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OBJETIVOS:
1. Observar y reconocer las diferentes fases de la mitosis a través de la observación del ápice de las raíces de la
cebolla.
2. Identificar morfológicamente las características de la etapa de interfase y de los períodos de división (mitosis)
en el ciclo celular.
MATERIALES: Los materiales marcados con * los deben llevar los estudiantes por grupos de trabajo.
Guía de laboratorio impresa y previamente leída, microscopio, pota-objetos*, cubre-objetos*, aguja, pinzas*,
lanceta*, tijeras*, un bulbo de cebolla cabezona con varias raíces*, frasco lavador, mechero de Bunsen, papel de
filtro, vaso de precipitado, vidrio de reloj, Orceína.
INTRODUCCIÓN: Las células vivas tienen una propiedad muy notable: su capacidad de multiplicarse con
fidelidad casi perfecta y no solamente uno o dos veces, sino por centenares y millares de generaciones. La mayoría
de las células se reproducen por división binaria cuyo resultado son dos células hijas casi idénticas. Uno de los
procesos de división celular más impresionantes es la mitosis, el cual es llevado a cabo de una manera ordenada,
realizándose una precisa e igual distribución del material genético ya duplicado para formar así dos núcleos hijos con
igual tipo y número de cromosomas. Una de los principales aportes de este proceso es la conservación idéntica en
la constitución genética de las células hijas y por tanto de la misma organización estructural y funcional con respecto
a las células madre. Este proceso también es en parte, responsable de la herencia o transmisión de caracteres de célula
a célula en los organismos pluricelulares y de generación en generación en los organismos en los cuales la mitosis es
también su medio de reproducción.
La división celular también es necesaria para el mantenimiento del individuo. Las células que tienen un ciclo vital
corto, tales como las del epitelio del tubo digestivo, de la capa externa de la piel, y los glóbulos rojos, son
reemplazadas por células nuevas producidas en la mitosis. La mitosis está dividida de manera arbitraria en cuatro
fases, llamadas profase, metafase, anafase y telofase, esto con el objetivo de facilitar su estudio. En un sentido más
amplio y moderno, la mitosis puede considerarse como una parte de un proceso clínico conocido como ciclo celular.
El ciclo celular además de la mitosis incluye el “reposo” o sea la llamada interfase del núcleo; existen varios estadios
en la interfase: el estado G1 (del inglés Gap que significa intervalo), durante el cual el núcleo se encuentra sin división
y justo antes de que se efectúe
la síntesis del ADN; el estado S (del inglés Synthesis), en el cual ocurre la síntesis del ADN y el estado G2 que se
presenta tras la síntesis del ADN, pero antes de iniciarse la primera etapa de la mitosis, la profase. El ciclo celular
consiste, por consiguiente, en la secuencia continua de interfase y mitosis. Padilla, et al. (2014).
1. Corta con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y deposítalo en un vidrio de reloj en el que se han
vertido 2-3 ml de orceína.
2. Calienta suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la ebullición.
3. Toma con las pinzas uno de los ápices o extremos de las raicillas y colócala sobre un portaobjetos, añade una
gota de orceína y deja actuar durante 1 minuto.
4. Coloca el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Procura que la raíz quede extendida sobre el
portaobjeto.
5. Coloca unas tiras de papel de filtro sobre la preparación. Pon el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona
el cubreobjetos y haz una suave presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no
hay peligro de rotura por mucha presión que se realice.
6. Observa al microscopio la muestra, primero con el objetivo de menor aumento y luego con el de mayor
aumento. Anota y haz un dibujo.
7. Fíjate que la preparación presenta un aspecto de una dispersión de células.
8. Observa los cromosomas teñidos de morado, el aspecto reticulado de los núcleos y las células que se puedan
encontrar en proceso de división de mitosis.
9. Describe tus observaciones.
REFERENCIAS
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Buenaventura Cali. Editorial Bonaventuriana
De Echeverri, M. T.; Melo, E.; Montoya, J. C.; de Plata, C.; Satizábal, J. M. y Solorzano, M. Prácticas de
laboratorio. Biología celular. Universidad del Valle. Facultad de Salud, Departamento de Ciencias Fisiológicas.
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http://www.bashanfoundation.org/gmaweb/pdfs/bacterias.pdf
Marieb, E. (2008). Anatomía y fisiología humana. 9ª edición. Madrid España: PEARSON EDUCACIÓN.
Padilla, H., Méndez, D., Cavallo, E., García, D & Ángel D. (2014). Manual de guías de laboratorio de biología
general. tronco común. Universidad De Cartagena Facultad De Ciencias Exactas Y Naturales Programa De
Biología.
Ballesteros, J & Floréz, N. Prácticas de Laboratorio de Biología General I. (1996).
Plummer, D. T. (1981). Bioquímica Práctica. 2a. ed. Bogotá, Colombia: Mc- Graw
Tortora, G & Derrickson, B. (2011). Principios de anatomía y fisiología. 13ª edición. Bogotá: Panamericana.
Conocer la utilidad de la tinción de Gram como herramienta para el diagnóstico. Pasos para una adecuada
recolección para que la tinción de Gram se realice de manera impecable.
http://www.facultadsalud.unicauca .edu.co/Documentos2010/DptoMe dInt/Tencion_de_gram.pdf.
http://www.biologie.unihamburg. de/bonline/ e00/contents.htm: Microscopía, citología, histología
y bioquímica vegetal, con numerosas imágenes al ME y modelos moleculares en 3D, que pueden girarse en el
espacio.
http://images.botany.org/. Colección de microfotografías comentadas sobre histología vegetal
http://128.171.207.10/faculty/webb/BOT410/anatweb/pages/default. Una de las mejores páginas sobre histología
vegetal, incluyendo además tutoriales para manejo de microscopio y algunas aplicaciones informáticas