UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

LABORATORIO QUÍMICA ANALÍTICA

INFORME LABORATORIO 12
ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR UV-VIS
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIERRO (III)

GRUPO N° 4

NOMBRE ( sólo el Apellido ( sólo el primer Código

primer nombre) apellido)

Dino Lossio 20200548

Ana Salazar 20200562

Diego Mendoza 20200549

Andres Zamora 20200570

Profesora: CECILIA ALEGRÍA

Fecha de la práctica: Martes 21 de septiembre del 2020

Fecha de entrega del informe: Martes 28 de septiembre del 2020

1
 LA MOLINA - LIMA – PERÚ

ÍNDICE

1. Introducción…………………………………………………………………………...3

2. Objetivos…………………………………………………………………………….…3

2.1. Objetivos generales……………………………………………..…...…......3

2.2. Objetivos específicos…………………………………………..…………..3

3. Marco teórico……………………………………………………...…………….…....4

4. Metodología…………………………………………………………………………….6

4.1. Materiales……………………………………………………………………..6

4.2. Métodos………………………………………………………………………..6

4.3. Flujograma…………………………………………………………………….7

5. Resultados……………………………………………………………………………..9

6. Discusiones …………………………………………………………………………..12

7. Conclusiones………………………………………………………………………....12

8. Recomendaciones…………………………………………………………………...12

9. Bibliografía……………………………………………………………….……………13

10. Anexos………………………………………………………………………………...13

11. Cuestionario…………………………………………………………….……..…..….14

2
1.INTRODUCCIÓN:

La espectroscopia atómica se basa en la absorción o emisión de radiación por partículas

atómicas al producirse la transición del estado electrónico fundamental al excitado o
viceversa. Las transiciones electrónicas del átomo pueden producirse entre las capas
externas del átomo o entre las capas internas, necesitando estas últimas radiaciones más
energéticas. Cuando las transiciones se producen entre niveles electrónicos extremos se
requieren radiaciones correspondientes a la región UV-Vis del espectro, mientras que las
transiciones entre las capas internas corresponden a la zona de rayos X del espectro
electromagnético (Aucejo, A. M., et al., 2011).

La espectroscopia de absorción molecular está basada en la interacción de la radiación

ultravioleta, visible e infrarroja con moléculas y es utilizada para la identificación y
cuantificación de miles de especies orgánicas e inorgánicas. Concretamente, la
espectroscopia molecular de absorción, en el ultravioleta y en el visible, (también llamada
espectrofotometría) se emplea primariamente en análisis cuantitativo y, probablemente, es el
procedimiento más usado en los laboratorios químicos y clínicos de todo el mundo.
En principio es factible la determinación espectrofotométrica de cualquier compuesto orgánico
que contenga uno o más grupos cromóforos, así como de numerosas especies inorgánicas.
De tal manera que las aplicaciones de los métodos cuantitativos de absorción no sólo son
numerosas, sino que además atañen a todos los campos en que se requiere información
cuantitativa. (Aucejo, A. M., et al., 2011).

El hierro (III) forma un complejo de transferencia de carga con el anión sulfocianuro y su color
es utilizado en la determinación, por vía espectrofotométrica, de cantidades de hierro presente
en aguas, bebidas, etc.

JUSTIFICACIÓN
En esta práctica se puede observar la formación de enlaces covalentes entre un metal ácido
de Lewis con una base de Lewis le confiere capacidad de absorber radiación en el rango
visible para sus transiciones electrónicas. y se da el complejo hierro tiocianato tienen alta
absortividad y puede cumplir con la ley de Lambert y Beer.

2.OBJETIVOS:

2.1 OBJETIVOS GENERALES

● Complejar el hierro (III) con tiocianato para generar alta absortividad molar en el rango
visible y se manifestará con color complementario.
● Realizar la cuantificación de una muestra problema aplicando la Ley de Beer.
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

3
 ● Determinar hierro (III) por espectrofotometría de absorción molecular visible en
muestras comerciales.

3.MARCO TEÓRICO:
● Espectroscopia:Esta técnica trata de medir la cantidad de radiación de una fuente
determinada que absorben los átomos metálicos pulverizados , conocida esa
absorbancia y previa preparación de una curva de calibración , se determina la
concentración de los átomos absorbentes en la llama y con ello la concentración de
los átomos en disolución .El elemento analizar se disocia de sus enlaces químicos y
se coloca en estado atómico neutro , no excitado y no ionizado , en un nivel
energético bajo, por lo que es capaz de absorber radiación en un paso de banda muy
estrecho(0,001-0,01 nm) . La energía de la radiación absorbida es igual a la que el
elemento emitirá si fuese excitado y se puede aplicar una corrección de la ley de
Lambert-Beer, A diferencia de los métodos de emisión en los cuales solo un pequeño
porcentaje de átomos excitan , aquí casi todos quedan en estado neutro capaces de
absorber , de ahí su mayor sensibilidad.(Palacio,2008).

Fig 1.Espectroscopia(Fuente:Slideshare)

● Ley de Lambert y Beer:La ley de lambert-Beer , es una ley cuantitativa en las

espectroscopias IR y UV-VIS y se expresa como , A=𝜀(v)bC , donde A es la
absorbancia, magnitud adimensional ,𝜀(v) es la absortividad molar o coeficiente de
absorción molar , en L.mol-1cm-1 , b es el espesor de la cubeta o célula , en cm y C
la concentración molar de la muestra , en M o mol-L-1. Esta es una ley cuantitativa y
aditiva , de modo que , para mezclas con N componentes , la absorbancia de la
mezcla a la frecuencia v es igual a la suma de las absorbancias de los N componentes
en esa posición espectral.(Nuñez,2006).

4
 Fig 2.Ley de Lambert y Beer(Fuente:Slideshare)

● Absorción por especies inorgánicas: Los espectros de la mayoría de los iones

complejos y las moléculas inorgánicas que absorben se parecen a los de los
compuestos orgánicos , con máximos la absorción anchos y poca estructura fina ,
una excepción importante de los espectros de los guiones de la serie de los lantánidos
y actínidos.Los electrones responsables de la absorción de estos elementos están
apantallados de influencias externas por electrones situados en orbitales de números
cuánticos elevados , En consecuencia las bandas la absorción son estrechas y están
relativamente poco afectadas por la naturaleza de las especies unidas por los
electrones externos.Con pocas excepciones , ilusiones y complejos de los 18
elementos de las dos primeras series de transición son coloreados al menos en alguno
de sus estados de oxidación , la absorción de radiación visible por estas especies se
debe a transiciones de electrones entre orbitales d llenos y vacíos que difieren en
energía a causa de los ligandos Unidos a los iones metálicos. (Skoog,2020)
● Técnicas para determinar ion tiocianato: En la determinación analítica de los iones
tiocianato con hierro(III) se forma un complejo de tiocianato de hierro de un color rojo
intenso.(Beyer,1987)
❖ La reacción esta dada de la siguiente manera :Fe 3+ + nSCN- --->Fe(SCN)n3+ ,
en donde n va desde el 1 hasta el 6
❖ Para concentraciones bajas de tiocianato la especie predominante es
Fe(SCN)++ , para concentraciones de tiocianato 0,1 M es Fe(SCN) 2 y para
concentraciones de tiocianato superiores los complejos que predominan son
las cargadas negativamente.
❖ El rango recomendado de concentración es de 0,015 a 0,25mg de hierro en
100 mL de solución , El color se desarrolla inmediatamente y es estable por 30
minutos , así la solución contiene agua y está protegida por la luz.
❖ El cobre cúprico en cantidades mayores de 2 mg/L , El Mercurio mercúrico en
cantidades superiores a 1mg/L y el bismuto en cantidades que superen los 10
mg/L dan lugar a una formación de iones complejos con el tiocianato

4. METODOLOGÍA:

4.1 MATERIALES

INSTRUMENTOS DE LABORATORIO:

5
 ● Pipetas volumétricas de 1, 2, 5 y 10 mL.
● Pipetas graduadas de 10 mL.
● Matraz volumétrico o fiolas de 25, 50 y 100 mL.
● Vaso de precipitados de 100mL
● Vaso de precipitado de 50 mL
● 1 piceta con agua destilada
● Gradilla con 12 tubos de ensayo de 15 mL

REACTIVOS
● Solución madre de 100 ppm de Fe(III) a partir de hierro electrolítico o cloruro
férrico grado reactivo
● Solución de KSCN al 20% (p/v)
● Solución de HNO3 al 15% (p/v)

EQUIPOS
● Balanza analítica.
● Espectrofotómetro UV-VIS.
● Cubetas de plástico o vidrio y cuarzo.

4.2 MÉTODOS

● Calibrar el equipo según instrucciones del manual.

● Adicionar los reactivos y diluirlos.
● Preparar el blanco y las soluciones estándar
● Medir la absorbancia del blanco y las soluciones estándar.
● Mediante los datos obtenidos construir la curva de calibración.
● Completar las tablas.

4.3 FLUJOGRAMA

6
5. RESULTADOS:

Actividad 1.
Completar la Tablas 1 referido a la preparación de las soluciones estándares de
Fe(KSCN)2+.

Tabla 1. Preparación de soluciones estándares de Fe(KSCN)2+.

Solución Madre Fe3+ = 100 ppm

BLANCO ST-1- ST-2 ST-3 ST-4 ST-5
Vol Solución Madre 0 1 2 3 4 5
Vol HNO3 5 5 5 5 5 5

Vol KSCN 10 10 10 10 10 10

Vol H2O 35 34 33 32 31 30

Vol Final 50 50 50 50 50 50
Concentración final 0 2 4 6 8 10
en ppm.

Actividad 2.
Elaborar la Curva de Calibración con los datos de la Tabla 1, pegar el gráfico y determinar la
absortividad molar para el complejo coloreado.

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Tabla 2. Datos de absorbancia para cada solución estándar y longitud de onda tanto de
permanganato como dicromato.

λ = 480 nm Absorbancia
BLANCO 0,000
ST-1 0,164
ST-2 0,340
ST-3 0,493
ST-4- 0,622
ST-5 0,898

Tabla 3. Determinación de la absortividad molar experimental.

Especie Longitud Absortividad molar, ɛ, L.mol-

1
de Onda Ecuación de Regresión Lineal .cm-1
λ (nm) (valor de la pendiente)

Fe(KSCN)2+ 480 = 0.086x - 0.0103 0.086

Actividad 3.
Hallar la concentración de Hierro en la muestra problema, completar la Tabla 4

Tabla 4. Datos de preparación de muestra: harina de pan.

Muestra: Mezcla problema:

harina de pan
Gramos de muestra 0,255

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 Volumen de dilución 100 mL

Alícuota 4 mL

Volumen mL , HNO3 5
Volumen mL , KSCN 10
Volumen final de 50
dilución (mL)
Absorbancia de la 0,384
muestra
Fe(KSCN)2+ ppm 4.5849ppm
Concentración Molar 2.9967 x 10-5
2+
Fe(KSCN) .
g Fe en la muestra 8.227 x 10-3
problema

6.DISCUSIONES:
● Las mediciones de absorción en la región UV y visible del espectro, nos muestran
información cualitativa y cuantitativa sobre moléculas orgánicas, inorgánicas y
bioquímicas. La absorción , en general, los iones y complejos de los elementos de las
dos primeras series de transición absorben bandas amplias de radiación visible por lo
menos en uno de sus estados de oxidación y por ello son coloreados.
● Muchos autores mexicanos comparan en distintas muestras de alimento la
determinación de vitaminas y de hierro por el metodo de espectrofotometria
ultravioleta visible , en donde se indicaba que la cantidad máxima de hierro por norma
es de 15 mg , segun los calculos que obtuvimos en el laboratorio nuestra muestra
presenta 8.227 x 10-3 g de hierro los cuales están dentro de los estándares y nos
indicaria que es apto para el consumo humano.

7.CONCLUSIONES:
● Se logró determinar el hierro (III) por espectrofotometría de absorción molecular
visible en muestras comerciales, en este último paso se siguieron una serie de
procedimientos que deben su importancia al aseguramiento de la precisión de los
resultados.
● Se representó gráficamente la curva de calibración espectrofotométrica y a´si la
determinación de absortividad molar del Fe(KSCN)2+ . A partir de la gráfica y de la
ecuación de la recta se determinó que la absortividad molar era 0.086 L.mol-1 .cm-1
12
● Además de esto se logró determinar la concentración molar de Fe(KSCN)2+ . que
resultó 2.996 x 10-5 y gramos de Fe en la muestra problema fue de 8.227 x10-3.

8.RECOMENDACIONES:

● Calibrar de manera correcta el espectrómetro para no tener problemas al momento de

sacar los cálculos y estar seguros de tener resultados exactos y precisos.
● Al momento del pesado, acercarse lo más posible del valor requerido para que la
concentración no aumente demasiado.
● Cuando se use el espectrofotómetro, limpiar la cubeta para no obtener un resultado
erróneo

9
9.BIBLIOGRAFÍA:

● Palacio, J. M. A., & Martínez, D. G. (2008). Técnicos Especialistas de Laboratorio Del

Servicio Vasco de Salud-osakidetza. Madrid, MAD, 255-
256.https://books.google.com.pe/books?id=XihXgDoj0ogC&pg=PA237&dq=curva+de
+calibracion&hl=es&sa=X&ved=2ahUKEwiog7n264jzAhX-
J7kGHbe7Ce4Q6AF6BAgHEAI#v=onepage&q=curva%20de%20calibracion&f=false
● Núñez, J., & Bertrán, J. (2006). Problemas de Química Física. Delta
Publicaciones.https://books.google.com.pe/books?id=Rb6axLFw7pYC&pg=PA255&d
q=ley+de+lambert+beer&hl=es&sa=X&ved=2ahUKEwiGwLXK6YjzAhWrILkGHSZXD
T4Q6AF6BAgGEAI#v=onepage&q=ley%20de%20lambert%20beer&f=false
● Aucejo, A. M., Estellés, M. J. L., & Hernández, R. H. (2011). Laboratorio de análisis
instrumental. Universitat de
València.https://books.google.com.pe/books?id=YDvLEZ3AdLQC&pg=PA44&dq=La
+espectroscopia+de+absorci%C3%B3n+molecular+est%C3%A1+basada+en+la+int
eracci%C3%B3n+de+la+radiaci%C3%B3n+ultravioleta&hl=es&sa=X&ved=2ahUKEw
jgy5KFo7LzAhWTlJUCHRBrApYQ6AF6BAgGEAI#v=onepage&q=La%20espectrosc
opia%20de%20absorci%C3%B3n%20molecular%20est%C3%A1%20basada%20en
%20la%20interacci%C3%B3n%20de%20la%20radiaci%C3%B3n%20ultravioleta&f=f
alse
● Beyer, H., & Walter, W. (1987). Manual de química orgánica.
Reverte.https://books.google.com.pe/books?id=Pm7lNZzKlaoC&pg=PA394&dq=dete
rminacion+del+ion+tiocianato+con+hierro+3&hl=es&sa=X&ved=2ahUKEwjixaSJvLLz
AhXCFbkGHd-
2BHYQ6AF6BAgDEAI#v=onepage&q=determinacion%20del%20ion%20tiocianato%
20con%20hierro%203&f=false
● Skoog, D. A. (2020). Fundamentos de química analítica. Vol. 2 (Vol. 2).
Reverté.https://books.google.com.pe/books?id=8LP1DwAAQBAJ&pg=PA564&dq=A
bsorci%C3%B3n+por+especies+inorganicas&hl=es&sa=X&ved=2ahUKEwie6c7rwLL
zAhU8J7kGHfDhAVcQ6AF6BAgHEAI#v=onepage&q=Absorci%C3%B3n%20por%2
0especies%20inorganicas&f=false

10. ANEXOS:

A= k.l.C
Y= 0.086X - 0.0103
0.384= 0.086X - 0.0103
X= 4.5849
𝐶 𝐶𝐶(𝐶𝐶𝐶𝐶)+2 = 4. 5849𝐶𝐶𝐶

4.5849 𝑚𝑔 𝐹𝑒(𝐾𝑆𝐶𝑁)+2 1𝑔 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒(𝐾𝑆𝐶𝑁)+2

Concentración Molar: 𝑥 𝑥 = 2.9967 x 10-5 M
𝐿 1000 𝑚𝑔 153 𝑔 𝐹𝑒(𝐾𝑆𝐶𝑁)+2

−3
2.9967𝑥10 𝑥𝑥𝑥 𝐹𝑒(𝐾𝑆𝐶𝑁)+2 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒 156 𝑔 𝐹𝑒
G de Fe: 𝑥 𝑥 = 1.6783 x 10-3 g Fe/L
1𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒(𝐾𝑆𝐶𝑁)+2 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒

1.6783 x 10-3 g Fe/L --------1000mL Yg FE = 8.392 x 10--5

10
 Yg Fe ---------- 50 mL

alícuota: 0.255g -------- 100 mL Z= 0.0102 g muestra

Zg ---------- 4 mL

−5
8.392𝑥10 𝑔 𝐹𝑒
0.0102 𝑔 𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔
= 8.227x 10--3 g de Fe en la muestra

11. CUESTIONARIO:

1. ¿Cuál es el propósito e hipótesis de la práctica 11?

PROPÓSITO:
Complejar el hierro (III) con tiocianato para generar alta absortividad molar en el rango
visible y se manifestará con color complementario.

Determinar hierro (III) por espectrofotometría de absorción molecular visible en muestras

comerciales
HIPÓTESIS:
La formación de enlaces covalentes entre un metal ácido de Lewis con una base de Lewis
le confiere capacidad de absorber radiación en el rango visible para sus transiciones
electrónicas.

El complejo hierro tiocianato tiene alta absorción y puede cumplir con la ley de Lambert y
Beer.
2. ¿Cree usted que ha logrado ésa competencia?

Sí, se siguió los pasos indicados por la profesora, hallamos las curvas de calibración . De
modo que con lo aprendido elaboramos tanto el reporte como el informe.

3. Explique la espectroscopia de absorción molecular UV-VIS. Aplicaciones.

La espectroscopía UV-Vis se basa en el proceso de absorción de la radiación ultravioleta-

visible por una molécula. La absorción de esta radiación causa la promoción de un electrón a
un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber radiación de esta frecuencia
son los electrones de enlace de las moléculas, por lo que los picos de absorción se pueden
correlacionar con los distintos tipos de enlace presentes en el compuesto. Se utiliza en los
laboratorios para determinar cantidades pequeñas de una cierta sustancia.

4. ¿Qué son los colores complementarios? Explique.

Una sustancia que se desee medir su concentración y que tiene un color particular absorberá
su color complementario y reflejará su mismo color. Los colores complementarios son
opuestos en la rueda cromática. Por ejemplo, un objeto rojo absorbe luz verde y refleja luz
roja. Además los colores complementarios se pueden determinar por niveles de absorción,
por ejemplo: absorción a 420-430nm se ve amarillo, absorción 500-520nm se ve rojo,
absorción total se ve negro y reflexión total se ve blanco.

11
 figura 1. circulo de colores complementarios.

5. ¿Qué se entiende por trasferencia de carga y cómo se usa en la espectroscopía UV-

VIS?

Las bandas de absorción en las regiones Ultravioleta y Visible que presentan los compuestos
orgánicos se asocian con transiciones electrónicas en la capa de valencia. Los electrones
involucrados en dichas transiciones corresponden a aquellos más débilmente atraídos por el
conjunto de núcleos atómicos que componen la molécula y cuyos estados pueden ser
descritos a través de orbitales moleculares que se expresan como combinaciones lineales de
orbitales atómicos de la capa de valencia.

Las transiciones electrónicas a orbitales moleculares más externos dan lugar a las
denominadas transiciones Rydberg presentes en el Ultravioleta de vacío. Por otra parte, las
transiciones electrónicas que involucran a los electrones de las capas internas son muy
energéticas y se presentan en la región de los rayos X del espectro electromagnético.

6. ¿Qué es un espectro de absorción; como se construye y qué información permite

obtener? Dibuje y explique.

El espectro de absorción de un elemento es el conjunto de frecuencias de las ondas de las

que el elemento puede absorber mediante radiación.

Para obtener el espectro de absorción de un material, se toma una muestra del elemento en
estado gaseoso y se ilumina con haces de luz de diferentes frecuencias.

12
 Figura 2. espectrofotómetro.
7. ¿Qué es una curva de calibración y cómo se construye? ¿Cómo de muestra si la
relación es lineal o cumple con la ley de Lambert y Beer.
Una curva de calibración es la representación gráfica de una señal que se mide en función
de la concentración de un analito. El calibrado incluye la capacidad de un método analítico
para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un
compuesto en una muestra.
La curva de calibración se construye midiendo la señal analítica en cada uno de los patrones
previamente elaborados. En el eje de ordenadas se asigna el valor de la señal medida y en
el eje de abscisas la concentración del patrón.

Figura 3. modelo de curva de calibración

Debido a que la ley de Lambert y Beer nos indica la relación entre absorbancia y
concentración de analito, ésta ley se puede representar mediante una curva de calibración,
colocando la absorbancia en el eje de las ordenadas y la concentración de analito en la
abscisa.
8. ¿Qué otros métodos analíticos existe para la determinación de hierro en diferentes
matrices?

Hay más de 50 métodos descritos para la cuantificación de Fe S, pero aún no existe un

método de referencia aceptado universalmente. Estos métodos incluyen técnicas sofisticadas

13
como la dilución de isótopos, inmunoprecipitación, inmunoelectroforesis y espectroscopia de
absorción atómica, así como métodos automatizados.

Se han utilizado diferentes agentes reductores o cromógenos. Sin embargo, el Comité

Internacional de Estandarización en Hematología (ICSH) ha recomendado el uso de ácido
tioglicólico como agente reductor y batofenantrolina o ferrozine como cromógenos. En
general, todos los procedimientos disponibles para la determinación de Fe S tienen un uso
clínico limitado dado su alto costo, falta de disponibilidad, grandes volúmenes de muestra
requeridos, son tediosos, consumen mucho tiempo y demandan equipo especial de
laboratorio.

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