Universidad Nacional Agraria La Molina

Facultad de Ciencias. Departamento de Química

Curso: Química Analítica – Laboratorio

Práctica 10
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
MOLECULAR UV-VIS:
Determinación Espectrofotométrica de Cromo y
Manganeso

Integrantes:
 Anchayhua Torres, Katherine Leyla
(Pesquería, 20141297)
 Huanca Gil, Karen Mercedes
(Pesquería, 20141311)
 Otero Huamán, Diego André
(Pesquería, 20141322)
 Ruiz García, María Isabel
(Pesquería, 20141327)

Profesores:
 Palma, Juan Carlos (Teoría)
 Gómez, Susana (Práctica)

Grupos:
 Teoría: C
 Práctica: E

Fechas:
 De realización: 09-06-16
 De entrega: 16-06-16
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INTRODUCCIÓN:

Desde hace muchos años se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias
químicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiación se puede estudiar
la absorción de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino también en
ultravioleta e infrarrojo. Se denomina espectrofotometría a la medición de la cantidad de
energía radiante que absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda de la
radiación, y a las mediciones a una determinada longitud de onda.

La teoría ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos
de energía llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda está asociada con los
fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida de energía.
En este caso, se utilizará dichas propiedades para la determinación de la cantidad de
cromo y manganeso (en porcentaje) que se encuentran en estado de oxidación como
Dicromato y Permanganato.

JUSTIFICACIÓN:
La instrumentación en la química analítica ha tomado cada vez más, una mayor relevancia
respecto a los métodos clásicos; es por esta razón que se debe aprender a utilizar, en este
caso, el espectrofotómetro de manera efectiva para la determinación de sustancias a través
de sus propiedades ópticas.

OBJETIVOS:
 Determinar cromo y manganeso por espectrofotometría de absorción molecular
en el rango visible tanto en forma independiente como en mezcla.
 Determinar cromo y manganeso en mezcla por espectrofotometría de absorción
molecular en el rango visible.

HIPÓTESIS:

 El cromo como dicromato y el manganeso como permanganato absorben

radiación en el rango visible y puede determinarse por espectrofotometría de
absorción molecular.
 El cromo como dicromato y el manganeso como permanganato en mezcla pueden
determinarse simultáneamente por la aditividad de las absorbancias.

REVISIÓN DE LITERATURA

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite

determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las
moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la
cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para
hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se
puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y
medir la cantidad de luz absorbida por la misma.
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Ley de Lambert-Beer

Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de

longitud de onda fija) y concentración de un cromóforo en solución:

A = log I/Io = ε·c·l

La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su

concentración –a mayor número de moléculas mayor interacción de la luz con
ellas-; también depende de la distancia que recorre la luz por la solución –a
igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra más
moléculas se encontrará-; y por último, depende de ε, una constante de
proporcionalidad -denominada coeficiente de extinción- que es específica de
cada cromóforo. Como A es adimensional, las dimensiones de ε dependen de
las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la
primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones
de ε resultan ser M-1·cm-1. Este coeficiente así expresado, en términos de
unidades de concentración molar (o un submúltiplo apropiado), se denomina
coeficiente de extinción molar (εM). Cuando, por desconocerse el peso
molecular del soluto, la concentración de la disolución se expresa en otras
unidades distintas de M, por ejemplo g·L-1, las dimensiones de ε resultan ser
distintas, por ejemplo g-1·L·cm-1, y al coeficiente así expresado se denomina
coeficiente de extinción específico (εs). La ley de Lambert-Beer se cumple para
soluciones diluidas; para valores de c altos, ε varía con la concentración,
debido a fenómenos de dispersión de la luz, agregación de moléculas, cambios
del medio, etc.

Transmitancia y Absorbancia

Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad Io

incide perpendicularmente sobre una disolución de un compuesto químico que
absorbe luz o cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la radiación
incidente (Ia) y dejará pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It

La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la

cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la
muestra, It, y la cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa
normalmente en tanto por ciento: % T = It/Io x 100 La transmitancia nos da una
medida física de la relación de intensidad incidente y transmitida al pasar por la
muestra. La relación entre %T y la concentración no es lineal, pero asume una
relación logarítmica inversa.

La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto

que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el
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logaritmo de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io. Cuando la
intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del
100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda,
y entonces A vale log 1 = 0. Ia It Io l 3 La cantidad de luz absorbida dependerá
de la distancia que atraviesa la luz a través de la solución del cromóforo y de la
concentración de éste.

Instrumentación para la medición de absorbancias de la luz visible y

ultravioleta: espectrofotómetro UV-visible

La medición de absorbancia de la luz por las moléculas se realiza en unos

aparatos llamados espectrofotómetros. Aunque pueden variar en diseño, en
especial con la incorporación de ordenadores para el análisis de datos, todos
los espectrofotómetros constan, según se indica en la figura, de:

1. Una fuente de energía radiante: lámpara de deuterio y tungsteno

2. Un monocromador para la selección de radiaciones de una determinada
longitud de onda: filtros, prismas, redes de difracción.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o
tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plástico
transparente. Para medir en UV se deben usar las de cuarzo o sílice
fundido, porque el vidrio no transmite la radiación UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las señales luminosas
en señales eléctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de

luz y longitud de onda a la que se va a realizar la medida. Hay
espectrofotómetros de un solo haz (con una sola celdilla para alojar la cubeta
con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas); en
nuestro caso se trabajará con los de un solo haz. Se mide primero la
absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna el
valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que la intensidad
incidente y transmitida sean iguales (Io = It), y por tanto la absorbancia es
cero. A continuación se pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la
absorbancia de ésta.
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Aplicaciones de la Ley de Beer a Mezclas

La ley de Beer también se aplica a una solución que contiene más de una clase
de sustancia absorbente. Siempre que no haya interacción entre las varias
especies, la absorbancia total para un sistema multicomponente está dada por:
A = A1 + A2 + A3 +........... + An = ε1 b c1 + ε2 b c2 + ε3 b c3 +......... + εn b cn
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RESULTADOS

Determinación de cromo y manganeso independientemente:

Tabla 2

Datos para el Cromo como estándar

Datos para el Cromo como estándar

Sustancia Cromo como Dicromato =Cr2O72-
Longitud de onda de máxima absorbancia 440
Longitud de recorrido de la radiación(cubeta) 1cm
Peso atómico del cromo 52
Ecuación de regresión del estándar A= 409.9M-0.0027

Datos de la muestra de Cromo en la muestra (tomar como referencia datos de la práctica

9)
Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3

Peso de muestra de mineral de 0.0867g 0.0867g 0.0867g

cromo, g
Volumen de dilución de la muestra , 250 250 250
mL
Volumen alícuota de dilución 2
tomada, V1
Volumen final de dilución, V2 5
Absorbancia a λmax del dicromato 0.5
Molaridad dicromato en dilución 1.2264x10-3
leída, M2
Molaridad dicromato dilución 3.066x10-3
anterior M1
Molaridad cromo en V1 6.6692x10-3
Porcentaje de Cr en la muestra 91.95%
Porcentaje p/p promedio C muestra
originada

Datos para el Manganeso como estándar (tomar como referencia datos de la práctica 9)

Sustancia Manganeso como Permanganato: MnO4-

Longitud de onda de máxima absorbancia 527
Longitud de recorrido de la 1cm
radiación(cubeta)
Peso atómico del manganeso 55
Ecuación de la regresión estándar A=2533.6M-0.081
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Datos de muestra de Manganeso en la muestra

Repetición 1 Repetición 2 Repetición 2

Peso de muestra de mineral con 0.0367g 0.0367g 0.0367g
manganeso
Volumen de dilución de la muestra,mL 250 250 250
Volumen de dilución tomada,V1 2
Volumen final de dilución ,V2 5
Absorbancia a λmax del perganmanato 0.104
Molaridad del permanganato en 7.301x10-5
dilucion, M2
Molaridad permang.en dilución anterior 1.825510-4
M1
Molaridad de Magnaneso en V1 2.669 x10-3
Porcentaje p/p de Mn en la muestra 6.84%
original
Porcentaje p/p promedio Mn muestra
original

Determinación de Cromo y Manganeso en Mezcla

Datos de muestra
Repetición 1 Repetición 2 Repetición 2
Peso original de muestra de aleación con 0.1g 0.1g 0.1g
cromo
y manganeso
Volumen de dilución de la muestra 250mL 250mL 250mL
Volumen de dilución tomada, V1 2
Volumen final d dilución , V2 5
Molaridad de dicromato en diluc.leída, 1.2141 x10-3
M2
Molaridad dicromato diluc anterior , M1 3.04x10-3
Porcentaje cromo(p/p) en muestra 79.04%
original
Molaridad permanganato en diluc leída, 4.55x10-5
M2
Molaridad permanganato diluc anterior, 1.1375x10-4
M1
Porcentaje p/p de manganeso en la 1.564 %
muestra
%promedio de Cr en muestra original
%promedio de Mn en muestra original

Datos de los estándares (Tomar como referencia los datos de la práctica 9)

Absortividad molar : ε, cm-1 , mol-1.L
A λmax Cr2O72-: 440 A λmax MnO4-: 527
2-
Del dicromato, Cr2O7 410 64
-
Del permanganato , MnO4 13 2533.4
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Datos de la muestra
Absorbancia total Ao de la dilución muestra
A λmax Cr2O72-: A λmax MnO4-:
Repetición 1 0.491 0.125
Repetición 2 0.5 0.133
Repetición 3 0.511 0.135
Promedio 0.5007 0.131

DISCUSIONES

Se realizó dos cálculos por separado, primero se determinó y usó a partir de los resultados
obtenidos en la práctica anterior, la longitud de onda de máxima absorbancia tanto del cromo
como K2CR2O7 (440 nm) y del manganeso como KMnO4 (527 nm), posterior a ello se obtuvo
las ecuaciones de regresión por separado de cada analito en la muestra determinada. Los cuales
fueron: A= A= 409.9M-0.0027 para el cromo y A= A=2533.6M-0.081 para el
manganeso.Finalmente se analizó la muestra de la mezcla, usando el espectrofotómetro en
diluciones de la muestra problema para encontrar las concentraciones respectivas de cada
analito. Para el cálculo de dichas concentraciones, usamos los datos previos y la ecuación:

A = A1 + A2 + A3 + ........... + An = ε1 b c1 + ε2 b c2 + ε3 b c3 + ......... + εn b cn

Una aplicación de La ley de Beer (Brunatti,2010) ,que también se aplica a una solución que
contiene más de una clase de sustancia absorbente .Se reemplaza en base a su longitud de
onda máxima respectiva para el Cr y Mn ; luego se tiene que hacer los cálculos previos de
absortividad molar para reemplazar en dicha ecuación, como se aprecia en el cuadro de
resultados. Con todos los datos obtenidos y las concentraciones que figuran en la tabla 4, se
obtuvo que el % de Cr en la muestra original que fue de 79.0% y para el Mn 1.564 % .Cabe
recalcar que los datos fueron corregidos debido a impedimentos en el laboratorio por los
equipos con los que se trabaja, y los resultados pueden ser variables según el % de pureza de la
muestra. A partir de dicha corrección se obtuvo los datos mostrados en el presente informe, los
cuales se aproximan mucho más a la teoría estudiada previamente.
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CONCLUSIONES

 El cromo como dicromato y el manganeso como permanganato

absorben radiación y se determinan por espectrofotometría de
absorción molecular.
 El manganeso y el cromo en mezcla se pueden determinar por
aditividad de las absorbancias.

CUESTIONARIO:

¿Cuál es el propósito e hipótesis de la práctica?

OBJETIVOS:
 Determinar cromo y manganeso por espectrofotometría de absorción molecular
en el rango visible tanto en forma independiente como en mezcla.
 Determinar cromo y manganeso en mezcla por espectrofotometría de absorción
molecular en el rango visible.
HIPÓTESIS:

 El cromo como dicromato y el manganeso como permanganato absorben

radiación en el rango visible y puede determinarse por espectrofotometría de
absorción molecular.
 El cromo como dicromato y el manganeso como permanganato en mezcla pueden
determinarse simultáneamente por la aditividad de las absorbancias.
2. ¿Cree usted que ha logrado esta competencia?

Si porque se han seguido los procedimientos indicados en la guía y se empleó la

ecuación de regresión adecuada conforme a la práctica anterior.

4.- ¿Qué son los colores complementarios? Explique

La espectrofotometría de absorción molecular es una técnica basada en la absorción de

radiación U.V. o visible por determinadas moléculas La radiación correspondiente a estar
regiones del espectro electromagnético provocan transiciones electrónicas a longitudes
de ondas características de la estructura molecular de un compuesto.

Al pasar radiación electromagnética por una capa transparente de un sólido, líquido o gas,
pueden eliminarse selectivamente ciertas frecuencias como consecuencia del proceso
llamado absorción. En este caso, la energía radiante se transfiere a los átomos o moléculas
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que constituyen la muestra, como resultado de ello, estas partículas pasan del estado de
menor energía a estados de mayor energía o estados excitados.

Tanto las moléculas como los átomos tienen un número limitado de niveles o estados
energéticos cuantizados. Para que se produzca absorción de radiación, la energía del fotón
excitante (incidente) debe igualar a la diferencia de energía entre el estado fundamental y
uno de los estados excitados de la especie absorbente. Estas diferencias de energía (ΔE)
son únicas, por lo tanto permiten caracterizar los constituyentes de una muestra. Para este
objeto se obtiene experimentalmente una representación gráfica de la variación de la
absorbancia en función de la longitud de onda.

Según vimos en el esquema anterior la absorción es directamente proporcional a la

longitud (b) de la trayectoria de la radiación a través de la solución y a la concentración
(c) de la especie absorbente: A = a . b . c (con a: cte. de proporcionalidad).

Si c se expresa en moles por litro y b en cm, entonces la absortividad se denomina

absortividad molar (ξ):A=ξ.b.c.

La Ley de Beer se cumple igualmente en soluciones que contienen más de una especie
absorbente, siempre que no haya interacción entre dichas especies. Por tanto, para un
sistema multicomponente la relación será:

AT = A1+A2+………+An
AT = ξ1bc1+ξ2bc2+………+ξnbcn

APLICACIONES:

 Especies Absorbentes:

La absorción de radiación ultravioleta y visible por una especie M, puede considerarse

como un proceso en dos etapas, la primera de las cuales corresponde a la excitación según:

M+h.v→M*

Donde M* representa la partícula atómica o molecular en su estado electrónico excitado

que se produce como resultado de la absorción del fotón h v. Este estado excitado tiene
un breve tiempo de existencia (10-8 a 10-9 s) y desaparece a través de través de algunos de
los diferentes procesos de relajación (calor).

M*→M+calor

La absorción de la radiación ultravioleta o visible, se produce por lo general como

consecuencia de la excitación de los electrones de enlace; debido a esto, la longitud de
onda de los picos de absorción se puede correlacionar con los tipos de enlace existentes
en la especie que se estudia.

 Explotación Analítica:
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 Identificación proximal de los grupos funcionales en una molécula.

 Método bastante selectivo para el análisis cuantitativo de compuestos cuyos
enlaces producen absorción.

Conviene considerar tres tipos de transiciones electrónicas que permiten explicar por qué
algunas especies pueden absorber energía radiante. Estos tres tipos son:

 Los electrones π, σ y η.
 Los electrones d y f.
 Los electrones de transferencia de carga.

BIBLIOGRAFÍA:

 Brunatti, C., & Martín, A. M. (2010). Introducción a la Espectroscopía de

Absorción Molecular Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano.
 Valladares, S. (1994) Espectrofotometría de Absorción Molecular Ultravioleta
visible. Food and Agriculture Organization of the United Nations.
 Carlos Brunatti, A. M. (s.f.). Introducción a la Espectroscopía de
Absorción.Molecular Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano. Obtenido de
http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf