UNIVERSIDAD PRIVADA

NORBERT WIENER
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ENFERMERÍA
Informe:
Laboratorio nivel 3 y cuestionario n° 2

Integrante:

Sosa Mundaca, Frida Giuliana

CURSO:

Microbiología y Parasitología

SECCIÓN: EN4M3

DOCENTE:

Cespedes, Roxana Esther

Lima-Perú
2023-1
2.1 Marco Teórico
Reacción Antígeno Anticuerpo Los microorganismos bacterianos contienen en su
superficie determinantes antigénicos que son reconocidos por anticuerpos
específicos. Se define a la Aglutinación como el fenómeno en el que las bacterias
o las células en suspensión en un líquido precipitan cuando se añaden anticuerpos;
éstos se unen a sus antígenos y originan complejos del tipo células-antígenos-
anticuerpos en forma de grumos visibles a simple vista. La aglutinación se aplica
para la determinación del factor Rh, de los grupos sanguíneos y las pruebas de
embarazo.

Una reacción de aglutinación consiste en la interacción entre un antígeno

particulado y anticuerpos presentes en un suero inmune (antisuero) provocando
la formación de un complejo macroscópico en forma de red fácilmente visible a
simple vista donde los anticuerpos hacen las veces de puentes entre los antígenos.

Existen 2 tipos generales de reacciones de aglutinación:

a) Aglutinación Directa
b) Aglutinación Indirecta o Pasiva.
 Ambas pueden realizarse en forma cualitativa o cuantitativa. El tipo de
reacción donde el antígeno es particulado como por ejemplo células eritrocitos,
bacterias, espermios, etc., se denomina Reacción de Aglutinación Directa. En
cambio cuando el antígeno es una molécula soluble, por lo tanto de tamaño
considerablemente menor, los complejos Ag-Ac formados durante la reacción no
son fácilmente visibles a simple vista, pero la reacción se puede hacer visible si el
antígeno se asocia (acopla) a partículas de mayor tamaño pero inertes (esto es, que
no participan en la reacción Ag-Ac sino que solo facilitan su visualización). En estos
casos se dice que la partícula -cuya función F-CV3-3B-2 es ser solo portadora-
está sensibilizada con el antígeno. Esta reacción se denomina Reacción de
Aglutinación Pasiva o Indirecta.
TIPOS DE AGLUTINACION EN EL DIAGNOSTICO
- Hemaglutinación.
- Aglutinación en Látex.
- Inmunodifusión.
- Fijación de Complemento.
El grupo sanguíneo al que pertenece un individuo está determinado por los
antígenos de membrana de sus eritrocitos y los anticuerpos del suero. Algunos
antígenos y sus anticuerpos se encuentran además en las secreciones. Los
anticuerpos del suero suelen producir aglutinación de los eritrocitos portadores
de antígenos de grupo distinto. Por ello, algunos grupos sanguíneos, como los del
sistema ABO o el facto Rh, ha de tenerse en cuenta a la hora de realizar
transfusiones sanguíneas o trasplante de órganos.
2.2 Competencias
Identifica las diferentes formas bacterianas por medio de una Coloración Gram.
Reconoce la interacción Antígeno-Anticuerpo a través de una técnica de
Aglutinación. Dimensiona la metodología en su aplicación en el diagnóstico de
agentes infectocontagiosos.

2.3 Materiales y equipos

• Láminas portaobjetos
• Aceite de Inmersión.
• Colorantes y reactivos
• Coloración Gram Cristal de Violeta.
• Solución de Lugol
• Alcohol-Acetona
• Safranina o Fucsina Básica
• Mechero Bunsen
• Asa de siembra
 • Soporte para la preparación (sobre el cristalizador).

2.4 Procedimiento
Las alumnas se agrupan en grupos de 4 estudiantes. Todas previamente
vestidas con guantes, mascarilla, gorro y bata. Una de ellas será la encargada
de realizar la prueba de laboratorio.

1 2 3
En primer lugar, se enciende el mechero Bunsen, y se esteriliza el material que se
utilizará para la extracción de la muestra, como podemos observar en la foto
número 3.

Seguidamente hacemos un ligero raspado en la muestra biológica para poder

ponerlo y frotar en el portaobjetos.
Seguidamente, esterilizamos el material utilizado con el mechero, y al finalizar lo
dejamos enfriar en un lado, como se observa en la imagen marcada con un círculo.
Luego se sostiene el portaobjeto con el asa de siembra, para hacer el flameado por
aproximadamente uno 10 a 15 segundos. Se tiene que observar como una fina
capa blanca.

A continuación, procedemos a lavar

por 2 segundos la muestra con agua, y
la dejamos reposar en una varilla de
cristal, para poder agregar las
soluciones.

Aquí tenemos los colorantes en orden:

1° Cristal Violeta
2°Lugol
3°Alcohol Cetona
4°Safranina
Primero procedemos a poner una gota de cristal violeta sobre la muestra,
esperamos 1 min y luego enjuagamos.

Segundo aplicamos una gota de Lugol sobre la muestra, lo que hace el Lugol es
fijar el color, esperamos 1 min y enjuagamos.
Tercero aplicamos una gota de alcohol cetona sobre la muestra, lo que hace el
alcohol es romper la pared celular y evidenciar sí la muestra es Gram positivo o
Gram negativo, esperamos 15 segundos y enjuagamos.

Cuarto, agregamos el ultimo colorante, la Safranina, esperamos 30 segundos. Y

lo enjuagamos con agua.
Por último a la muestra se le agrega aceite de inmersión para que se pueda
observar mejor, y luego es llevada al microscopio con un enfoque de 100x.
Y podemos observar que es un Gram negativo, y lo que tenemos en el
portaobjeto es la bacteria E. coli.

Cuestionario:
Esquematizar las observaciones y completar el siguiente cuadro.
¿Para qué se usa la coloración de Gram?

Es la técnica de coloración más común y más útil en microbiología para identificar

bacterias.

¿A qué se debe la reacción de Aglutinación en la prueba del Grupo Sanguíneo?

Se debe a que primero se produce una interacción entre el Ac y Ag lo que forma una red
de enlace covalente y forma la aglutinación.