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ACTUALIZACION EN EL ANALISIS DE LABORATORIO DE

LOS LIQUIDOS BIOLOGICOS Y SEDIMENTO URINARIO

LIQUIDO AMNIÓTICO
TM. Darwin Echeverría Díaz
GENERALIDADES
El líquido amniótico es un líquido
que rodea y protege al feto a través de su
gestación dentro del saco amniótico.

Está compuesto por constituyentes celulares y


numerosos componentes bioquímicos, tales
como electrolitos, compuestos nitrogenados,
proteínas, enzimas, lípidos y hormonas.

El análisis del líquido amniótico es de utilidad


en la evaluación de, distress fetal, maduración
del feto, infección y daño del tubo neuronal.

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GENERALIDADES

“Se ha observado que el líquido amniótico de


aspecto transparente corresponde a los
primeros meses de gestación, cambiando
en las últimas semanas tomando un aspecto
lechoso con grumos blancos cada vez más densos”

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ORIGEN

“Varia a lo largo del embarazo”

De 10 a 18
• Trasudado de semanas • Diuresis fetal
plasma materno a • Fluido traqueal
través del amnios • Trasudado del
liquido intersticial • Trasudada entre la
fetal a través de la sangre fetal y
piel fetal inmadura cavidad amniótica

De 1 a 8 >18
semanas semanas

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Proporciona un medio liquido
para el feto donde pueda realizar
movimientos activos y pasivos
libremente.

Funciones
Proporcionar protección mecánica
frente agresiones externas
(traumatismos maternal ) y
contracciones uterinas.

Actúa en la homeostasis
bioquímica fetal, aportando de
forma inmediata líquidos y
nutrientes al embrión

Durante el embrazado, ayuda al


acomodamiento del feto al canal
del parto, lubricando este canal

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AMNIOCENTESIS

El líquido amniótico se recolecta por


punción aspirativa a través de la pared
abdominal. Se prefiere la amniocentesis
trans-abdominal, debido a que la vaginal
puede contaminar el líquido con células
vaginales y bacterias.

Se extrae aproximadamente 10 a 20 mL de
líquido con jeringa, generalmente 2 ó 3
tubos, dependiendo del tipo de exámenes
a realizar.

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Tubo sin Tubo con Tubo estéril
anticoagulante anticoagulante Sin
EDTA anticoagulante
Examen
Macroscópico Morfología Cultivo
Y bioquímico celular microbiológico

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INDICACIONES AMINIOCENTESIS

Indicación Semana de gestación


Sospecha de anomalía
cromosómica, 16
Alteración metabólica
DTN
Isoinmunización 20-28
Sospecha de inmadurez fetal o 34-42 semanas
pulmonar
Sospecha de corioamnionitis 26-34

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Conservación

Transporte
Inmediatamente de obtenido El transporte al laboratorio
el líquido amniótico debe ser debe efectuarse lo antes
transferido a tubos o posible.
contenedores plásticos Las muestras para estudios
estériles, protegidos de la luz, de fosfolípidos deben
para ser transportados al transportarse refrigerados.
laboratorio. Si se almacenan por más
de 24 horas, es necesario
congelarlos.
Se recomienda el uso de
contenedores de color ámbar
o protegerlos con papel de
aluminio para prevenir la foto
oxidación de la bilirrubina.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Examen macroscópico
Análisis visual de color y aspecto

El líquido amniótico normal es incoloro o amarillo pálido.

Color Situación asociada


Amarillo o ámbar Eritoblastosis (Bilirrubina)
Verdoso (Meconio) Hipoxia fetal
Oscuro a rojo marrón Muerte fetal

“Se debe tener en cuenta que todos los líquidos


amnióticos tienen un grado de turbidez, dependiendo del
estado de gestación. La centrifugación o filtración puede
ayudar a remover el material particulado presente”

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ANALISIS DE LABORATORIO

Examen macroscópico
Aspecto

Tipo I Incoloro, ligeramente cetrino, sin


Vernix (antes 34 semanas)
Tipo II Ligeramente opalescente,
ligeramente turbio, escaso Vernix
(34-38 semanas)
Tipo III Turbio, puede ser un poco
lechoso, abundante Vernix. (Sobre
38 semanas)

Tipo IV Lechoso, viscoso, con filamentos


mucosos, sin Vernix.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Examen microscópico
Recuento de leucocitos

Recuento diferencial se recomienda en todos los


casos, pero siempre es necesario si se observan
más de 50 leucocitos /mm3.

*No se pueden emplear contadores electrónicos de


células porque pueden dar recuentos falsamente
elevados.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Examen microscópico
Células anaranjadas

• Sulfato azul de Nilo al 0,1 %

• Color

Células con grasas neutras:


anaranjadas

Células sin lípidos: azules

A mayor tiempo de gestación, mayor porcentaje de células anaranjadas, 10 % o más a las


> 36 semanas de gestación
En la actualidad estas técnicas de tinción son poco comunes y han sido reemplazadas por otros
tipos de exámenes para evaluar la madurez pulmonar fetal.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Células anaranjadas
Examen microscópico
Células Tipo I.- Redondas, nucleadas con citoplasma
totalmente teñido, tamaño de 10 a 15 micras de diámetro

Células Tipo II.- Presentan cierto aplastamiento en el


borde nucleadas, con citoplasma menos densamente
teñido y algo granular, tamaño 25 a 35 micras.

Células Tipo III.- Tamaño similar al tipo II con


citoplasma muy claro, borde nucleadas y anucleadas

Células Tipo IV.- Células escamosas, anucleadas,


tamaño de 15 a 20 micras, levemente teñido o
transparente, generalmente con gotas de grasa en la
superficie (corresponde a las células anaranjadas) Se
presentan en forma individual o formando acúmulos y
membranas cuando la edad de gestación es superior a 38
semanas.
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ANALISIS DE LABORATORIO

Exámenes químicos

Glucosa
“Es importante la determinación de glucosa en
líquido amniótico, con métodos analíticos
automatizados, suficientemente sensibles,
especialmente en niveles bajos, dado que niveles
menores de 16 mg/dL son indicativos de infección”

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ANALISIS DE LABORATORIO

Exámenes químicos
Creatinina

La concentración de creatinina se relaciona con la


masa muscular fetal y la capacidad de concentración
renal del feto.

VR: 0,5- 1,0 mg/dl 0-33 semanas


>1,7 mg/dl 36-37 semanas
2-4 mg/dl >40 semanas

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ANALISIS DE LABORATORIO

Exámenes químicos
Bilirrubina

La bilirrubina en el líquido amniótico, es de


interés para determinar el grado de hemólisis y
la intensidad de la anemia del feto producida por
un EH cuando existe incompatibilidad materno-
fetal.

VR: 10-30 ug/dl

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ANALISIS DE LABORATORIO

Exámenes químicos
Proteínas

La concentración de proteínas como albúmina,


disminuyen con la edad gestacional.

La mayor parte procede del suero materno, pasando al


líquido amniótico por pinocitosis.

Electroforéticamente, son semejantes a las maternas.


Las principales proteínas son ceruloplasmina,
transferrina, IgG, IgA, IgM.
IgG e IgA son de origen materno.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Exámenes químicos
Alfafetoproteína

Su concentración aumenta lentamente hasta la


semana 13, los niveles máximos se alcanzan en la
semana 15, descendiendo progresivamente hasta el
fin del embarazo.

Cuando aparece elevada en el suero materno, podría


realizarse la amniocentesis para pesquisar AFP en el
L.A. y diagnosticar defecto en el tubo neural
(16 semanas), pero esta puede estar falsamente
elevada si la muestra se contamina con meconio o
sangre fetal.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar
Fosfolípidos
La evaluación de la madurez fetal es
importante es determinadas
circunstancias obstétricas, cuando es
necesario interrumpir el embarazo.

Lo que se pretende investigar y conocer


es si el feto ha alcanzado la aptitud
funcional de sus órganos para la vida
extrauterina, sin necesidad de cuidados
especiales.

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La plena madurez fetal se alcanza durante el tercer trimestre gestacional. Las diversas
pruebas disponibles para evaluar la madurez fetal investigan la madurez fetal de órganos
tales como pulmón, hígado, riñones y sangre

Un pulmón maduro presenta un surfactante pulmonar que impide el colapso de los alvéolos
durante el ciclo de inhalación y exhalación. Este agente tensioactivo es una mezcla compleja
de lípidos y proteínas, siendo los principales la lecitina y esfingiomelina

Diversos métodos de laboratorios permiten establecer un índice predictivo que correlacione


la concentración de fosfolípidos en el liquido amniótico con la madurez fetal.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar
Fosfolípidos

La cuantificación de lecitina y
esfingomielina puede realizarse
mediante cromatografía en capa fina.

l/E < 2 -> Se asocia a inmadurez fetal

l/E >2 -> Se asocia a madurez fetal

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar

Fosfatidilglicerol

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar
Test de clements

“Se basa en la propiedad biofísica de que una cantidad suficiente de surfactante


pulmonar presente en el líquido amniótico genera una capa de burbujas estables en la
interface aíre-líquido, cuando se agita en presencia de etanol “

Tubos 1 (ml) 2 (ml) 3 (ml) 4 (ml)


L.A. 1 0,75 0,50 0,25
NaCl 0.9% - 0,25 0,50 0,75
Etanol 95% 1 1 1 1
*Interferencia muestras con sangre y meconio

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ANALISIS DE LABORATORIO

Test de clements Madurez pulmonar

Pulmón inmaduro
• Aquel que no presenta burbujas en los tubos o forma un
halo incompleto en ellos.
Pulmón en vías de maduración
• Aquel que presenta en el primer o en el primer y segundo
tubo un halo completo de burbujas en su superficie.
Pulmón maduro
• Aquel que presenta en los 3 tubos un halo completo de
burbujas en la superficie.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar
Cuerpos lamelares

En la actualidad es posible realizar el análisis


de los cuerpos lamelares que son partículas de
material surfactante citoplasmáticas producidas
por los neumocitos tipo 2.

Se encuentran en el líquido amniótico a partir


de la semana 26 gestacional. Su incremento es
proporcional al aumento de los fosfolípidos y
de la relación lecitina-esfingomielina.

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar
Cuerpos lamelares

“Dado que presentan un diámetro similar al de


las plaquetas, se cuantifican en forma similar al
recuento plaquetario, en contadores
hematológicos automatizados.”

Madurez pulmonar fetal >30.000 partículas/μL

Bordeline 20.000- 30000 partículas/μL

Inmadurez pulmonar fetal <20.000 partículas/μL

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ANALISIS DE LABORATORIO

Madurez pulmonar

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ANALISIS DE LABORATORIO

Orina / Liquido amniótico


La orina contiene alta concentración de creatinina y urea y
Puede ser esencialmente no contiene proteínas y glucosa. En
necesario contraste, el líquido amniótico contiene proteínas
diferenciar si una . (aproximadamente 2 a 8 g/L) y glucosa.
pérdida de líquido
corresponde a
El líquido amniótico tiene concentración de creatinina
líquido amniótico
similar a la del plasma, se incrementa de 2 a 3 veces
u orina
aproximadamente a partir de la semana 37 de gestación

si la creatinina del líquido amniótico es mayor de 4 mg/dL,


el líquido recolectado puede ser orina o líquido amniótico
contaminado con orina.

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Análisis
microbiológi
co
Tinción de Gram

Cultivo

Técnicas de biología
molecular
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