El recuento de microorganismos viables totales es una técnica utilizada para determinar la cantidad

total de microorganismos vivos presentes en una muestra. Esta técnica es ampliamente utilizada en
microbiología y puede aplicarse en diferentes áreas, como la industria alimentaria, la microbiología
ambiental, la microbiología clínica y la investigación científica.

El objetivo principal del recuento de microorganismos viables totales es obtener una estimación
cuantitativa de la carga microbiana viable en una muestra. Esto se logra mediante la detección y el
recuento de las colonias microbianas que se forman cuando los microorganismos viables se
multiplican en un medio de cultivo adecuado. A continuación, se presenta una exposición detallada
del proceso de recuento de microorganismos viables totales:

1. Preparación de medios de cultivo: Para realizar el recuento de microorganismos viables totales,

es necesario preparar medios de cultivo adecuados. Estos medios proporcionan los nutrientes
necesarios para el crecimiento de los microorganismos y pueden variar según el tipo de
microorganismo que se desea contar. Algunos ejemplos comunes de medios de cultivo incluyen agar
nutritivo, agar tripticasa-soja y agar Plate Count.

2. Preparación de diluciones: Si la muestra original tiene una concentración muy alta de

microorganismos, es necesario diluir la muestra para obtener una cantidad manejable de colonias en
la placa de cultivo. Para ello, se toma una muestra de la muestra original y se diluye en un medio de
dilución estéril adecuado, como agua peptonada o solución salina. Se utilizan técnicas de dilución
seriada para obtener diferentes diluciones que cubran el rango esperado de microorganismos
viables.

3. Siembra de las placas de cultivo: Se toman volúmenes conocidos de las diluciones

preparadas y se siembran en placas de Petri estériles utilizando técnicas de siembra
adecuadas, como la técnica de esparcimiento o la técnica de siembra en gota. Se asegura una
distribución uniforme de la muestra en la superficie del medio de cultivo.

4. Incubación: Las placas de cultivo se incuban a una temperatura adecuada para el

crecimiento de los microorganismos. La temperatura de incubación puede variar según los
microorganismos que se estén analizando. Se incuban durante un período de tiempo
determinado, generalmente de 24 a 48 horas, aunque puede variar dependiendo de los
microorganismos específicos y los requisitos del análisis.

5. Conteo de colonias: Después de la incubación, se examinan las placas de cultivo y se

cuentan las colonias visibles. Se deben contar solo las colonias distintas y bien aisladas. Las
colonias pueden tener diferentes características, como color, tamaño, forma o textura, lo que
puede ayudar a identificar y distinguir diferentes tipos de microorganismos. Es importante
llevar a cabo el conteo en condiciones de iluminación adecuadas y utilizar herramientas como
lupas o contadores de colonias para facilitar el proceso.
6. Cálculo del recuento de microorganismos viables totales: Una vez que se ha realizado
el conteo de colonias, se realiza el cálculo del recuento de microorganismos viables totales.
Se multiplica el número de colonias contadas por el factor de dilución correspondiente. Si se
realizaron múltiples diluciones, es necesario tener en cuenta todos los pasos de dilución en el
cálculo final. El resultado se expresa generalmente como el número de unidades formadoras
de colonias (UFC) por unidad de muestra (por ejemplo, UFC/ml o UFC/g).

Es importante mencionar que durante todo el proceso de recuento de microorganismos

viables totales, se deben seguir las buenas prácticas de laboratorio y utilizar técnicas estériles
para evitar la contaminación cruzada. Además, es esencial cumplir con los estándares y
requisitos de calidad establecidos para el análisis microbiológico en el área específica de
aplicación.

En resumen, el recuento de microorganismos viables totales es una técnica utilizada para

estimar la cantidad total de microorganismos vivos en una muestra. Implica la preparación de
medios de cultivo, la dilución de la muestra, la siembra de placas de cultivo, la incubación, el
conteo de colonias y el cálculo del recuento final. Es una herramienta fundamental en la
microbiología para evaluar la carga microbiana en diferentes entornos y aplicaciones.