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1. Aplicaciones prácticas de la técnica de recuento de conidios en cámara de Neubauer.

Evaluar la resistencia de las plantas a enfermedades o efectuar estudios específicos


(epidemiológicos) del patógeno, se utiliza inóculo a una concentración específica (es decir, un
número determinado de esporas por mililitro), según el patógeno y hospedero en estudio, con la
finalidad de obtener una buena infección que permita observar las diferencias entre los materiales
evaluados.

Para determinar la concentración se usa un hemacitómetro, con el cual se hacen conteos de


esporas en campos de dimensiones conocidas, que darán el número de esporas por ml de la
suspensión inicial. De esta forma, por medio de diluciones se obtiene el inóculo en la
concentración deseada.

facilidad con que son aislados, multiplicados y manipulados en condiciones de laboratorio; la


producción abundante de conidios en varios tipos de medios y substratos; la capacidad que poseen
de colonizar el suelo y el sistema radicular de las plantas; los diversos mecanismos que pueden
utilizar en el control de fitopatógenos y en la promoción de crecimiento de las plantas
intensificación del uso de bioproductos (se han utilizado con éxito para controlar los patógenos
principalmente de suelo ) para el control de fitopatógenos,
para mejorar la sanidad de las plantas y la producción vegetal

¿En qué procedimientos es utilizado?

PARA EL CONTEO DE NÚMERO DE CONÍDIOS


la preparación de suspensión de conidios de Trichoderma y conteo de número de conidios con ayuda
de una Cámara Neubauer (hemacitómetro) en microscopio óptico.

Aplicable a los productos en las formulaciones polvo mojable, gránulos dispersables y suspensión
concentrada que tienen como ingrediente activo estructuras del hongo Trichoderma.

PORCENTAJE DE CONIDIOS VIABLES.

método cuantitativo donde el resultado es expresado en porcentaje de conidios viables (germinados


y activos). Tiene como base la alícuota de la suspensión de conidios de Trichoderma en áreas
delimitadas de la placa de Petri con medio de Agar papa dextrosa (APD), incubación en temperatura
adecuada para la germinación de los conidios y conteo de número de conidios viables al
microscopio óptico.

UNIDAD FORMADORA DE COLONIA

método cuantitativo, donde el resultado es expresado en unidades formadoras de colonia (UFC/mL).


Tiene como base la homogenización del producto biológico con el diluente esterilizado (solución
salina con adición de Tween 80). A partir de ésta es realizado diluciones seriadas, las cuales son
distribuidas en placas sobre medio APD con Triton e incubadas a 25 ± 2 °C en oscuridad para
posterior conteo de número de colonias formadas por Trichoderma.

2. ¿Cuál es el volumen en mm3 de cada uno de los cuadrantes de la cámara de Neubauer.


Explique el fundamento del factor de la cámara de Neubauer (104 ).

la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de


profundidad. el volumen de cada cuadrante es: 1mm x 1mm x 0.1mm = 0.1mm3 .

por cuadrantes
Área = 1 mm x 1mm = 1 mm2
Volumen = 1 mm2 x 0,1 mm = 0,1 mm3 = 1 x 10-4 ml

volumen ; ancho x largo x profundidad

v= 1mm x 1mm x 0.1mm =0.1mm (volumen del cuadrante en el cual se realiza el conteo de
esporas)

El número de esporas se obtiene en ml por tanto se debe realiZar la conversación de mm3

a ml entonces:
3. ¿Cuál es el procedimiento para determinar el número de esporas por gramo?

4. ¿Qué otras metodologías hay para hacer el recuento de microorganismos? Seleccione un


método directo y uno indirecto diferentes a los planteados en esta práctica y
explíquelos.

Recuentos Directos

Recuento microscópico: Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento fácilmente
disponible en un laboratorio de microbiología. Para estos recuentos se utilizan generalmente cámaras
de recuentos, aunque también pueden realizarse a partir de muestras filtradas en membranas y
transparentadas o teñidas con colorantes fluorescentes (Naranja de acridina).

Recuento electronico: Los contadores electrónicos permiten realizar recuentos de bacterias, levaduras
no filamentosas y protozoarios, pero no de hongos y microorganismos filamentosos o miceliares.

Medida de la Biomasa

La medida de la masa de los constituyentes de la célula bacteriana es utilizada frecuentemente como


base para la medida de una actividad metabólica, o de un constituyente metabólico o químico.

Dispersión de la Luz

Cuando un haz de luz paralelo (colimado) golpea una partícula en suspensión, parte de la luz es
reflejada, parte es diseminada, parte es absorbida y parte es transmitida. La nefelometría mide la luz
dispersada por una solución de partículas. La turbidimetría mide la luz dispersada como un
decrecimiento de la luz transmitida a través de la solución. Con relación a la longitud de onda y al
tamaño de la partícula pueden existir tres tipos de dispersión.