117
17. MUTACIONES
1. La mutación es un cambio heredable en
la secuencia de bases del ADN
El mecanismo de síntesis de ADN garantiza una
alta fidelidad en la copia de la hebra nueva, lo
que tiene como consecuencia una muy baja va-
riabilidad en la información entre células ma-
dres e hijas. Finalizada la duplicación del ADN,
es decir, a lo largo de la vida de la célula, ocu-
rren mutaciones que si no se reparan se heredan
de célula a célula, cuando su ADN se duplique.
Los efectos de las mutaciones a nivel de sistemas
pueden ser positivos (evolución biológica, adap-
tación, biodiversidad) o negativos (enfermeda-
des hereditarias o adquiridas).
• La base de la variabilidad biológica son las
mutaciones. Por eso son necesarias para que
los seres vivos puedan adaptarse a las condi-
ciones cambiantes del ambiente.
• Las mutaciones se generan como consecuen-
cia de la inestabilidad propia de la molécula de
ADN, pero además pueden ser inducidas por
agentes mutagénicos de origen físico, químico
y biológico.
2. Agentes mutagénicos
Los agentes mutagénicos físicos, químicos y
biológicos incrementan la frecuencia con que
ocurren las mutaciones debido a la inducción
de cambios a nivel de la molécula de ADN. Las
lesiones pueden ser reparadas por vías enzimá-
ticas presentes en sistemas de distinta comple-
jidad, tales como bacterias, levaduras, vegetales
y animales. Pero la reparación del ADN puede
realizarse con error (mutagénica) o sin error.
2.1 Agentes Físicos
Las radiaciones ionizantes y no ionizantes son
los principales agentes físicos mutagénicos de
J. Monza, E. Nunes* y S. Signorelli
* Laboratorio de Radiobiología,
Departamento de Biofísica,
Facultad de Medicina. UdelaR.
origen natural y artificial. Además de la impor-
tancia que han tenido y tienen las radiaciones a
nivel de la evolución, se deben considerar tam-
bién las aplicaciones a nivel industrial, biotecno-
lógico y en el área de la salud.
Es fundamental conocer los efectos de las radia-
ciones a nivel molecular, celular y de sistemas,
que de acuerdo a su energía y dosis, pueden pro-
ducir daños derivados de mutaciones. También
es importante conocer y controlar en la medida
de lo posible, los mecanismos de radioprotec-
ción, a través de antioxidantes de origen natural
y el uso de filtros.
2.1.1 Radiaciones ionizantes.
Los rayos X y g, así como partículas de alta ener-
gía, como los positrones, pueden provocar ioni-
zación de átomos de la materia con la que cho-
can. Estas radiaciones pueden dañar al ADN di-
rectamente por la ruptura de enlaces fosfodiéster
o por la pérdida de bases, o indirectamente, por
la interacción con productos que se generan por
reacciones de oxidación en el medio circundante
con producción de radicales libres como los ra-
dicales hidroxilo y superóxido, entre otros.
2.1.2 Radiaciones no ionizantes.
La radiación UV según su longitud de onda se
clasifica en: UVA (320 a 400 nm), UVB (290 a
320 nm) y UVC (15 a 290 nm).
• Los tres tipos de radiación UV pueden pro-
ducir mutaciones y cáncer. Las radiaciones
de onda larga y media (A y B) provenientes
del sol predominan en la superficie terrestre y
pueden producir a nivel de la piel inflamación
(enrojecimiento, ulceración), hiperpigmenta-
ción, envejecimiento y cáncer. Estos dos últi-
mos eventos se han observado principalmente
en personas expuestas largo tiempo a la radia-
ción solar por su actividad laboral. En este gru-
118

po se encuentran los agrónomos, trabajadores • A grandes rasgos, el mecanismo de reparación

rurales, pescadores, marineros, entre otros. del dímero de T consiste en lo siguiente:

• Las radiaciones UV predisponen a la disminu- a. Reconocimiento del fallo estructural e hidróli-

ción de la respuesta inmune, estrés oxidativo sis del ADN por endonucleasas (UvrABC) que
y daño a nivel del ADN, con perturbación de cortan un fragmento a ambos lados del dímero.
redes reguladoras de la estabilidad genómica y
del ciclo celular (ej. supresores tumorales).

• La radiación UVC ha sido objeto del mayor

número de investigaciones a nivel molecular.
Se absorbe específicamente por el ADN y es
responsable de la formación de dímeros de pi-
rimidina entre bases adyacentes: T - T, T - C y
C - C (Fig. 1). Si bien las células son capaces de
repararlos mediante un mecanismo específico
de escisión de nucleótidos que involucra varias
enzimas (Fig. 2), el daño producido aumenta
con la dosis o fluencia energética (energía /
superficie). En general, a mayor dosis menor
probabilidad de reparación, es decir que au-
menta la probabilidad de que algunos dímeros
no sean corregidos por los mecanismos enzi-
máticos correspondientes.

• Durante la duplicación del ADN la ADN pol

puede incorporar un nucleótido incorrecto
frente al dímero de pirimidinas, por lo que es-
tos dímeros son mutagénicos, con las conse-
cuencias para la célula que esto conlleva.

• La remodelación de la cromatina en torno a

las lesiones es importante para permitir la ac-
cesibilidad de las enzimas de reparación. Los
estudios con mutantes en la vía de reparación
específica y el análisis a en seres humanos,
evidenciaron que la falta o deficiencia de cier-
tas enzimas de reparación predispone a la apa-
rición de cánceres de piel de distintos tipos.
Figura 2. Reparación de un dímero de timina. Una endo-
nucleasa (UvrABC) realiza la escisión (a -22 pb y + 6 pb res-
pecto al dímero). La helicasa II remueve el fragmento y la
ADNpol I sintetiza el nuevo ADN que la ligasa une al ADN
existente.

Figura 1. Dímeros de timina. La exposición al sol favorece la formación de dímeros de T entre dos T de la misma hebra, por
la formación de enlaces covalentes entre si. Esto produce una modificación en la estructura del ADN.

b. Separación del oligonucleótido generado por
acción de la helicasa II.
c. Síntesis de nuevo ADN por la ADN pol I que
usa como molde a la hebra "sana" de ADN, que
es complementaria a la que tenía el dímero.
d. Unión del ADN nuevo con el existente por
acción de la ligasa.
Algunas de las enzimas mencionadas con fun-
ción de reconocimiento y corte de la lesión se de-
nominan XP, por Xeroderma pigmentosum. Esta
enfermedad en la especie humana ocurre por fal-
ta de esas enzimas, y lleva a una alta incidencia
de cáncer de piel.
2.2 Agentes químicos
Los mutagénos químicos pueden clasificarse
como intercalantes, análogos de bases y los que
reaccionan con el ADN.
• Los intercalantes provocan inserciones o dele-
ciones de un par de nucleótidos cuando el ADN
se duplica, lo que puede generar corrimiento
del marco de lectura. El bromuro de etidio,
usado para teñir ADN, y los colorantes de acri-
dina se intercalan entre dos bases púricas ad-
yacentes (Fig. 3).
Figura 3. Intercalantes. Estas moléculas se incorporan en-
tre bases adyacentes.
• Los análogos de bases son compuestos simila-
res a las bases nitrogenadas que pueden incor-
Cuadro 1. Mutaciones por sustitución, inserción y deleción.
Tipo de mutación ADN ADN mutado
Sustitución, cambia un nucleótido por otro. AGTTACCAT AGCTACCAT
Deleción, se elimina uno o más nucleótidos. AGTTACCAT ATTACCAT
Inserción, se incorpora uno o más nucleótidos. AGTTACCAT AGTTCACCAT
119
porarse al ADN cuando se duplica y producir
errores en la hebra hija. Entre los análogos de
bases se encuentran el 5-bromouracilo, análo-
go de la timina, y la 2 –aminopurina, análogo
de la adenina (Fig. 4).
Figura 4. Dímeros con análogos de bases. A. Dímero de
5-BU (5-bromouracilo) con adenina. B. Dímero de 2-AP
(2-aminopurina) con timina.
Entre las moléculas que reaccionan con el ADN
se encuentran el benzopireno, el etil metano sul-
fonato (EMS) y la aflatoxina B1.
• El benzopireno, abundante en el humo de ci-
garrillos, se genera durante la combustión in-
completa de substancias de origen orgánico
(carbón, aceites, madera, nafta). Es metaboli-
zado y transformado en parte por las células en
dioloepóxido, un potente agente cancerígeno
que se une covalentemente a la G. El EMS me-
tila a la G y genera el cambio GC a AT, mien-
tras que la aflatoxina B1 se une a la G y produce
ruptura del enlace entre la base y la pentosa:
deja un sitio apurínico.
2.3 Agentes biológicos
Los virus pueden alterar el material genético a
través de inserciones o deleciones en el genoma
de la célula huésped. También los trasposones,
secuencias de ADN que pueden “saltar” de un lu-
gar a otro en el ADN cromosómico, pueden pro-
ducir mutaciones.
3. Las mutaciones pueden generar o no
cambios en el número de bases
Las mutaciones pueden alterar o no la cantidad
de bases del ADN. Las delecciones e inserciones
producen, respectivamente, disminución o au-
120
mento en el número de nucleótidos. Sin embar-
go la sustitución de una base por otra no genera
cambio en la cantidad de nucleótidos (Cuadro 1).
• Para analizar las consecuencias que puede tener
una mutación se debe considerar, además de si
varía o no el número de bases, el lugar donde
ocurrió, es decir, si se localiza en la región es-
tructural, o en regiones reguladoras del gen.
A continuación se analizan las consecuencias que
pueden tener mutaciones ocurridas en diferentes
regiones de un gen constitutivo que codifica una
proteína.
3.1 Mutación en la región estructural de
un gen que codifica una proteína
3.1.1. Mutación por sustitución: no modifi-
ca el número de bases del gen y pueden o no pro-
ducir el cambio de un aminoácido en la proteína.
• Mutaciones sinónimas. Estas mutaciones
generan un codón que codifica para el mismo
aminoácido, por lo que no cambia la función de
la proteína: son mutaciones "silenciosas”, aun-
que podrían determinar cambios en las estruc-
turas terciaria y cuaternaria. Estas mutaciones
son comunes como consecuencia del cambio
en el ADN de la base que codifica a la tercera
base de un codón. Debido a la redundancia del
código genético este tipo de mutación no con-
duce a un cambio en el aminoácido. Observe en
el ejemplo presentado que una mutación A por
C no genera cambio de aminoácido:
ADN --TTT-- ADN mutado --TTC--
--AAA-- --AAG--
ARNm --UUU-- ARNm --UUC--
Aminoácido --Fen-- Aminoácido -- Fen --
• Mutación con cambio de un aminoáci-
do. El cambio de un aminoácido en la proteína
puede hacer variar o no su función. A modo de
ejemplo, si como consecuencia de la mutación
cambia un aminoácido del sitio activo de una
enzima, probablemente ocurra una variación
en la funcionalidad de esa molécula. Si el ami-
noácido estuviera en una región no comprome-
tida con la función, la mutación no afectará a la
calidad de la enzima.
Otro aspecto a considerar es la característica del
–R del aminoácido. Si los –R son similares en
polaridad y tamaño,puede no haber un cambio
funcional en la proteína.
• Mutación sin sentido. Este tipo de mutación
genera un codón de terminación a partir de otro
que codificaba para un aminoácido. Como con-
secuencia se genera un polipéptido de menor
tamaño, y probablemente no funcional.
3.1.2. Mutaciones con cambio en el núme-
ro de bases: por lo general tienen como con-
secuencia la formación de proteínas no funcio-
nales, porque generan corrimiento del marco de
lectura (Cuadro 1).Esto hace que se modifiquen
la secuencia de todos los aminoácidos codifica-
dos después de la inserción/deleción, incluso el
codón stop.
• El único caso en el que no se corre el marco de
lectura es la inserción o deleción de múltiplos
de 3 nucleótidos. Por ejemplo, al perderse 6
nucleótidos la proteína pierde 2 aminoácidos.
3.2 Mutación en un promotor
Las mutaciones en el promotor u otras regiones
reguladoras no traen cambios en la calidad de las
proteínas en la mayor parte de los casos estudia-
dos. Las mutaciones en esas regiones, sean por
sustitución o cambio en el número de bases, pue-
den afectar a la cantidad de ARN transcripto. Si
se trata de ARNm variará la cantidad de proteína.
+ Observe que en el caso de los promotores una
mutación por sustitución, deleción o inserción
pueden traer aparejada las mismas consecuen-
cias. Es decir un aumento o descenso en la afini-
dad de la ARN pol por el promotor.
Al finalizar la preparación del tema será
capaz de:
1. Explicar por qué las mutaciones pueden ser
beneficiosas o perjudiciales.
2. Distinguir las consecuencias a nivel celular o
del sistema.
3. Describir la formación y reparación de un dí-
mero de timina y sus consecuencias.
4. Predecir consecuencias de distintos tipos de
mutaciones en diferentes regiones.