Efecto del estrés hídrico inducido con PGE, en la

germinación de semillas de Hypericum laricifolium,

Pernettya prostrata y Hesperomeles obtusifolia.
Karen G Ceballos- Castro, Angie A Bravo-Ordoñez, Julieth Y Checa-Pantoja, María L Zambrano-Martínez

Grupo de Investigación de Taller de Investigación IV, Departamento de Biología, Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales, Universidad de Nariño.

1. Resumen

El estrés hídrico afecta negativamente, la regeneración, el crecimiento y la supervivencia de las

plantas. Los efectos de estrés por sequía severa varían según la especie y diferentes taxones pueden
mostrar diferentes estrategias de adaptación para sobrevivir bajo tales eventos estresantes . . La
evaluación de la tolerancia a la sequía durante la germinación de las semillas podría ayudar a
comprender la persistencia de las especies en sus hábitats y su interacción con otras especies en las
comunidades así como su posible efecto por el clima cambiante. El . Para analizar el efecto del
estresestrés hídrico en procesos de germinación de semillas se puede inducir usando soluciones de
sales en los medios de germinación con diferentes potenciales osmóticos, uno de ellos es el Polietilen
Glicolentre ellos el (PEG).
Los efectos de estrés por sequía severa varían según la especie y diferentes taxones pueden mostrar
diferentes estrategias de adaptación para sobrevivir bajo tales eventos estresantes . La evaluación de la
tolerancia a la sequía durante la germinación de las semillas podría ayudar a comprender la
persistencia de las especies en sus hábitats y su interacción con otras especies en las comunidades así
como su posible efecto por el clima cambiante . Se aplaplicaron soluciones osmóticas a diferentes
concentraciones de PEG 8000, para evaluar los patrones de germinación simulando el estrés por
sequía en condiciones de bajo potencial hídrico, como el polietilen glicol de pesos moleculares 6000 y
8000las caracterisiticascaracterísticas de germinación de tres especies de plantas de páramo , el cual
es una buena herramienta para provocar condiciones de sequía durante la germinación de
semillas.Dado que en condiciones in situ es difícil analizar este estrés. La importancia de esta
investigación radica en que actualmente no existe suficiente literatura científica en donde se plasme
el efecto del estrés hídrico en plantas arbustivas del ecosistema de páramo como Hypericum
laricifolium, Pernettya prostata y Hesperomeles obtusifolia, por lo que, los resultados de este estudio
pueden aportar al vacío del conocimiento que existe sobre este tema.previamente se realizó una
caracterización de las semillas de cada especies Como primer punto se evaluó las características
morfológicas comousando como variables el peso y tamaño de las semillas. Se encontró gran
variación en peso y número de semillas por fruto así como variaciones significativas en el tamaño de
las semillas de Pernettya prostrata, Hesperomeles obtusifolia e Hypericum laricifolium, obteniendo
así que, Hesperomeles obtusifolia es la de mayor peso con un promedio de 1.0684 0.348 g. de tres
arbustos del páramo Galera Posteriormente se analizóEl el efecto de tres concentraciones de
polietilenglicol comparado con el control mostraron???----------------------- que, a mayor potencial
osmótico se reduce la capacidad germinativa de las semillas debido al déficit de agua, mientras que en
el control se generó una germinación normal en las 3 especies..

como inductor de estrés hídrico en la germinación de las semillas de las especies anteriormente
mencionadas. Frente a esto en la presente investigación se obtuvieron diversos resultados frente a las
variable tomadas tales como.Germinación en dónde Hesperomeles obtusifolia registro porcentaje de
germinación, a potenciales Osmóticos de -0.4 con un 2% , a -0.6 del 1% y en - 0.8 donde no se obtuvo
germinación , seguidamente esta Hypericum laricifolium que reflejo germinación a potenciales
osmóticos del -0.4 del 2% , para -0.6 no se presentó germinación y a -0,8 del 1%. En cuanto al tiempo
de germinación Los resultados muestran gran variación en el tiempo medio de germinación a nivel
de cada especie según el potencial osmótico aplicado.

El tamaño y la forma de la semilla son un índice relativo de la inversión de materia y energía que hace
la planta progenitora en cada descendiente. El tamaño y otras propiedades de los recursos presentes
dentro de los frutos y semillas constituyen un compromiso entre las necesidades directas de la planta
progenitora y las de sus descendientes, tanto en el momento actual como a lo largo de la historia de la
especie . Se encontró gran variación en peso y número de semillas por fruto así como variaciones
significativas en el tamaño de las semillas de Pernettya prostrata, Hesperomeles obtusifol

ia e Hypericum laricifolium, obteniendo así que, Hesperomeles obtusifolia es la de mayor peso con un
promedio de 1.0684 0.348 g, lo que confirma lo expresado por Reynel y J. Seguido está, Hypericum
laricifolium del 0.0061 0.0003 g, que en el estudio realizado por Pirela , confirma los resultados
obtenidos, y se afirma además que el tamaño de esta semilla es uno de los más pequeños de la familia
Hypericaceae y pernettya prostrata del 0.0056 0.0011g , siendo esta la de menor tamaño con respecto
a las dos anteriores. El tamaño de la semilla también está relacionado positivamente con el tamaño
inicial de la planta y con el vigor y la supervivencia de plántulas bajo diferentes tipos de estrés hídrico
.En cuanto a esto se tiene que cuando las plantas se desarrollan en ambientes limitativos tienden a
mostrar mayor variación en el tamaño de las semillas que producen, como lo señala Halpern en
Lupinus perennis L. La capacidad de una plántula para sobrevivir cuando ha perdido parte de sus
hojas, está positivamente asociada con el tamaño de la semilla . No en todos los ambientes las
semillas de mayor tamaño germinan mejor. La variación en el tamaño de la semilla desempeña un
papel importante en los procesos de germinación y establecimiento de plántulas. La germinación en
cuatro fechas de siembra de cinco categorías de peso y tamaño de semilla de Stenocereus beneckei A.
H. obtusifolia siendo la semilla más grande, tiene un mayor porcentaje de germinación, esto puede
deberse a que como anteriormente se mencionó, el tamaño le permite absorber más fácilmente los
nutrientes y el agua, en comparación con H. Laricifolium

2. Introducción

Una de las mayores preocupaciones de la sociedad en relación con el cambio climático se refiere a sus
posibles efectos en los recursos hídricos. De hecho, el clima y el ciclo hidrológico están tan
íntimamente relacionados que es difícil definir las fronteras entre ellos; el clima depende de variables
relevantes del ciclo hidrológico, tales como la humedad ambiente y la precipitación. Adicionalmente,
el sistema climático y el ciclo hidrológico están vinculados estrechamente con los océanos, como lo
demuestra, entre otros, el fenómeno de El Niño (Voituriez y Jacques, 2000). Frente a esto los
ecosistemas de alta montaña se encuentran entre los más sensibles a cambios en las condiciones
climáticas que ocurren a escala global, regional y local. La biota de estos ecosistemas podría ser
especialmente vulnerable a los cambios climáticos de larga duración pues su rango adaptativo se
realiza con especiales particularidades en los ciclos diurno-nocturno, condiciones especializadas que
tienden a considerarlos como más vulnerables y, por lo tanto, podrían ser usadas como sistemas
indicadores del cambio ambiental.(Ruiz et al. 2008)

El estrés por sequía puede afectar negativamente, la regeneración, el crecimiento y la supervivencia

de las plantass en diferentes etapas (Du et al 2019, Ding et al 2020) debido al potencial osmótico de
las semillas deshidratadas que restringen su metabolismo (Bradford et al., 2013). . Los efectos por
estrés por sequía severa varían según la especie y diferentes taxones pueden mostrar diferentes
estrategias de adaptación para sobrevivir bajo tales eventos estresantes (Volis y Bohrer 2013, Baskin y
Baskin 2014). La evaluación de la tolerancia a la seguía durante la germinación de las semillas podría
ayudar a comprender la persistencia de las especies en sus hábitats y su interacción  con otras especies
en las comunidades así como su posible efecto por el clima cambiante (Bhatt et al 2022). 

El efecto del estrés hídrico en procesos de germinación de semillas se puede inducir usando
soluciones de sales en los medios de germinación con diferentes potenciales osmóticos, uno de ellos
es PEG). (Bradford et al., 2013). Este método es una buena herramienta para provocar condiciones
de sequía durante la germinación de semillas, dado que en condiciones in situ es difícil analizar este
estrés.} Mokhberdoran et al, 2009; Nieto-Garibay et al, 2010; Sayar et al, 2010).

En los sistemas naturales, un déficit de agua puede ser el resultado de bajas precipitaciones, baja
capacidad de retención de agua del suelo, excesiva salinidad, temperaturas extremas frías o calientes,
baja presión de vapor atmosférica o una combinación de estos factores (Nilsen y Orcutt, 1996).Y se
pueden aplicar soluciones  osmóticas para evaluar los patrones de germinación simulando el estrés por
sequía  en condiciones de bajo potencial hídrico, como el polietilen glicol de pesos moleculares
6000 y 8000 (PEG-6000, PEG-8000), el cual es una buena herramienta para provocar
condiciones de sequía durante la germinación de semillas (Mokhberdoran et al, 2009; Nieto-
Garibay et al, 2010; Sayar et al, 2010). Dado que en condiciones in situ es difícil analizar este
estrés.

La inhibición del crecimiento de las plántulas está relacionada directamente con la presencia de PEG
en el medio, que reduce la entrada de agua hacia los tejidos, lo cual es indispensable para desarrollar
presión de turgencia y que ocurra el alargamiento celular. La inhibición de este último proceso en
condiciones de estrés hídrico severo se observó en diferentes genotipos de Oryza sativa L. por otros
autores. Por otra parte, si se afecta el estado hídrico del embrión disminuye el metabolismo en
general, debido a una reducción en la actividad de las enzimas que participan en diferentes procesos
vitales, como la degradación de las reservas alimenticias y la respiración celular. Esto último es
importante, ya que el crecimiento rápido durante la germinación y las etapas posteriores demanda un
consumo energético elevado para realizar todos los procesos de síntesis. (Pirdashti et al., 2003).

Frente a la información suministrada,

lLa importancia de esta investigación radica en que actualmente no existe suficientela literatura
científica es escasa sobre deficiencia de agua en la etapa de germinación de las semillas de especies
vegetales del páramo, l páramo en donde se plasme el efecto del estrés hídrico en plantas arbustivas
del ecosistema de páramo como Hypericum laricifolium, Pernettya prostata y Hesperomeles
obtusifolia, por lo que, los resultados de este estudio pueden aportar al vacío del conocimiento que
existe sobre este tema.

Con relación a lo mencionado,Teniendo en cuenta la información dada anteriormente se planteó como

incógnita ¿Cómo afecta el estrés hídrico el proceso de germinación de 3 especies de páramo
Hypericum laricifolium, Pernettya prostata y Hesperomeles obtusifolia? Y en búsqueda de respuesta a
esta pregunta se plantearon dos objetivos. Como primer punto de Eevaluó las características
morfológicas como peso y tamaño de las semillas de tres arbustos del páramo Galeras (Hypericum
laricifolium, Pernettya próstata y Hesperomeles obtusifolia) Posteriormente sey analizaró el efecto
de tres concentraciones de polietilenglicol como inductor de estrés hídrico en la germinación de las
semillas de las especies anteriormente mencionadas.

3. Metodología

3.1. Ubicación del área de estudio

El estudio se realizó en el páramo del sector Urcunina del Santuario de Flora y Fauna Galeras. Su
temperatura de acuerdo a la información obtenida por el IDEAM, estación de Obonuco en el
municipio de Pasto, desde el año 2000 al 2011, el Santuario de Flora y Fauna, es de 12,04°C, con
oscilaciones entre los 2,5ºC y 13,16ºC, correspondiendo la más baja al mes de julio y la más alta al
mes de febrero. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que, en las madrugadas en las zonas más altas
del Santuario, las temperaturas pueden descender hasta de –8ºC y, en días soleados, en horas del
mediodía, puede llegar a los 17ºC (López de Viles 1994; Bedoya & Morillo 2001). A partir de la
revisión de estudios investigativos del Santuario, documento Estado del Arte de la Información
Biofísica y Socioeconómica de los páramos del Departamento de Nariño y Programa de Monitoreo
del SFF Galeras, tiene actualmente un registro de 621 especies de flora, distribuidas en 270 géneros y
95 familias, donde sobresale la familia Asteraceae , seguida de la familia Orchidaceae y finalmente la
familia Ericaceae, cuyos representantes han sido considerados uno de los mejores adaptados a
condiciones altoandinas y de amplia distribución, con géneros como Disterigma empetrifolium,
Vaccinium floribundum, Pernettya prostrata, Gaultheria glomerata, entre otros.

3.2. Diseño de muestreo

3.2.1. Material vegetal

Se colectaron frutos de 5 a 10 individuos de cada una de las especies de Hypericum

laricifolium, Pernettya prostata y Hesperomeles obtusifolia, en el páramo Sector Urcunina a
una altura de 3600. 3700 msnm. Los frutos fueron empacados e identificados en bolsas de papel
para ser trasladados al laboratorio de fisiología vegetal de la Universidad de Nariño.
Inmediatamente los frutos fueron abiertos y secados al aire por una semana. Luego se limpiaron, se
seleccionaron y
se almacenaron para su respectivo tratamiento

3.3. Experimento de laboratorioCaracterización morfológica de las semillas

Para la caracterización morfológica de las semillas se realizaron 3 réplicas de 100 semillas

Para la determinación de peso de semillas, la variable es peso de 100 semillas. El tamaño de semillas
se midió usando fotografías en estereomicroscopio con cámara y con la herramienta Zen que es un
analizador de imágenes. Se determinó la longitud y el diámetro de cada semilla a un total de 50
semillas.

Evaluacion del efecto del estrés hídrico en la germinación

Se utilizaron 4 lotes de 25 semillas de las especies Hypericum laricifolium, Pernettya próstata y
Hesperomeles obtusifolia. Se montaron pruebas de germinación para esto se usaron cámaras de
germinación usando cajas de en 4 cajas Petri previamente esterilizadas con doble capa papel
absorbente. El papel fue humedecido constantemente con las siguientes soluciones que corresponden
a cuatro niveles de tratamiento eitno usando para tres tres concentraciones de Polietilenglicol 8000, y
un control con agua destilada. El PEG generea que genera diferentes potenciales osmóticos que
inducen iendo sequía a las semillas . Para ello se utilizó Polietilenglicol 8000.

Para preparar las soluciones de PEG se siguió el método propuesto por Michel y Kaufmann (1973).
Para ello se prepararon soluciones de PEG 8000 con agua destilada en tres a diferentes
concentraciones y como control se empleó agua destilada. El cálculo del potencial osmótico
equivalente para cada una de las soluciones se realizó mediante la ecuación descrita por Michel y
Kaufmann (1973) Tabla 1.
Tabla 1. Concentraciones de Polietilenglicol 8000 (PEG 8000) necesarias para obtener los
potenciales osmóticos deseados a 20°C, deducidas de la fórmula de Michel y Kaufmann 1973.

Potencial osmótico deseado (MPa) Concentración PEG 8000 en agua (g/Kg-1)

0,0 0,0

-0,4 169

-0,6 253

-0,8 338

Tabla 1. Concentraciones de Polietilenglicol 8000 (PEG 8000) necesarias para obtener los
potenciales osmóticos deseados a 20°C, deducidas de la fórmula de Michel y Kaufmann 1973.

El diseño experimental usado fue el siguiente:de laboratorio se presentó así

- 4 lotes de 25 semillas de Hypericum laricifolium PEG (-0.4)

- 4 lotes de 25 semillas de Hypericum laricifolium PEG (-0.6)
- 4 lotes de 25 semillas de Hypericum laricifolium PEG (-0.8)
- 4 lotes de 25 semillas de Hypericum laricifolium en control (agua destilada)

-4 lotes de 25 semillas de Pernettya próstata PEG (-0.4)

-4 lotes de 25 semillas de Pernettya próstata PEG (-0.6)
-4 lotes de 25 semillas de Pernettya próstata PEG (-0.8)
-4 lotes de 25 semillas de Pernettya próstata en control (agua destilada)

-3 lotes de 25 semillas de Hesperomeles obtusifolia PEG (-0.4)

-3 lotes de 25 semillas de Hesperomeles obtusifolia PEG (-0.6)
-3 lotes de 25 semillas de Hesperomeles obtusifolia PEG (-0.8)
-3 lotes de 25 semillas de Hesperomeles obtusifolia en control (agua destilada)

El proceso de germinación se registroregistró evaluó diariamente

durante cuarenta días, el criterio seguido para decidir que se había
producido la germinación fue la emergencia y elongación de la radícula
(≥2 mm) de la radícula.

Transcurrido el tiempo correspondiente a germinación de las semillas se procedió a calcular los

porcentajes de germinación en cada concentración, así como el índice de velocidad de
germinación TMG y el tiempo medio de germinación usando las siguientes formulas según
corresponda:

- % de germinación = (No. Semilla germinada/25) *100

- Velocidad de germinación = (No. Semilla germinada/día 1)+(No.Semilla germinada/día 2)

…....(No. Semilla germinada/día 40)

- Tiempo medio de germinación=(semilla germinada en tal día/semillas germinadas).

-
 -

3.4. Análisis Estadístico

Previa comprobación de supuestos de normalidad y homoecedassaticidad de varianza (test de
shapiro.- wilk y levene). SEl análisis estadístico fue posible gracias al programa Rstudio, y fue
utilizado para hacer unae realizó una comparación entre de las medidas de las variables longitud, y
peso de las semillas en cuestión, % de germinación, tiempo medio de germinación y velocidad de
germinación. Debido a que no hubo normalidad en los datos se realizó y un análisis no paramétrico
de las variables en consideración, siendo evaluado como un modelo bifactorial. Se obtienen así las
gráficas de homogeneidad y normalidad en los test de shapiro. wilk y levene y el noun análisis no
paramétrico de kruskal wallis, con los datos obtenidos en longitudes y pesos, tiempo medio,
velocidad y porcentaje de germinación de H. laricifolium, P. prostrata y H. obtusifolia. . El análisis
estadístico fue posible gracias al programa Rstudio.

Resultados

4.1. Análisis Características Morfológicas.

4.1.1. Largo y Ancho de las semillas
Llos datos obtenidos en cuanto a la medición de largo y ancho de las especies de estudio
demuestran que Hesperomeles obtusifolia, es la especie que presenta un mayor tamaño, con un
largo de 0.538 mm y un ancho de 0,2819 mm, las especies de Hypericum laricifolium y Pernettya
prostrata, alcanzan tan solo un largo de 17,28% y 27,34% del tamaño de H. obtusifolia,
respectivamente, en cuanto al ancho de estas especies resulta ser menor en un 82,27 % y 60,88%
respectivamente, estas diferencias encontradas se corroboran con análisis estadístico mediante
la prueba de Kruskal Wallis ( KW = ¿??gl= ¿?p=< 0,001 2.2e-16), lo cual indica que los datos
obtenidos son significativamente diferentes entre sí. (Gráfico 1.)

Gráfico 1. Promedio de medidas de largo y ancho(cm) de Hypericum laricifolium, pernettya

próstata y Hesperomeles obtusifolia, expresadas en unidades de mm. Autor(s). Ceballos,K. y col.
(2022).

4.1.2. Peso de las semillas .

Los Valores del peso reflejan una variación en los resultados a nivel de las tres especies,
Hesperomeles obtusifolia es la de mayor peso con un promedio de 1.0684 ± 0.348 g, seguido esta
de Hypericum laricifolium condel 0.0061± 0.0003 g y Ppernettya prostrata del conn0.0056 ±
0.0011g .

4.2. Efecto del Potencial Osmótico en la Capacidad Germinativa

4.2.1 Porcentaje4.2.1 Porcentaje de Germinación.

Los resultados obtenidos frente a los cuatro potenciales osmóticos (MPa) evaluados sobren
cadae cada especie, muestran una disminución significativa en el porcentaje de germinación
cuando el potencial osmótico es mas negativo que genera mayor estrés en el proceso de germinación y
estas respuestas son también dependientes do de la especie. En este sentido, Hesperomeles
obtusifolia registro un porcentaje de germinación del 2%, al Ψspotenciales Osmóticos más bajo
de --0.4(MPa) con un 2% , del 1% aΨs de -0.6(MPa) del 1% y eny en el Ψs mas alto - 0.8(MPa)
donde no se obtuvo germinación , seguidamente esta Hypericum laricifolium que reflejo
germinación a potenciales osmóticos del -0.4 (MPa) del 2% , para -0.6(MPa) no se presentó
germinación y a -0,8 (MPa) del 1% . Finalmente pernettya prostrata que fue la más sensible
puesto que se observó inhibición total en los tres potenciales osmóticos evaluados obteniéndose
germinación solo en el control con 100% de disponibilidad de agua a un potencial osmótico del
0.0 (MPa) (figura 1).

A. B.

C.

Fig 1. Porcentaje de germinación en función de cuatro potenciales osmóticos ensayados. (A)

Hypericum laricifolium, (B) Hesperomeles obtusifolia y (C) Pernettya prostrata. Autor(s).
Ceballos,K. y col. (2022).
3.2.2. Tiempo Medio de Germinación
Los resultados muestran gran variación en el tiempo medio de germinación a nivel de cada
especie según el potencial osmótico aplicado, es así que pernettya prostrata sigue siendo la más
sensible como se mencionó anteriormente, solo registra germinación al 100% de disponibilidad
de agua , a un nivel de 0.0(MPa) , aun así registra el menor tiempo medio de germinación de 15
días , Hypericum laricifolium muestra a niveles Osmóticos de -0.4(MPa) un tiempo de
germinación de 19 días , para 0.6 (MPa) no se evidencio germinación y en 0.8 (MPa) alrededor
de 17 días . Hesperomeles obtusifolia a potenciales osmóticos de -0.4 (MPa) muestra un tiempo
de germinación de 19 días aproximadamente , a -0.6(MPa) de 14 días y en -0.8 (MPa) no se
evidencio germinación. figura 2

A. B.

C.

Fig 2. Tiempo medio de germinación en función de cuatro potenciales osmóticos ensayados. (A)
Hypericum laricifolium, (B) Hesperomeles obtusifolia y (C) Pernettya prostrata. Autor(s).
Ceballos,K. y col. (2022).
3.2.3. Velocidad de germinación
La velocidad de germinación ( No. semillas /día) varió significativamente de acuerdo a la especie
y al nivel de los potenciales osmóticos evaluados, a medida que el potencial osmótico aumenta
se observa menor velocidad de germinación . En este sentido Hypericum laricifolium a
potenciales osmóticos de 0,4(MPa) presentó una velocidad de germinación de 0.10 a -0.6 (MPa)
de 0 y a -0.8(MPa) de 0,06, para Hesperomeles obtusifolia en -0.4(MPa) se obtuvo una velocidad
de 0.21 a -0.6(MPa) de 0.11 y a -0.8 (MPa) de 0.071, Pernettya prostrata solo presentó velocidad
de germinación en 100% de disponibilidad de agua con una velocidad de 2.93. Figura 3 .

A. B.

C.

Fig 1. Velocidad de germinación en función de cuatro potenciales osmóticos ensayados. (A)

Hypericum laricifolium, (B) Hesperomeles obtusifolia y (C) Pernettya prostrata. Autor(s).
Ceballos,K. y col. (2022).
Los datos obtenidos para la tres especies de páramo Pernettya prostrata, Hypericum
laricifolium, Hesperomeles obtusifolia y Pernettya prostrata, en cuanto a los factores analizados
de porcentaje de germinación, velocidad y tiempo medio de germinación sobre los potenciales
osmóticos evaluados, se corroboraron a través de un modelo bifactorial con la prueba no
paramétrica de kruskal y wallis, donde se obtuvieron p valores de 0,55, 0.6172 y 82,77
correspondientes a cada especie , que nos indicaron que no se presentó significancia estos
valores presentan un refuerzo estadístico de los tratamientos empleados en el presente trabajo.

Discusión
El tamaño y la forma de la semilla son un índice relativo de la inversión de materia y energía
que hace la planta progenitora en cada descendiente. El tamaño y otras propiedades de los
recursos presentes dentro de los frutos y semillas constituyen un compromiso entre las
necesidades directas de la planta progenitora y las de sus descendientes, tanto en el momento
actual (tiempos ecológicos) como a lo largo de la historia de la especie (tiempos evolutivos).J.
Harper y colaboradores (1970)
Se encontró gran variación en peso y número de semillas por fruto así como variaciones
significativas en el tamaño de las semillas de Pernettya prostrata, Hesperomeles obtusifolia e
Hypericum laricifolium, obteniendo así que, Hesperomeles obtusifolia es la de mayor peso con
un promedio de 1.0684 ± 0.348 g, lo que confirma lo expresado por Reynel y J. Marcelo
(1999) , donde se obtuvo un valor aproximado de 1,5 gramos sobre 100 semillas. Seguido está,
Hypericum laricifolium del 0.0061± 0.0003 g, que en el estudio realizado por Pirela (2006),
confirma los resultados obtenidos, y se afirma además que el tamaño de esta semilla es uno de
los más pequeños de la familia Hypericaceae y pernettya prostrata del 0.0056 ± 0.0011g , siendo
esta la de menor tamaño con respecto a las dos anteriores.
La masa de la semilla es un factor que afecta la germinación, y el crecimiento de las plántulas
(Cordazzo, 2002). El tamaño de la semilla también está relacionado positivamente con el
tamaño inicial de la planta (Moegenburg, 1996) y con el vigor y la supervivencia de plántulas
bajo diferentes tipos de estrés hídrico (Leishmann et al., 2000; Hendrix, 1984). Cuando las
plantas se desarrollan en ambientes limitativos tienden a mostrar mayor variación en el tamaño
de las semillas que producen, como lo señala Halpern (2005) en Lupinus perennis L.. Otro factor
importante es la herbivoría, ya que las plántulas pueden sufrir daños por la remoción de sus hojas en
sus primeras etapas de vida. La capacidad de una plántula para sobrevivir cuando ha perdido parte de
sus hojas, está positivamente asociada con el tamaño de la semilla (Armstrong y Westoby, 1993;
Bonfil, 1998).
No en todos los ambientes las semillas de mayor tamaño germinan mejor ... En zonas
semiáridas, un ejemplo es Astrophytum myriostigma L.,donde, las semillas pequeñas
germinaron más y con mayor rapidez que las grandes, lo que podría estar relacionado con su
capacidad para absorber agua más rápidamente que las de mayor tamaño en ese ambiente con
limitaciones de humedad; también podría tratarse de una estrategia para permanecer en el
banco de semillas del suelo por varios años (Sánchez et al., 2006).
La variación en el tamaño de la semilla desempeña un papel importante en los procesos de
germinación y establecimiento de plántulas. La germinación en cuatro fechas de siembra de
cinco categorías de peso y tamaño de semilla de Stenocereus beneckei (Ehrenberg) A. Berger &
F. Buxbaum se evaluó con la finalidad de inferir las estrategias de supervivencia en las primeras
fases de su ciclo de vida. La germinación tuvo diferencias estadísticamente significativas entre
las semillas grandes y medianas, que fueron superiores a las pequeñas (Ayala et al., 2004). En el
caso de la evaluación en porcentajes de germinación de Hypericum laricifolium, Pernettya
prostrata y Hesperomeles obtusifolia, se obtuvo una similitud a los resultados anteriormente
mencionados, encontrando que H. obtusifolia siendo la semilla más grande, tiene un mayor
porcentaje de germinación, esto puede deberse a que como anteriormente se mencionó, el
tamaño le permite absorber más fácilmente los nutrientes y el agua, en comparación con H.
laricifolium que tiene porcentajes de germinación en diferentes potenciales osmóticos y por
último P. prostrata que obtuvo el menor porcentaje de germinación, aproximándose a 0 por no
presentar germinación en ningún tratamiento,ytratamiento, y siendo la más pequeña de las
especies en cuestión.
La disponibilidad de agua en las semillas tiene una función dominante en la regulación de la
germinación y la obtención de buenos rendimientos, el déficit de agua limita la productividad de
los cultivos más que ningún otro factor ambiental.

El efecto del estrés hídrico inducido por PEG en el porcentaje de germinación muestra como
resultados principalmente en la especie Hypericum laricifolium un porcentaje de un 30% de
germinación en el control y un porcentaje no mayor al 5% bajo las condiciones del tratamiento;
para la especie de Hesperomeles obtusifolia la germinación respecto al control tomó un
porcentaje entre el 6% y para los tratamientos un porcentaje entre el 1% y 2%; por último la
germinación presente en el control de Pernettya prostrata radica en un 42% y la germinación en
tratamientos presentó un porcentaje del 0%. Cada uno de los datos anteriormente mencionados
muestran como se ve afectada la germinación a medida que se aumentan los potenciales
osmóticos (MPa) a mayor estrés hídrico los porcentajes de germinación disminuyen al igual que
la velocidad de germinación por lo que se produce un efecto significativo en el tiempo medio de
germinación para cada especie, aunque cabe resaltar que este proceso varía dentro de cada
especie como se pudo evidenciar , es así que se encontró que Ppernettya prostrata mostró mayor
sensibilidad a los distintos potenciales osmóticos evaluados debido a que solo se evidencio
germinación bajo 100% de disponibilidad de agua.

Diferentes autores señalan que el estrés hídrico afecta grandemente el proceso germinativo y
señalan que la germinación es la fase crítica para el establecimiento y desarrollo de las plantas,
pues garantiza la supervivencia de éstas (Almas, Bagherikia, Mashaki, 2013). También se
informa que el polietilenglicol resulta un osmolito eficiente para simular estrés hídrico en los
estudios de germinación, por ser un compuesto inerte y no tóxico (Muscolo, Sidari, Anastasi,
Santonoceto, Maggio, 2014). La disminución de germinación debido a elal incremento de
potencial hídrico se debe a cambios en los procesos metabólicos presentes en las semillas y al
desarrollo de metabolitos inducidos por el estrés, provocando una reducción de la difusión del
agua a través del tegumento y la absorción de agua por las semillas que provoca un déficit de
hidratación.

La disminución en indicadores germinativos como el porcentaje de germinación por efecto del

polietilenglicol, se ha informado en diferentes especies, como S. bicolor (Rezende et al., 2017),
Triticum durum Desf. (Khayatnezhad y Gholamin, 2011), Pennisetum glaucum L. (Sani y Boureima,
2014) y Pongamia pinnata (L.) (Swapna y Rajendrudu, 2015). En estos trabajos las respuestas de las
plántulas dependieron del genotipo (variedad) en cuestión. Los resultados también coinciden con los
observados en plántulas de alfalfa (Medicago sativa L.) donde se evaluó la germinación, el
crecimiento y su tolerancia al estrés osmótico inducido por polietilenglicol-6000 en diferentes
concentraciones y en tres genotipos distintos: «Dk166 » , «Verdor » susceptibles a déficit hídrico y
«Salina » resistente (Castroluna et al., 2014). Los resultados mostraron un retraso en el proceso de
germinación en todas las variedades, aunque con diferencias entre los genotipos evaluados. El hecho
de que Hypericum laricifolium germinara en una solución de PEG 8.000 a potenciales -0,4 y -0,8, y
Hesperomeles obtusifolia a potenciales -0,4 y 0-.6 pudiera sugerir la presencia de mecanismos de
tolerancia a la sequía. Por otra parte, para Pernettya prostrata no tuvo germinación en ningún
potencial osmótico, lo que puede deberse a que el material vegetal es incapaz de sobrevivir en
condiciones máximas de estrés hídrico donde la disponibilidad de agua es menor al 8%.

Se conoce que en otros estudios realizados, el crecimiento fue inhibido tanto por NaCl como por
PEG-8000. Rentablemente, la presencia de NaCl o PEG en la germinación y el medio de
emergencia reduce la absorción de agua por las plántulas e inhibe la movilización de las
reservas al eje embrionario en crecimiento. Estos datos son de acuerdo con otros estudios de
germinación en la presencia de NaCl o soluciones osmóticas no iónicas como Manitol o PEG
(Kawasaki et al., 1983).