UNIVERSIDAD DE

SONORA

División de Ciencias Biológicas y

de la salud

Departamento de Ciencias Químico-Biológicas

Laboratorio de Química Analítica II

Dra: Yedith Soberanes Duarte

Práctica #3: Ley de Beer. Curva de calibración

Integrantes

Figueroa acosta Patricia Michelle

Robles Anaya Antonio de Jesús

Urrea Ramírez Ivana

Valenzuela Moroyoqui Zuceth Elí

Hermosillo, Sonora a 15 de septiembre del 2021.

 Objetivo

● Elaborar una curva de calibración a partir de la medición de la absorbancia de

soluciones estándar de sulfato de cobre (II)
● Determinar la concentración de una solución de concentración desconocida
de sulfato de cobre (II) a partir de la curva de calibración

Introducción

Un procedimiento analítico utilizado en análisis cuantitativo es la calibración, que

conlleva la construcción de una curva de calibración, la cual es una representación
gráfica de una propiedad cuantitativa en función de otra, generalmente la
concentración del analito. La calibración tiene como objetivo elegir unos parámetros
que permitan obtener una linealidad en la curva, respecto a las 2 propiedades en
estudio del analito, con el fin de obtener resultados que sean directamente
proporcionales a la concentración de dicho compuesto en una muestra,
generalmente en un intervalo de tiempo determinado.

Con el fin de realizar esta curva de calibración deben estar definidas las 2
propiedades a comparar, y a partir de ahí, se determina el método y los equipos
adecuados para obtener los datos que definan una propiedad en función de otra.

La etapa de calibración se realiza mediante un modelo de línea recta, que consiste

en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste la linealidad de “x” puntos
experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una variable
independiente (concentración), y una variable de respuesta (nivel de absorbancia),
la recta de calibrado se encuentra definida por la siguiente ecuación:

y = + mx b

Materiales y reactivos

Equipo

● Espectrofotómetro de ultravioleta visible

● Computadora portátil por equipo

Material

● 2 vasos de precipitado de 100 mL

● 6 celdas de vidrio o plástico
● 5 tubos de ensayo de 15 x 125 mm
● 1gradilla
● 2 pipetas volumétricas de 1 mL
● 2 pipetas volumétricas de 2 mL
 ● 1 pipeta volumétricas de 5 mL
● 1 piceta con agua destilada
● 1 pipetor o jeringa para pipeta
● 7 pipetas Pasteur
● 1 agitador
● 1 recipiente para residuos
● Sanitas para la celda

Reactivos

● Soluciones de CuSO4 0.100 M (acidificada, para evitar precipitación)

● Solución problema de CuSO4
● Agua destilada

Diagrama de flujo
 Resultados

1. Anotar los valores de absorbancia de cada dilución en la siguiente tabla.

Tubo Concentración de CuSO4 Absorbancia

(M)

1 0.02 M 0.15273

2 0.04 M 0.30846

3 0.06 M 0.46326

4 0.08 M 0.62218

5 0.01 M 0.80523

Muestra problema

Equipo 1 0.55292

Equipo 2 0.6846

Equipo 3 0.46168

Equipo 4 0.44521

Equipo 5 0.72456

Análisis de los datos

1. Calcular la ecuación de la regresión lineal (la línea de mejor ajuste) de

absorbancia vs concentración para las soluciones de CuSO4.
2. Determinar la concentración de la solución desconocida de CuSO4

y 0.6846

m 0.1619

b -0.0152

x 4.32242

3. Suponiendo que todos los equipos llevaron a cabo la práctica en el

laboratorio y obtuvieron la concentración para la muestra problema, como se
muestra en la tabla, calcule la incertidumbre.

Equipo Concentración de CuSO4 (M)

1 3.50907968

2 4.32242125

3 2.94552193

4 2.84379246

5 4.56924027

s=√(2.46255283/ 5-1)

s=0.78462616

4. Investigar y describir un método alternativo para determinar la concentración

molar de la solución desconocida de CuSO4 utilizando el valor de la
absorbancia.

Se aplica cuando se conoce el valor del coeficiente de Absortividad Molar

para el analito que queremos cuantificar a la longitud de onda de trabajo y en
la solución utilizada. En estos casos medimos la absorbancia de la muestra a
analizar y utilizando la Ley de Lambert Beer podemos despejar el valor de la
concentración.
 Conclusiones

Como conclusión, podemos decir que hemos obtenido mucho más conocimiento
acerca de las curvas de calibración y la ley de Beer. En esta práctica pudimos
resolver con éxito una curva de la calibración, dándonos los resultados esperados,
así como también pudimos obtener la concentración de una solución que
desconocemos de CuSO4 .

Cuestionario

1. ¿Cuáles son las principales limitaciones de la Ley de Beer?

A concentraciones altas ( > 0.01M) Las distancias medias entre las partículas
disminuyen hasta tal punto que cada partícula afecta la distribución de carga
de los vecinos. Estas interacciones alteran la capacidad absorbente de las
partículas respecto a una radiación de determinada longitud de onda.

A concentraciones muy diluidas (con muy baja concentración del absorbente)

La presencia de electrolitos (o el solvente)se aproximan mucho a las
especies absorbentes alterando la absortividad molar debido a interacciones
electrostáticas

2. El método más ampliamente utilizado para realizar un ajuste lineal es el

método de mínimos cuadrados. Explique brevemente en qué consiste
dicho método.

Es un procedimiento de análisis numérico en la que, dados un conjunto de

datos (pares ordenados y familia de funciones), se intenta determinar la
función continua que mejor se aproxime a los datos (línea de regresión o la
línea de mejor ajuste), proporcionando una demostración visual de la relación
entre los puntos de los mismos. En su forma más simple, busca minimizar la
suma de cuadrados de las diferencias ordenadas (llamadas residuos) entre
los puntos generados por la función y los correspondientes datos.
 Este método se utiliza comúnmente para analizar una serie de datos que se
obtengan de algún estudio, con el fin de expresar su comportamiento de
manera lineal y así minimizar los errores de la data tomada.

3. ¿Cómo se ve afectada la absorbancia de una solución si en lugar de

utilizar una celda de un 1 cm de paso óptico se utiliza una celda de 2
cm?

No se verá muy afectada con esa diferencia de tamaño de la celda, aunque,

dependiendo de qué solución muestra las longitudes de absorbancia que se
marquen serán mayores por el área cerrada o menores, o probablemente
sean inobservables dependiendo de las características de la muestra y el
material de la celda.

4. Una solución de una muestra problema de concentración 1 mM presenta

una absorbancia de 1.2. Si de esta solución se toman 2 mL y se diluyen
a 5 mL ¿cuál sería el valor de la absorbancia de la nueva solución?

C1=? C1V1=C2V2 C1=C2V2/V1

C2=0.001M C1= (0.001m)(2mL)/5mL C1=0.0004M

V2=2 mL C-A 0.001M - 1.2

V1=5mL 0.0004M - x x= 0.48

Bibliografía

● Fajardo, J. J., Caicedo, R., & Pinilla, J. P. CURVA DE CALIBRACIÓN.

● Espectrofotometría. (s. f.). aulavirtual. Recuperado 14 de septiembre de 2021,

de
https://aulavirtual.agro.unlp.edu.ar/pluginfile.php/43546/mod_resource/content
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● Dispersión por la luz de un prisma. (s. f.). Aula Virtual. Recuperado 13 de

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 https://aulavirtual.agro.unlp.edu.ar/pluginfile.php/3883/mod_resource/content/

0/clase_9-10/espectroscopia_clase_teorica.pdf

● P. (2020, 21 abril). Mínimos cuadrados. MiProfe.com.

https://miprofe.com/minimos-cuadrados/