Bacilo ácido alcohol resistente

TUBERCULOSIS

Generalidades.
Se trata de bacilos delgados, rectos o ligeramente curvos, inmóviles, que
no presentan cápsula ni forman esporas gram positivos, que resisten la
decoloración con decolorantes energéticos, como las soluciones de etanol
en ácido clorhídrico, son un tipo de bacteria que causa tuberculosis,
aerobios, tienen una pared celular rica en lípidos los bacilos
acidorresistentes tienen entre 1 y 10 m de largo

Esquema de la estructura bacteriana de mycobacterium tuberculosis

Estructura celular de M. tuberculosis 12 Consta de un gruesa

pared, separada de la membrana celular por el espacio periplásmico,
con cuatro capas. La mas interna es el glicopéptido o peptidoglicano con
moléculas de N-acetilglucosamina y ácido-N- glucolilmurámico, con cortas
cadena

Morfología microscópica.
Bacilos, inmóviles, se pueden observar aislados o agrupados en los
cultivos, forman masas compactas, tienen filamentos largos con células
hinchadas que asemejan unas mazas, formas irregulares de clava o
cuneiformes
Colonial.
Forma colonias elevadas, verrugosas, y adherentes de color blanquecino o
amarillento. En ciertos medios de cultivo las cepas virulentas se agrupan
en manojos paralelos formando largos cordones enroscados

Medio de cultivo utilizado

Este agar es un medio selectivo bien adaptado para el aislamiento,
la enumeración y la diferenciación de mycobacterias.
La selectividad del medio se basa en un verde malaquita y sales
minerales que inhiben el crecimiento de la mayoría de los
organismos contaminantes.
Preparación del medio:
Homogeneice el polvo contenido en el frasco.
Añada 37,2 gramos de medio deshidratado a 600 ml de agua
destilada estéril fría con 12 ml de glicerol para bacteriología. No
añada glicerol cuando prepare el agar de Lowenstein-Jensen sin
glicerol.
Mezcle hasta que se obtenga una suspensión homogénea. Caliente
suavemente, agitando constantemente y luego caliente hasta hervir
durante 1 a 2 minutos. Si es necesario, ajuste el pH a 6.6. Esterilice
en un autoclave a 121°C durante 15 minutos.
En condiciones estériles, prepare 1.000 ml de una suspensión muy
homogénea de huevos frescos enteros. Lave
cuidadosamente y desinfecte los huevos antes romperlos. Evite
incluir burbujas de aire al romper y homogeneizar los huevos.
Mezcle cuidadosamente y asépticamente 600 ml de medio básico
estéril, enfriado a 45-50°C y 1.000 ml de huevos enteros, evitando la
inclusión de burbujas de aire.
Dispense el medio completo en condiciones estériles
(preferiblemente tubos con tapón de rosca).
Coagule en una posición inclinada, en un baño maría o autoclave a
85°C durante 45 minutos. Los tubos deben conservarse a +4°C en
la oscuridad, evitando que se sequen.

ENFERMEDAD PRODUCIDA Y MODO DE CONTAGIO

La tuberculosis o TB es causada por una bacteria llamada

Mycobacterium tuberculosis.

Los microbios entrar en sus pulmones de allí ,pueden irse a otras

partes del cuerpos por ejemplo los riñones,la columna vertebral y el
cerebro.

La tuberculosis se propaga cuando una persona enferma tose,canta

o habla y usted respira el aire contaminado con los microbios de la
tuberculosis.
SÍNTOMAS Y TRATAMIENTO

Síntomas
•Tos intensa que dura tres semanas o mas.
•Dolor de pecho.
•Perdida de peso.
•Fiebre.
•Sudoración nocturna.
•Tos con sangre.
•Debilidad.

Tratamiento
•Isoniazida (lNH)
•Rifampicina (RIF)
•Etambutol (EMB)
•Pirazinamida (PZA)

Modo de contagio
Las bacterias de la tuberculosis se transmiten de una
persona a otra por el aire.Estas bacterias se liberan al aire
cuando una persona con enfermedad de tuberculosis de
los pulmones o de la garganta tose, estornuda, habla o
canta. Las personas que se encuentren cerca pueden
inhalar estas bacterias e infectarse. Las personas con
enfermedad de tuberculosis tienen más probabilidades
de transmitírsela a las personas con las que pasan tiempo
todos los días. Esto incluye a familiares, amigos y
compañeros de trabajo o de escuela.
 Prevención

Quimioprofilaxis Con Isoniacida

La quimioprofilaxis puede ser primaria, que tiene por

objeto evitar la primoinfección tuberculosa en personas
con riesgo de contagio, y secundaria, que pretende evitar
que el infectado desarrolle la infección tuberculosa.

La Isoniacida es un fármaco muy eficaz para la prevención

de la tuberculosis activa, logrando reducir entre un 60-
98% la tasa de enfermedad activa en pacientes con
conversión tuberculínica confirmada. Siempre que se
haya descartado la enfermedad, la quimioprofilaxis se
realiza, una sola vez en la vida del individuo, a dosis de
300 mg/día en adultos y de 5 mg/Kg en niños
(sin superar los 300 mg), durante 6 meses; excepto en los
portadores del VIH, en los que su duración se prolonga
hasta 12 meses.

Vacuna BCG

La vacuna BCG ess una vacuna contra la enfermedad de

tuberculosis. Esta vacuna no es de uso frecuente en los
Estados Unidos, pero a menudo se administra a los bebés
y niños pequeños en los países donde la tuberculosis es
común. Se ha observado un grado de protección contra la
tuberculosis muy variable (entre
un 0 y un 80%). Sin embargo, los resultados de un
numero importante de estudios epidemiológicos
muestran que la vacuna BCG protege a los niños de las
formas más graves de TB, mientras que su eficacia en
adultos no ha sido definitivamente establecida.

Técnica de Ziehl- Neelsen

1. Hacer un frotis de la muestra de esputo.
1. La fijación al calor asegurará de que el frotis quede adherido
al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados
falsamente negativos y un frotis muy grueso puede
desprenderse del portaobjetos durante la tinición.
2. Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de
tinción con los extendidos hacia arriba. Coloque todos los
portaobjetos orientados uniformemente, con el frotis hacia
arriba. Nunca tiña más de 12 portaobjetos a la vez.
2. Dejar el frotis sobre el puente de tinción.
3. Aplicar fucsina-fenicada.
1. Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos
durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este período.
4. Calentar con un mechero hasta la emisión de vapores (3-5
minutos).
1. Se requiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada
penetre y tiña la pared celular de la bacteria. No deje que
hierva o se seque el colorante.
2. Lave suavemente el colorante de cada portaobjetos con agua
corriente fría hasta que toda la tinción libre quede lavada.
Lave suavemente de manera que el extendido no se barra del
portaobjetos. Retire el exceso de agua.
5. Decolorar con alcohol-ácido.
1. Cubra cada portaobjetos con la solución decolorante, tal
como alcohol ácido y manténgalo sobre el portaobjetos
durante 3 minutos. Si no se decolora suficientemente, el
contenido del esputo que no son bacilos TBC puede
permanecer teñido. Enjuague con agua una vez más los
portaobjetos y quite el exceso de agua. Si los portaobjetos
 aún están rosa, aplique una cantidad adicional de la solución
decolorante de 1 a 3 minutos.
6. Aplicar azul de metileno (1 minuto).
1. Aplique la solución de contraste, azul de metileno, durante 1
minuto.
7. Enjuagar con agua
1. Vuelva a enjuagar con un leve chorro de agua e incline cada
portaobjetos hasta drenar el exceso de agua. Finalmente,
coloque cada portaobjetos en una gradilla a que sequen al
aire.
2. Ahora coloquele una pequeñita gota de aceite de inmersión y
haga la observación al microscopio con 10 x 100

Tipos de muestras conservación y transporte

Estructura celular de M. tuberculosis 12 Consta de un
gruesa pared,
separada de la membrana celular por el espacio
periplásmico, con
cuatro capas. La mas interna es el glicopéptido o
peptidoglicano con
moléculas de N-acetilglucosamina y ácido-N-
glucolilmurámico, con
cortas cadena
ConservacionLos tubérculos deben almacenarse en la
oscuridad, lejos de la luz. Expuestos a la luz se vuelven
verdes, esta coloración es clorofila e indica que en la
patata empieza a formarse un compuesto llamado
solanina que puede ser tóxico consumido en grandes
cantidades
Transporte :
El transporte de muestras al laboratorio debe ser tan
rápido como práctico – Aún una muestra de esputo con
retraso en su envío puede ser utilizada para baciloscopia
y análisis para Xpert MTB/RIF
Cuando sea posible, las muestras deben refrigerarse a
2–8°C, por un máximo de 10 días. Sin embargo, si fuera
necesario las muestras pueden ser almacenadas a 35°C
por hasta 3 días, y refrigerarlas a 2–8°C, para una
combinación máxima de 10 días
El número total de muestras en la caja corresponderá al
número de solicitudes
que lleva incluidas
El número de identificación de cada recipiente de esputo
debe corresponder al
número en cada solicitud
La solicitud de cada muestra debe contener la
información de cada paciente

Diagnostico por visualización microscópica

A los tres días de crecimiento, se observan los cordones
de una macrocolonia (foto superior).
Lectura Ziehl-Neelsen aumento bacilos alargados y
unicelulares (foto inferior).

A los 11 días de crecimiento obsérservamos los cordones

periféricos de las microcolonias (foto superior).
Se observan bacilos en cadenas largas (foto inferior).

A los 14 días de crecimiento de tuberculosis (foto

superior).
Se observan cordones clásicos (foto inferior).

A los 15 días de crecimiento de marinum observamos los

cordones periféricos salientes de las microcolonias (foto
superior).
Bacilos unicelulares cortos (foto inferior)

A los 17 días de crecimiento de fortuitum, se observa la

formación de cordones, con visualización macroscópica a
100X

Diagnostico por cultivo y muestra

Un diagnostico de cultivo de bacterias puede detectar
bacterias perjudiciales dentro o sobre el cuerpo que
pueden estar causando enfermedades. Para hacer la
prueba, necesitará entregar una muestra de sangre,
orina, piel u otro tejido. El tipo de muestra depende de
dónde parece estar localizada la infección.