UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

ZOOTECNIA
MICROBIOLOGÍA

Bioseguridad en el Laboratorio

OBJETIVOS:

• Promover en los estudiantes el pensamiento de seguridad biológica y

autoprotección.
• Crear y mantener una cultura de seguridad en el laboratorio.
• Identificar los factores de riesgo asociados a exposición biológica y
estrategias de control

MATERIALES:

Equipo de protección personal.

• Bata de laboratorio.
• Guantes descartables.
• Gafas/careta.
• Tapabocas
• Gorro
• Zapato cerrado
• Pantalon largo
• Frasco Guardián.

INTRODUCCIÓN

Bioseguridad

Los laboratorios microbiológicos constituyen medio ambientes de trabajo especiales,

generalmente únicos, que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas
identificables para las personas que se encuentren en o cerca de ellos. Durante todo
el transcurso de la historia de la microbiología, las infecciones se han contraído en
el laboratorio. Los informes publicados hacia fines del siglo pasado describieron
casos de tifoide, cólera, muermo, brucelosis y tétano1 adquiridos en el laboratorio.
En 1941, Meyer y Eddie2 publicaron un estudio de 74 infecciones de laboratorio con
brucelosis que se habían producido en los Estados Unidos, y concluyeron que la
“manipulación de cultivos o especimenes o la inhalación de polvo con contenido de
organismos de Brucella constituye un peligro inminente para quienes trabajan en los
laboratorios”. Algunos casos se atribuyeron al descuido o a malas técnicas en la
manipulación de materiales infecciosos.
Riesgo biológico (en inglés Biohazard) se define como cualquier microrganismo,
parásito (metazoo), vector, toxina biológica o cualquier sustancia biológica con
capacidad de generar enfermedad, otra disfunción biológica o la muerte en
humanos, plantas, animales y otros organismos vivientes. El manejo seguro de
riesgos biológicos se logra mediante la ejecución de prácticas y conductas en el
laboratorio y la implementación de medidas e instalaciones que permitan contener
estos agentes.
Niveles de Bioseguridad se describen cuatro niveles de bioseguridad (BSLs), que
constan de combinaciones de prácticas y técnicas de laboratorio, equipos de
seguridad e instalaciones de laboratorio. Cada combinación es específicamente
apropiada para las operaciones llevadas a cabo, las vías de transmisión
documentadas o sospechadas de los agentes infecciosos, y la función o la actividad
del laboratorio. Nivel de Bioseguridad 1. son adecuados para laboratorios destinados
a la educación o capacitación secundaria o universitaria, y para otros laboratorios en
los cuales se trabaja con cepas definidas y caracterizadas de microorganismos
viables que no se conocen como generadores sistemáticos de enfermedades en
humanos adultos sanos. Nivel de Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios
educativos, de diagnóstico, clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con un
amplio espectro de agentes de riesgo moderado que se encuentran presentes en la
comunidad y que están asociados con enfermedad humana de variada gravedad. Los
riesgos primarios del personal que trabaja con estos agentes están relacionados con
exposiciones accidentales de membranas mucosas o percutáneas, o ingestión de
materiales infecciosos. Debe tenerse especial precaución con agujas o instrumentos
cortantes contaminados. Nivel de Bioseguridad 3. se pone mayor énfasis en las
barreras primarias y secundarias para proteger al personal en áreas contiguas, a la
comunidad y al medio ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente
infecciosos. Nivel de Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con agentes peligrosos
o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen en
peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales no
existen vacunas o terapias disponibles.
Es importante aplicar las normas de bioseguridad cuando se manipulen muestras
biológicas.

-­­ Rutas de infección en el laboratorio

o Inoculación parenteral.

o Derrames y Salpicaduras en piel y membranas mucosas.

o Ingestión o exposición por pipeteo inadecuado por boca, contacto de

ojos o boca con manos o material contaminado.

o Inhalación de aerosoles (infecciosos).

Prácticas fundamentales de seguridad en los laboratorios de diagnóstico

1. Equipo de protección personal

1.1Ropa protectora: es un medio de control habitualmente utilizado para

proteger al trabajador de la exposición a elementos químicos o biológicos que
puedan poner en riesgo potencial su salud o integridad física. Dado
que los riesgos biológicos en el laboratorio se relacionan
principalmente con fluidos orgánicos y sangre, se recomienda el uso de ropa
y guantes resistentes a líquidos. Cuando se hace referencia a ropa de
protección, en un sentido general, se incluyen todos los elementos que
hacen parte del equipo protector, esto es, bata, guantes y botas o zapatos
cerrados. Los materiales tejidos, cocidos o con poros deben evitarse en el
laboratorio dado el potencial de trabajo con líquidos,gases,microorganismos.

1.1.1 Bata de laboratorio o uniforme: tiene el fin de evitar la contaminación

de la ropa personal. Es necesario retirar la ropa de protección antes de
circular por un área no perteneciente al laboratorio (cafetería, sala
de descanso, oficinas administrativas). No se recomienda llevar la ropa de
laboratorio u otro EPP a casa para ser lavada, los laboratorios o
instituciones de salud deben contar con una lavandería para este fin.

1.2Protección de ojos y cara: se utilizan elementos que impidan la

penetración de partículas o cuerpos extraños en las mucosas (conjuntival) y
de potenciales riesgos de infección por salpicaduras de material biológico.
Los elementos de protección que usan habitualmente son: gafas con o sin
protectores laterales, gafas con montura integral, pantallas faciales, entre
otros. En cualquier momento que uno de estos elementos se contamine
debe ser descontaminado antes de ser utilizado nuevamente. Las gafas
formuladas y los lentes de contacto no son considerados EPP.

1.3Protección de pies y piernas: debe elegirse en función del peligro, que en

los laboratorios se constituye esencialmente por el derrame de sustancias
químicas o biológicas que pongan en riesgo la salud. En diversos
lugares pueden ser suficientes los zapatos normales, sin embargo, el
uso de sandalias o calzado abierto, está prohibido dado que expone los
pies a riesgos potenciales y accidentes.

1.4Protección de manos: para la protección de las manos en el laboratorio se

utilizan guantes descartables; existen guantes de diferentes
 materiales (látex, nitrilo y vinilo) y su uso que dependen de los
requerimientos para la realización de pruebas específicas y de la salud del
laboratorista (evitar reacciones alérgicas, etc.). Los guantes utilizados
deben ajustarse a la medida de sus manos, no se recomienda el uso
de guantes estrechos o grandes ya que esto puede ocasionar accidentes.
Es importante tener presente que los guantes no proveen completa
protección contra la contaminación de manos (6,7).

1.4.1 Recomendaciones del uso de guantes

-­­ Asegurarse que están intactos, sin fisuras o imperfecciones.

-­­ Siempre que ocurra contaminación de los guantes (por derrame de fluidos,
etc.) estos deben cambiarse.
-­­ No se recomienda la descontaminación y reutilización de guantes, esta
práctica debe evitarse incluso cuando los suministros en el laboratorio son
limitados.
-­­ Lavarse las manos antes de colocarse unos guantes nuevos.
-­­ No tocar la cara, ojos, cabello ni otras partes corporales al igual que objetos
de uso personal – de utilización en áreas diferentes del laboratorio.
(lapiceros, cuadernos, celular, etc.) .
-­­ Lavar las manos luego de retirar los guantes.
-­­ Usar una técnica adecuada para colocar y retirar los guantes de las manos.

1.5Micropipeteadores e instrumentos de ayuda para pipeteo

Deben ser utilizados en todo momento en el cual se requiera realizar

procedimientos de pipeteo. El pipeteo con la boca se encuentra prohibido y
es restringido en todos los laboratorios. Esto se debe a que la aspiración oral
e ingestión de sustancias con potencial dañino para la salud ha sido
responsable de muchas infeccione asociadas al laboratorio.

2. Desinfección (8)

2.1Terminología

-­­ Desinfección: medio físico o químico de destruir microrganismos, este

método no incluye necesariamente la eliminación de esporas.
 -­­ Descontaminación: cualquier proceso para remover y/o destruir
microrganismos. También se utiliza al hablar de neutralización de
sustancias químicas peligrosas y elementos radiactivos.
-­­ Biocida: término general para cualquier agente que destruya organismos
-­­ Microbicida - Antimicrobiano: agente que destruye microrganismos o que
suprime su crecimiento y multiplicación.
-­­ Antiséptico: sustancia que inhibe el crecimiento y desarrollo de
microrganismos, sin destruirlos necesariamente. Se utilizan en
superficies corporales.
-­­ Esterilización: Proceso que destruye y/o remueve toda clase de
microrganismos y esporas.

2.2Buenas prácticas de trabajo

Limpiar rutinariamente las superficies ambientales antes de establecer áreas

de trabajo y antes de dejar dichas áreas. Limpiar cada instrumento (cronómetro,
termómetro, teléfono, etc.) luego de tocarlo con guantes utilizados. No utilizar
alcohol o soluciones basadas en alcohol solas (aisladas) para desinfectar
superficies, estas se evaporan rápidamente lo que disminuye su eficacia. Utilizar
desinfectantes recomendados para superficies ambientales (hipoclorito de sodio).
Dejar la sangre seca o fluido biológico al menos 20 minutos en contacto con
la solución descontaminante de elección para permitir actúe correctamente.
Está prohibido consumir alimentos o bebidas, mascar chicle, fumar, aplicarse
cosméticos u otros productos, almacenar alimentos y ropa de uso personal en el
laboratorio.

2.2.1 Soluciones blanqueadoras (cloradas)

Las soluciones de Hipoclorito se consideran corrosivas e irritantes. Debido a esta

característica las soluciones sin diluir son corrosivas para el acero inoxidable. Para
que sean un desinfectante efectivo las soluciones deben contener >0,5% pero
<2% de hipoclorito de sodio. Aun cuando las soluciones con hipoclorito pueden ser
desinfectantes efectivos, son pobres limpiadores, por lo tanto se requiere de
un proceso de 2 pasos donde se realice una limpieza previa a la desinfección (una
práctica recomendada es dejar secar los productos de limpieza antes de adicionar
el desinfectante).
 2.3Riesgos biológicos (9)

2.3.1 Punciones y heridas

No se debe re-envainar las agujas, si este procedimiento es absolutamente

necesario se debe utilizar un quipo especial que permita minimizar el riesgo
de punción. Disponer las agujas en contenedor a prueba de fugas y punciones
marcado con la palabra o el símbolo de riesgo biológico “Biohazard”.

2.3.2 Rompimientos/quebraduras

Nunca se debe recoger material quebrado en el laboratorio con las manos

(desnudas o enguantadas), es necesario el uso de pinzas u otro material de ayuda
para recoger los vidrios rotos (fragmentos de vidrio). El material roto debe
depositarse en un recipiente para objetos afilados. Es recomendable no utilizar
material astillado o con fisuras y cuando esto se presente descartarlo en un
contenedor para material roto.

2.3.3 Derrames, salpicaduras y aerosoles

Es responsabilidad de todo personal de laboratorio desarrollar todos los

procedimientos de una manera que minimice la creación de salpicaduras o
aerosoles.

Los procedimientos y equipos que se encuentran generalmente asociados a

la producción de aerosoles son el pipeteo, mezclar con pipeta o vórtex y la
centrifugación.

2.4Disposición de residuos (10, 11)

En general los residuos se clasifican en peligrosos y no peligrosos de acuerdo a sus

características. Los residuos no peligrosos son aquellos que no presentan
riesgo para la salud humana o el medio ambiente, estos se clasifican en
reciclables, inertes y ordinarios. Los residuos peligrosos por su parte son aquellos
que pueden causar daño a la salud humana o al medio ambiente (al igual que los
envases, empaques y embalajes que hayan estado en contacto con ellos), estos se
clasifican a su vez en residuos infecciosos o de riesgo biológico y residuos
químicos.

Todo laboratorio cuenta con unos recipientes adecuados para la disposición de los
diferentes tipos de residuos, dichos recipientes se categorizan por colores y están
rotulados de acuerdo al material que contienen y su riesgo potencial (Tabla 1)
Tabla 1. Clasificación y disposición de residuos según código de
colores
El material corto-punzante (lancetas, agujas, laminillas) debe desecharse en
los recipientes conocidos como “frasco/tarro guardián” que se rotulan con el símbolo
universal de riesgo biológico (Figura 1)

Figura 1. Símbolo universal de riesgo biológico/biohazard

Bibliografía

1. Wilhelmsen C, Hawley R. Biosafety. Medical Aspects of biological warfare. Capítulo 22

2. Herrick R. Protección personal. Enciclopedia de salud y seguridad en el trabajo. Cap 31

3. Mazzali R. Notas sobre bioseguridad, principales agentes microbianos reportados

como causantes potenciales de infecciones de laboratorio. Caracas. Revista de la
Sociedad Venezolana de Microbiología. Vol 6, No 2. 2006

4. Caixeta R, Barbosa A. Acidente de trabalho, com material biológico, em profissionais

de saúde de hospitais públicos do Distrito Federal, Brasil, 2002/2003. Rio de Janeiro.
Cad. Saúde Pública. Vol 21, No 3. Pp 737-746. 2005

5. Center for Disease Control and prevention (CDC). MMWR. Guidelines for safe work
practices in human and animal medical diagnostic laboratories. Atlanta. Supplement.
Vol
61. 2011

6. Using disposable gloves. Wisconsin and South Dakota Office for Health Protection. Food
Code Fact sheet No 5.

7. World Health Organization. Patient safety. Glove use information Leaflet

8. World Health Organization. Laboratory Biosafety manual. Geneva. 2004

9. Center for Disease Control and prevention (CDC). Op cit.

10. Decreto 1669 de 2002. Manejo de residuos anatomopatológicos humanos

11. Decreto 4741 e 2005. Por el cual se reglamenta parcialmente la prevención y manejo de
los residuos y desechos peligrosos en el marco de la gestión integral.