Concentración de la enzima

Con base en la experiencia del efecto de la concentración de enzima sobre la actividad se la

sacarosa, se logró demostrar lo descrito en la bibliografía, ya que en se observa que la
concentración de enzima es directamente proporcional a la velocidad de catálisis, siempre y
cuando el sustrato se mantenga constante y no se agote; una vez que el sustrato se agota, deja de
haber actividad enzimática. Al aumentar la concentración de enzima, aumenta la velocidad de
catálisis, esto es porque al haber mayor enzima, hay mayor número de sitios activos listos para
iniciar con la hidrolisis, además de que se aumenta la probabilidad de que el sustrato llegue al sitio
activo de la invertasa. Ahora analicemos las concentraciones de enzima y sustrato utilizadas en
esta experiencia. Se necesita de muy poca concentración de enzima para catalizar una mayor
concentración de sustrato, la concentración de sustrato es millones de veces mayor a la
concentración de enzima. Este análisis nos permite describir que podría haber más de un sitio
activo dentro de la sacarasa y además de que una sola molécula de invertasa puede hidrolizar
muchas moléculas de sacarosa, ya que esta tiene la facultad de regresar a su forma original, una
vez realizada la catálisis, para hidrolizar nuevamente otra molécula de sacarosa y repetir el proceso
muchas veces. Cabe mencionar que todas las enzimas pueden hacer esto, siempre y cuando no se
rebase su tiempo de vida media (McKee, 2003).

Efecto del Ph

Una vez obtenidos los resultados de esta experiencia se observó que a pH = 6.5 la sacarasa
presentó su máxima actividad por lo que decimos que este es su pH optimo (muy cercano al
descrito en la bibliografía para la invertasa extracelular e intracelular que tiene un pH = 5). El pH
optimo obtenido no quiere decir que sea el pH único en el cual la invertasa puede catalizar
observamos que de un pH = 3 al pH optimo hay actividad enzimática y va aumentando al aumentar
el pH de la solución. A un pH arriba del pH optimo se observa un decaimiento de la actividad
enzimática esto se debe a distintos factores uno de ellos es que la actividad enzimática está
estrechamente relacionada con el estado iónico del sitio activo. Un cambio de pH puede provocar
la desprotonación o protonación de los residuos aminoácidos que se encuentran en el sitio activo,
esto se debe a que se alcanza o se rebasa el pKa de los grupos ionizables que actúan en el sitio
activo. Podríamos decir que la enzima trabaja mejor con los residuos aminoacidicos, en su forma
desprotonada, dentro del sitio activo (Lehninger, 2001).

El cambio de pH también provoca que se modifique la estructura terciaria de la enzima, lo que

tiene como resultado la perdida de la actividad biológica de la enzima. Un cambio brusco en el pH
de la solución en donde se encuentra la enzima, la enzima se desnaturaliza; por lo tanto, pierde su
capacidad de catálisis. Las modificaciones del pH pueden hacer que la enzima se acerque a su
punto isoeléctrico, observando la precipitación de esta. Al haber cierto porcentaje de enzima
precipitada, la actividad enzimática va a ser menor. Otra consecuencia del cambio del pH es la
modificación del sustrato, en esta experimentación este no fue el caso ya que la sacarosa no puede
ser ionizada tan fácilmente (McKee, 2003).

Bibliografía
McKee, J.R. bioquímica. La base molecular de la vida. 3ª Edición. McGraw-Hill. España, 2003.
Paginas consultadas 167-173.