UNIVERSIDAD NACIONAL DE TUCUMÁN

Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia

“BacilosGramnegativos, fermentadores deglucosa, anaerobios

facultativos”
Familia Enterobacteriaceae: Salmonella

Bioq. Carolina López

Profesora Adjunta Cátedra de
Bacteriología
Objetivos
1) Conocer clasificación serológica.
2)Conocer fisiopatogenia de Salmonella
2) Conocer las distintas enfermedades que produce Salmonella
3) Diagnosticar en el laboratorio distintas serovariedades de
Salmonella
 TAXONOMIA

Grupo 5: Bacilos Gram negativos, fermentadores de

glucosa, anaerobios facultativos

Subgrupo 1 Familia Enterobacteriaceae

Géneros:
▪ Proteus
▪ Citrobacter
▪ Providencia
▪ Edwarsiella
▪ Salmonella
▪ Enterobacter
▪ Serratia
▪ Escherichia
▪ Shigella
▪ Klebsiella
▪ Otros

30 géneros, más de 100 especies

(Manual de Bergey`s de Determ. Bacteriológicas 9ª Ed.)

 Enterobacterias

Colonizadores Patógenos Patógenos Patógenos

normales urinarios gastrointest. extraintestinales

E. coli
E. coli E. coli Salmonella
diarreagénicos

Enterobacter Klebsiella Salmonella Enterobacter

Klebsiella Proteus Shigella Klebsiella

Proteus Serratia

E. coli
 SALMONELLA

▪ Bacilos Gram (-)

▪ No forma esporas
▪ Oxidasa (-)
▪ Móviles
▪ No fermenta lactosa
▪ Fermentan glucosa ácido
▪ Reducen NO3 NO2
▪ Indol (-)
▪ Citrato (+) (S. Typhi (-)
▪ Producción de Gas (+) (S. Typhi (-)
▪ Producen SH2
 SALMONELLA
▪ Hábitat: Sist. gastrointestinal de animales domésticos (perros, gatos,
gallinas, pollos), salvajes (reptiles, aves e insectos, tortugas), aguas y suelos
contaminados.

▪ “Salmonella” deriva del Dr. Salmon, cirujano veterinario, descubrió y aisló la

cepa entérica de intestino de cerdo en 1885 (S. choleraesuis).

▪ Alimentos, aguas contaminadas, principal mecanismo de transmisión.

▪ Productos de granja representan la mayor fuente de salmonelosis.

▪ Refrigeración previene el crecimiento pero no mata las bacterias.

▪ Calentamiento entre 57-60ºC es efectivo para matar a la bacteria.

▪ Temperatura de crecimiento óptima es 37°C.

 SALMONELLA

Entérica: > 2600 cepas subdivididas en 6 grupos

Salmonella
Bongorí 20

I- S. entérica Subesp entérica (99,5 % ) 1.435

II- S. entérica Subesp salamae 485
III a- S. entérica Subesp arizonae 94
III b- S. entérica Subesp diarizonae 321
IV- S. entérica Subesp houtenae 69
VI- S. entérica Subesp indica 11
 SALMONELLA
 El género Salmonella está dividido en dos especies, S. bongorí y S. entérica .
(CDC).

 Más 2.600 cepas están agrupadas dentro de S. entérica.

 Estas especies están divididas en seis subgrupos

 Todas las especies que son patógenas para el hombre están dentro de la
especie S. entérica, subgrupo 1 (también llamada entérica).

 Las serovariedades no tienen nivel taxonómico de especie.

 El nombre taxonómico correcto para el organismo que causa fiebre tifoidea

es:

 Salmonella entérica subespecie entérica serovariedad Typhi

 Salmonella entérica serovariedad Thypi

 Salmonella Typhi

 Salmonella entérica subespecie entérica serovariedad Typhimurium

 Salmonella Typhimurium
 SALMONELLA
Los serotipos se clasifican según esquema de Kauffman y White basado en
antígenos somáticos O, flagelares H (fase 1 y 2) y ocasionalmente capsular Vi.

Antígeno O: LPS .Polímero de oligosacáridos. Grupo de genes rfb codifican

enzimas que intervienen en la biosíntesis y ensamblaje de azúcares.
Antígeno H: proteínas. Genes que codifican antígenos flagelares flic: fase
1 (especifico) y fljb: fase 2 (inespecífico).
 Serotipificación de Salmonella spp. acorde a esquema de Kauffmann-White
Fórmula Antigénica
S. enteritidis serovariedad Grupo Antígeno H
Antígeno O
Fase 1 Fase 2
Salmonella Paratyphi A A 1,2,12 a -

Salmonella Paratyphi B b 1,2

Salmonella Derby B 1,4,5,12 f,g 1,2
Salmonella Typhimurium i 1,2

Salmonella Oraniemburg m,t -

C1 6,7
Salmonella Infantis r 1,5
Salmonella Newport C2 6,8 e,h 1

Salmonella Typhi 9,12,Vi d -

D1
Salmonella Enteritidis 1,9,12 g,m -
 SALMONELLA
División Ecológica
1. Serotipos y especies no adaptadas. Atacan al hombre y a los animales:
S. Enteritidis, S. Typhimurium, S. Choleraesuis (>1.800 serovariedades)

Características: Dosis infectivas altas (106- 108)

Período de incubación corto.
Comúnmente producen gastroenteritis.
Excepcionalmente invasivas.

2. Serotipos y especies adaptadas a huésped animal :

S. Pollorum, S. Gallinarum, S. Abortus-ovis, S. Abortus-equi, S. Dublin,

3. Serotipos y especies estrictamente adaptadas al hombre: Salmonella Typhi,

Salmonella Parathyphi A,B y C

Características: Dosis infectivas pequeñas 101 – 102

Periodo de incubación prolongado.
Producen septicemias con síndrome tifoideo.
Pueden producir portadores permanentes.
 SALMONELLA: MANIFESTACIONES CLÍNICAS

1. Gastroenteritis

2. Fiebre tifoidea (Fiebre entérica).

3. Septicemia con lesiones focales.

4. Estado de portador asintomático. (FAO WHO, 2002)

Todas las personas son susceptibles a adquirir esta enfermedad (niños,

ancianos, pacientes inmunocomprometidos etc.)
 SALMONELLA

FACTORES DE VIRULENCIA

1) Estructuras superficiales :
a) LPS
b) Flagelos
c) Cápsula
d) Fimbrias

2) Genes de virulencia:
a) Islas de patogenicidad (SPI-1…..SPI-20)
b) Genes de resistencia a los antimicrobianos
c) Plásmidos de virulencia (patógenos de los animales domésticos).
 SALMONELLA
FACTORES DE VIRULENCIA
 SALMONELLA

ISLAS DE PATOGENICIDAD

Grupo de genes involucrados en codificar factores

específicos de virulencia

SPI-1 (31 genes) Codifica Tipo III de secreción(SST3)

Codifica determinantes que median:

✓ Funciona en los primeros estadios de la infección

✓ Adherencia e Invasión a células no fagocíticas del huésped
✓ Reclutamiento de neutrófilos
✓ Apoptosis de macrófagos
✓ Fagocitosis inducida en Mac. no activados para transporte
✓ Activan caminos de quinasas y factores de transcripción
✓ Codifica gen invA (detección de Salmonella spp. en muestras
de alimentos)
 SST3: Complejo aguja

4 anillos conectados como un bastón.

Los anillos inferiores interactúan con la
membrana y el peptidoglican se extiende
formando una estructura que se asemeja a
una aguja.
El componente principal es lipoproteína.
Secretan proteínas efectoras para invadir
células humanas o de animales.
SPI-1

Salmonella 2 SST3

SPI-2
 SST3: Complejo aguja
Salmonella: 2 sistemas de secreción tipo 3
❖ SPI-1
❖ SPI-2
 Sec. Tipo III (Cuando la bacteria está dentro de la célula)
SPI- 2 Regulan supervivencia.
(32 genes) Replicación bacteriana en células fagocíticas y no
fagocíticas.
Intervienen en las infección sistémica

Supervivencia intracelular en macrófagos

SPI- 3 Provee productos esenciales para el crecimiento en
condiciones limitadas de Mg2

Codifica SSTI, mediante la secreción de toxinas .

SPI- 4 Participa en la adaptación de Salmonella al ambiente
intracelular

Codifica proteínas involucradas en la secreción fluída.

SPI- 5 Reacción inflamatoria en la mucosa intestinal.

✓ Debido a una regulación coordinada y precisa de los genes de virulencia Salmonella

logra adaptarse a cambios ambientales que se le presentan durante el proceso
infeccioso.
 SALMONELLA: Adherencia
✓ Isla SPI-1
✓ Las adhesinas reconocen distintos receptores.
✓ Tienen la capacidad de activar linfocitos B y neutrófilos provocando una respuesta
biológica.

Fimbrias Receptor Efecto

-Activa linfocitos B
Tipo 1,2,3 Células huésped
-Activan macrófagos
SEF 14, 17, 18 Matriz extracelular de tejido dañado
-Secretan citoquinas
 SALMONELLA

INVASIÓN A LA MUCOSA INTESTINAL

 SALMONELLA: Invasión

Ingestión de agua y Inicio del ciclo Adh. cél. epit. del Ileón y células M
alimentos contaminados de infección

Inducen reordenamiento del Salmonella invade por

citoesqueleto englobándola en fagosoma mecanismo “disparo” (SST3)
(SCV)

GATROENTERITIS

Sobrevive y se replica dentro de las SCV

FIEBRE TIFOIDEA
 SALMONELLA: Infección Gastrointestinal

Proteínas Efectoras Receptor Efecto

PEEC Tejido linfoide -Destrucción de cel M
SPI-5 Placas de Peyer -Invade enterocitos adyacentes
Sop D Cel M -Activa citoquinas inflamatorias
Sop B Cel hospedador -Destrucción de microvellocidades
Pip A no fagocíticas -Disminución de la absorción
- Entra Ca++, sale Cl-, produce diarrea
 SALMONELLA: Gastroenteritis

Migración de neutrófilos Lliberación IL8, GM-CSF, IFNγ,

VCS y macrófagos (PMN) TNFα, GRO-β y GRO-γ que
reclutan células fagocíticas

Interrupción de la absorción de Na+ ,mayor PMN liberan prostaglandinas

absorción de CA++ ,aumenta la eliminación incrementa los niveles de
de Cl- AMPc.

Pérdida de agua por parte de la Provoca los evidentes signos de una

célula diarrea con abundantes PMN
 SALMONELLA: Fiebre tifoidea

Proteínas Efectoras.
Receptor Efecto

SPI I Tejido linfoide Sip A: Proteina de union a actina, inhibe

despolarizacion actina (Chaperona Sic A)
Sip A Placas de Peyer
Sop E: Induce ondulamiento en la membrana
Sop E Cel M e internaliza a Salmonella
Sop E2 Cel hospedador no Sop E 2: Polimerizacion de actina y
Spt P fagocíticas reorganiza citoesqueleto
Sop B Spt P: Antagoniza con quinasa terminal, evita
ondulamiento
 SALMONELLA: Fiebre tifoidea

VCS Se multiplica Migra hacia el borde basal

Interactúa y penetra en macrófagos

Ganglios linfáticos Liber. IL-6,IFN-γ,TNFα
mesentéricos. Reclutamiento de neutrófilos y monocitos
Pasan a sangre desde el
Bacteriemia primaria Macrófagos del hígado,
sistema linfático
transitoria bazo, médula ósea, vesícula
biliar

Vesícula biliar, reinfección

del tracto intestinal, Bacteriemia secundaria, las
inflamación, ulceración y manifestaciones clínicas
necrosis.

Hemorragias ,perforación. Muerte

 SALMONELLA: Gastroenteritis

Serotipos no adaptados

Período de incubación: depende de la dosis (106- 108)

Síntomas:
◼ 6 a 18 hs. después de la ingestión de agua y alimentos.
◼ Náuseas, vómito, fiebre, diarrea, dolor abdominal, mialgia.
◼ Fiebre y diarrea: 2 a 7 días
◼ Enfermedad autolimitada.
◼ Edades extremas, SIDA, Enf. Inflamatoria intestinal, CA de intestino, mayor gravedad.
◼ Mortalidad <0,2 %
◼ Portación en heces es de 4-5 semanas.
◼ < 3% inmunocompetentes tienen hemocultivos (+).
Diagnóstico: Heces (coprocultivo)
 SALMONELLA: Gastroenteritis
EPIDEMIOLOGÍA
❖ Salmonella es una de las cuatro causas principales de enfermedades diarreicas a nivel
mundial.
❖ Enfermedad de origen alimentario.
❖ Zoonosis de distribución mundial.
❖ Causa brotes: hospitales, fiestas, geriátricos, restaurantes etc.

Transmisión:
1. Indirecta: Por consumo de agua y alimentos contaminados.
Fuente común: carne y derivados, vacunos, aves de corral y huevos crudos, leche cruda,
productos lácteos, frutas y hortalizas crudas etc.
Contaminación huevo:
▪ Por ruptura de la cáscara.
▪ Trans-ováricamente de ovario infectado
▪ Oviducto antes formación de la cáscara
Huevos infectados mantenidos a temperatura ambiente alcanzan rápidamente dosis
infectivas.
Las gallinas ponedoras son asintomáticas.

2. Directa: De persona a persona vía fecal – oral. Portadores humanos asintomáticos

pueden diseminar la enfermedad.
 SALMONELLA: Fiebre Tifoidea

Serotipos adaptados estrictamente al hombre: S. Typhi y S. Paratyphi A, B y C

Fiebre tifoidea /paratifoidea es 10:1 según la OMS

Dosis infectiva: 10 1 – 10 2
Período de incubación :10 a 14 días.
Síntomas:
 Primera semana: Fiebre, anorexia, mialgia, dolor de cabeza, constipación y
malestar general.
 Segunda semana: Bacteriemia, fiebre elevada, dolor abdominal, máculas rosadas,
hepato y esplenomegalia, diarrea.
 Tercera semana: Fiebre, diarrea, necrosis de la placas de Peyer.
 Complicaciones: perforación intestinal, hemorragias, colecistitis, neumonía,
abscesos (hígado, bazo). Muerte

Administrar antibióticos rápidamente

Epidemiología
❖ Cada año contraen fiebre tifoidea entre 11 y 20 millones de personas y que
entre 128.000 y 161.000 de ellas acaban falleciendo, lo que supondría menos
de 1%
❖ El mayor riesgo se da en las comunidades pobres y vulnerables, entre los que
se incluye la población infantil
❖ Asia y África (10-20 %), EEUU (<1%)
❖ Embarazadas sin ATB produce abortos

Estado de portador crónico

 Salmonella persiste en las heces o en la orina por más de 1 año (1-4 %)
 Mayoría en mujeres y en pacientes con anomalías biliares.
 Serología para el antígeno Vi puede ser útil, porque en los pacientes crónicos
habrá títulos elevados y en los agudos los títulos serán bajos.
 Tratamiento con ATB (4-6 semanas)
 SALMONELLA: Fiebre tifoidea
EPIDEMIOLOGÍA

❖ Dieciséis millones de afectados, con < 1% muertes por año OMS

❖ Humanos único huésped y reservorio natural.
❖ Argentina 20-40-casos /año. Centro y Norte
❖ Diseminación: heces (asintomáticos) y heces y orina (sintomáticos)
❖ Transmisión: Por consumo de agua y alimentos contaminados. Moscas

Prevención:
❖ Agua purificada.
❖ Eliminación eficaz de aguas servidas.
❖ Portadores crónicos no manipulen alimentos, niños y ancianos.
❖ Viajeros NO consumir alimentos crudos y agua no potabilizadas.

Vacunación:
❖ Ty21a: oral, bacilos atenuados.
❖ ViCPS: IM, policarido, única dosis.
❖ Typbar-TCV: conjugada, niños > 6 meses ( OMS 2.017)

Regiones endémicas: Aunque su distribución es mundial, India, África, México y Chile, son
países de riesgo.
Indicaciones Vacunación
La OMS recomienda la vacunación contra la fiebre tifoidea a:
✓ Todas las personas que viajen a países de alto riesgo: sudeste asiático, África y
algunos sectores de Latinoamérica.
✓ Habitantes de zonas endémicas (prioridad en niños y adolescentes, por su
incidencia).
✓ Microbiólogos y laboratoristas en contacto con la bacteria.
✓ Convivientes de portadores de S.Tiphy.

Contraindicaciones
✓ Inmunocomprometidos.
✓ No se recomienda en menores de 2 años. (Typbar-TCV )
✓ Usar con precaución en trombocitopénicos o con trastornos hemorrágicos
(hemorragia leve en el lugar de aplicación).
✓ Hipersensibildad a los componentes de la vacuna.

Efectos Colaterales
✓Leves.
✓La vacuna oral: fiebre, náuseas, vómitos, cefalea, rash.
✓La vacuna inyectable: dolor, eritema, cefalea.
Fuente: Varias - Guía Práctica de Vacunación - Dr. Carlos Köhler - 5 Ediciones.
Contenido Actualizado el January 5, 2021,
 SALMONELLA: Fiebre tifoidea
Situación actual
 Es una enfermedad de alta prevalencia en los países muy poco desarrollados y en menor
escala en aquellos en vías de desarrollo
 Está en relación directa con las condiciones socio-económicas y de higiene ambiental,
especialmente el agua potable y manejo de excretas.
 En la Argentina, se registran entre 20 y 40 casos por año, casi todos en el centro y norte
del país, un 10% correspondió al Sur (2009)
 En América del Sur se aproxima a 150/100.000 y en algunos sectores de Asia al
1.000/100.000
 Mientras que en Francia la incidencia es de 1/100.000 habitantes, en su colonia, Guyana,
es de 12/100.000.
 En Indonesia se reportan 20.000 muertes anuales.
 Los casos se dan en general en la población comprendida entre los 3 y 19 años.

Fuente: Varias - Guía Práctica de Vacunación - Dr. Carlos Köhler - 5 Ediciones

Contenido actualizado el January 5, 2021,
 SALMONELLA: Septicemia

 El 5 % desarrollan septicemia: prolongada, fiebre, escalofríos, anorexia y anemia.

 El 5 a 10 % desarrollan infecciones localizadas como:

 Endocarditis: proceso muy destructivo.

 Infecciones arteriales: aorta abdominal es afectada con mayor frecuencia.

 Artritis séptica: niños, pacientes con inmunosupresión o drepanocitosis.

 Infecciones intradominales: Abscesos de hígado o bazo.

 Infecciones del SNC: Meningitis (0,9%) o abscesos cerebrales

 Infecciones pulmonares: Abscesos pulmonares, neumonía

 Infecciones óseas: osteomielitis (anemia drepanocítica, LES, neoplasia e inmun.)

 Infecciones urogenitales: pacientes inmunodeprimidos.

S. Cholerasuis, S. Dublin
 Defensas del huésped sobre Salmonella

➔Inmunidad celular: SIDA, trasplante, enfermedad linfoproliferativa.

➔Edad: neonatos, ancianos.

➔Acidez gástrica: antiácidos, aclorhidria.

➔Función fagocítica: hemoglobinopatias, drepanocitosis, bartonelosis,

paludismo, histoplasmosis.

➔Microbiota intestinal: antibióticos, cirugía intestinal.

➔Barrera gastro-intestinal intacta: procesos malignos, enfermedad intestinal

inflamatoria.
 Diagnóstico en el laboratorio

1. Gastroenteritis: Coprocultivo

2. Septicemia: Hemocultivos

3. Fiebre tifoidea (Fiebre entérica ):

1ª semana: Médula ósea (85-95 %), Hemocultivos (40-60%)
2ª semana: Hemocultivos, Coprocultivo
3ª semana: Coprocultivo ( 85 % positivos)

Otras muestras pueden ser: orina, secreciones gástricas, médula ósea, LCR etc.
 COPROCULTIVO

Agar Mac Conkey XLD SSA Selenito Fresco

PMN,
Hematies
Parásitos

Colonias blancas Colonias rojas Colonias blancas y negras

Subcultivo a las 6 h

XLD SSA

Colonias rojas Colonias blancas y negras

Serología Salmonella

Propiedades bioquímicas: TSI, SIM,CITRATO, UREA

Propiedades bioquímicas de Salmonella aislada de un coprocultivo:

TSI: alcalino/ácido
Citrato: (+) S. Typhi : (-)
S.I.M: SH2(+), indol (-), mot.: (+)
Urea: (-)
Luego se realiza serología para identificar
Propiedades bioquímicas de Salmonella aislada de un sitio extraintestinal (sangre,
medula ósea, LCR, orina etc.):

TSI: alcalino/ácido
Citrato: (+) S. Typhi : (-)
S.I.M: SH2(+), indol (-), mot.: (+)
Urea: (-)
Decarboxilación de Lisina (LIA): (+)
Voges proskauer: (-)
Rojo de metilo: (+)
Decarboxilación de Ornitina: (+)
Hidrólisis de Arginina: (+)
FAD: (-)
Luego se realiza serología para identificar
 Antibiograma

Coprocultivo:
Ampicilina, TMS, Ciprofloxcina, Cefpodoxima (screening de BLEE), Ac.
Nalidixico, Fosfomicina

Sitio extraintestinal:
Ampicilina, Cefalotina, AMC, Fox, Ceftazidima, Cefotaxima, TAZ, TMS,
Ciprofloxacina, Imipenem, Gentamicina, Amicacina, Cefepime.

Sistemas Automatizados

Microscan Vitek Film Array

 Serodiagnóstico de fiebre tifoidea
Reacción de Widal

 Se determina la presencia de anticuerpos contra el antígeno O y H de Salmonella Typhi.

 Las aglutininas séricas comienzan a aumentar durante la segunda semana de la
enfermedad.
 Llegan a un pico durante la quinta semana.
 La reacción de Widal se basa en aglutinación antígeno- anticuerpo
 Inespecífica : Da reacciones antigénicas cruzadas con otras bacterias (principalmente
enterobacterias, incluyendo Salmonellas no typhi), parásitos, virus y hongos.
 Interpretada en el contexto clínico
 Zonas endémicas títulos 1:160-200.
 Zonas No endémicas títulos 1:50-100
 Sensibilidad 74%, especificidad 77 %
 Falsos (+) y falsos (-)
 Tabla 1. Diferencias clínicas y epidemiológicas entre Salmonella typhi y Salmonella enteritidis

Variable Salmonella typhi Salmonella enteritidis

Cuadro clínico y duración Fiebre entérica; 4 semanas Enterocolitis; 8 días

Exclusivamente humano Avícola (zoonosis)

Reservorio
Relevante y fundamental en la transmisión De escasa importancia epidemiológica por su
Importancia del portador breve duración
asintomático
Alimentos involucrados Gran diversidad: Específicos:
Agua, verduras, mariscos, otros Carnes de ave y huevos

Tratamiento Efectivo con antimicrobianos Sin tratamiento antimicrobiano efectivo

conocido

Letalidad 10% si no se trata Muy baja

Examen microbiológico relevante Hemocultivo Coprocultivo

Control y prevención Saneamiento ambiental: agua potable, Programas de control de alimentos, cocción
alcantarillado, higiene personal de alimentos

Efecto del desarrollo Desaparece con el desarrollo Aparece con el desarrollo

Situación epidemiológica actual En declinación Aparición epidémica en 1994, endemia

actual.
Bibliografía:
▪Enfermedades Infecciosas. Principios y Práctica. Mandell, Douglas y
Bennett. 4° edición
▪Microbiología. Zinsser 17° edición
▪Manual de Microbiología Clínica de la Asociación Argentina de
Microbiología. Bacterias de Importancia Clínica. Vol. 1. Horacio
Lopardo, Silvia Predari, Carlos Vay
▪Salmonella enterica: a review or the trilogy agent, host and
environment and its importance in Chile.Marlen Barreto, Mario Castillo-
Ruiz y Patricio Retamal
▪Mecanismos moleculares de patogenicidad de Salmonella sp Inda
Marcela Figueroa Ochoa,* Antonio Verdugo Rodríguez*

Gracias