PRACTICA No.

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AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE ENTEROBACTERIAS

Introducción

Las bacterias son organismos cosmopolitas que tienen diferentes necesidades y por ende
diferentes hábitats y funciones biológicas, las enterobacterias son un grupo de bacterias Gram
– que viven en simbiosis con organismos superiores dentro de su tracto digestivo p, ej.
Escherichia coli, como organismos de vida libre degradan una buena cantidad de substratos
y que tienen la capacidad e fermentar carbohidratos, particularmente la lactosa produciendo
una serie de ácidos diferentes.
Son organismos que se encuentran regularmente en las heces fecales y por ende su presencia
en los alimentos habla de contaminación, algunas son capaces provocar enfermedades
gastrointestinales graves, tal es el caso de Salmonella tiphy que solo requiere de un solo
organismo para promover una infección.

Objetivo

Identificar hasta género al menos tres tipos diferentes de bacterias aisladas de diferentes
muestras.

Materiales

-30 tubos de ensaye -Dimetil alfa naftilamina

-10cajas de petri -Rojo de metilo
-Agar de eosina y azul de metileno -Alfa naftol
-Agar salmonella - Shigella -Tubos Durham
-Agar Mac Conkey
-Citrato Simmons
-Caldo de nitratos
-Caldo urea
-Caldo base roja de fenol y lactosa
-Caldo base rojo de fenol y dextrosa
-Caldo base rojo de fenol y sacarosa
-Caldo base rojo de fenol y manitol.
-Caldo rojo de metilo – Voges -
proskauer.
-Agar de lisina y hierro LIA
-Movilidad indol ornitina MIO
-Sulfuro indol movilidad SIM
-Agar de fenilalanina
-Reactivo de Kovacs
-Reactivo de Nessler KOH
Procedimiento

1.-preparar los medios de cultivos en cajas según indique el instructor.

2.-los restantes agregar en tubos de y esterilizar también siguiendo las instrucciones del
manual Bioxon
3.-aislar a partir de las muestras llevadas al laboratorio
4.-inocular los caldos por movimientos circulares y los agares en picos de flauta por picadura
y en cola de pescado
5.-leer hasta 96 horas según indique el instructor.
7.-cotejar las características con matrices de comparación para identificar a las bacterias hasta
género.

Resultados

Reportar en la siguiente tabla las Pruebas bioquímicas

Resultados
Medio de cultivo Bacteria 1 Bacteria 2
MIO Movilidad
Indol
Ornitina
SIM Sulfuro
Indol
Movilidad
LIA Lisina
Citrato
Caldo RM-VP
Caldo KNO3
CBRF + dextrosa
CBRF + sacarosa
CBRF + lactosa
CBRF + fructosa
Agar fenilalanina
Caldo urea - +

Forma de Evaluación
Presentación de reporte escrito y bitácora.