PRACTICA 3

REACIONES DE RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS EN MUESTRAS REPRESENTATIVAS

COMPETENCIA:

Durante la práctica identificar cualitativamente la presencia de aminoácidos en muestras representativas.

FUNDAMENTO:

Los aminoácidos, son moléculas orgánicas que contienen un grupo amino y un grupo carboxilo,
veinte son los constituyentes de las proteínas se las conoce como alfa aminoácidos.
Cuando una célula viva sintetiza proteínas, el grupo carboxilo de un aminoácido reacciona con el grupo amino de
otro aminoácido, formando un enlace peptídico y sucesivamente forman una larga cadena.
Dentro de las propiedades químicas que presentan los aminoácidos se considera las reacciones
de coloración como también reacciones generales que identifican cualquier aminoácido caso de las reacciones de la
ninhidrina.
Los α aminoácidos sirven de materia prima en la obtención de otros productos celulares, como hormonas,
neurotransmisores y pigmentos. Además, varios de estos aminoácidos son intermediarios fundamentales en el
metabolismo celular.
PARTE EXPERIMENTAL
MATERIALES Y REACCTIVOS

1.- Tubos de ensayo 7.-Reactivo de ácido sulfúrico H2SO4(c)

2.- Vasos de precipitados 8.- Reactivo de hidróxido de sodio NaOH al 10 y 20 %

3.- Pipetas 9.- Reactivo de acetato de plomo al 5%

4.- Baño isotérmico 10.-Solucion de sacarosa al 5 %

5.- reactivo de ninhidrina 11.- Albumina de huevo y muestra biológica.

6.- Reactivo de ácido nítrico HNO3(c)

PROCEDIMIENTO

⮚ En el caso de muestras bilógicas, tomar la muestra de orina en un vaso de precipitado

Estéril previa higiene y eliminando el primer choro de la orina.
⮚ Medir el pH con papel indicador universal, si el color es muy ámbar puede interferir en el análisis para lo cual
se procede a disolución de 1/10.

1.- REACCION DE LA NINHIDRINA.

 Esta reacción de utiliza para la detección de aminoácidos, como para cuantificación en materiales biológicos.

Los alfa aminoácidos calentados en solución acuosa en presencia de ninhidrina producen un color azul o violeta
formando la base de Schiff. Esta base se descompone con la liberación de CO 2 por hidrolisis a 2 amino – 1,3 diceto y
un aldehído. El aminodiceto se condensa con otra molécula de ninhidrina dando un complejo de color azul.

La coloración azul depende del pH, si este es muy ácido la coloración no puede producirse. Algunos aminoácidos
como la prolina, hidroxiprolina y la asparagina dan un color amarillo.

PROCEDIMIENTO

Colocar 0,5ml de la muestra en un tubo de ensayo agregar 2 a 3 gotas de solución etanólica de ninhidrina, calentar
hasta la formación de color violeta.

2.- REACCION XANTOPROTEICA

Es debido a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratados
con acido nítrico concentrado. la prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de
grupos bencénicos , especialmente en presencia de la tirosina una vez realizada la prueba se añade un álcali el cual
vira a un color anaranjado oscuro.

PROCEDIMIENTO

En un tubo de ensayo se vierte 0,5ml de solución de tirosina y se le añade 2 a3 gotas de HNO 3© con un ligero
calentamiento se pone amarillos enfría y añadir gotas de NaOH al 10%
Hasta un color naranja.

3.- REACCION PARA EL TRIPTOFANO

Se fundamenta en que la sacarosa de hidroliza a su monosacárido, el cual se deshidrata y forma

una hidroximetilfurfural, este se combina con triptófano formando un complejo coloreado rojizo.

PROCEDIMIENTO
En un tubo de ensayo verter 0,5ml de muestra, añadir 2 gotas de sacarosa, mezclar y luego dejar caer en el fondo del
tubo 1ml de ácido sulfúrico (c ), al contacto de los líquidos aparece una coloración roja en forma de anillo.

4.- REACIONES DE LOS AMINOACIDOS AZUFRADOS

Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo.
Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali de azufre de os aminoácidos, el cual, al reaccionar con una
solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

PROCEDIMIENTO
Poner en un tubo de ensayo de 2 a 3 ml. de muestra, luego añadir 2ml. de solución de NaOH al
20% posteriormente agregarle 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5 % calentar el tubo
Hasta ebullición, si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que sea formado sulfuro de plomo,
utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo que nos sirve para identificar
Proteínas que tienen en su composición aminoácidos con azufre.

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la importancia principal de los aminoácidos en la alimentación?

2. Valores normados para el consumo de proteínas en los humanos.
3. Dentro de los alfa aminoácidos ¿Cuáles son los esenciales? Indique su importancia.
4. ¿Cuáles son los aminoácidos fundamentales intermediarios en el metabolismo celular?
5. Explicar con reacciones químicas el fundamento de las reacciones de los aminoácidos estudiados en la
práctica.
6. Realice la clasificación de los aminoácidos en función de su polaridad.