Aislamiento y caracteristicas para la identificacion de microorganismos

En el manejo de muestras contaminadas o cultivos mixtos en los que se

encuentran diversos microorganismos, el primer paso para proceder a su estudio
es el aislamiento, es decir la separación de cada uno de los posibles integrantes
microbianos de la muestra.

Existen diversos métodos para conseguir esta separación, la mayoría de ellos

basados en la inmovilización de las células microbianas en la superficie de los
medios de cultivo sólidos. Al depositar una célula bacteriana o una levadura en un
punto del medio de cultivo, ésta quedará inmovilizada en ese punto y en él se
reproducirá por absorción de los nutrientes del medio. Las nuevas células
generadas permanecerán igualmente inmóviles y tras sucesivas generaciones
conformarán lo que denominamos una «colonia» que no es más que un montón
de células derivadas de una sola célula madre inicial, es decir, un clon de la
bacteria o levadura depositada al sembrar. Esta colonia es visible al ojo humano y
presenta diferentes características según el microorganismo que la genera. Esto
nos permite distinguir las diferentes poblaciones microbianas que se encuentran
en la muestra sembrada y separarlas transfiriendo una colonia de cada tipo a un
nuevo medio de cultivo estéril, a estos cultivos los consideraremos «puros» por
poseer un sólo tipo de microorganismo. (El fundamento es válido teniendo en
cuenta sólo microorganismos cultivables).

Técnicas de aislamiento. Se realiza un aislamiento de los microorganismos

presentes en un cultivo mixto en caldo ordinario, sobre agar nutritivo. Se siembran
dos placas de agar nutritivo, una mediante la técnica del agotamiento de asa y
otra mediante la de estrías escocesas y en cuadrante.

Estas técnicas pretenden diluir la carga microbiana que se deposita sobre el medio
de cultivo de forma que, en los últimos trazos de la siembra, haya tan pocas
células que queden suficientemente separadas unas de otras y puedan desarrollar
colonias independientes.

Técnica de aislamiento y recuento: el banco de diluciones. Se realizan una

serie de diluciones seriadas a partir del cultivo mixto Con esta técnica
conseguimos además de aislar colonias, obtener un recuento del número de
bacterias que tenemos en el cultivo.