1¿En qué consiste la técnica de cromatografía?

La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen

como finalidad la separación de mezclas basándose en la diferente
capacidad de interacción de cada componente en otra sustancia. De
forma general, consiste en pasar una fase móvil (una muestra
constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el
disolvente) a través de una fase estacionaria fija sólida. La fase
estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de
forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y
se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla
presenta un tiempo característico de paso por el sistema,
denominado tiempo de retención. Cuando el tiempo de retención del
compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la
mezcla, éste se puede separar mediante la separación
cromatográfica.

2.¿Cúantos tipos de cromatografía existen?

Dependiendo al tipo de interacción del analito entre las fases
estacionarias y móviles existen 4 tipos

Cromatografía de reparto
La cromatografía de reparto ha llegado a ser el tipo de cromatografía de
líquidos más ampliamente utilizado. En el pasado, la mayoría de las
aplicaciones se han referido a compuestos polares no iónicos de baja a
moderada masa molecular < 3000). Sin embargo, recientemente se han
desarrollado algunos métodos que han extendido las separaciones de
reparto a los compuestos iónicos. La cromatografía de reparto se puede
subdividir en cromatografía líquido-líquido y cromatografía con fases
unidas químicamente (enlazadas). La diferencia entre estas técnicas
radica en la forma como se retiene la fase estacionarla sobre las
partículas soporte del relleno.
Ejemplos de este tipo de cromatografía, son las cromatografías sobre
papel, sílice hidratada y la cromatografía líquida de alta eficacia en fase
reversa.
Cromatografía de adsorción
La cromatografía de adsorción, o líquido-sólido, es la forma clásica de
cromatografía de líquidos que introdujo Tswett por vez primera a
principios de este siglo. Más recientemente, se ha convertido en un
método importante de HPLC. Las únicas fases que se utilizan en HPLC
líquido-sólido son la sílice y la alúmina, siendo la primera la que se
prefiere para casi todas las aplicaciones debido a su mayor capacidad de
carga y a su mayor diversidad de presentaciones.

Ejemplo: Vino derramado sobre un mantel blanco. Un accidente a la

hora de la cena nos permitirá observar, al secarse el vino por contacto
con el aire, las diversas sustancias que lo componen. Cada una teñirá de
distinto tono o color el blanco de la tela, y se podrán identificar por
separado, cosa que normalmente resultaría imposible.

Cromatografía iónica

La cromatografía iónica es un tipo especial de cromatografía en la que la

que tiene lugar un proceso de separación de los iones de una disolución
mediante intercambio iónico entre la fase móvil y la estacionaria
(columna). Los iones quedan retenidos reversiblemente en la columna
por sus diferentes propiedades de carga. Este tipo de cromatografía es
popular para la preparación de la muestra, por ejemplo en la limpieza de
las proteínas o ácidos nucleicos de muestras.

Cromatografía de exclusión molecular.

 La fase estacionaria es un material poroso a través del que eluden los
analitos, dependiendo de sus tamaños. En este tipo de cromatografía no
existe ningún tipo de interacción física o química entre los analitos y la
fase estacionaria. Los analitos de mayor tamaño eluden primero, es
decir, no son retenidos en la fase estacionaria. Mientras que los analitos
de menor tamaño quedan atrapados en los poros de la fase estacionaria
y van saliendo de ella a medida que se pasa la fase móvil (líquida).