Practica número 2: Medios de cultivo

Autores: Jessica Aracely Salazar Berlanga, Ricardo Javier Machado Zaragoza, Marian Montemayor
Ruesga.

Asignatura: Agresión y Defensa

Licenciatura: Nutrición y Fisioterapia

Fecha de entrega:23 de febrero de 2023

Docente: Ana Leticia Arriaga Guerrero

Resumen:
En esta práctica pudimos estudiar el proceso que se lleva a cabo al momento querer hacer
cultivos y sobre todo los pasos que tienen al momento de hacer la esterilización, se prepararon
soluciones con agar nutritivo ya que es muy útil para el crecimiento bacteriano y se pueden ver
las colonias pequeñas con mayor facilidad. Por lo cual se pesó el agar y se mezcló con agua
destilada para después agitar un tiempo, después se utilizó gasas y aluminio para sellar el
matraz y no dejar que le entrara nada, posteriormente se le coloco cinta testigo para saber si se
esterilizo bien. Después de haber hecho todo el proceso del agar nutritivo se pone en la
autoclave a vapor para pasar al paso de la esterilización.
Palabras clave: cultivos, esterilizacion, agar nutritivo, bacteriano y autoclave a vapor.

Abstract:
In this practice, we were able to study the process that takes place when wanting to cultivate
crops, especially the steps involved in sterilization. Nutrient agar solutions were prepared as
they are very useful for bacterial growth, and small colonies can be seen more easily. Therefore,
the agar was weighed and mixed with distilled water, and then agitated for a while. Gauze and
aluminum were used to seal the flask and prevent anything from entering, and then a control
tape was applied to know if it was properly sterilized. After completing the entire process of
preparing the nutrient agar, it is put in the steam autoclave for the sterilization step.

Keywords: Cultivation, sterilization, nutrient agar, bacterial, and steam autoclave.

Introducción:
Los medios de cultivo son una mezcla de
nutrientes que, en concentraciones
adecuadas y en condiciones físicas óptimas,
permiten el crecimiento de los
microorganismos. Estos medios son
esenciales en el Laboratorio de
Microbiología por lo que un control en su
fabricación, preparación, conservación y
uso asegura la exactitud, confiabilidad y
reproducibilidad de los resultados
obtenidos.
En los laboratorios de microbiología se
utilizan diferentes tipos de medios de
cultivo que pueden ser preparados en forma
líquida o en forma sólida. Usualmente para
preparar un medio sólido, se parte de un
medio líquido al que se le añade un agente
solidificante
Planteamiento del problema:
Un medio de cultivo microbiano es una
mezcla de sustancias que promueve y
sustenta el crecimiento y la diferenciación
de los microorganismos. Los medios de
cultivo contienen nutrientes, fuentes de
energía, factores promotores del
crecimiento, minerales, metales, sales
amortiguadoras y gelificantes.
Los medios de cultivo microbiológico
pueden prepararse como un líquido
(caldo), un sólido (placas de agar) o un
semi-sólido (en profundidad). Los medios
sólidos y semi-sólidos contienen un agente
solidificante como el agar o la gelatina.
Justificación:
Los medios de cultivo se pueden preparar en
el laboratorio a partir de cada uno de sus
constituyentes básicos, o por simple
rehidratación de productos asequibles
comercialmente (medios de cultivo
deshidratados).
Generalmente se prefiere el uso de los
medios de cultivo deshidratados porque,
además de simplificar el trabajo, con ellos se
tiene mayor probabilidad de obtener
resultados reproducibles.
Objetivos:
Al finalizar el trabajo práctico el
estudiante estará en capacidad de:
• Preparar adecuadamente medios
de cultivo a partir de sus
ingredientes y a partir de medios
de cultivo deshidratados.
• Indicar el método de esterilización
apropiado
Hipótesis:
¿Porque el uso de agar nutritivo para el
cultivo de bacterias? Es fácil de preparar ya
que contiene una combinación de nutrientes
que son esenciales para el crecimiento de
bacterias. El agar cuenta con nutrientes que
son de vital importancia los cuales son
carbohidratos, aminoácidos, vitaminas y
minerales. También puede ser modificado
por ejemplo existen bacterias que requieren
hierro por lo cual se le puede agregar
sangre o ajustar el pH para algunas
bacterias que prefieren ambientes ácidos o
alcalinos. Por último, el agar proporciona
una superficie solida ya que se solidifica a
temperatura ambiente y proporciona una
superficie solida que permite que las
bacterias se adhieran y formen colonias
más fácil, lo cual facilita el aislamiento y la
identificación de las especies bacterianas.
Resultados:
Iniciamos a pesar el 2.3 de Agar nutritivo
sobre un vidrio de reloj en nuestra charola de
pesaje (Figura 1).
Posteriormente servimos 100ml en una
probeta para medir el agua destilada (Figura
2).
Luego esos mismos 100ml de agua destilada
la pasamos de la probeta al matraz (Figura
3).
En ese matraz agregamos los 2.3 gramos de
agar nutritivo anteriormente pesado y lo
agitamos para mezclarlo bien y buscar una
mezcla homogénea (Figura 4).
Sellamos nuestro matraz con un tapon de
gasas y arriba tapamos con aluminio y
ponemos cinta testigo con su identificación
(Figura 5 y 6).
Finalmente, introdujimos nuestro matraz
sellado e identificado en la autoclave para
esterilizar durante 15 minutos a 121°C/15 psi
(Figura 7).

Figura 1. Pesando 2.3 gramos de Agar Figura 4. Agua con Agar nutritivo
nutritivo

Figura 5. Agua destilada con Agar

nutritivo mezclándose

Figura 2. Probeta con 100ml de agua

destilada

Figura 5. Matraz sellado con aluminio y

Figura 3. Matraz con los 100ml de agua gasas
destilada
 como al seguirlos podemos conseguir
eficacia los objetivos deseados.
En esta práctica no se logró terminar el
medio de cultivo por completo, pero será
retomada en la siguiente practica de
laboratorio.
Referencias

¿Cómo funciona un laboratorio para

Figura 6. Matraz sellado e identificado
microbiología? (s/f).

Mdmcientifica.com. Recuperado

el 23 de febrero de 2023, de

https://mdmcientifica.com/labor

atorio-para-microbiologia/

Medios de cultivo. (2019, julio

17). EduLabC.

https://edulabc.com.mx/medios-

de-cultivo/
Figura 7. Matraz en la autoclave
Análisis de resultados: No title. (s/f). Sigmaaldrich.com.
En esta práctica, es importante seleccionar
adecuadamente los métodos generales y los https://www.sigmaaldrich.com/
reactivos para lograr resultados satisfactorios
en la preparación de los medios. Además, MX/es/products/industrial-
mantener la asépsis en todo momento es
crucial para preservar los microorganismos microbiology/microbial-culture-
que se utilizarán. El agar solidificado es
cultivado en una placa de Petri, lo que media
facilita su replicación en un entorno
propicio.
Conclusión
En conclusión, esta práctica nos mostró
como conseguir un medio de cultivo hecho
desde 0, cuales son todas las herramientas
que necesitamos y descubrimos que no es
algo tan simple que se pueda hacer en poco
tiempo, ya que lo que más tiempo lleva es la
esterilización.
Igualmente aprendimos la importancia de
respetar cada uno de los pasos dictados, y