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Por ejemplo, una infección de las vías urinarias puede hacer que la orina
se vea turbia en lugar de trasparente. Tener niveles elevados de
proteína en la orina puede ser un signo de enfermedad renal.
Uricostat
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard*: solución de ácido úrico 10 mg/dl.
A. Reactivo A: solución conteniendo buffer Good pH 7,8 y la sal sódica de
3,5 diclorohidroxibenceno sulfónico (DHS).
B. Reactivo B: solución conteniendo buffer Good pH 7,8, 4-aminofenazona
(4-AF), uricasa (UOD), peroxidasa (POD), y ferrocianuro de potasio.
Concentraciones finales
Buffer Good .........................................................50 mmol/l
UOD..................................................................... ≥ 200 U/l
POD................................................................... ≥ 1000 U/l
4-AF..................................................................0,10 mmol/l
Ferrocianuro de potasio..........................................6 umol/l
DHS....................................................................2,0 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A Plus de Wiener lab.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
• Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
• Material volumétrico adecuado.
• Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
• Baño de agua a 37º C.
• Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
• Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en fotocolorímetro con
filtro verde (490-530 nm).
• Temperatura de reacción: 37º C o 18-25º C
• Tiempo de reacción: 5 minutos a 37º C o 20 minutos a 18-25º C
• Volumen de muestra: 20 ul
• Volumen final de la reacción: 1,02 ml
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirse o aumentarse
proporcionalmente (Ej: 50 ul de Muestra + 2,5 ml de Reactivo único o 10 ul +
500 ul).
4. Procedimiento
Ácido úrico
5. Resultados
5.1. Esquematizar o dibujar el procedimiento de cada experimento.
Rotular correctamente para saber de qué se trata.
UREMIA
ACIDO URICO
Creatinina
5.2. Realizar una breve explicación o fundamentación del resultado de
cada experimento.
Uremia
Ácido úrico
Creatinina
5.3. Desarrollar los cálculos matemáticos que se han realizado en cada
experimento
Conclusiones
Cuestionario
6.1. Indicar la importancia clínica de todos los metabolitos de
desecho.
• Metabolito es un producto que queda después de la
descomposición (metabolismo) de un fármaco por parte del cuerpo.
• Los metabolitos primarios se definen como aquellos que están
involucrados de forma directa en el crecimiento, desarrollo y
reproducción normal de un organismo con una función fisiológica
importante.
• Por el contrario, los metabolitos secundarios no están
involucrados en estos procesos de forma directa. La ausencia de
un metabolito primario suele con llevar la muerte inmediata o a
corto plazo mientras que la ausencia de un metabolito secundario
no.
• Los metabolitos, aun cuando sean intermedios en una ruta
metabólica, pueden tener importantes funciones. Por ejemplo,
pueden inhibir a una enzima o activar otra ruta metabólica.
6.2. Fundamentar el método colorimétrico y espectrofotométrico
para identificar y cuantificar a la urea, ácido úrico y creatinina.
• Los métodos enzimáticos para la determinación
espectrofotométrica, se caracterizan por ser más fiables, precisos,
exactos y selectivos que los métodos químicos tradicionales, los
análisis de creatinina en suero y orina no son la excepción. Estos
métodos enzimáticos mejoran la selectividad para la Creatinina,
por ser una técnica cinética.
• Las técnicas colorimétricas se basan en la medida de la absorción
de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas. En
principio todos los sistemas que cuantifican el color a partir de
tres variables poseen aspectos colorimétricos: Luminancia,
Longitud y Pureza por eso para la determinación de acido úrico
en la orina trabaja con el ácido úrico y la uricasa que dará
alantoína que al final da el CO2, peróxido de hidrogeno que
pasara a la siguiente reacción que trabajara con la
aminofenazona y la sal sódica 3,5diclorohidroxibenceno sulfónico
lo que hará que halla un cambio de color quinoneimina más la
formación del agua.
6.3. ¿Con qué patologías están relacionados las concentraciones
de los metabolitos creatinina, ácido úrico, urea y a nivel de
sangre y orina?
Metabolitos Creatinina •
Insuficiencia renal crónica.
Ácido Úrico
• Patologías sistémicas (hipertensión, enfermedad renal crónica y
enfermedad cardiovascular) y a otras patologías más localizadas
como la gota y la preeclampsia.
Urea y a nivel de sangre y orina
• Fallo cardiaco.
• Los niveles de urea en sangre pueden subir por un exceso de
proteínas en la dieta, pero también por una enfermedad hepática
o renal. La insuficiencia renal y la hepática son complicaciones de
tener niveles de urea altos.
6.4. ¿Mediante qué método podemos aplicar para determinar la
concentración de la bilirrubina clínicamente importante?