Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
“BEBIDA PROBIÓTICA A PARTIR DEL SUSTRATO DEL ALMIDÓN
DE ARRACACHA (ARRACACIA XANTHORRHIZA) VIABLE A LAS
BACTERIAS LÁCTICAS, ENRIQUECIDA CON CAMU-CAMU”
Autores:
Pimentel Moraya, Gianella
Quispe Inga, Miguel Ángel
Quispe Luyo, Rosalinda
Asesor(a):
Diaz Gutiérrez, Albertina
Línea de investigación:
Ingeniería y Tecnología
Callao,2022
PERÚ
INFORMACION BÁSICA
4
2.2.7. Fermentación ..................................................................................... 20
2.2.8. Camu-camu ....................................................................................... 21
2.2.9. Probióticos ......................................................................................... 23
2.3. Marco conceptual ..................................................................................... 26
2.3.1. Almidón de la arracacha .................................................................... 26
2.3.2. Hidrolisis enzimática del almidón de la arracacha ............................. 27
2.3.3. Fermentación del almidón hidrolizado ............................................... 27
2.3.4. Fortificación del sustrato obtenido con camu-camu ........................... 27
2.3.5. Viabilidad del sustrato para el Lactobacillus casei ............................. 27
2.4. Definición de términos básicos ................................................................. 28
2.4.1. Hidrolisis ............................................................................................ 28
2.4.2. Probiótico ........................................................................................... 28
2.4.3. Prebiótico ........................................................................................... 28
2.4.4. Amilosa .............................................................................................. 29
2.4.5. Glucosa ............................................................................................. 29
2.4.6. pH ...................................................................................................... 29
2.4.7. Sustrato ............................................................................................. 29
2.4.8. Biomasa ............................................................................................. 30
III. VARIABLES E HIPOTESIS .........................................................31
3.1. Hipótesis .................................................................................................. 31
3.1.1. General .............................................................................................. 31
3.1.2. Especifica .......................................................................................... 31
3.2. Operacionalización de las variables ......................................................... 31
IV. METODOLOGIA DEL PROYECTO .............................................34
4.1. Diseño metodológico ................................................................................ 34
4.1.1. Diseño de la investigación. ................................................................ 34
4.1.2. Contrastación de hipótesis. ............................................................... 35
4.1.3. Diseño experimental. ......................................................................... 35
4.2. Método de investigación........................................................................... 38
4.2.1. Descripción del Método ..................................................................... 38
4.2.2. Requerimiento ................................................................................... 40
4.3. Población y muestra. ................................................................................ 41
5
4.3.1. Población. .......................................................................................... 41
4.3.2. Muestra. ............................................................................................. 42
4.4. Lugar de estudio. ..................................................................................... 42
4.5. Técnicas e instrumentos para la recolección de la información. .............. 42
4.5.1. Técnicas de recolección de datos...................................................... 42
4.5.2. Instrumentos de recolección de datos. .............................................. 43
4.6. Análisis de datos, cronograma y presupuesto. ......................................... 43
4.7. Aspectos éticos en investigación ............................................................. 44
V. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES............................................45
5.1. Actividades ............................................................................................... 45
5.2. Lista de actividades .................................................................................. 47
5.3 Cronograma de actividades ..................................................................... 48
VI. PRESUPUESTO ..........................................................................49
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ............................................50
VIII. ANEXOS .....................................................................................52
6
INTRODUCCION
7
I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN
1.1. Descripción de la realidad problemática
Uno de los alimentos saludables más cultivados pero muy poco aprovechado
en nuestro país es la arracacha, es un tubérculo recomendado por su fácil
digestibilidad que nos brinda una excelente fuente de carbohidratos y nutriente
energético. (Suquilanda, 2009). Por ello, la elaboración de una bebida probiótica a
base del almidón de la arracacha contribuye en la reducción de los índices de
sobrepeso y obesidad. Si esta bebida probiótica es fortificada con Camu-camu,
además de obtener un sabor agradable, también enriquecemos su valor nutricional
y gracias a las propiedades de dicho fruto aumentamos los beneficios para la salud
de las personas. Además, lograremos difundir el conocimiento y diversificar el uso
de este tubérculo.(Solis et al., 2009)
Desde hace algunas décadas se sabe que las enfermedades crónicas han
llegado a ser las causas más frecuentes de morbilidad y mortalidad en el mundo.
Paralelamente, algunas investigaciones científicas han podido establecer que
tales enfermedades están asociadas, en mayor o menor medida, a desórdenes
en la dieta y falta de actividad física, entre otros factores.
8
La obesidad y el sobrepeso suponen un alto riesgo de padecer enfermedades
crónicas como la diabetes tipo II, la hipertensión, las enfermedades
cardiovasculares y coronarias y algunos tipos de cáncer.(Mellitus, 2020)
Para aprovechar los nutrientes del almidón de arracacha mediante una bebida,
se obtuvo un sustrato a partir de la hidrolisis enzimática generando la viabilidad a
la bacteria lactobacillus casei, posteriormente se enriqueció con Camu-Camu para
obtener un sabor agradable y aumentar el valor nutritivo.
9
1.2.1. Formulación general
¿Como obtener un sustrato viable a las bacterias lácticas para elaborar una
bebida probiótica a partir del almidón de arracacha enriquecida con Camu-camu?
1.3.1. General
1.3.2. Especifico
10
1.4. Justificación de la investigación
1.4.1. Teórica
11
1.4.2. Metodológica
1.5.2. Temporal
1.5.3. Espacial
12
II. MARCO TEÓRICO
2.1. Antecedentes
13
permite aprovechar de los nutrientes que nos brinda la quinua y los efectos
favorables de los microorganismos probióticos.
2.2.1. Arracacha
14
Figura N°2: Composición de la arracacha
2.2.2. Almidón
15
Figura N°3: Estructura del almidón
2.2.3. Hidrolisis
16
Un factor que afecta el grado de hidrólisis de los diferentes tipos de almidones
es el tamaño promedio de los gránulos de almidón. Se ha comprobado que los
gránulos de menor tamaño se hidratan con mayor rapidez que los gránulos de
mayor tamaño, ya que estos presentan una mayor superficie de contacto relativa.
Otros factores que influyen en el grado de hidrólisis son la cantidad de lípidos y
su interacción con las moléculas de amilosa, extensión e interacción de las
cadenas de almidón, así como el contenido de fósforo. Se ha observado también
una 48 fuerte resistencia a la hidrólisis por parte del complejo amilosa
lípidos.(Ríos Ramos Eduarda & Romero Henry Michel, 2017)
Hidrólisis alcalina
La hidrólisis enzimática
Hidrolisis acida
2.2.5. Sustrato
18
2.2.6. Bacterias Lácticas
Definición
Clasificación
19
La mayoría de estos microorganismos pertenecen al grupo de las bacterias
ácido lácticos y son utilizadas por la industria alimentaria para la elaboración de
productos fermentados, predominando los géneros Lactobacillus y
Bifidobacterium (Conway, 1996; Torres, 2002; Barboza y col., 2004; Ogueke,
2010).
2.2.7. Fermentación
Definición
Clasificación
• Fermentación alcohólica
• Fermentación acética
20
• Fermentación láctica
• Fermentación cítrica
• Fermentación butírica
2.2.8. Camu-camu
21
Estudios revelan que la concentración de ácido ascórbico en el camu-camu
aumenta cuando los suelos tienen mejores atributos químicos (magnesio y fosforo)
y buenas condiciones de fertilidad natural (Abanto- Rodríguez et al., 2016).
22
El camu-camu es una buena fuente de minerales tales como sodio, potasio,
calcio, zinc, magnesio, manganeso, cobre (Akachi et al., 2010) y varias clases
de aminoácidos, tales como serina, valina y leucina (Akter et al., 2011). También
contiene pequeña cantidad de pectina y almidón. La glucosa y la fructosa son
el azúcar principal del camu-camu (Zapata y Dufour, 1993). Por lo tanto, la
presencia de diferentes compuestos bioactivos en este fruto podría ser utilizado
para retardar o prevenir diversas enfermedades cardiovasculares y el cáncer.
2.2.9. Probióticos
El término probiótico (del griego “para la vida”) incluye una amplia gama de
microorganismos, principalmente bacterias y levaduras, sin embargo, el efecto
en la salud humana es específico de la cepa. El concepto de “probiótico” en los
últimos años desde la divulgación de la Guía de Probióticos y Prebióticos
publicada por la Organización Mundial de la Salud y la Organización de las
Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (FAO) ha sido
malinterpretado, empleando el término en productos con insuficiente base
científica.
Los probióticos se han validado para aumentar la respuesta inmune contra las
infecciones virales y restablecer la homeostasis intestinal. La evidencia de
números estudios en humanos y modelos animales han demostrado la eficacia
clínica de diversas cepas con capacidad probiótica sobre el tratamiento de
23
enfermedades como cáncer de colon (efecto anticancerígeno), enfermedad
inflamatoria intestinal, diarrea (actividad antimicrobiana), complicaciones
postoperatorias e intolerancia a la lactosa. Sin embargo, en el mercadeo de los
probióticos existen generalizaciones relativas a los beneficios potenciales para la
salud. Los mecanismos moleculares que subyacen a la acción de estos
microorganismos ingeridos siguen sin estar completamente claros, se presume
que pueden ser mecanismos multifactoriales. En la mayoría de los casos, el
efecto es mediado a través de una interacción entre moléculas en la superficie
del microorganismo probiótico y el sistema inmune del huésped, provocando una
respuesta antiinflamatoria. El metabolismo bacteriano a menudo parece ser
irrelevante, aunque en otros casos se presume que la eficacia se basa en la
producción de metabolitos bacterianos (ácidos grasos de cadena corta). Las
investigaciones recientes indican que la relación puede ser más compleja y residir
en redes ecológicas microbianas dentro del intestino del huésped.
Bebida probiótica
24
por la mínima concentración de microorganismos vivos al final de la vida útil del
producto con valores mínimos de 107 UFC/g. Esta concentración se calculó
sobre la base de la porción diaria de microorganismos probióticos viables que
deben ser ingeridos para obtener efectos funcionales.
25
2.3. Marco conceptual
26
2.3.2. Hidrolisis enzimática del almidón de la arracacha
27
presencia de sustancias inhibitorias presentes que limitan o favorecen el
crecimiento bacteriano para obtener un alimento probiótico.(Diaz Gutiérrez, 2020)
2.4.1. Hidrolisis
Taherzadeh & Karimi, 2008 citado en (Diaz Guitierrez, 2020), Es una etapa
que provoca la ruptura de los polímeros de celulosa y hemicelulosa,
obteniéndose los monómeros respectivos, como los azúcares reductores.
(Gómez López, 2017), Es una reacción química en la cual se rompe
necesariamente un enlace entre dos átomos o moléculas para formar
monómeros más simples que el original material lignocelulósico, intervienen
agua, ácidos fuertes, álcalis o enzimas.
2.4.2. Probiótico
2.4.3. Prebiótico
28
2.4.4. Amilosa
2.4.5. Glucosa
2.4.6. pH
2.4.7. Sustrato
29
2.4.8. Biomasa
30
III. VARIABLES E HIPOTESIS
3.1. Hipótesis
3.1.1. General
3.1.2. Especifica
31
Tabla N°1: Operacionalización de las variables
32
Rpm (1969, citado en FAO,
La arracacha contiene un almidón 2007)
muy fino proporcionando así
mayor digestibilidad lo cual lo
hace
factible utilizarlo en alimentos que X1.2.1:
requieren de congelación o X1.2.1: Enzima mg /100g
X1.2.2:
refrigeración para conservarse. X1.2.2: Azucares Tiempo (s)
X1.2: Hidrolisis Método Espectrofotometría
(Hermann, 2003) reductores Temperatura
enzimática experimental X1.2.3: Cronometría
X1.2.3: Parámetros (°C)
Termómetro
La hidrólisis en almidones de hidrolisis Acidez - pH
Potenciometría
gelatinizados o pregelatinizados
la acción de la enzima tiende a ser X1.3.1: Cultivo por
más rápida y eficaz por plaqueo
X1.3.1: Lactobacillus
transformar este sustrato en corto UFC/ml X1.3.3:
Casei
tiempo en azúcares y dextrinas, Acidez – Ph Termómetro
X1.3.2: Sustrato
representando esta respuesta el X1.3: Fermentación Temperatura Método Potenciometría
X1.3.3: Parámetros
potencial de energía disponible. Láctica (°C) inductivo Índice refracción
de fermentación
(Rodríguez, Silva, Tester et al., Tiempo (s) X1.3.4: UFC/ml, Mac
X1.3.4: Cinética de
2006) UFC/horas Farlan
fermentación
X2.1.1: Potenciometría
X2.1.2: Índice de
X2.1: Característica X2.1.1: acidez
El fruto camu-camu se caracteriza pH refracción
fisicoquímica del X2.1.2: % Proteínas Método
por presentar altos niveles de Porcentaje (%) X2.1.3: Índice de
probiótico X2.1.3: % Grasas experimental
vitamina C (ácido ascórbico). La Porcentaje (%) refracción
X2.1.4: % Minerales
mayor concentración se Caracterizamos las Porcentaje (%) X2.1.4: Índice de
encuentra en la pulpa, siendo propiedades del refracción
F(x2): Camu- esta 14337,94 g/ 100g (peso camu-camu y del
X2.2.1: Actividad X2.2.1: Secuestro del
Camu como seco). (Sotero Solis, Víctor, et al., X2.2: probiótico, adjuntando
antioxidante Mg camu- radical DPPH (Lebeu
fortificante de 2009) Características la relación de peso de Método
X2.2.2: camu/mL et al.)
bebida probiótica del Camu-camu camu-camu con experimental
Concentración de mg /100g X2.2.2: Cromatografía
Presenta diversos beneficios para respecto al volumen
ácido ascórbico de HPLC
la salud al ser una fuente de la bebida
importante de antioxidantes X2.3: Relación de probiótica.
nutricionales, y β-caroteno peso de Camu- Características X2.3.1: °Brix X2.3.1: Refractometría
(Chirinos et al., 2010). De la pulpa Mg /L Método
camu / volumen X2.3.2: g.c. camu X2.3.2: Relación peso/
Proporción g.c. / ml sustrato experimental
de bebida camu/ ml sustrato volumen
probiótica
33
IV. METODOLOGIA DEL PROYECTO
4.1. Diseño metodológico
F(x2): Camu-camu
como fortificante de
bebida probiótica
34
4.1.2. Contrastación de hipótesis.
Hipótesis nula
Hipótesis alternativa
35
mediante azúcares reductores y por el conteo de colonias en placa.(Diaz
Guitierrez, 2020)
Se elige como método un diseño factorial debido a que los procesos son de
carácter cuantitativo y experimental por lo que en consecuencia induce a realizar
un diseño experimental optimizando los procesos combinando factores y
métodos.
2 60min 0.05mg/100g
3 60min 0.05mg/100g
4 120min 0.10mg/100g
5 120min 0.10mg/100g
6 120min 0.10mg/100g
7 180min 0.20mg/100g
8 180min 0.20mg/100g
9 180min 0.20mg/100g
36
Tabla N°4: Factores y niveles de la fermentación láctica del almidón hidrolizado.
Niveles
Factores Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3
Concentración de 50UFC/ml 100UFC/ml 150UFC/ml
lactobacillus
casei
Tiempo de 24h 48h 96 h
fermentación
Leyenda: T=20°C
Factorial: 32
Tabla N°5: Matriz de diseño experimental.
2 24h 50UFC/ml
3 24h 50UFC/ml
4 48h 100UFC/ml
5 48h 100UFC/ml
6 48h 100UFC/ml
7 96 h 150UFC/ml
8 96 h 150UFC/ml
9 96 h 150UFC/ml
37
4.2. Método de investigación.
F(x1): Viabilidad del sustrato que se obtiene por hidrolisis enzimática del almidón
de arracacha.
Preparación de arracacha
Mezclado
Cocción
38
Hidrolisis Enzimática
Fermentación
39
Figura N°4: Variación del pH en almidón de yuca durante 31 días de fermentación.
4.2.2. Requerimiento
Equipos
• Balanza analítica digital de 0.1 mg
• Cuenta colonias
• Autoclave
• Recipiente de 2 litros
• Termómetro
40
• Refractómetro
• Tiras de PH.
Materiales
• Vaso precipitado
• Pipetas
• Probeta
• Bureta
• Luna de reloj.
• Espátula.
• Placa Petri de vidrio.
• Tubos de vidrio con y sin tapa, gradilla.
• Botellas de vidrio
• Pinzas metálicas
• Mechero, rejilla, hornilla
Medio de cultivo
4.3.1. Población.
41
4.3.2. Muestra.
a) Determinación de humedad.
b) Determinación de cenizas.
42
c) Determinación de Materia Orgánica.
43
4.7. Aspectos éticos en investigación
44
V. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
5.1. Actividades
• Implementación
45
• Selección y toma de muestras
• Contrastación de hipótesis
• Resultados
• Discusión de resultados
46
• Impresión y presentación del informe final
d) Implementación – experimentación
h) Resultados
i) Discusión de Resultados
47
5.3 Cronograma de actividades
MESES
ACTIVIDADES
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Recolección de
Información XX XX
Bibliográfica
Comunicación con
XX XX
Instituciones
Ubicación del
XX
ambiente experimental
Implementación -
X XX XX
experimentación
Selección y Toma de
XX XX XX
muestra
Desarrollo
experimental y
XX XX X
tratamiento de
muestras
Contrastación de las
XX XX XX
hipótesis
Resultados XX XX
Discusión de
XX X
Resultados
Orden y Redacción
XX XX
Informe Final
Impresión y
Presentación del XX XX
Informe Final -TESIS
48
VI. PRESUPUESTO
La tabla 8 muestra los fondos que se debe reunir para elaborar proyecto presente
Tabla N°8: Presupuesto del proyecto
6.1 FINANCIAMIENTO
FINANCIAMIENTO INSTITUCIONAL S/ 8,000.00
RECURSOS PROPIOS S/ 10,200.00
INGRESOS TOTALES S/ 18,200.00
6.2 COSTOS
6.2.1 BIENES
INSUMOS S/ 1,000.00
MATERIALES DE LABORATORIO S/ 1,500.00
MATERIALES DE IMPRESIÓN S/ 100.00
MATERIALES DE LIMPIEZA S/ 100.00
REACTIVOS S/ 800.00
EQUIPOS S/ 4,000.00
SUBTOTAL BIENES S/ 7,500.00
6.2.2 SERVICIOS BASICOS
AGUA S/ 100.00
LUZ S/ 300.00
INTERNE S/ 200.00
6.2.3 TRANSPORTE
MOVILIDAD S/ 800.00
TRANSPORTE DE MUESTRAS S/ 200.00
6.2.4 PERSONAL
INVESTIGADOR S/ 3,000.00
ASESORIA S/ 2,500.00
AUXILIAR Y APOYO SECRETARIAL S/ 1,000.00
AUXILIAR DE LIMPIEZA S/ 800.00
6.2.2 SERVICIOS DE ANÁLISIS S/ 1 800.00
49
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Adarve-Cobo, M. A., & Mejia-Giraldo, L. M. (2012). OBTENCIÓN Y
CARACTERIZACIÓN FÍSICO-QUÍMICA DE ALMIDÓN FERMENTADO DE
ARRACACHA (Arracacia xanthorriza). Vitae, 19, 255–257.
Arone, D. (2019). Determinación de las propiedades físicoquímicas,
tecnofuncionales y microbiológicas del almidón de arracacha (Arracacia
xanthorrhiza) de las variedades blanca, amarilla y morada.
Azucena, L., & Ilvay, I. (2012). “EVALUACIÓN DE SUSTRATOS ORGÁNICOS
PARA LA PRODUCCIÓN DE PLÁNTULAS DE BRÓCOLI (Brassica oleracea
Var. Itálica).”
Bailon Neira Rodolfo. (2012). UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS INFORME
FINAL DE INVESTIGACIÓN “TEXTO: FERMENTACIONES INDUSTRIALES”
PRESENTADO POR: CALLAO-PERÚ 2012.
Caypo Luna, C., & Perez Azahuanche, F. (2007). Dextrinas a partir de almidón de
arracacha (Arracacia xanthorrhiza) por hidrólisis enzimática.
https://www.researchgate.net/publication/314212107
Diaz Guitierrez, A. (2020). Viabilidad del sustrato de la hidrolisis alcalina de la
cascara de yuca para los Lactobacillus casei.
García M, A., & Pacheco-Delahaye, E. (2010). EVALUACIÓN DE DE UNA
BEBIDA LÁCTEA INSTANTÁNEA A BASE DE HARINA DE ARRACACHA
(Arracacia xanthorrhiza) CON LA ADICIÓN DE ÁCIDO FÓLICO. Revista
Chilena de Nutrición, 37(4), 480–492. https://doi.org/10.4067/s0717-
75182010000400009
Guerrero Tibanquiza, J. R., & Danilo Morales, I. (2011). UNIVERSIDAD TÉCNICA
DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS
"UTILIZACIÓN DE PROBIÓTICOS (Lactobacillus plantarum) EN LA.
Huapaya C, C. S. (2012). ELABORACIÓN DE UNA BEBIDA PROBIÓTICA A
PARTIR DE LA FERMENTACIÓN LÁCTICA DEL ALMIDÓN HIDROLIZADO
DE HARINA DE QUINUA Chenopodium quinoa. 511, 7995788.
Huapáya Castillo Carolina. (2014). UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA
MOLINA.
Martinez, J., Astiasaran, I., & Madrigal, H. (2003). Alimentacion y Salud Publica.
Salud Publica de Mexico, 45, 583–584.
Mellitus, D. (2020). Obesidad y enfermedades no transmisibles relacionadas con la
nutrición. 180–195.
50
RIOS RAMOS EDUARDA PATRICIA Bach ZELADA ROMERO HENRY MICHEL,
B. (2017). UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUÍZ GALLO FACULTAD DE
INGENIERÍA QUÍMICA E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS ESCUELA
PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA “DETERMINACIÓN DEL
RENDIMIENTO DE GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DE
ALMIDONES DE YUCA (Manihot esculenta), CAMOTE (Ipomoea batatas) Y
PAPA (Solanum tuberosum)” TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO
PROFESIONAL DE: INGENIERO QUÍMICO PRESENTADO POR.
Solis, V. S., Doza, L. S., Sotero, D. G. De, & Correa, S. I. (2009). EVALUACIÓN
DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE LA PULPA, CÁSCARA Y SEMILLA
DEL FRUTO DEL CAMU CAMU (Myrciaria dubia H.B.K.). Revista de La
Sociedad Química Del Perú, 75(3), 293–299.
Suquilanda, M. B. (2009). Producción orgánica de cultivos andinos. 126, 199.
Torres Martinez Karla. (2007). Optimizacion de la etapa de hidrolisis acida.
Tovar Benítez Tomas. (2008). “CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA Y
TÉRMICA DEL ALMIDÓN DE MAÍZ (Zea mays L) OBTENIDO POR
DIFERENTES MÉTODOS DE AISLAMIENTO.”
51
VIII. ANEXOS
Tabla N°9: Matriz Operacional
52
X1.3: X1.3.1: Lactobacillus Casei
Fermentación X1.3.2: Sustrato
Láctica X1.3.3: Parámetros de
fermentación
X1.3.4: Cinética de
fermentación
X2.1: X2.1.1: acidez
Característica X2.1.2: % Proteínas
fisicoquímica X2.1.3: % Grasas
del probiótico X2.1.4: % Minerales
53