UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERIA

ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE

INGENIERÍA AGRÓNOMA

DEMOSTRACIÓN DE LA NATURALEZA PROTEICA

DE LA ENZIMA CATALASA EN VEGETALES

Autores:

Alba Contreras Deivis Marvin

Cacha Muñoz Dayana Loami

Príncipe Pareja Brayan

Quiñones Marreros Milagros

Zúñiga García Josué

Asesor:

Mg. Blgo. Yosef Avalos Ramírez

Nuevo Chimbote – Perú

2018
I RESUMEN

En este informe daremos a conocer los resultados de la tercera sesión de laboratorio de

Bioquímica, que trata sobre la demostración de la naturaleza proteica de la enzima
catalasa en vegetales. Las enzimas son catalizadores biológicos de naturaleza proteica
que aceleran las reacciones que tendrían lugar de manera espontánea sin perderse ni
modificarse en su acción, permitiendo las reacciones bioquímicas celulares
indispensables para los seres vivos. La actividad enzimática se encuentra determinada
por las condiciones tales como la cantidad de enzima, sustrato, la temperatura, el pH, el
tiempo de reacción, presencia de cofactores, presencia de moduladores, presencia de
inhibidores. El efecto acelerador es uno de los más altos que se conocen, multiplica la
velocidad de la reacción hasta en un millón de veces.

En el laboratorio se realizaron como base a la papa a la manzana y al tomate, las cuales

fueron desarrolladas de forma cualitativa, teniendo en cuenta la concentración del
sustrato que es uno de los factores que se aplican sobre la enzima para determinar su
actividad. En este caso como sustrato se cuenta con peróxido de hidrogeno que a
distintos cambios físicos - químicos nos ayudara a identificar la enzima catalasa que se
encuentra en la organela llamada peroxisoma. En dicha organela abunda la enzima.

El objetivo del presente experimento es evidenciar que las enzimas son proteínas que
gozan de las propiedades de éstas y que son sensibles a todos los agentes físico-
químicos que actúan sobre los mismos, haciendo variar su comportamiento y actividad.
INTRODUCCIÓN

Las enzimas son proteínas que contienen los mismos aminoácidos que se encuentran en otras
proteínas. Al igual que otras proteínas también tiene una estructura tridimensional, que
representa la conformación de contenido de energía mínimo, y pueden consistir de una sola o
de varias cadenas poli peptídicas

La catalasa es una enzima común encontrada en los organismos vivos, donde funcionan como
catalizadores en las reacciones de descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua
y oxígeno. La catalasa tiene uno de los cambios más altos de todas las enzimas. Una molécula
de catalasa podría convertir millones de moléculas de peróxido de hidrógeno a agua y oxigeno
por segundos.

La catalasa es un tetrámero de cuatro cadenas poli peptídicas, cada una larga cadena con 500
aminoácidos contiene cuatro grupos hemo porfirínicos (hierro) que llevan a la enzima a
reaccionar con el peróxido de hidrógeno. El pH óptimo para la catalasa es aproximadamente
de 7, la temperatura varia por especie.

La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales.
La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular,
se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta
enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona problema.

III- OBJETIVOS

3.1 Objetivo General

 Obtener un extracto crudo de la enzima catalasa
 Demostrar cualitativamente el efecto de ácidos, bases y sales sobre la
actividad de la catalasa.
3.2 Objetivo Especifico
 Observar cómo se libera gas
IV- MATERIALES Y METODOS

1 Congeladora

2 Centrífuga

3 Estufa

2 MATERIALES Y REACTIVO

PROPORCIONADO POR EL ALUMNO

1 Tomates verdes (inmaduras)

2 Papas verdes (inmaduras)

3 Manzanas verdes (inmaduras)

4 Un cuchillo de cocina

5 Un rayador
6 Dos paquetes de gasa o papel de filtro

PROPORCIONADO POR EL LABORATORIO

7 Hidróxido de sodio 2N

8 Ácido clorhídrico 0.5N

9 Acido tricloroacético 20%

10 Sulfato de cobre 20%

11 Buffer fosfato 0.05 M, y 0.1 M pH 6,5

12 Peróxido de hidrógeno 3%

13 Cloruro de sodio 0.15 M

14 Tubos de ensayo

15 Embudos

16 Matraces

17 Pipetas de 5 y 10 ml

18 Mortero

V RESULTADOS

VI DISCUSIÓN
 Según Bohinski (1991). La mayoría de las enzimas se distinguen por una
especificidad de acción, lo que significa que prácticamente cada conversión de
un reactivo (llamado sustrato) en un producto es catalizada por determinada
enzima, esto se corroboro en el laboratorio con los tres sustratos que fueron
estudiados.
 Según Adelaida D. (2002). Las especies de oxígeno reactivas como el radical
superóxido, el radical hidroxilo y el peróxido de hidrógeno (H2O2) se forman
durante la reducción del dioxígeno en agua. Estas especies pueden dañar las
proteínas, los lípidos y los ácidos nucleicos, por lo que se requieren sistemas
antioxidantes eficientes, entre los que se incluyen ciertas enzimas, esto se
corroboró en la práctica ya que las enzimas reaccionaron al sustrato incluso
provocaron la presencia de gas en la parte superficial de la solución.

VII. CONCLUSIONES
 Logramos obtener un extracto crudo de la enzima catalasa, con la ayuda
del buffer (pH 6,5). Ya que la ruptura de células en un buffer adecuado libera
las enzimas al medio.
  Comprobamos el efecto del pH en la actividad enzimática. Las enzimas poseen
un pH característico donde su actividad es máxima, por encima o debajo de ese
pH la actividad disminuye. Las catalasas dan como resultado oxígeno.
 Llegamos a observar cómo se liberaba gas de algunos tubos de ensayo.

VIII- RECOMENDACIONES

 Portar el guardapolvo siempre que estemos en laboratorio.

 Tener en buen estado los materiales del laboratorio.
 Al momento de usar la pipeta se debe usar correctamente.
 Medir adecuadamente algunas sustancias para la mezclas
 Tener todos los materiales requeridos y necesarios para realizar la practica
correctamente.
 Cualquier material de laboratorio que sea dañado, debe ser devuelto.
 Si algún material se rompe debe ser desechado para evitar cualquier accidente e
informar al profesor.

IX- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 Bohinski R. 1991. Bioquímica. 5ta Edic. Edit. Addison Wesley Iberoamérica.
México.
 Adelaida D. 2002. Estructura de las catalasas. México.
X.- ANEXOS

Figura 1: Obtención de la enzima de manzana: mediante el rayado y el

machacado con adición de 3ml de Buffer fosfato 0.1 M pH 6,5

Figura 2: Obtención de la enzima del tomate: rayamos y luego machacamos, se

añade 3ml de Buffer fosfato 0.1 M pH 6,5

Figura 3: Obtención de la enzima de papa: Rayamos la papa luego machacamos y

añadimos 3ml de Buffer fosfato 0.1 M pH 6,5
 1 2 3

Figura 4: Filtración de cada enzima obtenida con la ayuda de embudo y un vaso de

precipitación

Figura 5: Obtención
de la filtración de
cada enzima: tomate,
manzana y papa

Figura 6: Echar cada enzima en diferentes tubos de ensayos cada muestra de enzima en 6 tubos para
luego echarle reactivos a cada uno.
 Figura 7: muestra de papa con los
reactivos añadidos

Figura 8: muestra de la manzana

con los reactivos añadidos

Figura9: muestra del tomate con los

reactivos añadidos

Figura 10: Resultados de formación de gases en las enzimas de papa,

tomate y manzana
CUESTIONARIO
1. ¿Qué es un extracto crudo?
Sustancia muy concentrada que se obtiene de una planta, semilla u otra cosa por
diversos procedimientos. Este extracto crudo es una mezcla compleja de proteínas entre
las que se encuentra, en mayor o menor proporción, la proteína de interés.

2. ¿A qué clase de enzima corresponde la catalasa?

Corresponde a las oxido reductasa y dentro de las hidroperóxidasas, se denomina
catalasa y su código E.C.es 1.11.1.6
3. ¿Qué otros factores pueden considerarse para demostrar que las enzimas
son proteínas?
El análisis de las enzimas obtenidas en forma más pura, cristalizada,
demuestra que son proteínas.
Las enzimas son inactivadas a altas temperaturas y, en general, la
cinética de la desnaturalización térmica de las enzimas da resultados
muy parecidos a los de la desnaturalización térmica de las proteínas;
por ejemplo, el Q10 de la mayoría de las reacciones químicas es de 2
a 3, y, en el caso de las enzimas, a temperaturas elevadas, alrededor
de 60 a 70ºC, la actividad neta aumenta varios cientos, como sucede
con la velocidad de la desnaturalización térmica de las proteínas.
Todos los agentes que desnaturalizan a las proteínas también destruyen
o inactivan a las enzimas, ya sea el calor, los ácidos fuertes, o los
metales pesados que pueden combinarse con ellas.
4. Indique 4 enzimas que puedan extraerse en vegetales.
La bromelina es una enzima que se encuentra en el jugo de piña y en
el tallo de la piña. La gente la usa para hacer medicinas.
El plátano produce la enzima catecol oxidasa también llamada
catecolasa.
Las plaltas contienen una enzima llamada polifenol oxidasa.
Citocromooxidasas, que contienen proteínas distribuidas en tejidos
vegetales y animales.
Importancia de las enzimas:

La enzima puede fijar la molécula de sustrato de tal modo que el enlace

susceptible se halle :
a) Muy próximo al grupo catalítico sobre el centro activo
b) Orientado de tal forma con la relación con el centro catalítico que el estado de
transición se forma con facilidad
Las enzimas son esenciales en mucho de los procesos necesarios para la vida
por ejemplo: digerir alimentos, regenerar tejido, degradar sustancias).