Cuestionario 8

1. Que medio se utiliza para el recuento de clostriduim. ¿Cuál es el

fundamento?
La técnica se basa en mantener una condijo anaeróbica de crecimiento
en un medio de cultivo diferencial que permita destacar su propiedad
de reducir los sulfitos. Se suelen usar para apreciar la calidad higiénica
del agua y productos animales o de origen animal. El medio es el Agar
Triptona Sulfito Cicloserina (TSC) para el aislamiento selectivo y
recuento del Clostridium perfringens.

2. Características del Clostridium.

● Presencia de endosporas.
● Metabolismo anaeróbico estricto.
● Incapacidad para reducir sulfatos o sulfitos.
● Pared celular gram +.
3.Como se crea el ambiente de anaerobiosis. Cita y explica las técnicas.
Luego de sembrar la muestra en un medio de cultivo adecuado, la incubación
en anaerobiosis se consigue por medio de alguno de los siguientes sistemas:
● Jarras de anaerobiosis: Es el sistema más utilizado para generar una
atmosfera anaeróbica, consiste en una gorra de plástico con una tapa
que cierra herméticamente. La atmosfera anaeróbica puede lograrse
por dos métodos diferentes. El más sencillo utiliza un sobre comercial
generador de hidrógeno y CO2 que es activado, ya sea mediante la
adición de agua o por la humedad de las placas de agar. El H 2 se
combina con el O2 del aire para formar agua generando anaerobiosis.
Esta reacción es catalizada por granallas de zinc recubiertas de paladio
que se encuentra depositados en una canastilla fija a la tapa de la jarra.

● Bolsas de anaerobios: Consiste en una bolsa plástica transparente, gas

impermeable, un indicador de anaerobiosis (azul de metileno o
resazurina) un sobregenerador de anaerobiosis igual al utilizado en las
jarras. Este sistema tiene ventajas en su economía y practicidad,
además de poder observar directamente si existe crecimiento en las
 placas de Petri sin abrir el sistema, también se puede utilizar para los
sistemas de identificación de tipo API-20A.

● Cámara de anaerobios o cámara de guantes: Es un sistema anaerobio

completo que permite al microbiólogo procesar muestras y realizar la
mayoría de las técnicas bacteriológicas par el aislamiento e
identificación de las baterías anaeróbicas. Pueden estar constituidos de
varios materiales, como acero, plástico acrílico o fibra de vidrio. Si está
construida de forma apropiada, es económica para operar porque
permite el uso del medio en placas convencionales y el costo de los
gases, para la apreciación del sistema mínimo.

Una vez armado, el principal gasto es la mezcla gaseosa de es % de N.

10% de H , 5% de CO2 para remplazar el aire en el orificio de entrada
cuando los materiales se pasan hacia el interior de la cámara de
anaerobiosis.
 Cuestionario 9
1. ¿Qué medio se utiliza para el recuento de Coliformes totales y
fecales?
El medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio, caldo
lactosado bilis verde brillante que se utiliza como prueba presuntiva para
investigar la presencia de las baterías de grupo coliformes en agua.
2. ¿Cuál es el fundamento de cada uno de los mismos?
En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril
sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos
dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de
utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se
emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es
selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces
de tolerar tanto las sales biliares como el verde brillante. básicas (IMViC) a las
colonias típicas.
3. ¿Característica de los coliformes?
A pesar de que las bacterias coliformes se encuentran formadas por varios
géneros, presentan ciertas características que comparten:

Forma

Este grupo de bacterias se caracterizan por tener forma de bastón, por lo que
se conocen como bacilos. Son alargados, miden aproximadamente entre 3 y
6 micras y algunas tienen bordes redondeados, en tanto que otras los tienen
curvados.

Hábitat

Estas bacterias se encuentran esparcidas por toda la geografía mundial,

principalmente en suelos. Algunas crecen sobre la materia orgánica en
descomposición.

Así mismo, se encuentran formando parte integral de la flora bacteriana del

intestino de algunos animales de sangre caliente como el ser humano.
Son Gram negativos

Las bacterias coliformes son gram negativas. Esto quiere decir que cuando
son sometidas al proceso de tinción de Gram no adquieren la coloración
típica violeta, sino que lo hacen de una tonalidad fucsia.

Esto se debe a la configuración de su pared celular, la cual está conformada

por peptidoglicano y es muy delgada. Al ser delgada no es capaz de retener
las partículas del colorante de gram.

Son aerobios o anaerobios facultativos

Un organismo aerobio es aquel que obligatoriamente debe estar en un

ambiente rico en oxígeno para poder desarrollarse. Así mismo, las anaerobias
facultativas pueden desarrollarse en ambientes en los que haya
disponibilidad de oxígeno, o bien, ausencia de este. Algunas de las bacterias
coliformes son aeróbicas estrictas, en tanto que otras son anaerobias
facultativas.

Son oxidasa negativas

Las bacterias coliformes no tienen la capacidad para sintetizar ninguna de las

enzimas del grupo de las citocromo c oxidasas. Esto quiere decir que no
pueden utilizar al oxígeno como aceptor en la cadena transportadora de
electrones.

No son esporógenas

Las bacterias gram negativas, entre las que se incluyen las coliformes se
caracterizan por no producir esporas. De esta manera carecen de ese
mecanismo de protección cuando las condiciones ambientales se vuelven
hostiles.
Fermentan la lactosa

Una de las características más distintivas de las bacterias coliformes es que

tienen la capacidad de fermentar la lactosa, generando en el proceso gas en
un lapso de 48 horas a temperaturas medias de 37°C. Sin embargo, hay otro
grupo de bacterias dentro de las coliformes, que pueden realizar el proceso a
temperaturas mucho más altas de entre 42 y 45°C.

4. ¿Fundamento de la técnica más probable?

Se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa

y producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 ± 0.1°C
por un periodo de 24 a 48 h.

5. Diferencia entre coliformes totales y fecales

Los coliformes fecales derivan de los coliformes totales y estas son
capaces de fermentar la lactosa a 45°C y las totales a 37°C

6. Clasificación de las Enterobacterias.

Grupo I: Salmonella, Shi gella, Escherichia coli.
Grupo II: Enterobacterias, Sertatia
Grupo III: Proteaspovidencia