IDENTIFICAR LAS ESTRUCTURAS FUNGICAS (HONGOS).

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Alvarez C. Juan Pablo, 2García F. Erick, 3Rodríguez V. Ali, 4Vides A. Walfran.
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Universidad Del Magdalena, Facultad de Ingeniería, Programa de Ingeniería Pesquera,
Laboratorio de Microbiología de Alimentos. Carrera 32 No 22-08 Santa Marta, Colombia.
Códigos estudiantes: 20151130361, 20142130372, 20142130773, 20142130974.

1
jpalvarez0620@gmail.com, 2erickgarciafdez20@gmail.com,
3
rodriguezvillan.ali@gmail.com, 4walfrandj06@gmail.com.

RESUMEN

En el presente laboratorio se presenta la elaboración de un cultivo fúngico a partir del medio

de cultivo OGY (Agar oxitetraciclina-glucosa-levadura), el cual es utilizado para el
aislamiento selectivo y enumeración de levaduras y moho. Se hace la respectiva siembra por
agotamiento a partir de una muestra de agua contaminada, garantizando al máximo
condiciones de esterilidad durante el proceso. Luego de incubar y pasados 4-5 días (o varios
días) a temperatura ambiente, se realizó la respectiva lectura, observando
macroscópicamente características morfológicas de las colonias presentes (color, tamaño,
consistencia, etc.), obteniéndose el reconocimiento de la presencia tanto de mohos
miceliales como de Levaduras. Con algunas de las colonias que se lograron aislar se efectuó
un montaje húmedo para caracterizarlas microscópicamente, para ello se implementó la
técnica de tinción simple o tinción de GRAM, agregando una pequeña gota de Hidróxido de
Potasio al 15%, Azul de Metileno o Azul de Lactofenol el cual tiñe directamente el micelio
micólico.
Como principal objetivo de la práctica destacamos el hecho de poder identificar los distintos
tipos de hongos que se pueden encontrar en muestras biológicas y ambientales, a partir de
sus principales características morfológicas y teniendo en cuenta las técnicas de cultivo y
manipulación de estos organismos. Cabe resaltar la importancia de atender las explicaciones
y sugerencias de nuestra docente encargada antes de realizar cada uno de los procedimientos
en dicho laboratorio.

PALABRAS CLAVE: Medio de cultivo OGY, aislamiento, siembra, tinción de GRAM,

hongos.
 ABSTRACT
The present laboratory presents the elaboration of a fungal culture from the culture medium
OGY (Oxytetracycline-glucose-yeast Agar), which is used for the selective isolation and
enumeration of yeasts and mold. The respective seeding is done by exhaustion of a sample
of contaminated water, guaranteeing maximum sterility conditions during the process. After
4 to 5 days (or several days) at room temperature, a respectful reading will be made,
observing macroscopically the morphological characteristics of the colonies present (color,
size, consistency, etc.), obtaining the recognition of the presence of both molds mycelial as
yeast. With some of the colonies that were achieved in the future, a wet assembly was
performed to characterize them microscopically, for which the simple staining or GRAM
staining technique was implemented, adding a small drop of 15% Potassium Hydroxide,
Methylene Blue o Lactophenol blue which directly stains the mycelium mycelium.
The main objective of the practice is to identify the types of fungi that can be found in
biological and environmental samples, based on their main morphological characteristics
and taking into account the culture and handling techniques of these organisms. It is
important to highlight the importance of attending to the explanations and suggestions of
our teacher in charge before carrying out each one of the procedures in said laboratory.

Keywords: OGY medium culture, isolation, seeding, GRAM staining, fungi..

INTRODUCCIÓN.

Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus características
tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser organismos sedentarios que se
encuentran fijos a un sustrato y, mientras están vivos, no cesan de crecer. A los animales,
pues, aunque las células de los hongos poseen pared como las de las plantas, las paredes
celulares fúngicas son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro el esqueleto
externo de los insectos.
En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes orígenes, en el
árbol de la vida, razón por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayoría, los más
familiares y reconocibles, conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungi o Eumycota).
Otros se ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoa, como es el caso de
los hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan ciertos mohos acuáticos que
parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado Chromista, con las diatomeas,
esas particulares algas microscópicas de curiosa simetría.
Son de nutrición heterótrofa, es decir, dependen de nutrientes orgánicos que son
solubilizados por sistemas enzimáticos específicos y son absorbidos a través de su pared
celular y membrana plasmática. Estos organismos pueden ser unicelulares (levadura) o
multicelulares (filamentosos), sin embargo, también existen hongos dimórficos,
principalmente patógenos que se presentan en las dos formas alternativamente, dependiendo
de condiciones ambientales como la temperatura.
El cuerpo o estructura vegetativa característica de los hongos filamentosos (mohos) se
denomina talo, generalmente constituido de hifas ramificadas que forman el micelio. Las
hifas de algunos hongos presentan tabiques transversales o septos, aunque en el caso de los
Zygomycetes las hifas no presentan estos septos y se les conoce como hifas cenocíticas.
Los medios de cultivo utilizados en micología contienen nutrientes suficientes para asegurar
el desarrollo de los hongos (carbono, nitrógeno, vitaminas, oligoelementos, etc). El pH
ligeramente ácido tiende a facilitar el crecimiento de los hongos e inhibir al mismo tiempo
el desarrollo de otros microorganismos. Es así como actualmente se conocen
comercialmente variedad de medios de cultivo selectivos para aislamiento de levaduras y
mohos en muestras alimenticias, el más reconocido para tal efecto es el Agar OGY,
compuesto a razón de gramos / litro de extracto de Levadura 5,0; D (+) glucosa (dextrosa)
20.0; Agar-Agar (gelificante) 12,0 (ROJAS 2011).
Los criterios más empleados para la identificación de los hongos filamentosos incluyen el
estudio de las características macro y microscópicas de las colonias. Entre estas, la
morfología microscópica de los cultivos es la que proporciona los datos más importantes: el
grosor de los filamentos, el tipo y la distribución de los septos y, sobre todo, la forma, el
tamaño y la disposición de las esporas y de las estructuras formadoras de estas. Los
principales métodos aplicados para la observación microscópica de los cultivos son: la
observación es fresco, con una solución adecuada, y las preparaciones en cinta adhesiva.
Los cultivos observados, según estos métodos, resultan útiles en la mayoría de los casos
para identificar las especies.
El éxito de la práctica está en la observación de cada detalle en la morfología de los tipos de
hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada experimento y en la habilidad en el
manejo adecuado de cada material y reactivo.
 MATERIALES Y METODOS.

o Cajas de Petri
o Asas bacteriológicas
o Agar Ogy
o Porta objetos
o Hidróxido de potasio al 15%
o Azul de metileno
o Azul de lactofenol
o Microscopio
o Mechero de bunsen
o Zanahoria
o Trichoderma

Azul de lactofenol y azul de Muestra de Cajas de Petri

metileno Trichoderma

METODOLOGÍA
 Se humedeció un alimento (zanahoria) durante varios días.
 Se tomó de las colonias formadoras de la zanahoria, con el asa bacteriológica y se
colocó en un medio de agar Ogy, se incubo a 37°C durante 4 a 5 días.
 Se observó las características de las colonias desarrolladas (tamaño, color,
consistencia).
 Tomamos una pequeña porción de la colonia y se colocó en un portaobjetos, se le
agrego una pequeña gota de azul de metileno.
 Por ultimo observamos en el microscopio y describimos las estructuras vistas.
 RESULTADOS Y DISCUSIONES.

Colonias de alimento de la zanahoria y Zanahoria con azul de metileno

trichoderma colocada en el medio agar observamos la siguientes estructuras
ogy formadas

Hifas septadas del trichoderma vista Colonias desarrolladas de la zanahoria y

desde el microscopio trichoderma
La práctica respectiva arrojo resultados muy significativos. En ello podemos encontrar como
las colonias de los alimento del trichoderma y del pedazo de la zanahoria tuvieron un
crecimiento satisfactorio después de dejarlos en las condiciones requeridas por la práctica
que la incubamos durante 4 a 5 días. Como podemos observar en la foto #4, por lo que es
afirmativo al momento de comparar con lo dispuesto en la teoría acerca de estas colonias.
No obstante cabe destacar que el crecimiento de la colonia de la zanahoria tuvo un color
blanco, un tamaño normal y una consistencia definida. Y la colonia del trichoderma tuvo un
color como verde oscurito y tamaño normal y una consistencia muy definida sin deformarse.
También observamos los resultados positivos que nos arrojó la colonia de los alimentos de
la zanahoria y trichoderma vistos desde el microscopio, observando las diferentes estructuras
formadas por cada colonia. La estructura se ven bien definida por parte de la colonia de la
zanahoria como podemos observar en la foto #2 y la estructura formada por parte de la
colonia del trichoderma se ven un poco definida con hifas septadas como podemos en la
foto #3 y vemos su óptimo desarrollo en cada estructura.

CONCLUSIONES.

Se pudo concluir, que cada una de las prácticas desarrolladas tuvo la finalidad de poner en
práctica la teoría descrita en clases y la comparación de los resultados con lo visto. Logramos
observar las estructuras de algunos hongos, su consistencia y su color. Con esta información
se nos facilitó identificar algunos hongos que se encontraba en una zanahoria y en una
colonia de Trichoderma. Esto nos quiere decir que en la vida cotidiana al no conservar bien
los alimentos estaríamos expuestos a un crecimiento de hongos que bien sabemos no son del
todo bueno para el ser humano.
 CUESTIONARIO

1. Describa la forma, tamaño, características del micelio (algodonoso,

aterciopelado, velloso, aéreo o pegado al medio), el color del micelio, el color
de las esporas, cambios en el medio de cultivo, etc.
Forma: circular; tamaño: entre 5mm a 1cm; características del medio:
aterciopelado; color del medio: marron

2. Cuáles son las principales estructuras características de los mohos y las

levaduras.
Si bien sabemos, los Hongos se pueden clasificar según su forma entre los que
encontramos: Mohos y Levaduras.
Mohos u Hongos filamentosos Levaduras.
Los mohos son vegetales del reino La levadura es un hongo unicelular,
Myceteae. Carecen de raíces, tallos, microscópico de forma redonda u ovalada,
hojas y no poseen clorofila. Pertenecen denominado técnicamente: Saccharomyces
a los Eumycetes u Hongos Verdaderos. cervisiae. La estructura que posee este hongo es
Los mohos son un tipo de hongo compuesta de la siguiente manera:
constituido por filamentos largos
llamados hifas que en conjunto Pared celular: es la encargada del paso de aire,
constituyen un Micelio. líquidos y alimentos hacia la célula.
Un moho posee la forma de filamento Protoplasma: en pocas palabras es el cuerpo
tubular y bifurcado que se extiende propiamente dicho, el cual contiene grasas,
cada vez más, formando redes proteínas y carbohidratos con sus sales y
conectadas e irregulares. Estos poseen vitaminas.
un aspecto velloso u esponjoso además Núcleo: poseen un solo núcleo el cual se produce
de tener formas ovoide o esferoide. asexualmente por Gemación (Forma de
Las partes de más características del reproducción asexual consistente en la
Moho son: El Micelio y las Hifas. protrusión o protuberancia externa del
MICELIO: es el conjunto de hifas que protoplasma materno formando un saliente
constituye el talo de un moho. El (yema o gema), que va creciendo poco a poco y,
micelio intercelular se alimenta por finalmente, se desprende convirtiéndose en un
absorción a través de la membrana o la nuevo individuo.).
pared del hospedante. Vacuola: posee el papel fundamental de regular
HIFAS: son las ramificaciones y se y controlar el funcionamiento de la célula.
clasifican en vegetativas (su misión Mitocondrias: son las encargadas de
fundamental es la incorporación de proporcionar la energía necesaria, sintetizando
ATP, para la actividad celular.
nutrientes que poseen las estructuras Retículo endoplasmático: este sistema está
reproductoras en soportes aéreos.) relacionado con el transporte de muchas de las
proteínas sintetizadas por los ribosomas. Estos
últimos se pueden encontrar libres en el
citoplasma o pueden estar ligados al retículo
endoplasmático.

BIBLIOGRAFÍA
 Mueller GM et al. 2004. Biodiversity of Fungi. Elsevier, Amsterdam, apéndice.
 Kendrick B. 2000. The Fifth Kingdom. 3ª ed. Focus Publishing, Newburyport, cap 2,
3.
 Barnett HL, Hunter BB. Ilustrated Genera of Imperfecti Fungi. APS Press, St. Paul,
Minnesota, 1998.
 Sutton BC. Mitosporic Fungi (Deuteromycetes). pp. 15-55 en: Reynolds DR, Taylor
JW, editores. The Fungal Holomorph. CAB International, Wallingford, Oxon, 1993.