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intermoleculares
Carotenoides y cromatografía en
papel
El objetivo de este trabajo es realizar un análisis por medio de una cromatografía para deducir
que tipo de moléculas (carotenos, carotenos xantofilas, clorofilas) son aquellas en las que
ocurren interacciones intermoleculares de tipo puente de hidrógeno con la celulosa del papel.
En su mayoría, las moléculas que se encuentran en los distintos grados de madurez del
pimiento morrón son las siguientes:
Molécula Color
Clorofila Verde
(a-clorofila,
b-clorofila)
Xantófilas Amarillo
carotenoides
(zeaxantina,
luteína)
Carotenoides Rojo
(ß caroteno,
α caroteno,
ß criptoxantina,
Capsorubina,
capsantina,
licopeno,
asxantina)
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Trabajo de laboratorio
La cromatografía utilizada es para realizar una separación liquido – líquido, en donde
existe una fase móvil y otra estacionaria. La celulosa del papel es la fase estacionaria
mientras la mezcla es la fase estacionaria líquida. La fase móvil (líquida) será el solvente
orgánico.
Extractos
Para extraer las muestras de pimientos se cortaron en trozos muy pequeños y luego
se trituraron, esto con el objetivo de aumentar la superficie de contacto de las moléculas
y convertir fácilmente esta muestra de pimiento a fase líquida.
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A la muestra que se obtuvo se le agregó propanona (acetona) y hexano. Después de
dejar reposar una hora se filtró la muestra para separar lo sólido del pimiento y así
obtener la fase líquida.
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La siembra se hizo en un papel de filtro con capilares, colocándose el extracto a un
centímetro del borde de la hoja.
Se saturó la cuba cromatográfica con los vapores de las sustancias utilizadas en la
extracción con el objeto de que el avance del frente de corrida sea lo más distributivo
posible. Para esto se vertió un poco de la mezcla de hexano y propanona (5:1) además
de un papel embebido en la mezcla. Luego se agregó el papel con la siembra de cada
pimiento.
Lo esperado inicialmente, debido a que los carotenos van en aumento a medida que
el pimiento alcanza una madurez máxima, era que el pigmento rojo fuese el que menor
velocidad de corrida registrase, pero en ambas siembras realizadas en distintos días y
con concentraciones distintas, esto no se pudo apreciar.
La siembra se repitió en el siguiente laboratorio, pero esta vez llevando a los extractos
a una mejor concentración, dejándolos en el baño termostático por más tiempo.
Conclusión
De la primera siembra se puede sacar como conclusión al ver la hoja de
cromatograma que el nivel de interacción que se realiza entre las moléculas de clorofila
con la celulosa es mayor que la de las interacciones de los carotenos y carotenos
xantófilas. Esto puede deberse a la cantidad de oxígenos con pares de electrones
dadores, que, a pesar de tener impedimento estérico por el tamaño de la molécula, logra
acomodarse de tal forma para interaccionar formando puentes de hidrógeno. Otro factor
a favor es también que no es solo la clorofila la que se encuentra en este pimiento, las
frutas verdes de igual forma tienen carotenoides –en menor medida- ubicados en los
cloroplastos de la célula vegetal, es posible que alguno de éstos haya interaccionado
con la celulosa ralentizando su avance en el papel. El análisis que se realiza es
cualitativo y no cuantitativo
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En este caso, no se llegó a concentrar la muestra a 1 ml como planteaba hacer la
guía, es debido a la baja concentración de pigmentos que no se logró apreciar el
desarrollo.
De la segunda siembra se pudo comparar mejor el avance en la fase móvil de los
pigmentos amarillos y rojos. El grado de interacción de los pigmentos amarillos con la
celulosa fue mayor, se observa en el cromatograma que la migración de los carotenos
xantófilas es más lenta. Esto debido a que estas moléculas sufren de menos
impedimento estérico a su vez que tiene oxígenos aceptores e hidrógenos dadores en
sus grupos hidroxilos.
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El pimiento rojo tiene en su mayoría capsantina, licopeno y astaxantina, estas
moléculas cuentan con menos interacciones intermoleculares que las del pimiento
amarillo. La capsantina y astaxantina son aceptoras y dadoras de puentes de hidrógeno
y el licopeno es una molécula incapaz de interaccionar con puentes de hidrógeno por
ser una molécula no oxigenada. Al tener menor capacidad estructural para establecer
puentes de hidrógeno con la celulosa, se observó el rápido avance de este pigmento.
Bibliografía
1. http://dx.doi.org/10.17268/sci.agropecu.2019.04.10
2. https://es.wikipedia.org/wiki/Oleoresina_de_piment%C3%B3n
3. http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/pigmentos/carotenoides.html
4. https://fcf.unse.edu.ar/archivos/series-didacticas/SD-44-Cromatografia-CORZO.pdf
5. https://es.wiktionary.org/wiki/xantofila#:~:text=Sustantivo%20femenino,-
Singular&text=Pigmento%20de%20color%20amarillo%20pardo,de%20hoja%20caduca%20en%20oto%C3%
B1o.
6. https://www.plantasparacurar.com/propiedades-de-los-pimientos-amarillos/
7. https://www.wikiwand.com/es/Criptoxantina