Universidad Francisco José de Caldas

Facultad de Ciencias y Educación

Informe - Cromatografía en papel de espinaca, cilantro y laurel.

Daniel Felipe Flores Burbano 20191150067

Ivonne Lorena Quiroga Gil 201911500008

Resumen
En esta práctica de laboratorio, se realizó la cromatografía de papel con hojas de espinaca,
cilantro y laurel. Esto mediante el uso principalmente de toallas absorbentes y papel filtro,
con el propósito de realizar una comparación entre las fases estacionarias, al interactuar con
alcohol etílico como fase móvil, también se realizó el análisis de las relaciones de frente (Rf)
entre el nivel alcanzado por el eluyente y los pigmentos establecidos (clorofilas, xantofilas y
carotenos), determinando como principales resultados la obtención de Rf para los pigmentos
mencionados, asociando esto a la polaridad de los mismos y a la composición de la fase
estacionaria por interacciones de adsorción y desorción.
Abstract
In this laboratory practice, paper chromatography was performed with spinach, coriander and
bay leaves. This by using mainly absorbent towels and filter paper, with the purpose of
making a comparison between the stationary phases, when interacting with ethyl alcohol as
mobile phase, it was also performed the analysis of the front ratios (Rf) between the level
reached by the eluent and the pigments established (chlorophylls, xanthophylls and
carotenes), determining as main results the Rf obtained for the mentioned pigments,
associating this to their polarity and to the composition of the stationary phase by adsorption
and desorption interactions.
Palabras clave
Cromatografía de papel, polaridad, absorción, fase estacionaria, fase móvil
Keywords
Paper chromatography, polarity, absorption, stationary phase, mobile phase

___________________________________________________________________________
Introducción necesario recurrir a diversas herramientas
La cromatografía permite como tal la de detección, las cuales se denominan
separación, identificación y determinación reveladores.
de los componentes químicos en mezclas En este método de separación se sitúan 2
complejas y según lo expuesto por Pasto y fases, una estacionaria y una móvil en
Johnsosn (2008) Los componentes donde se da la interacción de la solución
separados por cromatografía deben poder con el material absorbente. En cuanto a la
ser visualizados de alguna manera, hecho naturaleza del proceso cromatográfico, los
que no constituye un problema para componentes disueltos de una mezcla se
sustancias coloreadas como los pigmentos, mueven continuamente entre las dos fases,
pero cuando los componentes a separar no se asocian momentáneamente con la fase
pueden ser observados a simple vista es estacionaria, no migran, mientras todos los
componentes momentáneamente presentes Lo primero en realizar es el corte de las
en la fase móvil migran a la misma hojas de las cuales queremos obtener la
velocidad que ésta. Entonces, la separación extracción, en nuestro caso fueron hojas de
no ocurre en ninguna de las dos fases, sino espinaca, hojas de laurel, y apio.
que es el resultado de continuos proseguimos a macerar las hojas
movimientos de las moléculas entre ellas agregando progresivamente alcohol etílico
(Sgariglia, Araceli, Soberon, Sampietro & al 73%.
Vattuone, 2010).
Los compuestos que avanzan a lo largo del
material se ven atraídos por fuerzas
electrostáticas sobre la misma superficie
del adsorbente, interaccionando el
disolvente con ambos. Esta interacción
competitiva establece las velocidades
Imagen 1 cilantro y hojas de Laurel
relativas con que ascienden por la capa del
adsorbente. La polaridad del disolvente
influye asimismo en la velocidad de
Después vertemos la mezcla en un
ascensión del soluto a lo largo de la capa
recipiente separando con la ayuda de un
de adsorbente, esto quiere decir que, a
colador los residuos sólidos.
mayor polaridad del disolvente, mayor
grado de ascensión del soluto. De aquí
surge el concepto de RF, siendo la relación
existente entre la distancia recorrida por el
compuesto y la distancia recorrida por el
disolvente en el mismo tiempo.
Un tipo de cromatografía muy utilizado es
la cromatografía en papel, en esta la fase
estacionaria está constituida simplemente
por una tira de papel de filtro. La muestra
se deposita en un extremo colocando
pequeñas gotas de la disolución y
evaporando el disolvente. Luego el
disolvente empleado como fase móvil se
hace ascender por capilaridad. La Imagen 2 extractos de cilantro, hojas de laurel y
espinaca
separación se realiza en función de la
Por lo siguiente cortamos tiras de papel
afinidad de los solutos con las dos fases,
filtro y/o papel servilleta familia,
las más solubles en agua se quedarán cerca
disponiéndose en la fase líquida o extracto.
del punto donde se aplicó la muestra, y las
Cada muestra se dejó
menos solubles en agua y más solubles en
__________________________________
el disolvente llegarán más lejos. (UNAM,
2007).
Resultados
__________________________________
Cromatografía espinaca
Metodología
 Caroteno 8 0.89
Rf=
9
Tabla 1. Rf de los pigmentos en la espinaca.

Cromatografía Cilantro

imagen 3. Cromatografía en papel de espinaca.

Claramente en la imagen 3 se observa el
desplazamiento de los pigmentos de la
espinaca, visualizando en la parte inferior Imagen 4 cromatografía cilantro papel filtro
del papel absorbente clorofila de tipo a por
tener una coloración verde claro, arriba de
esta se sitúa la clorofila de tipo b con una
tonalidad verde más acentuada, con mayor
desplazamiento se observa la xantofila y
por último el caroteno con un tono naranja
muy tenue. A partir de la medición de las
distancias recorridas por cada pigmento y
el disolvente, en este caso alcohol al 73%,
se calcula la relación de frentes para cada
uno de los pigmentos (ver tabla 1).

Pigmento Relación de Rf
frentes

Clorofila a 1,5 0.17 Imagen 5 cromatografía cilantro papel servilleta

Rf=
9

Clorofila b 3 0.34 En la imagen 4 y 5 se aprecia los

Rf= desplazamientos de los diferentes
9
pigmentos en el papel filtro y papel
Xantofila 3,2 0.69 servilleta familia. En la parte inferior de
Rf=
9 las fases estacionarias, se identifica la
clorofila b debido a la tonalidad verde
oscuro, y muy seguida de él se aprecia una
tonalidad amarilla identificando así el
compuesto de la xantofila. y por último
observamos un gran desplazamiento de la
tonalidad café que haría referencia a la
presencia de carotenos.
Proseguimos con el cálculo de la relación
de los frentes de los pigmentos.

Pigmento Relación de Rf
frentes

Clorofila a 0,9 0.09

Rf=
10

Xantofila 1 0.1 Imagen 6 cromatografía papel filtro hojas de laurel

Rf=
10
En la imagen 6 se observa el mismo
Caroteno 7,8 0.78 desplazamiento que en los anteriores
Rf=
10 casos, solo que aquí se evidencia más el
Tabla 2. Rf de los pigmentos en el cilantro en desplazamiento de la xantofila. Pero
papel filtro también observamos compuestos como la
clorofila b, clorofila a, t caroteno.
En este sentido nos disponemos a calcular
Pigmento Relación de Rf los frentes de referencia.
frentes

Clorofila a 3.4 0.25 Pigmento Relación de Rf

Rf= frentes
13,4

3,5 Clorofila a 0,3 0.026

Xantofila 0.26 Rf=
Rf= 11,5
13,4
Clorofila b 0,6 0.052
Caroteno 9 0.67 Rf=
Rf= 11,5
13,4
Tabla 3. Rf de los pigmentos en el cilantro papel Xantofila 1,5 0.13
Rf=
servilleta 11,5

Caroteno 5,3 0.46

Rf=
11,5
Tabla 4. Rf de los pigmentos en hojas de laurel
__________________________________

Cromatografía Hojas de Laurel

Análisis de resultados
Cromatografía espinaca
En los resultados obtenidos se evidencia el
mayor desplazamiento del caroteno esto
debido, a que los carotenos son menos
fuertes para interactuar con el papel,
quedan disueltos en la fase móvil y son
arrastrados por ella con un retardo mayor,
en si son menos polares. Esto se puede
denotar en el Rf del caroteno que es de
0.89, y según la UNLP (s,f) cuando el
valor es cercano a 1 hay mayor afinidad
del pigmento por la fase móvil (alcohol)
Los pigmentos con mayor afinidad por el
etanol que por el agua, serán arrastrados al
paso de la fase móvil. La movilidad de
cada compuesto respecto al frente del
disolvente tiene un valor característico, en
unas condiciones experimentales
determinadas (Téllez, 2019).
Por otro lado, la clorofila-a presentó un Rf
de 0.17, lo que indica que este pigmento es
muy afín a la fase estacionaria en este caso
el papel absorbente, produciendo la
retención del pigmento imposibilitando un
mayor desplazamiento, esto quiere decir
que hay una alta atracción por los
hidroxilos libres de la celulosa del papel.
Así la clorofila- b, que es más polar que la
a, se adsorbe más intensamente y presenta
un factor de retardo menor (Torossi,
2007). En nuestro caso sucedió lo
contrario la clorofila a presentó un Rf
menor que el de la clorofila b con uno de
0.34, en sí esto se puede deber a la
composición del papel absorbente, el cual
puede presentar menor cantidad de
hidroxilos libre por lo que el pigmento
menos polar se retendrá más rápido, en
este caso la clorofila- a.
En cuanto a la determinación de los
pigmentos, mediante sus colores, se puede
decir que la clorofila prefiere la luz azul a
la verde, o sea que absorbe más fácilmente
la parte más energética del espectro visible
del sol (el azul). Es por eso que la clorofila
y todas las plantas en general son verdes,
al ser éste el color que reflejan. (Cabre,
2014). En la espinaca se presentan el β-
caroteno y clorofila como principales
componentes responsables del color de las
mismas y cantidades menores de
xantofilas. El β-caroteno tiene color
amarillo, mientras que la clorofila tiene
coloración verde, presentado dos
variedades la a y la b que difieren en que
la tiene un grupo metilo la b un grupo
formilo en el anillo de porfirina. Este
grupo es el que genera la polaridad más
alta en este pigmento, por lo que esto
concuerda con lo dicho anteriormente del
Rf que presenta. La pérdida del ion Mg +
+ en las clorofilas conduce a la formación
de feofitina (a y b).
Por otro lado, las xantofilas son una
familia de compuestos, derivados de los
carotenos con átomos de oxígeno en la
estructura y que en la hoja de espinaca se
encuentran en menor proporción que β-
carotenos y clorofila. Estas Xantofilas se
evidenciaron en la cromatografía de la
espina con un Rf de 0.69, mostrando la
baja polaridad del pigmento y su afinidad
por la fase móvil. Según Torossi (2007)
los carotenos como la Xantofilas son
hidrocarburos y aunque la deslocalización
de los electrones pi le puedan dar una
mayor fuerza de wan der waals, no son lo
suficientemente fuertes para interactuar
con el papel, por lo que se disuelven en la
fase móvil presentando un Rf alto como se
logró evidenciar en la práctica.
Cromatografía cilantro
Como lo hemos nombrado con
anterioridad los procesos de separación de
los compuestos orgánicos en este caso del
cilantro dependerán del equilibrio de las
fuerzas intermoleculares entre el soluto la
fase estacionaria y la fase móvil. Por lo
tanto, según la polaridad de cada pigmento
y las fuerzas intermoleculares que
establezcan con los hidroxilos libres de la
celulosa del papel filtro, se dará la
separación de estos. Por lo tanto, se
evidencia gracias al cálculo de frentes de
referencia que la clorofila b es uno de los
compuestos más afines con la fase móvil,
y esto se debe a que en su estructura esta
posee un grupo aldehído (-CHOO). Se
evidencia después la tonalidad amarilla
que hace referencia a la presencia de
xantofilas y se evidencia que esta es polar
y es fuertemente atraída por la fase móvil.
Y como último los carotenos al estar más
lejos de la fase móvil y al realizar el
cálculo de Rf se establece que este es más
afín con la fase estacionaria, y esto se debe
a que los carotenos son cadena de
hidrocarburos que se disuelven en
compuestos no polares, de este modo será
casi nula su interacción con la fase móvil.
Al realizar la cromatografía del cilantro
con papel filtro y papel de servilleta, y al
calcular su Rf los resultados indican que
los pigmentos orgánicos del papel filtro
son más afines que con el papel de
servilleta a excepción de los carotenos. De
este modo el papel filtro nos indica que
posee mayor adsorbancia que el papel
servilleta.
Cromatografía de hojas de laurel
Se puede decir que el proceso es muy
similar al de la cromatografía con hojas de
espinaca y cilantro, en donde se presencia
los compuestos de clorofila b, clorofila a,
xantofilas y carotenos la diferencia recae
en que la hoja de laurel posee una gran
afinidad con la fase estacionaria ya que sus
Rf son cercanos a cero, como se puede
evidenciar en la Tabla 4. Rf de los pigmentos en
hojas de laurel.
__________________________________
Conclusiones
- En conclusión, se puede decir que
la fase estacionaria en la
cromatografía influye mucho en los
valores de Rf de los pigmentos de
la espinaca, el cilantro y el laurel,
ya que cada papel es diferente por
lo que la interacción de los
hidroxilos de la celulosa varía,
según la clase y marca del papel.
- Las hojas de laurel comparadas con
el cilantro y las espinacas medidas
con la fase estacionaria de papel
filtro poseen un mayor índice de
afinidad, ya que sus Rf son los más
cercanos a cero
__________________________________
Bibliografía
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12143#:~:text=La%20clorofila
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