QUI347-LAB-1

LUISA MENDEZ ALONSO

NOMBRE: SANDRA PEÑA

MATRICULA: 100414040

METODOS DE ANALISIS DBO & DQO

Los análisis para determinar la materia orgánica en aguas limpias y residuales

pueden clasificarse en dos tipos generales de medidas: las que determinan
cuantitativamente una cantidad conjunta de materia orgánica que consta de
componentes orgánicos con una característica común y las que determinan
cuantitativamente compuestos orgánicos individuales.
Para evaluar la cantidad total de materia orgánica presente se utilizan los
métodos de determinación del carbono orgánico total y de la demanda biológica
de oxígeno. Es posible identificar analíticamente fracciones macroscópicas de
materia orgánica, como ocurre en la determinación de DBO, que es un índice de
la materia orgánica biodegradable presente, aceite y grasas, la cual representa
la materia extraíble de una muestra por medio de un disolvente no polar.

DEMANDA BIOLOGICA DE OXIGENO

La determinación de la demanda biológica de oxígeno (DBO) es una prueba

empírica en la que se utilizan procedimientos estandarizados de laboratorio para
determinar los requerimientos relativos de oxígeno de las aguas residuales,
efluentes y contaminadas. La prueba tiene su aplicación más extendida en la
determinación de las cargas residuales en las instalaciones de tratamiento y en
la evaluación de la eficacia de extracción del ROB de tales sistemas de
tratamiento. La prueba mide el oxígeno utilizado, durante un período de
incubación especificado, para la degradación bioquímica de materia orgánica
(requerimiento de carbono), y el oxígeno utilizado para oxidar materia orgánica,
como los sulfuros y el ion ferroso. Puede medir también el oxígeno utilizado para
oxidar las formas reducidas del nitrógeno (requerimiento de nitrógeno) a menos
que se impida la oxidación por medio de un inhibidor. Los procedimientos de
siembra y disolución proporcionan una valoración de la DBO a un pH entre 6,5 y
7,5.
Necesidad de disolución
La concentración de DBO en la mayoría de las aguas residuales supera la
concentración de oxígeno disuelto (OD) disponible en una muestra saturada de
aire. Por tanto, es necesario diluir la muestra antes de incubarla para equilibrar
de forma adecuada el requerimiento y el suministro de oxígeno. Ya que el
crecimiento bacteriano requiere nutrientes tales como nitrógeno, fósforo, y
metales traza, se añaden estos al agua de disolución, la cual es tamponada para
asegurar que el pH de la muestra incubada se mantiene en un intervalo
adecuado para el crecimiento bacteriano. La estabilización completa de una
mezcla puede requerir un periodo de incubación demasiado largo para fines
prácticos; por lo tanto, el período de 5 días ha sido aceptado como el periodo de
incubación estándar.
PRUEBA DBO DE 5 DÍAS
Principio: El método consiste en llenar con muestra, hasta rebosar, un frasco
hermético del tamaño especificado, e incubarlo a la temperatura establecida
durante 5 días. El oxígeno disuelto se mide antes y después de la incubación, y
la DBO se calcula mediante la diferencia entre el OD inicial y el final. Debido a
que el OD se determina inmediatamente después de hacer la dilución, toda la
captación de oxígeno, incluida la que ocurre durante los 15 primeros minutos, se
incluye en la determinación de DBO.
Toma de muestras y almacenamiento: Las muestras para el análisis de DBO
pueden degradarse significativamente mientras están almacenadas, entre su
recogida y el análisis, y como resultado producir valores de DBO bajos. H·- gases
mínima la reducción del DBO analizando la muestra inmediatamente o
enfriándola hasta una temperatura próxima a la de congelación durante su
almacenamiento. Sin embargo, aún a baja temperatura, redúzcase el tiempo de
mantenimiento a un mínimo. Caliéntense las muestras enfriadas a 20 °C antes
del análisis.
INTRUMENTOS:
a) Botellas de incubación, capacidad de 250 a 300 ml. Límpiense los frascos
con un detergente, enjúguense perfectamente, y séquense antes de usarlos.
b) Incubador de aire o baño de agua, controlado por termostato a 20 °C ± 1
°C. Elimínese toda la luz para evitar la posibilidad de producción fotosintética
de OD.
REACTIVOS:
▪ Agua destilada
▪ Agua residual urbana reciente
▪ Solución fosfatos:
▪ Monohidrógenofosfato de sodio: 8,493 g
▪ Dihidrogenofosfato de potasio: 2,785 g
▪ Agua destilada hasta enrase a 1000 ml
Homogeneizar perfectamente la solución:
▪ Solución de sulfato de magnesio de 20 g/l
▪ Solución de cloruro de calcio de 25 g/l
▪ Solución de cloruro de hierro de 1,5 g/l
▪ Solución de cloruro de amonio de 2 g/l
Preparación del agua de dilución. Se prepara a partir de agua destilada
introduciendo en un recipiente:
▪ Solución de fosfato 5 ml
▪ Solución de sulfato magnésico 1 ml
▪ Solución de cloruro cálcico 1 ml
▪ Solución de cloruro de hierro 1 ml
▪ Solución de cloruro amónico 1 ml
Agua destilada hasta enrase a 1000 ml
Esta solución se mantiene a 20 °C y debe de airearse procurando evitar toda
contaminación por metales, materias orgánicas, oxidantes o reductores. Se
detendrá la aireación cuando la solución contenga 8 mg/l de oxígeno disuelto.
Dejar en reposo durante 12 horas manteniendo el recipiente destapado. Añadir
5 ml de agua residual urbana por litro de esta solución. Esta agua de dilución,
deberá utilizarse dentro de las 24 horas siguientes a su preparación.
PROCEDIMIENTO:
La técnica utilizada para la medición es la siguiente: Se introduce un volumen
definido de la muestra líquida en un recipiente opaco que evite que la luz pueda
introducirse en su interior (se eliminarán de esta forma las posibles
reacciones fotosintéticas generadoras de gases), se introduce un agitador
magnético en su interior, y se tapa la boca de la botella con un capuchón de
goma en el que se introducen algunas lentejas de sosa. Se cierra la botella con
un sensor piezoeléctrico, y se introduce en una estufa refrigerada a 20 °C.
Las bacterias irán oxidando la materia orgánica del interior de la disolución, con
el consecuente gasto de oxígeno del interior de la botella. Estas bacterias, debido
al proceso de respiración, emitirán dióxido de carbono que será absorbido por
las lentejas de sosa. Este proceso provoca una disminución interior de la presión
atmosférica, que será medida con el sensor piezoeléctrico.
En detalle:

▪ Introducir un volumen conocido de agua a analizar en un matraz aforado

y completar con el agua de dilución.
▪ Verificar que el pH se encuentra entre 6-8. (En caso contrario, preparar
una nueva dilución llevando el pH a un valor próximo a 7 y después ajustar
el volumen)
▪ Llenar completamente un frasco con esta solución y taparlo sin que entren
burbujas de aire.
▪ Preparar una serie de diluciones sucesivas.
▪ Conservar los frascos a 20 °C ± 1 °C y en la oscuridad.
▪ Medir el oxígeno disuelto subsistente al cabo de cinco días.
▪ Practicar un ensayo testigo determinando el oxígeno disuelto en el agua
de dilución y tratar dos matraces llenos de esta agua como se indicó
anteriormente.
▪ Determinar el oxígeno disuelto.
En el curso del ensayo testigo, el consumo de oxígeno debe situarse entre 0,5 y
1,5 g/l. En el caso contrario, la inoculación con el agua destilada no es
conveniente y se necesitará modificar la preparación.
Expresión de los resultados

DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO (DQO)

La Demanda Química de Oxigeno (DQO) se utiliza como una medida del

equivalente de oxígeno del contenido de materia orgánica de una muestra
susceptible de oxidación por un oxidante químico fuerte. Para las muestras de
una fuente específica, el DQO puede relacionarse empíricamente con el DQO,
el carbono orgánico, o la materia orgánica. La prueba es útil para monitorizar y
controlar después de haber establecido la correlación. Se prefiere el método de
reflujo de dicromato a los procedimientos que utilizan otros oxidantes debido a
su mayor capacidad oxidante, a su aplicabilidad, a una mayor variedad de
muestras y a su fácil manipulación.
Selección del método
El método de reflujo abierto es adecuado para una amplia gama de residuos en
los que se prefiere un gran tamaño de muestra. Los métodos de reflujo cerrados
son más económicos en cuanto al uso de sales metálicas como reactivos, pero
requieren homogeneización de las muestras que contengan sólidos suspendidos
para obtener resultados reproducibles. Es posible obtener en el mercado
ampollas y tubos de cultivo con reactivos medidos previamente.
Toma de muestras y almacenamiento
Preferiblemente, recójanse las muestras en frascos de cristal. Ensáyense las
muestras inestables sin demora. Si es inevitable el retraso antes del análisis,
consérvese la muestra por acidificación a un pH ≤ 2 utilizando H2SO4
concentrado. Mézclense las muestras que contengan sólidos precipitables con
un homogeneizador para permitir una toma de muestras representativa.
Háganse diluciones preliminares de los residuos que contengan un DQO alto
para reducir el error inherente a la determinación de volúmenes pequeños de
muestra.
 MÉTODO DE REFLUJO ABIERTO
Principio: La mayor parte de la materia orgánica resulta oxidada por una mezcla
a ebullición de los ácidos crómico y sulfúrico. Se somete a reflujo una muestra
en una solución acida fuerte con un exceso conocido de dicromato de potasio
(K2Cr2O7). Después de la digestión, el K2Cr2O7 no reducido que quede se
determina con sulfato de amonio ferroso para determinar la cantidad de K2Cr2O7
consumido y calcular la materia orgánica oxidable en términos de equivalente de
oxígeno
EQUIPO:
▪ Matraces Erlenmeyer de vidrio con cuello esmerilado de 250 mL
▪ Refrigerante tipo Liebig con junta de cristal esmerilado
▪ Bureta
▪ Calentador
REACTIVOS
▪ Solución de dicromato de potasio
▪ Reactivo ácido sulfúrico
▪ Solución indicadora de ferroína
▪ Sulfato de amonio ferroso (SAF)
▪ Sulfato mercúrico, HgSO4, cristales o polvo.
▪ Ácido sulfídico: Necesario sólo si debe eliminarse la interferencia de los
nitritos
▪ Ftalato de hidrógeno de potasio (FHP)
PROCEDIMIENTO:
Tratamiento de las muestras con DQO > 50 mg O2/L: se introduce 10,0 mL de
la muestra en un Erlenmeyer de reflujo de 250 mL (para muestras con DQO >
900 mg O2/L, utilizar 10 mL de una dilución adecuada de la misma). Agregar 1
g de HgSO4, y luego 5 mL de la solución de K 2Cr2O7 y mezclar. Acoplar el
refrigerante y hacer circular el agua fría. Agregar 15 mL de reactivo de ácido
sulfúrico a través del extremo abierto del refrigerante. Se continua con la
agitación mientras se añade ácido sulfúrico
¡¡¡PRECAUCIÓN!!! mezclar completamente antes de calentar para evitar el
calentamiento local del fondo del matraz y una posible explosión de su contenido.
Cubrir el extremo abierto del refrigerante con una cubeta pequeña para evitar la
entrada de material extraño a la mezcla de reflujo y someter a reflujo por 2 horas.
Enfriar y lavar el condensador con agua destilada. Desconectar el condensador
de reflujo y diluir la mezcla hasta aproximadamente el doble de su volumen con
agua destilada. Enfriar a temperatura ambiente y determinar el exceso de
K2Cr2O7 con SAF, utilizando 0,10 a 0,15 mL de indicador ferroína. Se toma como
punto final de la titulación el primer cambio de color manifiesto desde el azul
verdoso al marrón rojizo. De la misma manera se procede para un blanco que
contenga los reactivos y un volumen de agua destilada igual que la muestra.
• Determinación de la solución estándar: Se evalúa la técnica y la calidad de los
reactivos realizando la prueba en una solución patrón de ftalato de hidrógeno y
potasio
Expresión de resultados:

Donde:
A = volumen de sulfato de amonio ferroso utilizados para el blanco (mL)
B = volumen de sulfato de amonio ferroso utilizados para la muestra (mL)
M = molaridad del sulfato de amonio ferroso
f = factor de la solución SAF

METODO REFLUJO CERRADO COLORIMETRICO

Principio del método: la materia orgánica resulta oxidada por una mezcla a
ebullición de los ácidos crómico y sulfúrico. Se somete a reflujo una muestra en
una solución ácida fuerte con un exceso de dicromato. Después de la digestión
el dicromato no reducido se cuantifica para determinar la cantidad de dicromato
consumido utiliza el sulfato de plata como catalizador para la oxidación de
compuestos alifáticos lineales. Sulfato de mercurio como inhibidor de haluros.
El tiempo de reflujo es de 2 horas a 150 ± 2°C
El consumo de oxígeno se mide a 600 nm con un espectrofotómetro frente a los
estándares.
Materiales:
▪ Tubos de digestión
▪ Termo reactor
▪ Espectrofotómetro
Reactivos:
▪ Solución de digestión
▪ Reactivo de Ácido Sulfúrico
▪ Ftalato de Hidrógeno de Potasio patrón
Procedimiento:
Lavar los tubos de ensayo y tapas con H2SO4 al 20% antes de utilizarlos.
Mida la cantidad de muestra y reactivos dependiendo del tipo de tubo a utilizar
Tubo de Digestión Muestra ml Solución de digestión ml Reactivo de Ácido
sulfúrico ml Volumen total final ml16*100 mm 2,5 1,5 3,5 7,520*150 mm 5 3 7
1525*150 mm 10 6 14 30Ampollas estándar de 10ml2,5 1,5 3,5 7,5
Preparar un tubo para el blanco
Cierre bien los tubos e inviértase varias veces cada uno para mezclar
completamente. Utilice mascarilla en la cara y proteger las manos del calor
producido cuando se mezcla el contenido detuvo. Mezcle por completo antes de
aplicar calor para evitar el calentamiento local del fondo detuvo y una posible
reacción explosiva.
Colocar los tubos en el digestor por 2 horas a 150± 2°C.
Enfriar a temperatura ambiente
Invierta las muestras enfriadas y deje que los sólidos se depositen antes de medir
la absorbancia.
Preparación de la Curva de Calibración:
Prepare al menos 5 patrones de la solución de ftalato hidrógeno de potasio con
DQO que oscilen entre 20 y 900 µg O2/ml. Complete el volumen con agua
destilada.
Expresión de resultados:

REFLUJO CERRADO, MÉTODO TITULOMÉTRICO

REACTIVOS:
▪ Ftalato ácido de potasio (KHP) estándar:
▪ Solución titulante de Sulfato ferroso amoniacal hexahidratado
(Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O) FAS
▪ Solución de digestión: 0,0167M ó 0.1 N: se colocó a secar a 150°C
durante 2 horas
▪ Dicromato de potasio (K2Cr2O7) con pureza superior al 99.5%.
▪ Reactivo de ácido sulfúrico
▪ Solución indicadora de ferroína
Concentración de DQO en mgO2/L contra la absorbancia.
Procedimiento de análisis:
En tubos de digestión 16 x100 mm, se adicionaron 2,5 mL de muestra, 1,5 mL
de solución digestora, 3,5 mL de solución reactiva de ácido sulfúrico
completando un volumen de 7,5 mL, se digesto y dejo enfriar a temperatura
ambiente durante 30 minutos, en un Erlenmeyer, se añadieron unas gotas de
indicador de ferroína y se tituló con FAS 0,05 N para muestras menor a 100
mgO2/L y FAS 0,1 N para mues-tras mayor a 100 mgO2/L, hasta un color rojo
ladrillo. Se registró la lectura para el método titulométrico, NOTA: el FAS debe
ser estandarizado cada vez que se utilice.
Para el método colorimétrico Se colocó el instrumento a cero de absorbancia con
ayuda del blanco sin digestar. Después de 5 a 10 min de tiempo de contacto, se
leyó la absorbancia y se determinó la concentración de DQO a partir de la curva
de calibración previamente preparada, para cada uno de los rangos de trabajo.

EXPRESIÓN DE RESULTADOS:
Y=mx+b