Tcnicas de Muestreo, Anlisis e Interpretacin de Datos Ingeniera Ambiental

Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO):

Antes de comenzar con la tcnica de DBO debemos comprender el significado y alcance de la tcnica de determinacin de oxgeno disuelto (OD) ya que sta representa la base para el anlisis de dicho parmetro (DBO). La tasa de oxidacin bioqumica o DBO en una muestra puede ser determinada midiendo la cantidad de oxgeno disuelto (OD) en dicha muestra a lo largo del tiempo.

Determinacin de Oxgeno disuelto: Mtodo de Winkler

En medio bsico una solucin de sulfato manganoso produce un precipitado floculento de hidrxido de manganeso II.
2MnSO4 + 2 OH- Mn(OH)2 + SO4

Si hay oxgeno en el medio, ste reacciona con el hidrxido de manganeso II y produce dixido de manganeso IV hidratado (precipitado marrn, esta reaccin es conocida como fijacin del oxgeno).

Mn(OH)2 + 1/2 O2 MnO2. H2O

Una vez terminada la reaccin anterior se acidifica la solucin y se disuelve el precipitado. En presencia de yodo este se oxida y el dixido de manganeso IV se reduce a manganeso II. Por cada equivalente de iodo oxidado hay un equivalente de oxgeno.
2+ MnO2.H2O + 2 I- + 4 H+ Mn + I2 + 3 H2O

Finalmente, el iodo liberado se titula con tiosulfato, y se utiliza almidn como indicador (el iodo forma un complejo azul con el almidn, el ioduro no). Hay un equivalente de tiosulfato por equivalente de iodo. El anin tiosulfato se oxida a anin tetrationato

I2 + 2 S2O3

2-

S4O6

2-

+ 2 I-

Demanda Qumica de Oxgeno

La DBO de una muestra de aguas es el oxgeno consumido por microorganismos y/o contaminantes que se oxiden en un intervalo de tiempo (lo comn es 5 das) a temperatura controlada (la ms habitual es 20). Esta tcnica consiste esencialmente en la medicin del oxgeno consumido por microorganismos (generalmente bacterias) durante la utilizacin de la materia orgnica presente en la muestra, realizada en condiciones lo mas parecidas a las que ocurren en la naturaleza. La tcnica de DBO es ampliamente utilizada en el anlisis de efluentes domsticos e industriales, para determinar la cantidad de materia orgnica biodegradable que contiene la muestra en estudio. Dado que esta tcnica solo evala materia orgnica biodegradable mientras que la DQO evala materia orgnica total, se espera que para una misma muestra los valores de DQO sean mayores (o en casos extremos muy semejantes) a los de DBO.

Materiales y equipos:

Tcnicas de Muestreo, Anlisis e Interpretacin de Datos Ingeniera Ambiental Frascos con tapn esmerilado y material de vidrio para titular.

Reactivos:
Agua de dilucin. Se prepara con agregado de nutrientes (Fe, Ca, P y Mg) para favorecer el desarrollo microbiano. Solucin de sulfato manganoso aprox. 2,15 M Reactivo de ioduro alcalino, que tiene, adems de ioduro de potasio KI (o sdico) e hidrxido de K o Na, una pequea cantidad de azida de K o de Na , para eliminar interferencias. Cuidado, es muy txica!! Acido sulfrico concentrado (H2SO4 ) Solucin de tiosulfato de sodio 0,0125 N para titular (Na2S2O3 ) Solucin indicadora de almidn.

El mtodo consiste en llenar los frascos para DBO (especiales para este tipo de ensayo) con muestras que contengan cierta cantidad de microorganismos (en nuestro ensayo son los presentes originalmente en la muestra) y medir la cantidad de oxgeno que consumen. Estas muestras luego se incuban a 20 C, durante 5 das. La cantidad de oxgeno disuelto en la muestra se mide al principio y al final del ensayo y la DBO se calcula por diferencia de estas dos mediciones. Al igual que para el ensayo de DQO no se descarta que el agua que se utiliza para las diluciones de las muestras pueda contener cantidades significativas de materia orgnica y se realiza un blanco de la misma. Para trabajar con DBO es imprescindible hacer diluciones. Por la metodologa empleada la cantidad de oxgeno de la que se dispone inicialmente es de aproximadamente 8 g, por lo cual solo una muestra de 8 o menos de DBO podra ponerse a incubar sin diluir.

Diagrama/ esquema de trabajo:

Se debe determinar la concentracin de O2 inicial de las muestras y del agua de dilucin. Para esto se fija el oxgeno de las muestras agregando 1 mL de sulfato manganoso y 1 mL de ioduro alcalino

Preparacin y sembrado del ensayo de DBO:

Preparar las muestras en los frascos para DBO (aproximadamente 300 mL, tapn esmerilado), evitando que queden burbujas de aire. Considerar la cantidad de muestra a agregar y completar con agua de dilucin Llevar las muestras al incubador y dejar durante 5 das.

Titulacin de las muestras: determinacin de la DBO:

Fijar el oxgeno de las muestras agregando 1 mL de sulfato manganoso y 1 mL de ioduro alcalino. Una vez que un tercio del floculado haya decantado, agregar 2 ml de H2SO4 concentrado, tapar y Agitar bien. En este momento el floculado debe desaparecer. Con una alcuota de 100 mL del frasco de DBO comenzar la titulacin con la solucin de

Tcnicas de Muestreo, Anlisis e Interpretacin de Datos Ingeniera Ambiental Na2S2O3 0,0125 N, continuar hasta observar un color amarillo plido. En este punto agregar gotas del indicador de almidn y proceder con la titulacin hasta que desaparezca el color azul (punto final). Si es necesario realizar un duplicado de la titulacin. Calcular la cantidad de oxgeno disuelto (OD) considerando que: Por cada equivalente de tiosulfato gastado hay un equivalente de iodo Por cada equivalente de iodo hay un equivalente de oxgeno. Con los datos de OD para el Blanco, y Muestras T0 y T5 calcular la DBO para las muestras de entrada y salida de la planta de tratamiento de efluentes. Utilizar la siguiente frmula: DBO = ODm0 - [ODm5 x Vfrasco ODH2O x VH2O] + DBOH2O Vm m0: muestra da cero m5: muestra da cinco Vfrasco : Volumen del frasco Vm : Volumen de la muestras VH2O : Volumen del agua

Demanda Qumica de Oxgeno (DQO)

La tcnica de Demanda Qumica de Oxgeno (DQO) se utiliza para medir la fuerza orgnica de desechos tanto industriales como domsticos, esta permite analizar los desechos en trminos de la cantidad total de O2 necesaria para ser oxidada a CO2 y H2O y evaluar la materia orgnica presente, tanto biodegradable como no biodegradable. El ensayo se basa en el principio bsico de que todo compuesto orgnico, con muy pocas excepciones, puede ser oxidado completamente por la accin de agentes oxidantes en condiciones cidas. Durante el anlisis, la materia orgnica presente en la muestra es degradada a CO2 y H2O independientemente de la actividad microbiolgica. Una de las principales ventajas es el hecho que el ensayo se realiza en un tiempo no superior a 3 hs, mientras que la principal limitacin de la tcnica es que no permite discriminar entre la presencia/cantidad de materia orgnica biolgicamente oxidable vs. no biolgicamente oxidable. Siempre se espera que los valores de DQO, para una misma muestra, superen los de Demanda Bioqumica de Oxgeno (ver ms adelante). La tcnica de DQO se utiliza ampliamente en el anlisis de muestras de efluentes industriales y domiciliarios. El hecho de que pueda ser realizada y calculada en el mismo da permite evaluar las muestras inmediatamente; esto sumado a que la determinacin puede realizarse sobre muestra acidificada (a pH < 2) que puede conservarse hasta 28 das permite repetir la determinacin tantas veces como sea necesario en diluciones adecuadas. Realizado conjuntamente con en ensayo de DBO permite detectar la presencia de materia orgnica no oxidable biolgicamente.

Agente oxidante:

Tcnicas de Muestreo, Anlisis e Interpretacin de Datos Ingeniera Ambiental El dicromato de potasio (K2Cr2O7) es el agente oxidante de eleccin ya que posee la capacidad de oxidar un amplio rango de sustancias orgnicas a CO2 y H2O. Para garantizar y poder medir la oxidacin de toda la materia orgnica presente en las muestras el agente oxidante se utiliza en exceso. La accin del dicromato se ve favorecida en medio cido y a altas temperaturas, condiciones en las cuales se lleva a cabo el ensayo.

Materiales y equipos:
Tubos de digestin: tubos de borosilicato, aprox. 15 mm de dimetro, con capacidad de 6 mL aprox., con tapa a rosca resistente al calentamiento y a la mezcla sulfocrmica. Bloque calentador: revestido de aluminio, con agujeros adecuados para insertar los tubos de profundidad tal, que el nivel superior de mezcla quede, por lo menos, 5 mm dentro del bloque. Espectrofotmetro: para usar a 600 nm, con cubas de 1 cm de paso ptico.

Reactivos:
Acido sulfrico concentrado: grado analtico. Solucin cida de Dicromato de Potasio: en erlenmeyer de 1 L poner aprox. 500 mL de agua destilada, agregar 10,2285 g de Dicromato de Potasio (K2Cr2O7), grado patrn primario, secado previamente 2 hs a 103C y 167 mL de cido sulfrico concentrado (H2SO4), mezclar, agregar agua hasta un poco menos de 1 L, enfriar y trasvasar a un matraz de 1 L, enrasar. Mezcla digestora: al momento de hacer los anlisis preparar en erlenmeyer, una mezcla de 30% de solucin cida de dicromato de potasio y 70% de cido sulfrico concentrado (poner el dicromato primero y luego agregar, de a poco, el sulfrico); el volumen a preparar depende del nmero de muestras. Dejar enfriar antes de usar. Consideramos, con exceso, que necesitamos 10 mL para blancos, 10 mL para testigo y 10 mL para cada muestra. El exceso nos sirve para repetir cuando vemos, despus de la digestin, que debemos trabajar con otras diluciones del extracto.

Estndares:
- Solucin madre de biftalato de potasio:Triturar biftalato de potasio[C6H4(COO)2HK] grado para anlisis y luego llevar a peso constante, a 120C. Disolver 950 mg en agua destilada y llevar a 1.000 mL. Esta solucin tiene una DQO terica de 1000 mg O2/L. La solucin es estable en heladera por ms de 3 meses verificando que no tenga crecimiento visible de microorganismos. - Curva de calibracin: de la solucin madre de biftalato de potasio hacemos diluciones al 5, 10; 25; 40, 60; 70, 80 y 90 % en matraces de 100 mL que van de 50 a 900 mg O2/L. Procesar como en tcnica analtica - Estandar de trabajo: verificada la linealidad de la curva en el rango dado, se puede trabajar rutinariamente con un slo estandar, por ejemplo el de 500 mg O2/L.

Muestra:
Muestra de efluentes directa o diluida segn la concentracin esperada.

Tcnicas de Muestreo, Anlisis e Interpretacin de Datos Ingeniera Ambiental

Tcnica analtica:
PRECAUCIONES: Durante la realizacin del prctico usar anteojos de seguridad y guantes. Agitar fuertemente la mezcla en los tubos antes de colocarlos en el bloque calentador para evitar calentamientos locales en el fondo del tubo que podran producir una explosin.

Esquema de trabajo:
Se procesan Blanco de reaccin, Estndar y Extracto por triplicado (para poder eliminar un dato si es necesario). En recipientes rotulados: B (blanco de reaccin), St (estndar) y E (extracto, con su N ) poner: B Mezcla digestora (mL) Agua (mL) Estndar 500 mg O2 (mL) Extracto dilucin (mL) 2 1 St 2 1 E 2 1

Tapar bien los tubos. Agitarlos todos juntos, puestos en una gradilla y colocarlos en el bloque calentador, precalentado a 150 C durante 10 minutos, durante 2 horas. Dejar enfriar, agitar los tubos puestos en una gradilla y leer en espectrofotmetro a 600 nm.

Clculos:
Se expresa en mg de O2 /L: -Trabajando con curva de calibracin interpolar directamente. -Si se trabaj con un slo patrn: Abs E - Abs B DQO (mg O2/L) = ------------------------- x cc St. (mg O2/L) Abs St. -Abs B Donde: Abs E = absorbancia del extracto (Si se us extracto diluido, multiplicar el resultado por el factor correspondiente). Abs B = absorbancia del blanco de reactivos Abs St. = absorbancia del estndar cc St. = concentracin del estndar