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FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Ambiental

PRÁCTICA DE LABORATORIO
CÓDIGO

CURSO Contaminación de Agua, Tratamiento y Control CONAGUPRAC12

LABORATORIO Ingeniería Ambiental

NOMBRE DE LA
Practica 12: Determinación de Demanda Bioquímica de Oxigeno.
PRÁCTICA

I. Objetivos Generales:

 Analizar distintas matrices de agua en los parámetros de Demanda Bioquímica de

Oxigeno para determinar según su procedencia si cumple o está dentro de los
Instrumentos de Gestión de Calidad utilizados en el territorio Nacional y evaluar
estadísticamente los resultados.

II. Objetivos Específicos:

 Determinar Demanda Bioquímica de Oxigeno en las Matrices de Agua recolectadas por

cada grupo.
 Utilizar los ECA o LMP según la procedencia de la muestra y comparar con los
resultados obtenidos en el Laboratorio.

III. Definiciones

 *DBO: Demanda Bioquímica de Oxígeno, es la medida del oxígeno molecular

utilizado durante un período de incubación especificado para oxidar la materia
orgánica de una muestra de agua.
 *SEMILLA O INÓCULO: Población de microorganismos capaces de oxidar la
materia orgánica biodegradable de la muestra.
 *AGUA DE DILUCIÓN: Agua destilada con nutrientes para diluir las muestras.
 *INCUBACIÓN: Proceso llevado a cabo a condiciones de tiempo y temperatura
fija (5 días a 20±10°C), bajo las cuales los microorganismos llevan a cabo el
proceso de oxidación de la materia orgánica.

Principio
El principio básico es la medición de oxígeno utilizado durante un período de
incubación especificado para la degradación bioquímica de materia orgánica. Las
condiciones estándar del análisis incluyen incubación en la oscuridad a 20±10°C por 5
días.
El método consiste en el llenado con muestra diluida y sembrada, hasta rebosar, en un
frasco hermético, e incubarlo a 20±10°C durante 5 días. La DBO se calcula mediante la
diferencia entre el OD inicial y final. El OD inicial se determina rápidamente después
de hecha la dilución.

Interferencias
*La relación de la materia orgánica soluble a la materia orgánica suspendida, los
sólidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o
reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas,
pueden afectar la exactitud y la precisión de medidas de DBO.
*Las muestras que contienen componentes de cloro residual, sustancias tóxicas,
muestras sobresaturadas con OD o muestras que contienen peróxido de hidrógeno, no
permiten el desarrollo de las bacterias que degradan la materia orgánica.
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*DBO carbonácea contra nitrogenácea: La oxidación de las formas reducidas del
nitrógeno como amoniaco y nitrógeno orgánico, mediada por los microorganismos,
ejercen una demanda nitrogenácea, que ha sido considerada como una interferencia
en la prueba.
*Si el agua de dilución es de baja calidad, su DBO 5 aparecerá como de la muestra,
efecto que será amplificado por el factor de dilución, y el resultado tendrá una
desviación positiva. El método de análisis debe incluir el procesamiento como muestra
del agua de dilución para verificar su calidad.

IV. Equipos, Materiales y Insumos

Reactivos

Preparar los reactivos por anticipado, haciendo uso de químicos grado reactivo o de
mejor calidad. Usar agua destilada u otro equivalente, preferiblemente estéril para la
preparación de soluciones. Desechar cualquier reactivo en stock si hay algún signo de
precipitación o crecimiento biológico.

A. Solución de tampón Fosfato: Disolver 8.5 g de KH 2PO4, 21.75 g de K2HPO4, 33.4 g

de Na2HPO4.7H2O y 1.7g de NH4Cl en 500 mL de agua destilada y diluir a 1 L. El pH de
la solución debe ser 7.2 sin ajustes adicionales. Alternativamente disolver 42.5 g de
KH2PO4 y 1.7 g de NH4Cl en aproximadamente 700mL de agua destilada y ajustar el a
pH 7.2 con NaOH al 30% y diluir a 1L.
B. Solución de sulfato de magnesio: Disolver 22.5 g de MgSO4.7H2O en agua destilada
y diluir a 1L.
C. Solución de cloruro de calcio: Disolver 27.5 g de CaCl2 en agua destilada y diluir a
1L.
D. Solución de cloruro férrico: Disolver 0.25 g de FeCl3.6H2O en agua destilada y diluir
a 1 L.
E. Soluciones ácida y alcalina: Para neutralización de muestras residuales alcalinas o
ácidas se utilizan soluciones 1N.
a) Solución Ácida 1N: Adicionar suavemente y en agitación 28 mL de H2SO4 (cc) y
diluir a 1L.
b) Solución Alcalina: Disolver 40 g de NaOH en agua destilada y diluir a 1L.
F. Solución de sulfito de sodio: Disolver 1.575g de Na2SO3 en 1L de agua destilada.
Ésta solución no es estable, preparar diariamente. G.
Inhibidor de la nitrificación:
1) 2-cloro-6-(triclorometil) piridina (TCMP): Usar puro o en preparaciones comerciales
(2% TCMP en sulfato de sodio).
2) Solución de Allylthiourea (ATU): Disolver 2.0 g de ATU (C 4H8N2S) en 500 mL de
agua destilada y diluir a 1 L, almacenara a 4 °C, es estable no más de 2 semanas.
H. Solución glucosa- ácido glutámico: Secar glucosa y ácido glutámico ambas de
calidad para reactivo a 103°C por 1 hora. Añadir 150 mg de glucosa y 150 mg de ácido
glutámico en agua destilada y diluir a 1L. Preparar siempre inmediatamente antes de
usarla manteniendo condiciones estériles. Almacenar la mezcla glucosa- ácido
glutámico a 4°C o menos. Las preparaciones comerciales pueden ser usadas, pero las
concentraciones deben variar.
I. Solución de Cloruro de Amonio: Disolver 1.15g de NH4Cl en 500mL de agua
destilada, ajustar el pH a 7.2 con solución de NaOH y diluir a 1L. La solución contiene
0.3 mg N/mL.
J. Fuente de Agua para la preparación de agua de dilución, usar agua
desmineralizada, destilada o agua de grifo para la preparación de muestras diluidas.

Para la determinación del Oxígeno Disuelto por el Método Yodométrico- Modificación

de Azida, utilizar los siguientes reactivos:
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K. Solución de Sulfato Manganoso: Disolver 480g de MnSO4.4H2O, 400g de

MnSO4.2H2O o 364g de MnSO4.H2O en agua destilada, llevar a 1L y filtrar.
L. Solución Alcali-Yoduro-Azida
*Para muestras saturadas o menos saturadas: Disolver 500 g NaOH (ó 700 g de KOH)
y 135 g de NaI (ó 75 g KI) en agua destilada y llevar a 1L. Anadir 10 g de Azida de
Sodio (NaN3 ) disuelto en 40 mL de agua destilada. Las sales de sodio y potasio
pueden ser intercambiadas.
*Para muestras sobresaturadas: Disolver 10g de NaN 3 en 500mL de agua destilada.
Añadir 480 g de NaOH y 750 g de NaI, mezclar y disolver.
M. Ácido Sulfúrico Concentrado: 1mL es equivalente a 3mL de reactivo álcali-
yoduroazida.
N. Indicador de Almidón: Disolver 2 g de almidón grado reactivo (C 6H10O5)n y 0.2 g de
ácido salicílico (C7H6O3) en 100 mL de agua destilada caliente.
O. Tiosulfato de Sodio 0.025 N: Disolver 6.205 g de Na2S2O3. 5H2O en agua destilada.
Adicionar 1.5 mL de NaOH 6.0 N ó 0.4 g de NaOH sólido y diluir a 1L. Estandarizar con
solución de biyodato.
P. Biyodato de potasio 0.0021 N: Disolver 812.4mg de KH(IO3)2 en agua destilada y
llevar a 1L.
Para valorar ésta solución disolver aproximadamente 2g de KI en 100 a 150mL de agua
destilada. Adicionar 1 mL de H 2SO4 6N o unas gotas de H 2SO4cc y 20mL de solución
estandar de biyodato. Diluir a 200mL y titular con Na 2S2O3 hasta obtener un color
amarillo claro; en este punto adicionar indicador de Almidón y continuar hasta que
desaparezca el color azúl.

Materiales y Equipos

A. Incubadora de DBO: Equipo con magnitudes de trabajo 20±1ºC, eliminar toda la luz
para evitar la posibilidad de producción fotosintética de OD. El Modelo de la
incubadora es MEDILOW, cuya serie es 578171.
B. Botellas de incubación: Usar botellas de 60 mL o de mayor capacidad (son
preferibles botellas de 300 mL que posean tapón de vidrio esmerilado y boca
acampanada), limpiar los frascos con un detergente, enjuagar a fondo y secar
drásticamente antes de usarlos. Como precaución contra la entrada de aire en la
botella durante la incubación, utilizar un sello de agua, añadiendo agua a la boca
acampanada de las botellas de DBO especiales y cubrir la boca con un plástico o
papel aluminio para reducir la evaporación del sello de agua durante la incubación. C.
Pipetas volumétricas, de 20 y 100mL.
D. Microburetas, de 10mL.

V. Procedimiento:

Métodos de Preparación

A. Pre-tratamiento y Preparación de la Muestra

1.- Muestras con alcalinidad y acidez: Verificar el pH de todas las muestras, si éstas
no están entre 6 y 8, llevar la muestra a una temperatura de 20±3°C y ajustar su
pH entre 7.0-7.2, usando una solución de ácido sulfúrico o hidróxido de sodio
0.1N, evitando la dilución de la muestra en más de 0.5%. Las excepciones deben
ser justificadas con agua natural cuando la DBO tiene valores de pH medidos in
situ. El pH del agua de dilución no debe ser afectado por la dilución de muestra
mínima.
2.- Muestras que contienen componentes de cloro residual: Si es posible evitar
muestras que contengan cloro residual (tratar de recolectarlas antes de la
cloración). En algunas muestras el cloro se disipará en el plazo de 1 a 2 horas
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después de su exposición a la luz o puede ocurrir durante la toma y el transporte
de la muestra.
Para muestras en las cuales el cloro residual no desaparece en un tiempo
razonablemente corto, eliminarlo por adición de Na 2SO3.
a. Determinar el volumen requerido de solución de Na 2SO3 en una porción de 100
a 1000 mL de muestra.
b. Neutralizar añadiendo 10 mL ácido acético (1:1) o H 2SO4 (1:50) o 3 gotas de
ácido sulfúrico concentrado, luego agregar 1-10mL de solución de yoduro potásico
(10%), esto para 1L de muestra, o según el volumen utilizado para el ensayo y
titular con solución de Na2SO3 determinando el punto final con la solución de
almidón.
c. Añadir a la muestra neutralizada el volumen relativo de solución de Na 2SO3
determinada por la prueba anterior, mezclar y después de 10 a 20 minutos
comprobar el cloro residual de la muestra.
(Nota: Un excedente de Na 2SO3 en la muestra, consume oxígeno y reacciona con
ciertas cloraminas orgánicas que pueden estar presentes en muestras tratadas).
3.- Muestras que contienen otras sustancias tóxicas: Ciertas muestras de residuos
industriales, como los residuos del laminado contienen metales tóxicos, tales
pruebas a menudo requieren estudios y tratamientos especiales.
4.- Muestras sobresaturadas con OD: Las muestras que contienen concentraciones
de OD por encima de la saturación a 20°C pueden ser encontradas en aguas frías
o en aguas donde ocurre fotosíntesis. Para prevenir pérdidas de oxígeno durante
la incubación de tales muestras, reducir el OD hasta la saturación a 20±3°C,
agitando la muestra vigorosamente en frascos parcialmente llenos o inyectando
aire comprimido limpio y filtrado.
5.- Muestras que contienen peróxido de hidrógeno: Remanentes de peróxido de
hidrógeno en muestras de algunas industrias en el proceso del blanqueo usadas
por fábricas textiles y de papel, pueden provocar niveles supersaturados de
oxígeno en muestras tomadas para ensayos de DBO.
Mezclar tales muestras vigorosamente en recipientes abiertos por suficiente
tiempo para permitir que el peróxido de hidrógeno se disipe antes de realizar la
prueba de DBO.
Chequear la remoción de peróxido observando las concentraciones de oxígeno
disuelto con el paso del tiempo durante mezclas o usando tiras de peróxido. Los
tiempos de mezclas pueden variar de 1 a 2 horas dependiendo de la cantidad de
peróxido de hidrógeno presente.
La reacción de peróxido puede ser considerada completa cuando el OD no
incrementa 30 minutos después de haber realizado la mezcla vigorosa.

B. Selección y almacenamiento de fuente de agua para dilución de muestras para

DBO
Obtener agua de la fuente adecuada (destilada). Asegurarse que el agua está libre
de metales pesados, especialmente cobre y sustancias tóxicas como el cloro que
puede interferir en las mediciones de la DBO. El agua desionizada a menudo
contiene suficientes cantidades de orgánicos y microorganismos que pueden causar
fallas en la comprobación del control de calidad de agua de dilución.
Esta fuente de agua puede ser almacenada y ser oxigenada por 24 horas antes de
usada en la preparación del agua de dilución, verificando el criterio < 0.20 mg/L
DBO5 para el control de calidad del blanco de agua de dilución. El almacenamiento
prolongado por demasiados días puede mejorar la calidad del agua, pero el
crecimiento bacteriano puede causar otros deterioros.

C. Preparación de semillas de suspensión

Esto es necesario para tener en cada botella de DBO una población de
microorganismos capaces de oxidar la materia orgánica biodegradable en la
muestra. La fuente de la semilla puede proceder de agua residual doméstica,
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efluentes no clorados o no desinfectados y de las aguas de superficie que reciben
las descargas de agua residual que contengan una población microbiana
satisfactoria.
Algunas muestras (por ejemplo, algunos residuos industriales no tratados,
residuos desinfectados, residuos con alta temperatura, residuos que tienen
valores de pH menos que 6 o más que 8, o residuos almacenados más de 6
horas de haber sido recolectados) no contienen una suficiente población
microbiana.
Es preferible que la semilla se obtenga a través de un sistema de tratamiento
biológico procesador de residuos adaptada en el laboratorio mediante aireación
continuamente y añadiendo pequeños incrementos diarios de residuos,
recomendándose inhibir la nitrificación. Si no se dispone de esta utilizar el
sobrenadante del agua residual doméstica en reposo, al menos 1 hora. No filtrar ya
que esto removería los microorganismos de la semilla.

Procedimiento Analítico

A. Preparación del agua de dilución

Tomar el volumen deseado de la fuente de agua almacenada, según el tamaño de
las botellas a trabajar. Chequear para asegurar que la concentración de oxígeno
disuelto es al menos 7.5mg/L antes de usar agua para la prueba de DBO, sino
añadir OD agitando las botellas vigorosamente o por burbujeo de aire filtrado libre
de compuestos orgánicos. Alternativamente almacenar el agua en botellas lo
suficientemente grandes con tapón de algodón para permitir su saturación. Añadir 1
mL de cada una de las siguientes soluciones: tampón fosfato, MgSO 4, CaCl2, y
FeCl3 en 1L de agua de dilución a preparar. Mezclar completamente y llevar a
temperatura de 20± 3°C.
Preparar agua de dilución inmediatamente antes de usar, a menos que los blancos
de dilución muestren que el agua es aceptable después de tiempos de
almacenamiento muy largos.
Si los blancos de agua de dilución muestran una diferencia de oxígeno disuelto
mayor de 0.20mg/L, obtener un agua adecuada para mejorar la purificación o usar
agua de otra fuente.
No añadir agentes oxidantes o exponer el agua a luz ultravioleta el agua de dilución
con el fin de obtener los rangos del blanco de dilución.

B. Ajuste de Temperatura de la muestra

Llevar muestras a 20±3°C antes de hacer las diluciones.

C. Preparación de diluciones
Hacer diversas diluciones preparadas a la muestra, al menos 3 diluciones, con el fin
de obtener un OD final de al menos de 1.0mg/L y una diferencia de OD de al menos
2.0mg/L después de los 5 días de incubación.
Se recomiendan cinco diluciones si la experiencia con una muestra particular no
produce al menos tres botellas que tienen diferencias de OD mínimo aceptable y
límites residuales. La experimentación con una muestra concreta permitirá el uso de
un número menor de diluciones.
Un análisis más rápido como DQO puede ser relacionado con el DBO y servir de
guía en la selección de diluciones. A falta de conocimiento de datos previos o en el
caso de muestras nuevas, utilizar los siguientes porcentajes para la preparación de
diluciones:
0.01 a 1.0% para residuos industriales fuertes.
1 a 5% para aguas residuales crudas y estabilizadas.
5 a 25% para efluentes tratados biológicamente.
25 a 100% para aguas superficiales contaminadas
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El número de frascos que se preparan por cada dilución depende de la técnica para
determinar el OD y del número de duplicados deseados.
La preparación de las diluciones es en recipientes o envases volumétricos y luego
transferir a las botellas de DBO o preparar directamente en las botellas de DBO.
Cualquier método de dilución puede ser combinado con cualquier técnica de
medición de OD.

1.- Cuando se preparen las diluciones en envases volumétricos: Utilizando una

pipeta de boca ancha, agregar la cantidad deseada de muestra preparada a cada
frasco o probeta. Mezclar bien la muestra antes de pipetear para evitar pérdida de
sólidos por sedimentación. Para diluciones mayores de 1% hacer una dilución
previa en una probeta antes de hacer la dilución final. Llenar probetas o frascos, a
casi, dos terceras partes de total con agua de dilución evitando la entrada de aire.
Añadir cantidades apropiadas de suspensión de semillas y el inhibidor de la
nitrificación| y complete finalmente con agua de dilución. Mezclar bien evitando la
entrada de aire, sifonear la dilución mezclada a las botellas sin dejar que
sedimenten los sólidos durante la transferencia.
2.- Cuando se preparen las diluciones directamente en el frasco de DBO:
Usando una pipeta volumétrica de boca ancha, agregar el volumen de muestra
deseado a los frascos de DBO. Llenar cada botella de DBO aproximadamente las
dos terceras partes con agua de dilución. Añadir cantidades apropiadas de
suspensión de semillas y el inhibidor de la nitrificación para cada botella de DBO.
Cuando una botella contiene más del 67% de muestra después de la dilución, los
nutrientes pueden encontrarse limitados en la muestra diluida y subsecuentemente
pueden reducir la actividad biológica. En tales pruebas, añadir el nutriente,
minerales y las soluciones tampón directamente a la muestra diluida en una
proporción de 1mL/L (0.30 mL/botella de 300mL) o usar soluciones comerciales
preparadas designadas para dosificar de acuerdo al tamaño apropiado de la botella.

D. Adición de suspensión de la semilla

Si la siembra se realiza, añadir la suspensión de semilla al recipiente de dilución o a
cada botella de DBO antes de la dilución final. No añadir las semillas directamente a
las muestras de agua residual si éstas contienen sustancias tóxicas antes de la
dilución.
Generalmente 1 a 3 mL de agua residual estabilizada, ó 1 a 2mL de mezcla líquida
de un efluente primario diluida al 10%, para cada botella de DBO proporcionará una
cantidad adecuada de microorganismos. No filtrar la suspensión de la semilla antes
de usarla. Agitar la suspensión de la semilla durante la transferencia para asegurar
que la misma cantidad de microorganismos es añadida a cada botella de DBO.
Siempre registrar el volumen exacto de suspensión de semilla añadido a cada
botella. El consumo de Oxígeno Disuelto atribuible para la semilla adicionada por
cada botella generalmente está entre 0.6 a 1.0 mg/L, por lo que la cantidad de
semilla adicionada a cada botella de DBO deberá ser ajustada a este rango. Esto se
logrará realizando pruebas con ácido glutámico-glucosa (GGA) para la obtención de
resultados de 198 ± 30.5 mg/L. Por ejemplo, si 1mL de suspensión de semilla logra
198 ± 30.5 mg/L de DBO en la prueba con GGA, entonces se usará 1mL de
suspensión por cada botella de DBO.

E. Sellado de Botellas
Completar el llenado de cada botella, adicionando suficiente agua de dilución de tal
manera que al insertar el tapón se desplace todo el aire, sin dejar burbujas en la
botella.
Mezclar la muestra girando manualmente la botella varias veces, a menos que un
sensor de oxígeno que tiene un agitador se utilice inmediatamente para medir la
concentración del OD inicial.
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Para prevenir la absorción de aire por la botella durante la incubación use un sello
de agua, los cuales se obtienen invirtiendo las botellas en un baño de agua o
adicionando agua en el reborde cóncavo de la boca de las botellas especiales para
la DBO. Colocar una capa de papel o plástica o un capuchón metálico sobre la boca
de la botella para reducir la evaporación del sello de agua durante la incubación.

F. Determinación de OD inicial
Usar el método Iodométrico de modificación azida en todas las muestras diluidas,
blancos de agua de dilución y control de semilla. Remplazar cualquier contenido
desplazado con suficiente muestra diluida o agua de dilución para llenar las botellas,
ajustar los tapones en las botellas y formar el sello de agua antes de iniciar la
incubación. Después de preparar la dilución determinar el OD inicial dentro de los
30 minutos. Preparar una botella extra por cada dilución para la determinación del
OD inicial.
a.- Para la muestra recolectada en una botella de 250 a 300 ml, añadir 1mL de
solución de MnSO4, 1mL de reactivo álcali-yoduro-azida.
Si las pipetas son sumergidas en la muestra, enjuagarlas antes de devolverlas a
las botellas del reactivo. Taponar cuidadosamente para evitar burbujas de aire y
mezclar pocas veces invirtiendo la botella.
Cuando el sedimento ha decantado lo suficiente (para aproximadamente la mitad
de volumen de la botella) dejar claro el sobrenadante por encima de la masa
flocosa de hidróxido de manganeso, añadir 1.0 mL de H 2SO4cc.
Taponar y mezclar varias veces por inversión del frasco, hasta que la disolución
sea completa. Titular un volumen correspondiente para 200mL de la muestra
original después de la corrección para la muestra perdida por el desplazamiento
con reactivos. Así, para un total de 2mL (1mL cada uno) de MnSO 4 y reactivo
álcali-yoduro-azida en una botella de 300mL, titular 200*300/(300-2)= 201mL. b.-
Titular con solución de Na2S2O3 0.025M a color amarillo pálido.

Añadir pocas gotas de solución de almidón y continuar titulando hasta la primera

desaparición del color azul. Si el punto final es rebasado, valorar en retroceso con
solución de biyodato de 0.0021M, añadir gota a gota o por adición de un volumen
medido de la muestra tratada. Corregir para la cantidad de solución de biyodato o
muestra. Hacer caso omiso de subsiguientes recoloraciones debido al efecto
catalítico del nitrito o para trazas de sales férricas que no han sido complicadas
con fluoruro.

*Para calcular el O.D. :

-1 mL de Na2S2O3 0.025 N = 1 mg OD/L.
-Si la concentración del Na2S2O3 es diferente de 0.025 N, utilizar la siguiente
ecuación:

mg OD / L Volumen de Na 2S2O3  N del Na 2S2O3

0.025
G. Incubación de las Muestras
Incubar a 20±1ºC las botellas tapadas y selladas que contienen las diluciones
deseadas, los controles de semilla, los blancos de agua de dilución y los patrones
de glucosa-ácido glutámico. Evitar la luz para evitar el crecimiento de algas en las
botellas durante la incubación.

H. Determinación del OD Final

Después de 5días ± 6horas de incubación, determinar el OD de todas las muestras
diluidas, control de semilla, blancos de agua de dilución y el patrón de glucosa-ácido
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glutámico, usando el método titulo métrico de modificación azida o el método de
electrodo de membrana.

VI. Cálculos y Resultados:

 Determinación de Demanda Bioquímica Oxigeno:

1. Para cada prueba de botella que tiene una reducción en OD de 2,0 mg/L y al
menos 1,0 mg / L de OD final, calcular de la siguiente manera:

DBO 5, mg/L= (D1-D2) - (S) Vs

P

Donde:
D1= OD inicial de la muestra diluida después de la preparación, mg/L
D2= OD final de la muestra después de 5 días de incubación a 20°C, mg/L S
= Consumo de oxígeno de las semillas, Δ OD / ml de suspensión de semilla
añadida por botella. (S = 0 si la muestra no es sembrada)
Vs= Volumen de semilla en la respectiva botella, mL
P = Fracción volumétrica decimal de la muestra usada; 1/P= Factor de
dilución

2. Si la reducción de OD es menor de 2.0mg/L y la concentración de la muestra es

realizada al 100% (no se ha realizado dilución, excepto para las semillas,
nutrientes, minerales y soluciones buffer), entonces realizar la corrección de semilla
actual y el consumo de OD puede ser reportado como DBO aun si está menos de
2.0 mg/L.
3. Cuando todas las diluciones dan como resultado un OD final <1.0, seleccionar la
botella con más baja concentración de OD consumido (máxima dilución) y reportar:

DBO, mg/L > (D1-D2) - (S) Vs

P

Las muestras que presentan grandes diferencias entre el DBO calculado para
diferentes diluciones, por ejemplo, mayor que 30% pueden indicar la presencia de una
sustancia tóxica o problemas analíticos. Cuando los efectos se vuelven repetitivos,
investigar para identificar la causa. Identificar en las pruebas reportadas si no se
cumplen los siguientes criterios de control de calidad:
 Blanco de agua de dilución es superior a 0.20mg/L.
 Chequear si el ácido glutámico-glucosa está fuera de los límites
aceptables.
 Réplicas de las pruebas muestran diferencia más de 30% entre los valores
altos y bajos.
 Control de semilla no cumplen con los criterios anteriores establecidos en
todas las diluciones.
 OD final es menor de 1,0 mg/L.

VII. Resultados

1. Calibración del Oxímetro

Porcentaje de
Item Equipo P(mmHg) T(25°C) Aceptación
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1 Oxímetro 760 25 100%

2. Datos del análisis en 5 días a una temperatura de 20°C

Matrice Unidade OD OD OD OD V total

Item s s Vm(ml) inicial final 1 final 2 resultante (ml)
1 A.M. mgO2/L 50 9.8 2.8 2.9 2.85 300
2 A.R.I. mgO2/L 5 9.7 2.4 2.5 2.45 300
3 A.R.D. mgO2/L 10 9.6 2.4 2.3 2.35 300
4 A.U.C.H. mgO2/L 300 9.7 9.4 9.3 9.35 300
5 A. Sub mgO2/L 250 9.5 8.9 9 8.95 300

3. Cálculo del DBO5

Ejem: DBO5 para Agua de Mar

OD i−OD f
DBO5=
P

9.8−2.85
DBO5=
50
( )
300

DBO5=41.7

OD
OD resultant P(Factor de DBO
Item Matrices Unidades inicial e dilución) (mg/L) Norma Condición
 NO
1 A.M. mgO2/L 9.8 2.85 0.17 41.7 ECA Cat 4CUMPLE
DS N°
003-2002-
2 A.R.I.(Curtiembre) mgO2/L 9.7 2.45 0.02 435 PRODUCE  CUMPLE
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DS N°003- NO
3 A.R.D.(doméstica) mgO2/L 9.6 2.35 0.03 217.5 2010 CUMPLE
LMP
DS031-  NO
4 A.U.C.H. mgO2/L 9.7 9.35 1.00 0.35 2010 APLICA
ECA Cat1
5 A. Sub mgO2/L 9.5 8.95 0.83 0.66 A1  CUMPLE

VIII. Discusiones:

Las aguas superficiales son, altamente susceptibles a la contaminación; siendo el

vertedero tradicional a lo largo de toda la historia de la industria y las poblaciones. En el
caso de los contaminantes residuos que demandan oxígeno, afectan a las corrientes de
agua como a las aguas estancadas. (Raffo & Ruiz, 2014). Esta contaminación se
identificada en la muestra de agua de mar, que resulto tener 39.17 mg/L, sobrepasando
el estándar de calidad, esto indicaría que el cuerpo de agua está siendo afectado por los
vertientes industriales y domésticos a lo largo del tiempo. Cerca del 75% de los sólidos
en suspensión y del 40% de los sólidos filtrables de un agua residual de concentración
media son de naturaleza orgánica. (Raffo & Ruiz, 2014). La materia orgánica presente
son fracciones relevantes que se dan de los elementos contaminantes en las aguas
residuales domésticas y municipales debido a esto se refleja como la causante del
agotamiento de oxígeno de los cuerpos de agua. (Roa et al., 2014), este agotamiento se
vio reflejado en las dos muestras de agua (ARD y AM), que son las que tiene el valor
más bajo de OD resultante, el agua residual no está siendo tratada adecuadamente lo que
ocasiona el consecuente deterioro de la calidad en el cuerpo receptor que se vierte. Tal
como lo menciona (Works, 2015) un agua residual típica contiene materia orgánica en
gran concentración, como ya se evidenció en la toma de muestras, esto es significativo
en varios aspectos: ecológicamente, al descargar esta agua en un cuerpo receptor como
un lago o río, la materia orgánica es degradada por los microorganismos y ocasiona que
se consuma el oxígeno, matando a la fauna acuática. Desde un punto de vista sanitario,
la materia orgánica sirve para que proliferen los organismos patógenos que ya suele
contener el agua residual, de manera que cuanto más contaminada, mayor el tiempo y el
peligro que representa como foco de infección. Cabe recalcar que el agua residual
industrial de curtiembre cumple con los parámetros de calidad ambiental siendo esta una
industria que genera efluentes con alta concentración de materia orgánica el tratamiento
que se realiza viene siendo eficaz y evita el deterioro de la calidad ambiental del cuerpo
receptor.

IX. Conclusiones:
 Ing.
FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Ambiental
PRÁCTICA DE LABORATORIO

X. Recomendaciones:

XI. Referencias Bibliográficas:

 STANDAR METHODS. For the examination of water and wastewater. 22 ND.

Edition. 2012.

XII. Anexos: