Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Bioquímica General
Práctica #1 Determinación de aminoácidos terminales con grupo alfa amino libre (Método
de Sanger), Díaz Rodríguez Alexis y , Grupo: 4QV1 Sección 2

Introducción: Discusión:

En el procedimiento para establecer la Se calcularon los Rf de cada mancha, sin

secuencia aminoácido, son muy importantes
los métodos usados para identificar los restos
de aa terminales. El primero en lograr esto
fue Frederick Sanger, el cual diseñó un
método por el cual consiste en un marcaje
del amino terminal a través del uso de 2,4-
dinitrofluorobenceno (DNFB). Este es un
compuesto de color amarillo que reacciona
con los grupos amino libres en condiciones
básicas formando el dinitrofenil (DNP),
también reaccionara con los grupos imidazol,
fenolicos y ɛ-amino, por lo que se daría una
dinitrofenilación en la cadena lateral como en
caso de la tirosina, histidina y lisina, y al
hidrolizar el péptido que esta dinitrofenilado
se da una ruptura total de los enlaces
peptidicos y se da un hidrolizado que
contendra aminoácidos libres y DNP
derivados que se conservan intactos ya que
ese enlace es más difícil de romper.
antes mencionar lo que es el Rf, es la
movilidad que tiene un compuesto en este
caso un aminoácido con respecto a un
disolvente. Además, como ya sabemos se
calcula de la siguiente manera: La relación
entre la distancia recorrida de un aminoácido
con respecto a la distancia del disolvente,
desde el sitio marcado para la mezcla de
aminoácidos.
Conclusión:
Preguntas Extras:
➢ Grupo amino terminal de la
hemoglobina
R.- Grupo amino terminal de la valina NA1

Objetivos:
❖ Utilizar el método de Sanger para
identificar el grupo alfa-amino terminal
de la hemoglobina.

Resultados: Referencias:
● Luis Franco Vera. (2010). LA
Tabla 1. Distancia recorrida con sus Rf correspondientes. HEMOGLOBINA: UNA MOLÉCULA
Problema DNFB DNP -ala DNP -val DNP -asp PRODIGIOSA. 5/09/21, de Real
Academia de Ciencias Exactas,
Distancia
(compuesto) 5-11 5 5-9 5-11 5-15
Físicas y Naturales. Departamento de
Distancia
(eluyente) 16.2 16.2 16.2 16.2 16.2 Bioquímica y Biología Molecular,
Rf
Universidad de Valencia. Sitio web:
0.31- 0.31 0.31- 0.31- 0.31-
0.68 0.55 0.68 0.93 https://rac.es/ficheros/doc/00906.pdf
● Victor, R. (2019). HARPER

BIOQUIMICA ILUSTRADA (31.a ed.).

Fig. 1 Representación de la cromatografía con la distancia
(cm).
McGraw-Hill.
● Trudy, M. (2020). BIOQUIMICA LAS

BASES MOLECULARES DE LA VIDA.

McGraw-Hill.