INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Laboratorio de Ecología Microbiana

Grupo 4QV2
Sección 2 Equipo 1 y 4
Integrantes: Mendoza Fernández Nailea
Díaz Rodríguez Alexis
Velasco Cruz Jocelyn Perla

Práctica 10 "Ciclo del nitrógeno"

OBJETIVOS
● Determinar experimentalmente los principales procesos metabólicos
involucrados en el ciclo del nitrógeno.
● Enumerar las formas fisiológicas de las bacterias involucradas en estos
procesos, en diferentes muestras de suelo.

RESULTADOS

Tabla 1. Número de Microorganismos representantes de los procesos del ciclo del nitrógeno.

96𝑔−92𝑔 88.5𝑔−85𝑔
%𝐻 = 10
𝑥100 = 40% %𝐻 = 10
𝑥100 = 35%

Tabla 2. Número Más Probable de Microorganismos Amonificadores.

Equipos Microorganismos Amonificadores
de la
sección 2 Diluciones Tubos positivos por No. NMP NMP/g NMP/g
Dilución característico (valor de (B.H.) (B.S.)
tablas)

1 10-2 10-3 10-4 3 3 1 331 460 4600 7.07x10^3

4 10-2 10-3 10-4 2 3 1 221 28 280 4.3x10^2

460 28
𝐵/𝐻 = 100
𝑥1000 = 4600 𝐵/𝐻 = 100
𝑥1000 = 280
 Fig. 1 Gráfica más probable de microorganismos amonificadores

Tabla 3. Número Más Probable de Microorganismos Nitrificantes Fase 1 (Nitritación).

Equipos Microorganismos Nitrificantes Fase 1 (Nitritación)
de la
sección 2 Diluciones Tubos positivos por No. NMP NMP/g NMP/g
Dilución característico (valor de (B.H.) (B.S.)
tablas)

1 10-1 10-2 10-3 1 0 0 100 4 40 61.5

4 10-1 10-2 10-3 0 0 0 000 <3 <30 <46.1

Fig. 2. Gráfica número más probable de microorganismos nitrificantes (Fase I).

 Tabla 4. Número Más Probable de Microorganismos Desnitrificadores.
Equipos Microorganismos Desnitrificadores
de la
sección 2 Diluciones Tubos positivos por No. NMP NMP/g NMP/g
Dilución característico (valor de (B.H.) (B.S.)
tablas)

1 10-3 10-4 10-5 3 1 3 313 160 1.6x10^4 2.46x10^4

4 10-3 10-4 10-5 0 1 3 013 12 1.2x10^3 1.84x10^3

Fig. 3 Gráfica número más probable de microorganismos desnitrificadores.

DISCUSIÓN

La amonificación es el proceso por el cual los compuestos nitrogenados

encontrados en el suelo, productos de la descomposición de materiales orgánicos y
son degradados a compuestos simples por organismos que habitan el suelo,
principalmente bacterias y hongos. Estos microorganismos metabolizan estos
compuestos y liberan el exceso de nitrógeno en forma de amoníaco o ión amonio,
es decir, la conversión del nitrógeno que en la materia viva aparece principalmente
como grupos amino (-NH2 ) o imino (-NH-) a ion amonio. Los microorganismos que
pueden realizar la amonificación producen ureasa y dan como producto final el
amoníaco, observamos en la Fig 1, de acuerdo a los resultados, actividad
proteolítica por lo cual poseen una gran cantidad de nitrógeno el cual es utilizado
por los microorganismos que pueden realizar la amonificación.
Lo que se observó fue que a partir del amonio reacciona formando nitritos; esto se
verificó adicionando los reactivos de Griess A y B, que es Acido Sulfanilico y
naftilamina respectivamente, que van a reaccionar en presencia de los nitritos
formando p-sulfobenceno--naftilamina que producen un cambio de coloración de
rosa a rojo. Cuando un tubo dio negativo hay dos posibilidades, que no se haya
transformado a nitritos o que haya pasado a nitratos; si paso esto último se adiciona
granalla de Zinc para reducir los nitratos a nitritos y al observar un cambio en la
coloración se consideró un tubo positivo, pero si no sucedía ningún cambio se
consideró negativo porque no se degrado el sulfato de amonio. Se puede observar
que la estación más reducida de estos microorganismos se ve favorecido de
acuerdo a la adición de materia orgánica rica en proteínas como las aguas
residuales del río, que permite que aumente la tasa de nitrificación, además de que
estos microorganismos nitrificantes no pueden desarrollarse satisfactoriamente en
altos porcentajes de humedad, y con esto es normal que la cantidad de colonias
resultantes disminuya.
En el proceso de proteólisis se observó y cuantificó las colonias de microorganismos
que tienen actividad proteolítica en el medio de agar leche, mediante la formación
de halos opalescentes alrededor de las estas. Obteniendo que en la estación 5 hubo
la mayor proporción de microorganismos con actividad proteolítica, esto nos indica
que se llevó a cabo una mayor degradación de la caseína por los microorganismos
mediante la producción de caseínas que asimilan para su crecimiento y desarrollo;
sin embargo en la estación 7 se obtuvo la menor actividad proteolítica, esto es
debido a que en la estación no se encontraba una gran diversidad microbiana para
que otros microorganismos se encargaran primero de la reducción asimilatoria del
nitrógeno.

El proceso de desnitrificación, el cual es estrictamente anaeróbico, es un proceso

perjudicial para la agricultura; sin embargo para el tratamiento de aguas residuales
es beneficioso ya que convierte el NO3 - en N2 , disminuyendo significativamente la
cantidad de nitrógeno. La desnitrificación es empleada, en los procesos técnicos de
depuración controlada de aguas residuales, para eliminar el nitrato, cuya presencia
favorece la eutrofización y reduce la potabilidad del agua, porque se reduce a nitrito
por la flora intestinal, y éste es cancerígeno.

El proceso de desnitrificación se cuantificó en el medio para desnitrificadores

notándose microorganismos nitrificantes produciendo N2, el cual es devuelto a la
atmósfera completando el ciclo del nitrógeno.
CONCLUSIÓN

● El ciclo del nitrógeno es muy importante para mantener el equilibrio en la vida

de las plantas en el planeta, ya que es la principal fuente de nitrógeno para
estas.
● Los microorganismos simbiontes también son de gran importancia para las
plantas ya que captan el nitrógeno gaseoso y por medio de una ruta
metabólica lo degradan de formas aprovechables para las plantas y
mantienen niveles adecuados de nitrógeno.
● Los microorganismos metabolizadores de nitrógeno son muy importantes al
degradar al nitrógeno en su forma más simple, el nitrógeno que se encuentra
en los desechos y el resto de los seres vivos, que son incorporados al ciclo.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué factores pueden alterar el número de microorganismos

involucrados en el ciclo del nitrógeno?
La temperatura, el pH, la concentración de oxígeno disuelto, nutrientes
inorgánicos, materia orgánica y sustancias tóxicas.
2. La adición de fertilizantes nitrogenados puede tener consecuencias en
los procesos globales de contaminación . Indique cuáles consideraría
usted son estas consecuencias.
La contaminación de las aguas por nitratos, eutrofización y emisión de gases
a la atmósfera.
3. ¿Cuáles son las ecuaciones químicas que se llevan a cabo en cada uno
de los procesos biológicos analizados?
Proteolisis:

Amonificación:
 Nitrificación:

4. ¿Qué funciones tienen los bacteroides y la leghemoglobina en la

fijación biológica simbiótica del nitrógeno?

● La leghemoglobina es una proteína que contiene una porción de hemo. La

subunidad hemina es producida por las bacterias, mientras que la globina es
formada por la planta. La leghemoglobina es responsable del color rojo de los
nódulos activos, sirve para limitar la concentración de oxígeno dentro del
nódulo; ya que de esta forma las bacterias reciben suficiente oxígeno para
sobrevivir y se evita que la nitrogenasa se inactive por el oxígeno.
El bacteroide dentro del nódulo lleva a cabo la fijación del nitrógeno
atmosférico. La leghemoglobina se utiliza como transportador de electrones,
suministra oxígeno a los bacteroides para la producción de ATP.

REFERENCIAS
● Las actividades humanas han cambiado para siempre el ciclo del nitrógeno
de la Tierra. (s. f.). Agencia SINC.
https://www.agenciasinc.es/Noticias/Las-actividades-humanas-han-cambiado-
para-siempre-el-ciclo-del-nitrogeno-de-la-Tierra#:%7E:text=Fertilizar%20exce
sivamente%20los%20suelos%2C%20la,genera%20mayores%20niveles%20d
e%20contaminaci%C3%B3n.
● Vega Oliva, C. (s. f.). Problemas Ambientales y de Salud Derivados del uso
de Fertilizantes Nitrogenados. Facultad de Farmacia Universidad
Complutense.
http://147.96.70.122/Web/TFG/TFG/Memoria/CRISTINA%20VEGA%20OLIVA
.pdf