INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA GENERAL
Práctica No. 8 “Separación de fosfolípidos por cromatografía en capa fina” Olvera Medina Saul.
Romero Moreno Michael. Grupo: 3IM2 Sección 1
INTRODUCCIÓN.
Los lípidos son moléculas que son hidrofóbicas, por lo tanto, son
moléculas no polares por esta característica, los lípidos se clasifican
en complejos y simples. Los lípidos complejos tienen ácidos grasos
por lo que son saponificables; se dividen en triacilglicéridos,
esfingolípidos, fosfoacilglicéridos y ceras. Mientras que los simples
son derivados del isopreno y no son saponificables. entre ellos se
encuentran; el colesterol, hormonas sexuales, ácidos biliares y
algunas vitaminas.
Los triacilglicéridos también se conocen coloquialmente como
“grasas”, químicamente son ésteres de glicerol y ácidos grasos; de
estos podemos tener un monoglicérido, diglicérido y un
triglicérido. En estas clasificaciones podemos tener ácidos grasos
saturados o insaturados; los saturados lineales, por ello son sólidos
a temperatura ambiente y los insaturados aumentar la fluidez
tienden a ser líquidos a temperatura ambiente. Su función principal
es de reserva energética. Los lípidos pueden cambiar en su función
estructural si a este se le adhiere un grupo fosfato, entonces se
denominará “fosfolípido”, este es una estructura elemental de todas
las membranas biológicas. Si en la estructura funcional se adhiere
un carbohidrato, entonces se denominarán glucolípidos.
OBJETIVOS.
◉ Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina para la
separación de los fosfolípidos de la yema de huevo.
◉ Comparar los rf teóricos de los diferentes lípidos, con los
obtenidos en la cromatografía en capa fina.
◉ Comprender la función de cada uno de los reactivos que se
aplicaron a los cromatogramas.
RESULTADOS.
*Hoja Anexa.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
Se llevaron a cabo 4 cromatogramas en capa fina a una yema de
huevo, para la identificación de distintos tipos de fosfolípidos
presentes en la misma, por cada cromatografía cada mancha se
sacó una lectura de cada reactivo.
Ninhidrina: Este reactivo se utiliza para revelar fosfolípidos
que contienen grupos amino. En nuestra cromatografía reveló
manchas de color violeta como la mancha de la
fosfatidiletanolamina (mancha superior en Figura 1.) y la liso
fosfatidilserina (mancha inferior en Figura 1).
Molibdato: Este reactivo se une con el grupo fosfato haciéndolo
reaccionar para identificar fosfolípidos en general, en el
cromatograma se revelaron manchas de color azul.
Bismuto: La prueba de bismuto nos ayuda a revelar fosfolípidos
que contienen colina, los cuales se vieron en el cromatograma,
de color amarillo-naranja. En la prueba se revelaron los lípidos
neutros (parte superior de color amarillenta) y la
fosfatidilserina y la fosfatidilcolina (parte media).
Yodo: Los cristales de yodo revelan lípidos que tengan dobles
enlaces en su molécula. Estos se vieron de color café; en la
muestra se revela la presencia de esfingomielina y se observan
las manchas de dicho color.
CONCLUSIONES.
-La técnica de cromatografía en capa fina es la ideal para la
separación e identificación de algunos fosfolípidos.
-La yema de huevo de gallina tiene los lípidos neutros; Fosfatidil-
etanol-amina, fosfatidilserina, fosfatidilcolina (Lecitina),
esfingomielina y lisofosfatidilcolina.
-El reactivo de Molibdato es específico para grupos fosfato de
fosfolípidos en general, aunque igual puede identificar azucares
fosforiladas.
-El reactivo bismuto es específico para fosfolípidos con grupos
colina.
-La ninhidrina identifica grupos amino en los fosfolípidos.
-Para fosfolípidos con dobles enlaces, el reactivo específico es el
Yodo.
BIBLIOGRAFIA:
• In Wade L. “Química orgánica volumen 2 “, Editorial
Pearson 7ma Edición. México D.F 2011, PP. 160-191.
• Nelson, D., and Cox, M., Lehniger Principles of
biochemistry. Estados Unidos: Worth Publishers, 2000.
• McKee, T. (2003). “Bioquímica, la base molecular para
la vida”. Ed. Mc GrawHill-Interamericana. México
ANEXO
1.- Tabla de rf teóricos Esquema de Bismuto.

Fosfolípido Rf (teórico)

Lisofosfatidil colina 0.17

Esfingomielina 0.26

Fosfatidil colina 0.33

Fosfatidil serina 0.33

Fosfatidil etanolamina 0.71

Lípidos neutros 1.0

2.- Cromatogramas
Esquema de Yodo.

Distancia total del disolvente: 5.5 cm

3.- Tabla de rf prácticos

Esquema de Molibdato.
Fosfolípido Rf (práctico) :
distancia/5.5
Lisofosfatidil colina 0.2

Esfingomielina 0.24

Fosfatidil colina 0.36

Fosfatidil serina 0.36

Fosfatidil etanolamina 0.63

Lípidos neutros 0.98

Esquema de Ninhidrina.