INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTE DE BIOQUÍMICA
PRÁCTICA: SEPARACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA
FINA &DETERMINACIÓN DE COLESTEROL EN LA YEMA DE HUEVO
NOMBRE: RODEA CORREA DANIEL, VALENCIA CORTÉS LAURA MARIANA
SECCIÓN 2 GRUPO: 2OM2

OBJETIVO Fig. 2 Curva Tipo para la concentración de

 Aplicar la técnica de cromatografía colesterol
en capa fina para la separación de
los fosfolípidos de la yema de huevo
 Discutir las ventajas de separación
respecto a la cromatografía en papel
 Determinar y discutir la
concentración de colesterol en la
yema de huevo.

RESULTADOS
Fig. 1 Resultados y Cálculos de Rf

Muestra Cálculos Rf Identificación DISCUSIÓN

Molibdato M1 = 4.2/5.5 M1 = Fosfatidil Se utilizó para los dos experimentos una
=0.76 etanolamina porción de yema de huevo de gallina, a esta
M2 = 2.9/5.5 = M2 =Fosfatidil se le realizo una cromatografía en capa fina,
0.52 Serina para identificar los diferentes fosfolípidos
M3 = 0.9/5.5 = M3 = Fosfatidil presentes en la misma. Según las manchas
0.163 Colina de la cromatografía, se esperaría según la
bibliografía consultada que el reactivo
Bismuto M1 = 2.9/5.5 = M1 = Fosfatidil Molibdato identifica fosfolípidos en general, el
0.52 Colina de Bismuto identifica fosfolípidos que
M2 = 1.3/5.5 = M2 = contienen colina. Ninhidrina, esta prueba
0.23 Esfingomielina identifica grupos amino. El Yodo identificaría
M3 = 0.6/5.5 = M3 = Lisofatidil a Esfingomielina y Trioleína (Química
0.10 Colina Biológica, 2010). En la Fig. 1 se informa el
tipo de fosfolípido identificado en cada
Ninhidrina M1 = 3.9/5.5 = Fosfatidil reactivo utilizado, comparado con nuestros
0.70 etanolamina resultados, en la prueba de Molibdato nos
M2 = 2/5.5 = Fosfatidil dieron como resultado Fosfatidil etanolamina,
0.36 Serina Serina y Colina, el cual fueron fosfatos en
general. En Bismuto, se identificaron
Fosfolípidos con Colina. En Ninhidrina se
revelaron: Fosfatidil etanolamina, y serina.
Yodo M1 = 5/5.5 0 Lípidos Finalmente en la prueba de Yodo, se observó
0.90 Neutros que identificó Lípidos neutros, fosfatidil
M2 = 2.2/5.5 = Fosfatidil Colina y Lisofosfatidil Colina. Esto quiere
0.40 Colina decir que los errores presentes en la
M3 = 0.7/5.5 = Lisofosfatidil identificación de fosfolípidos, como en la
0.12 Colina Serina en la prueba de Ninhidrina, se
explican que podría ser una de las
desventajas de este método, así como la
difícil interpretación de manchas específicas,
ya que la localización de dichas manchas
depende del analista y están sometidas al
error humano.
CONCLUSIÓN

BIBLIOGRAFÍA
 Química Biológica. 2010. Disponible
en:
https://qcabiologica.files.wordpress.c
om