Medios Cromogenicos Laboratorios Microkit

MICROKIT CROMOKIT®
Medios de cultivo cromogénicos

En MICROKIT® somos pioneros (desde 1991) en diseño y fabricación de los más variados medios
cromogénicos para análisis microbiológicos de alimentos, aguas, cosméticos, superficies y aire:
Línea CROMOKIT ®. Tanto en deshidratado, como en todo tipo de formatos de medio preparado.
Tanto en medios agarizados, como en caldos de despistaje negativo de alta fiabilidad. Tanto en
medios selectivos, como en medios generales que necesitan mayor contraste colonias/medio.
Son medios enzimáticos, no sólo bioquímicos, por eso son mucho más fiables que los clásicos. Si una
colonia es del color indicado, la probabilidad de que sea el microorganismo diana aumenta del 70% al
99,5%, como media. Eso ahorra ingentes cantidades de reactivos posteriores (sólo se usan en las
colonias del color indicado) y eso ahorra todo el tiempo gastado en confirmar los falsos positivos
de los medios clásicos. Ya hay varios medios cromogénicos que han entrado en Normativa ISO,
pero nuestro I+D avanza mucho más rápido que la burocracia. Adelántese al futuro: ya es presente.
¡Nuestra innovación es suya!
RAPIDTEST Broth MU GPL US Cfs.Agar MCC Broth

Diferentes tonos de viraje en función de la carga E.coli: colonias azul-violetas, Coliformes: Caldo azul turquesa.
microbiana total y el tiempo de incubación demás coliformes: colonias rosas E.coli: Fluorescente bajo luz UVA de 366 nm
e indol (anillo rojo) positivo
CHROMOSALM Agar T.B.X. Agar CHROMOCYTOGENES Agar

Salmonella: colonias verde-azuladas E.coli: colonias verde-azuladas Listeria monocytogenes: colonias verdes con
falsos positivos de otros medios (Proteus, Citrobacter y halo, Rhamnosa positivas y Xylosa negativas
demás enterobacterias): colonias negras o incoloras
PCA-Cromogenic Agar YEA-Cromogenic Nutrient Agar
PCA-MILK-Cromogenic Agar
En los tres medios las colonias rojas Colonias sin contraste en
contrastan con el color del medio, las PCA-Milk clásico
partículas, las burbujas y la membrana.
: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

www.microkit.es E mail: microkit@microkit.es www.medioscultivo.com
MICROKIT CROMOKIT®
Medios de cultivo cromogénicos
XBC Agar (Mossel Prep/MYP con Cromokit SDA Caf (Sabouraud Dextrose Rapid Pseudomonas Agar (Agar Cetrimida
cromógeno): En presencia de Bacillus Agar Caf con cromógeno): Tanto levaduras con cromógeno): Detección confirmativa de
cereus, el medio vira de salmón a fucsia (Rhodotorula mucilaginosa, foto izquierda) alerta previa de Pseudomonas aeruginosa en sólo
y las colonias son azules o violetas como mohos (Aspergillus niger, foto derecha) 18 horas, por colonias rojas y posterior fluorescencia
se detectan antes y mejor, por su contraste
azul con el medio
Colicult-Plus (Caldo ISO-9308 con BCPT cromogénico: Detección HRS Rapid Agar , detección de Bacillus
cromógeno adicional): Despistaje de E.coli de las cepas del complejo Burkholderia sporothermodurans y otras esporas resistentes
(viraje a verde sin malinterpretaciones de cepacia, colonias fucsia y viraje a UHT: colonias rojas en forma de volcán en las
fluorescencia; e indol rojo) y demás Coliformes alrededor del medio salmón a fucsia primeras 36 horas
(viraje a amarillo) en 100-250 mL de agua
Cromokit CP, detección y recuento de Clostridium perfringens, Pseudocult P/A convertido en recuento NMP en 100-250 mL
sin que el ennegrecimiento del medio (como sucede en TSC) de agua: los pocillos positivos para Pseudomonas aeruginosa
enmascare colonias (ni su reversión a crema, cuando el medio son rosas, no sólo fluorescentes
pierde la anaerobiosis, como sucede en TSC) provoque dudas
sobre falsos negativos.
Cromokit X-Staph, detección y recuento de

Staphylococcus aureus (colonias azul oscuro)
frente a otros estafilococos (colonias azul claro) o
Bacillus spp. (colonias enormes, azul claro)

RAPIDTEST
MICROKIT
Tubos preparados para la rápida evaluación
¡Pasión por la creatividad!
de la carga microbiana
Este kit, permite realizar una estimación rápida, sencilla y económica del
contenido microbiano (recuento total de bacterias) en todo tipo de productos
(alimentos, lácteos, aguas, materias primas, productos químicos, orina...).
Con los tubos de RAPIDTEST podrá valorar en sólo unas horas los contenidos
bacterianos altos (sólo si son mayores de 1.000 ufc/inóculo, podrá saberlo en
menos de 12 horas), sin necesidad de aparataje (incluso se puede sustituir la Izquierda, positivo,
Derecha negativo
estufa de cultivos por el bolsillo del pecho, que estará a 35ºC).
RAPIDTEST se basa en reacciones metabólicas microbianas, que alteran las

moléculas cromogénicas incluidas. El cambio se traduce a simple vista por un
viraje del medio, de color amarillo a rojo púrpura y el caldo turbio, opaco al final
(si el producto analizado tiene color propio, el viraje puede ser al color derivado
de su mezcla; por ejemplo, la leche, blanca, hace virar el medio a rosa).
.
Sin la existencia de actividad metabólica microbiana con crecimiento de la
población, no puede tener lugar el viraje, con lo que se eliminan los falsos
positivos de otros métodos. El viraje es más rápido cuanto mayor sea la carga de
flora microbiana (sólo 2-3 horas en muestras muy contaminadas, con más de 108
bacterias por mililitro). Siempre que el contenido bacteriano sea superior a
1.000 ufc/mL, se obtienen resultados el mismo día!. . En leche vira a rosa
en vez de a rojo
Las muestras menos contaminadas se pueden concentrar por filtración (0,45 µm),
introducir la membrana enrollada en el tubo de RAPIDTEST con 15 ml de caldo cromogénico y
extrapolar los resultados a los mililitros filtrados, siempre que se concentren más de 1.000 ufc/membrana
para conocer el resultado positivo en menos de 13 horas.
La incubación puede hacerse a temperatura ambiente (ideal 18-25ºC), pero el kit vira mucho más rápido
si se realiza 35-37ºC (en un incubador, ej. MICROKIT Ref: SIL12AR). Una vez elegida la temperatura
de incubación, no debe ser variada, para que los resultados de los diferentes lotes de su producto sean
comparables. Si en su laboratorio la temperatura ambiental varía a lo largo del año, téngalo en cuenta
para obtener resultados más fiables.
El test puede ser realizado por personal no especializado, por lo que incluso industrias sin
laboratorio, pueden ya realizar un screening rápido de la carga microbiana de sus proveedores -materias
primas- y de su producto terminado. Es muy fácil de utilizar.
Cada tipo de producto, según su contenido en grasas, conservantes, transparencia, etc. tendrá un
comportamiento diferente con el test, por lo que debe validarse el kit en cada tipo de muestra. Para un
mismo tipo de producto, la correlación entre el tiempo requerido para el viraje y la carga microbiana, es
constante. Por ello, si para un producto determinado se establece el tiempo de viraje en función de
diferentes niveles de contaminación, puede estimarse la contaminación de las muestras simplemente
con el tiempo de viraje. .
Para validar el kit con su producto, tome una muestra muy contaminada y realice 10 diluciones
decimales en tubos 9 ml APTN (MICROKIT TPL110), para así obtener una población total de 10
submuestras. De cada una de ellas siembre 1 ml en un tubo de RAPIDTEST y, además 1 ml, en masa,
en placa preparada DryPlates-TC (MICROKIT DPP001). Incube todo a una temperatura concreta
(ideal 35ºC) y compare resultados, registrándolos mediante una tabla cuyas ordenadas muestren el
recuento en placa tras 48h de incubación y cuyas abscisas muestren el tiempo de viraje de
RAPIDTEST en horas. .

MICROKIT RAPIDTEST
¡Pasión por la creatividad!
En MICROKIT podemos realizar gratis esta validación en su producto concreto, sólo necesitamos que
pida 10 cajas de 20 tubos Rapidtest y nos envíe su producto, se lo haremos sin cargo a cambio de
emplear para ello 1 de las 10 cajas de su pedido. Ejemplo realizado en carne (no extrapolar a otros tipos
de muestras y validar el kit para cada una de ellas):
UFC/gr
8
10
7
10
6
10
5
10
4
10
3 1 2 3 4 5 6
10
2 Diferentes tonos de viraje en función de la carga
10 microbiana y el tiempo de incubación:
1
10 1: inicio, negativo,
horas que tardó 2: comienzo del viraje (si su muestra es incolora, este tono ya
RAPIDTEST le sirve para estándar de viraje y acelerar asi su decisión),
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 en virar a rojo 3 y 4: viraje más avanzado,
5 y 6: viraje completo y final a rojo-opaco
De modo que en carnes, cuando RAPIDTEST vire en 2 horas, indicará que hay nada menos que 10 8
microorganismos por gramo, cuando vire en 3 horas indicará que hay 10 6 , cuando vire en 7 horas
indicará que hay 10 5 y cuando vire en 13 ó más horas indicará que hay como máximo 10 3
microorganismos por gramo de muestra.
MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS
1. Añadir a un tubo 1 ml del producto o, en productos sólidos, 1 ml de la solución madre (disolución de

1 gramo en 10 ó 100 ml de agua peptonada tamponada neutralizante MICROKIT; en este caso, los
resultados se multiplicarán por 10 ó 100), o bien la membrana de filtración enrollada. Los productos
congelados o refrigerados tardan mucho más tiempo en producir el viraje, por lo que deben
atemperarse antes de homogeneizarse e inocularse. Si precalienta su muestra a 35ºC acelerará el
resultado. . .
2. Incubar a 35-37 ºC. Si puede hacerlo con agitación, o agitar de vez en cuando, el resultado se
acelerará.
3. Controlar el tiempo de viraje a rojo. El cambio de color se inicia por un rosado turbio del tubo,
que se intensifica y extiende más adelante con un tono rojo vino tinto y opaco.
4. Compare con su tabla de validación las horas de viraje para interpolar de forma inmediata cuál sería
el recuento en placa convencional. Si no desea mirar la estufa a intervalos cortos de tiempo,
establezca cuál es el valor límite por encima del cual el producto no es válido y acuda a la estufa una
vez transcurrido dicho tiempo; si el tubo ha virado con turbidez, el lote no será aceptable y si no lo
está, sí. Si RAPIDTEST está rosa, el lote está muy cerca de su valor de tolerancia. .
Caducidad: se entrega recién fabricado, con 6 meses de vida útil. Cajas de 20 tubos. Ref: KAJ001.
Conservar entre 4 y 21ºC, PROTEGIDO DE LA LUZ! No congelar

Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: microkit@microkit.es
Web: http://www.microkit.es
Blog: www.medioscultivo.com
Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
MCC P/A COSMETIKIT® DRY PLATES® MUGPLUS
CRIOTECA® CHROMOSALM DESINFECTEST® CCCNT
PLAQUIS® KITPRO-PLUS CROMOKIT® MBS
M-IDENT® SEILAGUA® SALMOQUICK AIRESANO
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT® PAU-14 AGAR (PathoChrom Alimentos Universal Agar)

Agar cromogénico para aislamiento selectivo de los patógenos más típicos en alimentos
INTRODUCCIÓN
La Ley General de Sanidad exige en alimentos la ausencia de patógenos. Hacía falta un medio que reuniese la mayoría de patógenos que
provocan de forma habitual retiradas de mercado de alimentos (son 14), con la consecuente pérdida económica, de imagen mediática en incluso de
carácter penal de las marcas implicadas. Y MICROKIT lo ha conseguido: PAU-14 Agar detecta los 14 patógenos que más retiradas de mercado
provocan a nivel Universal: Bacillus cereus, Aspergillus spp, E.coli, otros coliformes patógenos (Klebsiella spp, Enterobacter spp, Citrobacter
spp…), Enterobacterias patógenas aparte de los coliformes (Proteus mirabilis, Salmonella spp, Shigella spp, Serratia spp…), Enterococos fecales,
Pseudomonas aeruginosa y Vibrio parahaemolyticus. Total, 14 de los patógenos más típicos en alimentos. Sólo faltaría agregar los medios
adecuados para otros 6: Campylobacter jejuni, Clostridium perfringens, L.monocytogenes, St. aureus, Vibrio cholerae y Yersinia enterocolitica.
10 de los patógenos alimentarios más típicos, detectados en 36 horas por estría directa desde el caldo de enriquecimiento en PAU-14 Agar. Arriba, de Izda
a Dcha: E.coli, Shigella flexneri, Staphylococcus hominis, V.parahaemolyticus, Klebsiella pneumoniae. Abajo, de Izda a Dcha: Enterobacter gergoviae
B.cereus, Enterococcus faecalis, Aspergillus flavus, Salmonella enteritidis. No es un medio diferencial de colores espectaculares, pero si crece alguna
colonia rojiza, es sumamente probable que se trate de un patógeno típico de alimentos: sólo hay que confirmarla!
De este modo, con solo un medio de aislamiento (PAU-14 Agar) tras el enriquecimiento, cualquier laboratorio puede detectar
específicamente los 14 patógenos más comunes en alimentos (sin contar los 6 antes mencionados: Campylobacter jejuni, Clostridium
perfringens, L.monocytogenes, St. aureus, Vibrio cholerae y Yersinia entrerocolitica) que sólo detectaría con otros 14 medios de cultivo clásicos,
aparte de los 6 para éstos. Imagine la cantidad de tiempo, dinero, trabajo, espacio, estufas, residuos… que se va a ahorrar cuando sustituya los
medios específicos para cada uno de esos 14 patógenos, por uno solo: PAU-14 Agar.
COMPOSICIÓN
Factores nutritivos 16,0
Sales diversas 7,10 g
Agar-agar 15,0 g
Mix de agentes selectivos c.s.
Mezcla cromogénica c.s.
(Fórmula por litro)
pH final: ajustar a 7,2 ± 0.2
PREPARACIÓN
Disolver 38,5 g de medio en 1 L de agua bidestilada.
Remover para homogeneizar, calentando hasta Colonias rojas en PAU-14 Agar: 14 de los 20 patógenos más típicos de alimentos
ebullición sin parar de remover. AUTOCLAVAR a
121ºC durante 15 minutos. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando suavemente. No volver a fundir, dispensar en placas Petri estériles
1
y dejar solidificar. El color del medio es suavemente anaranjado. Las placas, si están bien cerradas en bolsas autosellables para evitar su
deshidratación y contaminación, pueden almacenarse hasta un mes fuera de nevera, en la oscuridad, las plaquis herméticas de MICROKIT hasta 6
meses ¡no congelar!
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE DE POLVO ANTES DE USAR PARA HOMOGENEIZAR LOS
GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS DIFERENTES COMPONENTES, POSIBLEMENTE FORMADOS DURANTE SU
ALMACENAMIENTO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. MANTENGA LAS PLAQUIS,
TUBOS Y FRASCOS PREPARADOS FUERA DE LA NEVERA, EN COMPLETA OSCURIDAD.
PRESENTACIÓN
-MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT516)
-Plaquitas herméticas y apilables 55 mm (PLAQUIS ®) Ref: PPL950
-Placas de 90 mm Ref: ECOP07
-Tubos preparados 18 mL para preparar una placa de 90 mm o 2-3 plaquis de 55 mm con cada tubo (TPL550)
-Frascos preparados 100 mL para preparar 5 placas de 90 mm o 10-15 plaquis de 55 mm con cada frasco (RPL550)
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras
desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la
etiqueta,...).
DESHIDRATADO: Polvo crema ligeramente rosado PREPARADO: Estéril, levemente anaranjado
CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 35°C aproximadamente y pre-identificación inmediata:
Bacillus cereus WDCM 00001, Correcto, colonias rojizas, Neogram positivas, catalasa positivas
Enterococcus faecalis WDCM 00087, Correcto, colonias rojizas, Neogram positivas, catalasa negativas
Escherichia coli WDCM 00012, Correcto, colonias rojizas, Neogram negativas, oxidasa negativas, indol positivas
Salmonella enterica typhimurium WDCM 00031, Correcto, colonias rojizas, Neogram negativas, oxidasa negativas, indol negativas
Shigella flexneri MKTS-SH1, Correcto, colonias rojizas, Neogram negativas, oxidasa negativas
Vibrio parahaemolyticus WDCM00037, Correcto, colonias rojizas, Neogram negativas, oxidasa +
Ver tabla de resultados con más cepas de patógenos típicos en alimentos en la página siguiente.

Sembrar en superficie sobre la placa preparada, el caldo enriquecido (Ej: Buffered Peptone Neutralizing Water, BPW…). Si lo desea, puede hacer
una estría en media placa con asa de 10 µL y otra en la otra media placa con asa de 1 µL para aumentar la probabilidad de aislar colonias puras.
Generalmente tras 36-48 h de enriquecimiento en los caldos mencionados, se detecta bien cualquier contaminante con asa de 10 µL.
Incubar a 35ºC durante 36-48h.
Buscar estrías o colonias típicas (rojizas: rosa, naranja, fucsia, púrpura…), que serán casi siempre de patógenos típicamente alimentarios, por lo
que el medio sirve de alerta previa. Si se desea, se puede pre-identificar con test adecuados inmediatos (Neogram KIN001, Oxidasa KOT050,
Catalasa KMT299, Coagulasa KWD094…) y, una vez orientados con éstos sobre el grupo al que pertenecen las colonias, usar galerías u otros test
adicionales. También se puede usar, en sólo 18h, Cromokit ID Agar (DMT523). Lógicamente buscar 14 patógenos, dará más trabajo de
confirmación, pero podremos asegurar lo que realmente nos pide la legislación: la ausencia de patógenos propios de los alimentos. Sobre todo si
enriquecemos en Buffered Peptone Neutralizing Water de Microkit, según se ha demostrado en intercomparación.
Patógenos en PAU-14 AGAR tras pasar cada cepa 36h por 12 h 18h 36 h 48h
BPNW, a 35ºC, a diferentes tiempos (12-48h) a 35ºC a 35ºC a 35ºC a 35ºC
WDCM 00053 Aspergillus niger brasiliensis + + + +
WDCM00001 Bacillus cereus + +
WDCM 00006 Citrobacter freundii + + +
WDCM 00175 Enterobacter aerogenes + + + +
WDCM 00087 Enterococcus faecalis + + + +
WDCM 178 Enterococcus faecium + + +
DSMZ 20160 Enterococcus hirae + + +
WDCM 00013 Escherichia coli +
WDCM 00196 Escherichia coli + + + +
WDCM 00090 Escherichia coli +
WDCM 00012 Escherichia coli + + +
WDCM 00097 Klebsiella aerogenes (Raoultella planticola) + + + +
DSMZ 5175 Klebsiella oxytyoca + + + +
WDCM 00206 Klebsiella pneumoniae (K.variicola) + + + +
MKTS-BCN1 Pantoea agglomerans salvaje + +
DSMZ 9245 Pluralibacter gergoviae + + + +
WDCM 00023 Proteus mirabilis + + +
WDCM 00025 Pseudomonas aeruginosa + + + +
WDCM 00117 Pseudomonas putida + + +
WDCM 00030 Salmonella enterica ssp enteritidis + + +
WDCM 00031 Salmonella enterica ssp typhimurium +
DSMZ 30121 Serratia marcescens +
MKTS-SH01 Shigella flexneri salvaje +
PECJJT Staphylococcus hominis salvaje + + +
WDCM00037 Vibrio parahaemolyticus + +
DOBLE BENEFICIO: DETECTE TODOS LOS PATÓGENOS TÍPICOS DE ALIMENTOS Y AHÓRRESE 14 MEDIOS DE CULTIVO ADICIONALES, más el
tiempo, dinero, trabajo, espacio, estufas, residuos… que eso le cuesta. Ventaja adicional: PAU-14 Agar es más económico que pedir por separado los 14 medios
para todos los patógenos alimentarios, incluso de las marcas más baratas. Y sólo se necesitan 38,5 g/L, por lo que 1 bote de 500 g cunde para elaborar 13 L, es decir,
722-867 placas de 90mm, 1.083 placas de 55mm o bien nada menos que 2.167 PLAQUIS® herméticas y apilables de MICROKIT (Ref: VDA002).
¿14 de los 20 patógenos alimentarios en un solo medio? ¡PAU-14 AGAR es casi un milagro! Todo un homenaje a la creatividad cuando se reúnen varios expertos
multidisciplinares con el objetivo común de ayudar a cumplir la auténtica legislación. ¡Haga que su laboratorio vuele al Siglo XXI!
El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado durante su análisis, según la legislación medioambiental
vigente: Autoclavar antes de desechar en la basura.
Diseñado y fabricado por MICROKIT, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, desde el 27 de Junio de 2022.
2
Inventar no es suficiente; además hay que adaptarse
a las necesidades de los usuarios.
LISTERIA CHROMOCYTOGENES
(Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR
AHORRE TIEMPO Y PLACAS....

¡NO DEJE QUE SU DINERO SE ESCAPE!
Por qué usar este medio deshidratado?
Independencia, al no someterse a la espera de importaciones/programaciones de placas preparadas

Disponibilidad, al evitar la necesidad de tener sobrestocks
Economía, al no tener que tirar placas caducadas
Larga caducidad, al ser medio deshidratado
Posibilidad de siembras en masa de 1ml...
Además:
No hay falsos positivos de cocos Gram + como en Palcam y Oxford, lo que ahorra tiempo y dinero
por no tener que confirmar colonias que luego no son de Listeria.
Listeria monocytogenes, crece verde y con halo, lo que nos ahorra perder tiempo y dinero por no
tener que confirmar colonias de otras Listeria no patógenas.
En Agosti Listeria and Ottaviani Agar, la -glucosidasa de

Listeria spp, provoca la aparición de colonias verde-azuladas.
La fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provoca un
halo de precipitación alrededor de sus colonias verdes.
Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de

provocar halo, se requiere confirmación de las colonias
Rhamnosa +/Xylosa -, con el kit KMT012.
CHROMOCYTOGENES Agar base DMT700.

Tubos preparados base TPL700.
Suplemento cocktail estéril SMT700.
Plaquitas herméticas del medio completo PPL970.
COMPOSICIÓN: La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la ISO 11290
CONTROL DE CALIDAD: Listeria monocytogenes: Colonias verdes con halo; con

respecto a PCA estandarizado, recuento 277-424% pero de forma selectiva y diferencial.
(+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

Empresa COLICULT-MCC COSMETIKIT® DRY-PLATES®
certificada CRIOTECA® CHROMOSALM DESINFECTEST®
ISO 9001 PLAQUIS® KITPRO-5S CROMOKIT®
desde 1997 M-IDENT® SEILAGUA® MUGPLUS
CROMOKIT X-STAPH AGAR

Medio cromogénico para detección y recuento diferenciales de Staphylococcus aureus, validado en muestras
de alimentos, cosméticos, aguas, superficies y aires.
S.aureus, colonias azul índigo o magenta (según cepa) S.epidermidis y otras especies: colonias azul turquesa
¿Sabía que de acuerdo con los servicios intercomparativos SEILA para alimentos, cosméticos y aguas, los
medios más usados para Staphylococcus aureus crean un porcentaje aberrante de falsos resultados, con
sensibilidades y especificidades inferiores al 70%?
Por fin puede terminar con el grave problema generalizado de falsos positivos y falsos negativos propios del
Baird Parker, del rpf y del Mannitol Salt Agar. Por eso MICROKIT ha diseñado un nuevo medio cromogénico,
que fulmina este problema.
En la validación interna realizada en 80 muestras de flora mixta, la sensibilidad obtenida con

CROMOKIT X-STAPH Agar ha sido del 100% (ningún falso -) y la especificidad también del 100%
(ningún falso +). Límite de detección demostrado desde 4 ufc/inóculo (aunque en realidad será 1 ufc, pero la
distribución contagiosa de los microorganismos impide normalmente demostrar valores inferiores a 6 ufc). En los
servicios intercomparativos en que los laboratorios han participado con este medio, desde su diseño en Octubre
de 2012, también demuestra esta excelencia de resultados sin falsos positivos ni falsos negativos propios de los
demás medios. Esta validación intercomparativa ha sido auditada por terceros (TÜV Rheinland en nuestra
certificación ISO 9001 y Prysma calidad en la auditoría de validación UNE-EN ISO 16140:2003/A1:2012), por lo
que se debe considerar certificada.
Algunos Bacillus pueden crecer con colonias grandes, turquesa; si son habituales en sus muestras, añada
polimixina B (SMS009) para que no crezcan.
Puede sembrar en masa (ideal), en superficie (reparto con asa Digralsky para recuentos o estría para
aislamientos), o también torundas o membranas de filtración.
Para aislamientos tras enriquecimiento, recomendamos el caldo Mannitol (DMT165) mucho mejor que el
clásico Giolitti-Cantoni.
Incubar a 35-37 ºC, durante 18-48 horas.
Si lo que busca son estafilococos coagulasa positivos, realice un látex coagulasa (KWD094) a las colonias
sospechosas (pequeñas, de colores azul índigo, azul turquesa o magenta).
Termine de una vez con la incertidumbre de los análisis de estafilococos en muestras no clínicas, en
productos donde se encuentran en estado letárgico o subletal, a causa de los tratamientos para erradicarlos
(alimentos, cosméticos, aguas, superficies y aire).

 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR)

La presencia de esporas altamente resistentes al calor de Bacillus
sporothermodurans en leche pasterizada por el método Ultra Hight Temperature (UHT)
se ha convertido en un problema importante en la industria láctea. Su presencia se
considera indeseable, ya que obstaculizan los requisitos de esterilidad comercial. En un
estudio (APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2005, p. 1480–1494), se han evaluado, mediante
el uso de un selectivo tratamiento térmico de 30 minutos a 100°C, la presencia,
fuentes, y naturaleza de las esporas potencialmente muy resistentes al calor en la
leche cruda. Se detectaron altos números de estas esporas en la tela del filtro del
equipo de ordeño y en muestras de cultivos y forrajes verdes. Se aislaron
aproximadamente 700 cepas después del calentamiento selectivo. La colección de
cepas mostró una notable diversidad, con representantes de siete géneros que forman
esporas aerobias. Las más frecuentes esporas aisladas de leche UHT han sido Bacillus
sporothermodurans (aerobio facultativamente anaerobio), Brevibacillus borstelensis,
Paenibacillus lactis, Bacillus sphaericus, Bacillus licheniformis, y Brevibacillus brevis. El
23% de las 603 cepas formadoras de esporas pertenecen a 18 nuevas especies. La
reducción de esta carga de esporas por buenas medidas higiénicas durante el ordeño
probablemente podría reducir aún más el nivel de contaminación de la leche cruda, y
de esta manera reducir al mínimo el recuento aeróbico de formadores de esporas de
bacterias que podrían conducir al deterioro de la leche y los productos lácteos.
Las HRS (Heat Resistant Spores) o más coloquialmente “termorresistentes”,
aparecen en muestras de leche UHT, sobre todo si el método de tratamiento térmico
es “indirecto” (intercambiador de calor). Los métodos “directos” con inyección de
vapor sobrecalentado son más eficaces, pero estas esporas también aparecen de vez
en cuando. No son un problema para la salud (son microorganismos de riesgo
biológico 1: sin riesgo para la salud) y aparentemente no alteran la leche, de modo que
nos hemos acostumbrado a beber leche contaminada por estos microorganismos. El
problema no es para el consumidor sino para la imagen de la industria.
MICROKIT ha desarrollado un medio de cultivo cromogénico, derivado del Plate
Count Agar ISO 4833, con factores “doping” que permiten la visión de estas esporas
germinadas en forma de colonias, que suelen ser diminutas y rojas, gracias a un
cromógeno termoestable. El medio no es selectivo para B. sporothermodurans, de
modo que también crecen en el mismo Bacillus licheniformis, Bacillus sphaericus y los
demás esporulados alterativos de la leche UHT: las esporas termorresistentes (HRS).
Pero se denomina así por el mayor conocimiento que tiene la industria láctea de la
denominación “B. sporothermodurans” que de las siglas HRS.
1
COMPOSICIÓN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g Obsérvese
Glucosa 1,0 g la forma
de volcán
Factores doping MICROKIT 8,0 g de las
Agar-agar 10,5 g colonias,
rojas, de
Cromógeno en frasco anexo c.s. Bacillus
(Fórmula por litro) sporother-
modurans
pH final: 6,8 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a
116°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y añadir asépticamente 2 ml pinchados
del suplemento estéril anexo (MIXCROM). No refundir. El color final del medio es
blanco-crema. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna
al crema cuando se plaquea, lo cual no afecta los resultados. Si lo desea, puede añadir
trazas de vitamina B12 cuando el medio se está enfriando a 47-50ºC, aunque ya están
incorporadas en el medio deshidratado. Si prefiere obtener colonias grandes, añada 37
g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Si desea una cierta selectividad en leche cruda,
añada a 1 L de medio, cuando se está enfriando a 47-50ºC, 10 ml de un frasco
pinchable de polimixina B (MICROKIT SMS009). O mejor someta a la leche cruda a un
calentamiento UHT para eliminar toda la flora acompañante.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN
LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT532

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que
varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras
conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la
fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema
PREPARADO: Estéril, Crema
EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-72 h a 37-55 ºC o bien 3-5 días a
30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:
Bacillus sporothermodurans MKTD 10599, Excelente, pequeñas colonias rojas o fucsia,
redondas, con forma de volcán (boina), PR >90% de colonias respecto al TSA.
Bacillus subtilis WDCM 00003, Excelente, colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas, PR
>90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Bacillus cereus WDCM 00001, Excelente, colonias céreas, fucsia, enormes, lobuladas,
PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Enterococcus faecalis WDCM 00009, Excelente, colonias pequeñas, rojas, redondas,
con márgenes incoloros, PR >90% de colonias respecto al TSA.
Staphylococcus aureus WDCM 00032, Excelente, colonias rojo burdeos, grandes,
redondas, mucosas, PR >90% de colonias respecto al TSA.
Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia, por lo que indicamos la
Universal WDCM según ISO 11133-2:2014 y la Colección de Cepas Nativas Tropicales.
2
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (100 g, 500 g, 5 Kg).
Recuento total de bacterias esporuladas en leche UHT y otros alimentos UHT (lácteos,
gelatina, forraje…). Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja,
púrpura.... sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas
levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los
distingue de los aerobios). El color de las colonias no afecta a las pruebas de
identificación posteriores que quisiera realizar.
Ver tambien la versión rápida de este medio (HRS Rapid Cromokit Agar DMT534)
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1 ml de muestra de leche y su serie de diluciones decimales, en masa,
para detectar precozmente la posible contaminación del lote, con esporas de este
microorganismo (o bien estriar en superficie muestras ya alteradas).
Si se desea analizar la leche antes de la UHT, añada a cada L de medio 10 ml de
Polimixina B (frascos pinchables MICROKIT SMS009), cuando está enfriándose a 47-
50ºC, para eliminar buena parte de la flora acompañante. La polimixina es un
antibiótico polipeptídico producido por una cepa de Bacillus polymyxa, activo frente a
Gram negativos, ya que rompe violentamente su membrana plasmática. Atención: los
iones Ca++ inhiben su acción. Aunque el mejor agente selectivo es el calor UHT, para
buscar sólo sus supervivientes, con este medio (sin suplementos de antibióticos). De
modo que para analizar leche cruda, es mejor someterla a un calentamiento similar a
UHT antes de sembrarla en el medio de cultivo, a fin de eliminar la flora acompañante.
Incubar una placa a 30 ºC aproximadamente durante 3-5 días, e incubar otra
placa a 37 y/o 55 ºC aproximadamente, durante 48-72 horas. Buscar las colonias rojas
y pequeñas típicas de B.sporothermodurans, aunque cualquier otro tipo de colonia que
aparezca, también demuestra una UHT deficiente. La recuperación supera el 20% por
encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a
ciertos factores doping descubiertos y agregados por MICROKIT. Esta fórmula, con
menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al
permitir una mejor oxigenación del fondo de la placa. Este medio está diseñado para
siembra en masa de productos que han sufrido esterilización UHT, de modo que los
resultados no son concluyentes en productos no-UHT, con numerosos falsos positivos
(sobre todo si no se añade polimixina B). Si desea sembrar en superficie, utilice 32 g/l
de este mismo medio, en lugar de 27 g/l. Para minimizar la desecación en muestreos
de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas
(MICROKIT SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de
autoclavar.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los

microorganismos según la legislación medioambiental vigente.
Autoclavar antes de desechar a la basura.
Medio recalentado,
rosado. Aún así se
distinguen perfectamente
las colonias, de un rojo
más intenso
Medio diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 2015, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en X-2020
3
ANEXO FOTOGRÁFICO
B.sporothermodurans en Maxim Agar Cromogénico (MICROKIT BCD515) en 3 días a 35ºC
B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532). Obsérvese el mayor tamaño

de las colonias en 3 días a 35ºC, que con lupa ya muestran su forma de volcán
B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532) al que hemos añadido 37 g/L

de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Obsérvese el espectacular tamaño de las colonias en 3 días
a 35ºC, que muestran a simple vista su forma de volcán
4
Mix de Acidolácticas en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT Bacillus cereus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT
DMT532+SMS009): Colonias blancas o muy ligeramente rosadas DMT532+SMS009): Colonias céreas, enormes, fucsia, lobuladas
Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT
DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas DMT532+SMS009) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth
(MICROKIT DMT022): Colonias enormes, fucsia, lobuladas
Enterococcus faecalis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT Listeria monocytogenes en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT
DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y
borde incoloro, aspecto similar a Listeria monocytogenes borde incoloro, aspecto similar a Enterococcus faecalis
Staphylococcus aureus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT Shigella flexneri en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT
DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, mucosas, redondas DMT532+SMS009): único Gram negativo testado que crece, con
colonias enormes, fucsia, lobuladas
5
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT BACILLUS CEREUS AGAR

Medio cromogénico para recuento diferencial de B.cereus y otras especies
relacionadas de Bacillus en alimentos (Con base de Agar Mossel CENAN,
ICMSF, ISO 7932:2004, ISO 21871:2006).
COMPOSICIÓN
Peptona péptica de carne 10,0 g

Extracto de carne 1,0 g
D-Mannitol 10,0 g
Cloruro sódico 10,0 g
Rojo Fenol 0,025 g
Mezcla cromogénica 3,2 g
Agar-agar 15,00 g
pH final: ajustar a 7,1 ± 0,2
PREPARACIÓN B.cereus, colonias blancas, céreas, con centro azul-

verdoso, con o sin el típico viraje de medio a fucsia.
Disolver 49,2 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta
ebullición para su disolución. Se puede autoclavar 15’ a 116ºC. El color final
del medio es salmón, transparente. Para conseguir selectividad, enfriar a 50 ºC
y añadir asépticamente 10 ml de Polimixina B 106UI (Ref: SMS009,
reconstituidas en 100 ml de agua estéril, o mejor 50 ml de yema con
polimixina Ref: SAJ001 para retener más tiempo el color del posible halo, al
volverse el medio más opaco). Mezclar y repartir en placas, sin recalentar. Si
se desea detectar especies como B.coagulans, B.pumilus, B.subtilis (colonias
verdes o verde-amarillentas), B.megaterium (colonias amarillas y mucosas)...
no añadir la polimixina, Pero entonces crecerán otros Gram positivos, a
menudo con colonias azules, como los enterococos.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN
CERRADO EN LUGAR SECO FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE
USAR. CODIGO: DMT505
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (500 g y 100 g); Tubos preparados (sin
yema-polimix) con 12 meses de caducidad; PLACAS PREPARADAS con 3 meses de
1
caducidad; PLAQUIS PREPARADAS con 6 meses de caducidad (las fechas indicadas son a
su recepción por el laboratorio, no sobre fabricación, ya que se fabrica bajo pedido).

fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, asalmonado PREPARADO: Estéril, salmón
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24-48 horas a 30 ºC
aproximadamente:
Bacillus cereus WDCM 00001 Excelente, Colonias grandes, aplanadas, con centro
azul claro. Halo de medio que suele virar a fucsia a su alrededor. Inoculando 100 ufc
de este microorganismo en este medio, crecen al menos 50 colonias típicas.
Bacillus thuringiensis MKTA10792**, Excelente, crece con colonias similares a las
de B.cereus y halo de medio que suele virar a fucsia a su alrededor, pero los bordes
de las colonias son irregulares.
Staphylococcus aureus WDCM00034, Excelente, Colonias amarillas.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido completamente.
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
SIEMBRA
Las placas no deben estar recién hechas, ya que en este medio hay que dejarlas
enfriar más de una hora para que la superficie quede bien dura. Sembrar en
superficie 0,1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, extendiendo
con un asa de Digralsky (VCL155, VRR154). Esta siembra es ideal para
máximo recuento de microorganismos muy aerófilos como B.cereus. Incubar
24-48 horas a 30 ºC aproximadamente.
INTERPRETACIÓN
Contar como B.cereus todas las
colonias planas, céreas, con centro
azul y bordes regulares, con o sin
viraje fucsia alrededor, ya que la
mezcla cromogénica es específica para
este subgrupo. Dado que B.cereus y
B.thuringiensis son bioquímicamente
idénticas, el aspecto de sus colonias en
este medio también lo es, aunque Estría de Bacillus cereus: azul con borde blanco y medio con
su típico viraje de salmón a fucsia
B.cereus crece con márgenes lisos,
regulares, mientras B.thuringiensis lo hace con márgenes irregulares, con
pequeños lóbulos. Tambien B.anthracis, algunas de cuyas cepas son el agente
del letal ántrax, se considera por Bergey de este mismo grupo B.cereus.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación
medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde X-2012, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en XI-2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR (BASE + frasco MIXCROM)

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Burkholderia cepacia en aguas, cosméticos y otras
muestras, con base BCPT Agar.
COMPOSICIÓN
Polipeptona bacteriológica 6.00 g
Piruvato sódico 6.00 g
Dihidrógeno fosfato potasio 4.35 g
Hidrógeno fosfato sodio 1.42 g
Sales biliares 1.50 g
Amonio sulfato 1.00 g
Magnesio sulfato 0.20 g
Sulfato férrico amónico 0.01 g
Rojo fenol 0.02 g
Detección en las primeras 24 horas. Izda: Pseudomonas
Cristal violeta 0,01 g aeruginosa, colonias rojas grandes. Dcha: Burkholderia
Agar-agar 12.0 g cepacia, colonias rojas pequeñas. Medio salmón-crema.
Mezcla cromogénica en frasco c.s.
Supl. Selectivo en frasco c.s.
pH final: ajustar a 6.2 ± 0.2
PREPARACIÓN
Disolver 32,5 g de medio en 1 litro de
agua bidestilada. Calentar hasta ebullición,
agitando hasta la total homogeneización. No
sobrecalentar. Autoclavar a 121 ºC durante 15
minutos. Enfriar a 45-50 °C. Añadir 2 ml/L
pinchados del frasco de suplemento
cromogénico MIXCROM, agitar y dispensar en
placas. Si se desea hacer el medio más selectivo Crecimiento a las 48 h: medio fucsia. Izda: Pseudomonas aeruginosa,
colonias rojas grandes y con márgenes lobulados. Dcha: Burkholderia
para análisis en aguas, añadir 14 ml de solución cepacia, colonias rojas menores y con márgenes redondos.
BCPT Suplemento estéril selectivo (SMT301,
que contiene Polimixina B (150.000 UI/L) y Ticarcilina (500,0 mg/L). Para máxima selectividad y evitar falsos
positivos de Sphingomonas spp. y Moraxella spp., se puede añadir Gentamicina, aunque forman colonias diminutas y
diferentes a las típicas de Burkholderia cepacia. En cambio Ochrobactrum anthropi y Delftia acidovorans sólo
resultan distinguibles mediante identificación molecular, ya que las galerías comerciales dan, igual que este medio,
falso positivo de B.cepacia.
Los antibióticos polimixina y ticarcilina del suplemento SMT301 restringen la productividad de algunas cepas
de B.cepacia, por lo que no conviene usarlos para recuentos ni en cosméticos. Además todas las colonias crecidas en
estos medios (base BCPT) sin suplemento selectivo, que han sido enviadas a nuestro servicio de identificación
molecular, han sido siempre de patógenos emergentes como lo es Burkholderia. Para detección por estría tras
enriquecimiento (para analizar muestras cosméticas de escasa carga microbiana), si se deben usar con los antibióticos,
porque no hay que contar colonias y así se evitan muchos falsos positivos.
La incorporación desde USP-2019 del complejo B.cepacia (CBC, con B.cenocepacia y B.multivorans) en el
control rutinario de medicamentos, nos demuestra que este medio es mucho más fácil de interpretar que el BCPT
1
clásico (sin cromógeno) y sirve de magnífico complemento al BCSA que recomienda esta Farmacopea, para evitar
falsos negativos. Igual que en Salmonella, deberían emplearse dos medios para el CBC: BCSA y BCPT-cromogénico.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE
BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT555
NOTA: Antes Pseudomonas cepacia, Burkholderia cepacia es una especie muy resistente que agrupa numerosas
cepas de bacilos Gram negativos, Oxidasa positivos (a menudo oxidasa-lentos), No Fermentadores de Glucosa,
Móviles. Algunas cepas pueden crecer en Agar Cetrimida sin fluorescencia y en Agar CN. Muchas cepas no crecen a
más de 35°C. En TSA algunas cepas crecen con colonias regulares, redondeadas, blanquecinas, crema o amarillas.
Deben identificarse molecularmente (MICROKIT SFI004), ya que las galerías bioquímicas no son nada fiables en este
tándem de cepas denominado B.cepacia. Debe el nombre genérico a su descubridor y el específico, a haber sido
descubierta infectando cebollas (Allium cepa), aunque se encuentra también en aguas y biofilms. Es una de las
bacterias más versátiles que se conocen, capaz de usar más de 200 compuestos como nutrientes, entre los cuales se
encuentran antibióticos, desinfectantes, pesticidas, hidrocarburos aromáticos policíclicos (HPA), tricloroetileno,
policlorobifenilos, ftalatos... además de producir sus propios antibióticos para suprimir el crecimiento de otros
competidores, así como matrices especiales para generar biofilms, lo que la hace extremadamente difícil de erradicar.
Es frecuente como saprófito en aguas, ambientes húmedos y suelos. Se emplea en biorremediación de
contaminaciones y en control de plagas fúngicas agrícolas, pero tambien algunas cepas son serios patógenos
oportunistas en infecciones nosocomiales. Parece que junto a otros Pseudomonadinos esta bacteria fué, desde el
Arcaico, corresponsable del paso de la vida a Tierra, al sintetizar ciertas macromoléculas que actúan como inductores
de la lluvia.

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3
meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya
llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo, rosado
PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros del hierro
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35°C aproximadamente:
Burkholderia cepacia MKTN10743**, Crece abundantemente y deprisa, con colonias burdeos (rojo vinto tinto), redondeadas (no lobuladas),
con viraje alrededor del medio salmón a rosa-fucsia. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 294 % en medio sin antibióticos.
Burkholderia cepacia MKTA 25416, Crece con colonias blancas, amarillas o asalmonadas, vira el medio de debajo de las colonias a rosa-fucsia,
sobre todo a las 48h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 275-294 % en medio sin antibióticos.
Burkholderia cepacia MKTD 50181, Crece con colonias fucsia, vira el medio de debajo de las colonias a rosa-fucsia, desde las primeras 24h.
Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 291-295 % en medio sin antibióticos.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Algunas cepas crecen con colonias burdeos grandes, lobuladas, con viraje del medio alrededor de
salmón a fucsia y fluorescencia a las 48h. Ciertas cepas de P.aeruginosa crecen mejor que en Cetrimida, lo cual convierte este cromogénico en
aliado para la búsqueda más efectiva de todas sus cepas. El 100% de colonias sospechosas recibidas en nuestra ID genética de clientes, que no
eran cepas de B.cepacia, eran de otros patógenos del agua/biofilm, por lo que el medio es excelente para screening de patógenos no
fermentadores.
Bacillus subtilis WDCM 00003, Inhibido Staphylococcus aureus WDCM 00032, Inhibido
Escherichia coli WDCM 00013, Inhibido
* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.
2
Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 24 h una de ellas es más salmón que roja.
Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 48 h todas son fucsia-rojas, pero de
diferentes tonalidades. Y el viraje del medio salmón a fucsia es muy diferente de unas a otras cepas tipo.

Sembrar en estría sobre la placa preparada una alícuota del cosmético (previamente diluido y enriquecido en LPT
Neutralizing Broth u otro caldo similar que sea neutralizante de todos los conservantes empleados actualmente y a la
vez enriquecedor). En agua, sembrar una membrana por la que se hayan filtrado 100 ml). Incubar a 30-35°C durante
24-72 horas, ideal 48 h. Verificar el crecimiento de una estría roja intensa o de colonias rojas de 1,5-2 mm de
diámetro, con o sin halo fucsia en el medio. Identificar por ID molecular (MICROKIT SFI004). El recuento/ml será la
suma de los recuentos de las tres placas (por filtración, el recuento será el número de colonias/los 100 ml filtrados). De
todas formas, no debe aparecer ni una sola colonia confirmativa en 1 g de cosmético enriquecido ni en 100 ml de agua
farmacéutica o cosmética.
El recuento a 24h y a 48 h es similar, solo unas pocas colonias más a las 48h (11% en la cepa de NCTC, 7% en la cepa
de DSMZ) y significativo: 70% en la cepa de ATCC.
3
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT555) + suplemento cromogénico MIXCROM (en frasco
pinchable estéril anexado al bote de polvo) y suplemento opcional en frasco pinchable estéril 100 ml (SMT301) c.s.p.7
litros de medio final. DryPlates-BCPT (DPP015), que en realidad son el origen de este medio cromogénico que ahora
también ofrecemos deshidratado. Placas preparadas 90 mm con (PPLM56, mejor para detección por estría tras
enriquecimiento) o sin (PPLM56NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de antibióticos. Plaquis herméticas
55 mm con (PPL942, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPL942NS, mejor para recuentos en
aguas) el suplemento de Antibióticos.
B.cenocepacia (B.cepacia complex) en BCPT cromogénico: se observa mucho más nítidamente que en BCPT clásico
B.multivorans (B.cepacia complex) en BCPT cromogénico: se observa mucho más nítidamente que en BCPT clásico
El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la
legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar en la basura.
Diseñado y fabricado en la UE en deshidratado por MICROKIT, desde Noviembre de 2016, en DPP desde Diciembre de 2013, bajo ISO 9001, ISO 11133 y
GMPs. Texto revisado: 06-10-2020
4
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT C.PERFRINGENS AGAR

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Clostridium perfringens en aguas, alimentos y muestras clínicas.
COMPOSICIÓN
Extracto de levadura 9.00 g Recuperación 100% en Cromokit C.perfringens Agar
(Izda() frente a un 20% del TSC Agar oficial (Dcha).
Sales mix 6.00 g Obsérvese el gran tamaño colonial y su color naranja, que
Agar-agar 15.0 g no desaparece como el negro en TSC al oxigenarse el
Mezcla cromogénica 1.40 g medio tras la incubación en anaerobiosis.
Mezcla selectiva 3.50 g
Atención: Bote de 100 g (para elaborar 2 litros de medio) y 2
suplementos adjuntos (se añadirán en frío 2 g/L del suplemento
1 y 0,12 g/L del suplemento 2)
PREPARACIÓN
.
Disolver 50,0 g de medio en 1 L de agua bidestilada.

Remover para homogeneizar, calentando hasta ebullición sin
parar de remover. AUTOCLAVAR a 121ºC durante 15
minutos. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando .
.
suavemente.
Añadir 2 g del suplemento 1 en 20 mL de agua bidestilada que no esté fría. Agitar hasta su total disolución.
Esterilizar por filtración con filtro de 0,45 µm (por ejemplo con jeringa y filtro de carcasa VHU237). El color final de
esta solución es marrón.
Añadir 0,12 g del suplemento 2 en 1 mL de agua bidestilada que no esté fría. Agitar hasta su total disolución.
Esterilizar por filtración con filtro de 0,45 µm (por ejemplo con jeringa y filtro de carcasa VHU237).
Añadir los 20 mL de la solución estéril del suplemento 1 y el 1 mL de la solución estéril del suplemento 2 al
1L de medio enfriado a 45-50ºC. Remover para homogeneizar.
Dispensar en placas Petri estériles y dejar solidificar. Las placas pueden almacenarse hasta un mes en nevera
¡no congelar! si están bien cerradas en bolsas autosellables, para evitar su deshidratación y contaminación.
DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT565- (bote de 100 g), incluye anexo suplementos selectivo + cromogénico
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. Y EL SUPLEMENTO

REFRIGERADO A 4-8ºC. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
NOTAS
Clostridium perfringens no es solo un patógeno de por sí (el agente causal más frecuente de la gangrena gaseosa,
además responsable de numerosas toxiinfecciones alimentarias -enteritis necrótica- a causa de sus toxinas); es además
el indicador de contaminación por aguas naturales, ya que su hábitat es el barro del fondo de los lagos y el intestino de
los animales de sangre caliente, incluido el hombre y con especial concentración en el perro. Y la presencia de sus
esporas demuestra la probable presencia de enterovirus y quistes de protozoos (Giardia, Cryptosporidium,
Entamoeba…)
1
Los medios diseñados hasta ahora se basaban en reacciones bioquímicas muy poco específicas: m-CP por cambios de
pH, TSC/TSN por reducción del hierro a sulfuro, que también pueden hacer muchas Enterobacterias…y además
revierte a colonias grises o blancas cuando se agota la atmósfera de anaerobiosis. Hacía falta un medio enzimático que
subiera la especificidad por encima del 95% y mantuviera las colonias del color diferencial incluso después de
agotarse la atmósfera anaerobia y tras sacar las placas de la jarra/bolsa de anaerobiosis; y MICROKIT lo ha
conseguido.

llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...).
DESHIDRATADO: Polvo crema PREPARADO: Estéril, crema
CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 37°C aproximadamente:
Clostridium perfringens WDCM 00007, Colonias naranjas. PR > 0,7 respecto al número de ufc certificadas e
inoculadas en TSC.
Clostridium perfringens WDCM 00174, Colonias naranjas. PR > 0,7 respecto al número de ufc certificadas e
inoculadas en TSC.
Enterococcus faecalis WDCM 00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
E.coli WDCM 00013, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
Artefactos: pueden aparecer grumos, que no afectan a rendimiento del medio.
Pueden aparecer falsos positivos de Clostridium sordelii, que se distinguen fácilmente con el indol o la prolina

Sembrar en superficie sobre la placa preparada:
a) La membrana filtrada en el caso de aguas y bebidas. No emplear membranas de acetato de celulosa, de
polietersulfona o de policarbonato; úselas de nitrato de celulosa, ésteres de celulosa o nylon.
b) Las diluciones decimales de la muestra de alimento, repartidas con asa de Digralsky
c) La muestra clínica por estría
Como en todos los medios para anaerobios, es muy necesario, inmediatamente después de la siembra, añadir encima
una segunda capa de agar-agar bacteriológico tipo E y exento de inhibidores (BCB006) autoclavado y enfriado a 45-
50ºC, para evitar el contacto del inóculo con el oxígeno del aire, hasta que la atmósfera de anaerobiosis generada
alcance el nivel óptimo. Y añadir 100 mL de caldo tioglicolato (RPL066) a los 100 mL de agua para que la filtración
sea menos estresante para este anaerobio estricto.
Si la placa ha sido mantenida en la nevera, debe dejarse atemperar antes de la siembra.
Si se buscan esporas en vez de formas vegetativas, según UNE-EN 26461-2, calentar la muestra de 100 ml de agua 15
minutos a 70-80 ºC, enfriar y filtrar después
Incubar a 37ºC durante 24h en atmósfera de anaerobiosis (KKT001 en bolsas ó KKM036 en jarras) y controlar la
correcta anaerobiosis con Anaerotest KKM039).
Confirmar las colonias típicas (naranjas) con M-Ident-C.perfringens (KMT008). La flora acompañante crece con
colonias azules, incoloras o no crece.
PRESENTACIÓN
MEDIO DESHIDRATADO 100g (DMT565-) y suplementos 1 y 2 anexos; c.s.p.2 L de medio final.
Plaquitas semiherméticas 55 mm en cassettes, referencia PPL965 (en cassettes entra la anaerobiosis y sale el oxígeno
del aire, pero se retrasa la desecación del medio, lo que aumenta enormemente su caducidad)
Fabricado en la UE en deshidratado y en PLACAS por MICROKIT, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, desde Septiembre de 2018, actualizado el
26/04/2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT CAMPY AGAR

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Campylobacter en alimentos, aguas y muestras clínicas,
en base a la Norma ISO 10272-1:2006.
COMPOSICIÓN

Extracto de levadura 9.00 g
Sales mix 9.00 g
Agar-agar 15.0 g
Colonias típicas de
Mezcla cromogénica 1.10 g Campylobacter spp.
Mezcla selectiva 1.10 g en este medio
Atención: Bote de 100 g (para elaborar 2 litros de medio) y suplemento adjunto (añadir 0,21 g/L)
PREPARACIÓN
Disolver 50,0 g de medio en 1 L de agua bidestilada. Remover para homogeneizar, calentando hasta ebullición
sin parar de remover. NO AUTOCLAVAR. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando suavemente.
Añadir 210 mg del suplemento en 10 mL de agua bidestilada que no esté fría. Agitar hasta su total disolución.
Esterilizar por filtración con filtro de 0,45 µm (por ejemplo con jeringa y filtro de carcasa VHU237).
Añadir los 10 mL de esta solución estéril de suplemento al 1L de medio enfriado a 45-50ºC. Remover para
homogeneizar.
Dispensar en placas Petri estériles y dejar solidificar. Las placas pueden almacenarse hasta un mes en nevera
¡no congelar! si están bien cerradas en bolsas autosellables, para evitar su deshidratación y contaminación.
DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT560- (bote de 100 g), incluye anexo suplemento selectivo + cromogénico
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. Y EL SUPLEMENTO

REFRIGERADO A 4-8ºC. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
1
NOTAS
Las diferentes cepas de Campylobacter spp. son la causa principal de las toxiinfecciones alimentarias con
gastroenteritis humanas en el mundo, donde se suele culpar falsamente al agente causal como Salmonella spp. De
modo que la incidencia actual de Campylobacter spp. está subestimada, dado que por su dificultad de análisis (al ser
un microorganismo microaerófilo), no se suele buscar en la mayoría de laboratorios agroalimentarios del mundo. Vive
en el tracto intestinal de pollos, cerdos, ganado y mascotas y también se puede transmitir por contaminación cruzada
de alimentos crudos/cocinados y por el agua. En niños menores de 2 años estas gastroenteritis debidas a
Campylobacter spp. son especialmente frecuentes y pueden causar su muerte (OMS, nota 255).
En un estudio comparativo entre este nuevo medio cromogénico, el medio Karmali con carbón (Oxoid) y Campylosel
con sangre (Biomerieux), realizado en el hospital Central de la armada de Argelia en 2016, se demuestra que el medio
cromogénico es, en cepas termotolerantes de Campylobacter (C.jejuni y C.coli), exactamente igual de sensible (100%)
que los otros dos medios clásicos, pero resulta mucho más específico (18% de falsos positivos, generalmente
Klebsiella oxytoca y Pseudomonas aeruginosa, frente al 48% del Karmali y al 57% del Campylosel). Además el
medio cromogénico se lee mejor (colonias rojas y bien aisladas, frente a las colonias de aspecto variable gris o blanco
de los otros medios en función de la edad del cultivo, que pueden ser confundidas con la flora acompañante).
llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo
PREPARADO: Estéril, crema
Campylobacter jejuni WDCM 00073 Crece con colonias rojas. Respecto a Campy charcoal Agar, recuento >70 %.
Campylobacter coli WDCM 00072, Crece con colonias rojas. Respecto a Campy charcoal Agar, recuento >70 %.
Escherichia coli WDCM00013, Inhibido
El medio no ha sido diseñado para C.fetus, que podría no crecer. C.lari sí crece adecuadamente, con colonias rojas.
Sembrar en estría sobre la placa preparada, una alícuota de la muestra de alimento enriquecida en Campy Broth. Si la
muestra es clínica o de heces, no suele precisar enriquecimiento.
Si la placa ha sido mantenida en la nevera, debe dejarse atemperar antes de la siembra.
Incubar a 42ºC durante 36-48h en atmósfera de microaerofilia (KKM037 o con el sistema de la jarra con vela). No es
necesario esperar a la incubación de 72h típica de otros medios.
Confirmar las colonias sospechosas (rojas) con el látex M-Ident Campy (KMB001) y pruebas bioquímicas.
PRESENTACIÓN
MEDIO DESHIDRATADO 100g (DMT560-) y suplemento anexo c.s.p.2 L de medio final.

Plaquitas semiherméticas 55 mm en cassettes, referencia PPL960 (en cassettes entra la microaerofilia y sale el aire,
pero se retrasa la desecación del medio, lo que aumenta enormemente su caducidad)
Fabricado en la UE en deshidratado y en PLAQUIS semiherméticas en cassette por MICROKIT, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, desde Julio de 2018,
actualizado 26-03-2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT EE AGAR (BASE)

Recuento y detección diferencial de Enterobacterias (colonias rosas) y E.coli
(colonias azules) en muestras de alimentos, cosméticos y agua.
COMPOSICIÓN
Peptonas 15,0 g
Carbohidratos 2,5 g
Agentes selectivos 0,5 g
Tampón fosfato 4,3 g
Mexcla cromogénica 0,12 g
Agar-agar 15,00 g

Suplemento SBH424: Agentes selectivos: 9,0 mg

Mezcla cromogénica: 12,5 mg
PREPARACIÓN
Disolver 19 g del medio en medio litro de agua destilada. Calentar agitando

hasta ebullición para su disolución. Autoclavar a 121ºC durante 15 minutos.
Enfriar rápidamente a 45ºC y añadir el contenido de 1 vial de su suplemento
SBH424 (previamente reconstituido con 1 ml de etanol y una vez mezclado
añadir 1 ml de agua destilada estéril, el precipitado es normal), mezclar bien y
verter en placas Petri estériles.
Si no se añade el suplemento SBH424, el medio sirve para recuento de
Coliformes (colonias rosas) y E.coli (colonias azules).
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE Y

EL SUPLEMENTO BIEN CERRADOS EN LUGAR SECO FRESCO Y
OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
1
CODIGO: DMT525
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (botes de 500 g y de 100 g)
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio

siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...)
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24 h a 37ºC
(aproximadamente) en oscuridad:
Escherichia coli WDCM00013, excelente, colonias azules.
Klebsiella pneumoniae WDCM00058, excelente, colonias rosas
Enterobacter aerogenes WDCM00175, excelente, colonias rosas
Staphylococcus aureus WDCM00034: completamente inhibido
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: completamente inhibido
SIEMBRA
Sembrar en masa 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, ya que

esta siembra es ideal para máximo recuento de microorganismos fermentadores
como son las Enterobacterias y los coliformes. Alternativamente se puede
sembrar 0,1 ml en superficie y repartir con asa de Digralsky. O también
depositar la membrana de filtración sobre la placa preparada. Incubar a 35-37
ºC aproximadamente, durante 18-24 horas. Si la flora acompañante de la
muestra se prevé muy elevada, añadir una segunda capa de medio una vez esté
sembrado y solidificado.
INTERPRETACIÓN
Contar todas las colonias rosas y azules como Enterobacterias, ya que la

mezcla cromogénica provoca esta coloración típica sólo en las colonias que
crecen en este medio y son de este grupo de microorganismos. Las colonias
azules son concretamente de E.coli. y las rosas de cualquier otra enterobacteria.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la

legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 2012, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs. Revisado 26-03-2020
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 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
ENTEROCOCCUS CROMOKIT AGAR

Agar selectivo y cromogénico para la detección y recuento de enterococos
fecales en aguas (MF) y en alimentos, en 24 h (US-EPA)
COMPOSICIÓN
Peptona 10,0 g
Extracto de levadura 30,0 g
Aesculina 1,0 g
Cicloheximida 0,05 g
Azida Sódica 0,15 g
X-Glucosido 0,75 g
Agar-Agar 15,0 g
pH final: 7,1 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 72 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta

ebullición. No sobrecalentar! Autoclavar a 121° C durante 15 minutos,
acortando los tiempos de enfriamiento. El color final del medio es crema-
ámbar.
Si se desea que el medio sea más selectivo, añadir, una vez enfriado a 47°C
aproximadamente, justo antes de verter en placas, Ac.Nalidíxico a razón de
0,24 g disueltos en 5 ml de agua estéril que contenga unas gotas de NaOH 0,1
N (para facilitar su disolución).
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR,
PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES
GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE
BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
1
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema
CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 h a 37-41°C aproximadamente:
Enterococcus faecalis WDCM00009, Excelente, colonias azules, diminutas.
PR > 0,5, en concreto >50-150% de colonias respecto al número de ufc
certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende
de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Enterococcus faecium WDCM 00010, Excelente, colonias azules, diminutas.
PR > 0,5, en concreto >50-150% de colonias respecto al número de ufc
certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende
de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00025, Inhibido completamente: Ni una sola
colonia.
Escherichia coli WDCM00013, Inhibido completamente: Ni una sola colonia.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN
Filtrar 100 ml de agua (o bien la cantidad deseada) y colocar la membrana
filtrada sobre una placa con medio. O bien sembrar en masa 1 ml de la solución
madre del alimento. Incubar a 41°C aprox durante 18-24 horas. Las colonias
azules, diminutas, son confirmativas para Enterococos fecales.
NOTA
Medio desarrollado para detección confirmativa en un solo paso, sin necesidad
de transferir membranas en dos medios, con la ventaja adicional de permitir el
recuento de enterococos fecales en las primeras 18-24 horas. La incubación a
41°C permite la detección más selectiva. La esculina es hidrolizada por los
enterococos con formación de esculetina y dextrosa. La cicloheximida inhibe la
aparición de levaduras y mohos y la Azida Sódica impide el crecimiento de
Gram negativos. El X-Glucósido es el sustrato cromogénico específico para los
enterococos glucosidasa positivos.
Medio robusto, diseñado para todo tipo de aguas (potables, envasadas, de baño,
incluidas las marinas y las de estuarios, acuarios, cetareas...) e incluso para
alimentos y avalado por la US Environmental Protection Agency (EPA).
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación

Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 2008, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT MAXIM-AGAR
CROMOGÉNICO (BASE + Supl. en frasco)
Recuento total con máxima recuperación en alimentos, aguas
y cosméticos, basado en PCA (FIL,IDF,AOAC,APHA,ICMSF),
diferenciando las colonias, incluso las más
Con este novedoso
diminutas, de las partículas y del medio.
medio de
Recuperación superior (122%) al PCA y
MICROKIT,
116% respecto al TSA.
distinguirá a simple
COMPOSICIÓN vista las colonias,
Triptona 5,0 g rojas, de las
Extracto de Levadura 2,5 g partículas de
Glucosa 1,0 g muestra y del
Factores doping MICROKIT 8,0 g medio, agilizando
Agar-agar 10,5 g los recuentos sin
Cromógeno en frasco c.s. desgastar su vista.
(Fórmula por litro) Y obtendrá
pH final: 6,8 ± 0,2 recuperaciones un
20% superiores,
PREPARACIÓN más cercanas a la
Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada. realidad.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C
durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y añadir asépticamente 2 ml pinchados del
suplemento estéril anexo (MIXCROM). No refundir. El color final del medio es blanco-
crema. A veces, por añadiré el suplemento demasiado pronto, adquiere un tono rosado que
retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados:
colonias rojas muy evidentes sobre fondo blanco-crema o rosado.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: BCD515
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen
las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta
Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica
de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema
1
EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 37 ºC o mejor 72 h a 30
ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:
E. coli WDCM00013, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 96-169
% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta
variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora
acompañante inoculada.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, colonias rojas, PR >70% en
concreto 99-165 % de colonias respecto al número de ufc certificadas e
inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la
composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Bacillus subtilis WDCM00003, Excelente, colonias rojas, PR >70% en
concreto 99-127 % de colonias respecto al número de ufc certificadas e
inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la
composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Micrococcus luteus MKTA 9341**, Excelente, Colonias rojas en 48 h, crecen
mucho más rápido y mejor que en TSA, y mejor a temperatura ambiente.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Excelente, colonias rojas, PR >70% en
concreto 99-191 % *de colonias respecto al número de ufc certificadas e
inoculadas en TSA.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente, colonias rojas.
**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos
la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Recuento total standard de bacterias aerobias en alimentos, aguas, productos farmacéuticos,
cosméticos y otros productos. Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja,
purpura.... sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras,
que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los
aerobios). El color no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en masa. Incubar a 30 ºC
aproximadamente durante 48 horas. Con flora psicotrofa, incubar a 6 ºC aproximadamente
durante 10 días y con flora termófila, incubar a 55 ºC aproximadamente durante 48 horas.
Contar todas las colonias. La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA
y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping de aerobios
descubiertos y agregados por MICROKIT. Esta fórmula, con menos agar, aumenta la
sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación
del fondo. Este medio está diseñado para siembra en masa. Si desea sembrar en superficie,
añada 3-5 g/l de Agar-Agar (BCB006), o utilice 30-32 g/l de este mismo medio. Para
minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir
2 gotas de antiburbujas (SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de
autoclavar. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un
duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX
sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente.
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 2014, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Octubre-2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
MDA-Microkit Differential Agar (BASE + Supl. en frasco)

(LPT AGAR PURPLE Cromogénico)
Recuento total diferencial tras desinfecciones; para todo tipo de alimentos grasos,
cosméticos, medicamentos, superficies y aire (En base a la UNE100012:2005). Ideal para
pre-identificación en primera siembra de los patógenos más habituales en ambientes y en
cosméticos.
COMPOSICIÓN
Púrpura de bromocresol* 0,04 g
Triptona 15,00 g
Peptona de soja 5,00 g
ClNa 5,00 g
Dextrosa 10,00 g
Tioglicolato sódico 1,00 g
Tiosulfato sódico 0,60 g
Bi-sulfito sódico 2,50 g
Lecitina 1,00 g
Agar-agar 15,00 g
Recuentos ambientales mucho más sensibles
(Fórmula por litro) y con muy superior diversidad de especies
Ajustar a pH final: 7,8 ± 0,2 diferenciables a simple vista que los medios
clásicos de recuento total.
PREPARACIÓN
Disolver 57,6 g de medio en 1 litro de agua bidestilada con 5 ml de Tween 80.
Calentar y agitar hasta ebullición.
Autoclavar a 116 ºC durante 30 minutos, o mejor a 121 ºC durante 10 minutos.
Enfriar rápidamente a 45-50ºC y añadir asépticamente 2 ml pinchados del
suplemento estéril anexo (MIXCROM). No refundir.
Al dispensar, agitar hasta su solidificación para evitar la formación de grumos.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN
LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
1
DESHIDRATADO CODIGO: BCD512

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Gris

PREPARADO: Estéril, Lavanda, Turbio
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48-72 h a 37°C

aproximadamente, o bien 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C
aproximadamente):
Enterococcus faecalis WDCM00087, Excelente. Colonias blancas y medio
naranja alrededor. Con respecto a TSA, recuento 90,3-220 %.
Bacillus subtillis WDCM00003, Excelente. Colonias anaranjadas o doradas,
medio lila alrededor que más tarde vira a naranja. Con respecto a TSA,
recuento >108-276 %.
E.coli WDCM00013, Bueno, Colonias crema o rojas, medio naranja
alrededor.. Con respecto a TSA, recuento 63-127 %.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Bueno,. Colonias rojas o doradas,
medio lila alrededor. Con respecto a TSA, recuento 34-122 %.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, Colonias anaranjadas,
medio naranja alrededor. Con respecto a TSA, recuento 59-103 %.
Candida albicans WDCM00054, Excelente, Colonias blancas o rosadas,
medio lila o naranja alrededor. Con respecto a TSA, recuento 48-93 %.
* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas

cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los
lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a
la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.
NOTA: Medio con base TSA formulado para la detección de microorganismos

totales en productos farmacéuticos, cosméticos, grasos y/o desinfectados, asi
como en ambientes interiores. La composición del medio permite diferenciar a
simple vista los patógenos más habituales, y además asegurar una buena
dispersión del inóculo. Emulsiona las grasas e inactiva los derivados de amonio
cuaternario, (únicos conservantes que inactivan los medios clásicos con
Lecitina y Tween) y provoca una total inactivación de los demás conservantes
que pueda llevar en su fórmula el cosmético, la superficie, el aire o la muestra,
ya que está formulado para los inactivadores modernos, incluidos parabens e
2
incluso Isotiazolinona, además de Compuestos fenólicos: fenoxietanol,
feniletanol, anilidos..., Amonios cuaternarios, Surfactantes catiónicos,
Aldehidos, Formaldehido, compuestos liberadores de formol, Compuestos
oxidantes, peróxidos, halógenos (Flúor, Cloro, Bromo...), Imidazoles,
Clohexidina, Biguanida, Sales metálicas (Cu, Zn, Hg), compuestos
organomercuriales... La recuperación es muy superior a la de los medios
habituales (media de un 200% con respecto al PCA).
Repartir con asa Digralsky 0,1 ml en la superficie de una placa o bien dejarla
abierta para estudios básicos (no repetitivos ni comparables) de aire por
sedimentación pasiva. O mejor mezclar 1 ml de muestra tratada por siembra en
masa con 20 ml de medio fundido y enfriado a 45-47ºC, justo antes de que
solidifique. O bien aplicar una Placa de Contacto un instante sobre la superficie
problema, sin moverla, o bien introducir una placa o una placa de contacto en
un aparato para control microbiológico del aire. Incubar a 21-43 ºC, durante 2
días (hasta 5 días en muestras muy difíciles). Contar todas las colonias.
Observar los colores de la colonia y del medio a su alrededor para pre-
identificar de que microorganismo se podría tratar, observando los colores
indicados en su Certificado de Control de Calidad o en la página anterior de
este documento. Un viraje prematuro del medio a amarillo o verdoso antes de
la aparición de colonias indica, si la muestra no es muy ácida (es decir, de pH
inferior a 5´4) que el recuento va a ser alto. Si el viraje a amarillo o verdoso
ocurre antes de incubar, es que no se ha ajustado bien el pH o que la muestra es
muy ácida y, de igual forma, hay que ajustarle el pH.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos

según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la
basura.
3
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT m-LGA AGAR

(membrane Lactose Glucuronide Agar)
Recuento y detección diferencial de Coliformes (colonias amarillas) y E.coli
(colonias verdes) en muestras de aguas. Medio especialmente diseñado a partir
del caldo Lauryl para aumentar la específicidad propia de otros medios
cromogénicos de amplio uso (ej: BOE 31/03/2009) en muestras de agua.
COMPOSICIÓN Arriba:
E.coli,
Peptona 40,0 g colonias
Extracto de levadura 6,0 g verdes.
Lactosa 30,0 g
Rojo Fenol 0,2 g
Lauryl Sulfato Sódico 1,0 g
Abajo:
Piruvato Sódico 0,5 g Demás
X-Glucurónido 0,2 g coliformes
Agar-agar 10,00 g (Klebsiella
oxytoca),
(Fórmula por litro) colonias
pH final: ajustar a 7,4 ± 0,2 amarillas
PREPARACIÓN
Disolver 88 g del medio en un litro de agua destilada. Calentar agitando hasta
ebullición para su disolución. Autoclavar a 115ºC durante 10 minutos. Enfriar
rápidamente a 45ºC, mezclar bien y verter en placas Petri estériles.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE Y

EL SUPLEMENTO BIEN CERRADOS EN LUGAR SECO FRESCO Y
CODIGO: DMT530
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (botes de 500 g)

1
DESHIDRATADO: Polvo crema-rosado PREPARADO: Estéril, rojizo
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 18 h a 37ºC
(aproximadamente) en oscuridad:
Escherichia coli WDCM00013, excelente, colonias verdes sobre fondo rojo.
Klebsiella oxytoca MKTD5175**, excelente, colonias amarillas sobre fondo rojo
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: colonias rosas sobre fondo rojo
Enterococcus faecalis WDCM00009: completamente inhibido
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra,
directamente trazable a la colección TIPO.
SIEMBRA
Depositar la membrana de filtración sobre la placa preparada, habiendo
eliminado el agua de condensación y evitando la formación de burbujas (use
SBL001) entre el medio y la membrana. Recomendamos haber revitalizado las
células, normalmente estresadas por la filtración, filtrando por la membrana,
tras la muestra de agua, 100 ml de Buffered Peptone Water, apagar
inmediatamente la bomba una vez finalizada la filtración de la muestra y no
dejar pasar más de 1 h desde la filtración hasta la siembra. Incubar a 35-37 ºC
aproximadamente, durante 18 horas (ideal 4 h a 30ºC seguidas de 14 h a 37ºC).
INTERPRETACIÓN
Contar todas las colonias verdes y amarillas como coliformes, ya que la mezcla
cromogénica provoca esta coloración típica sólo en las colonias que crecen en
este medio y son de este grupo de microorganismos. Las colonias verdes son
concretamente de E.coli. y las amarillas de cualquier otro coliforme. Otros
microorganismos no acidificantes pueden crecer, pero lo hacen con colonias
rosadas. En este medio se distinguen muy bien las colonias de E.coli de las de
otros coliformes y de las de la flora acompañante, incluso en placas muy
repletas de colonias mixtas. Precaución: contar las placas nada más sacarlas de
la estufa y sólo tras 18 h de incubación, ya que algunas colonias amarillas
pueden perder el color al enfriarlas y todo el medio puede virar a amarillo,
complicando su detección visual normal, que es muy evidente (amarillas sobre
fondo de color rojo). Se pueden confirmar las colonias verdes de E.coli con la
prueba del indol (SBH056), y las amarillas de los demás coliformes con la
prueba de la citocromo-oxidasa (KOT050), aunque la bibliografía sugiere que
no hace falta, dada la elevada especificidad del medio.
Medio recomendado en: The Microbiology of Drinking Water (2002),
Environment Agency, Methods for examination of waters and associated
materials, Part 4, Section B, The enumeration of coliform bacteria and E.coli
by a single membrane filtration technique.
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT O157:H7 AGAR

Detección diferencial de E.coli enterohemorrágico (VTEC) en alimentos y
muestras ambientales. Medio cromogénico con base del medio de Rappaport y
Henigh
COMPOSICIÓN
Hidrolizado enzimático de caseína 8,0 g

Sorbitol 20,0 g
Lysina 10,0 g
Desoxicolato sódico 0,15 g
Riojo fenol 0,12 g
Lauryl Sulfato Sódico 0,1 g
Agar-agar 15,00 g
PREPARACIÓN
Disolver 63 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta

ebullición para su disolución. NO Autoclavar. Enfriar a 45ºC y verter en placas
Petri estériles. Para mayor selectividad ante Aeromonas y Providencia, añadir
asépticamente 0,07 ml de solución estéril de Telurito Potásico al 3,5%
(SPL016) y mezclar bien.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE

BIEN CERRADO EN LUGAR SECO FRESCO Y OSCURO. AGITE EL
BOTE ANTES DE USAR.
CODIGO: DMT520
1
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (Botes de 500 g y de 100 g)

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 18-24 h a 35-44°C:
Escherichia coli O157:H7 WDCM00014, Excelente, colonias pequeñas de
color rosa-púrpura-magenta. Inoculando 100 ufc de este microorganismo en
este medio, crecen al menos 50 colonias típicas.
Escherichia coli WDCM00013, Bueno, Colonias verdes.
Klebsiella pneumoniae WDCM00058, Bueno, colonias amarillas y mucosas
Staphylococcus aureus WDCM00034, Completamente Inhibido.
SIEMBRA
Sembrar en superficie en estría por agotamiento para aislar colonias tras el

enriquecimiento en el medio E.coli O157 Broth BCD165. Incubar 18-24 h a
35-37°C, para mayor selectividad a 44,5ºC.
INTERPRETACIÓN
Se condidera E.coli O157:H7 toda colonia pequeña de color rosa, púrpura o

magenta, ya que este es el color que desarrolla enzimáticamente la mezcla
cromogénica en esta cepa. Las demás E.coli crecen con colonias verdes o
azules, a causa de su actividad X-Glu+, sorbitol + y Lysina-.

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NEOGRAM ENVIROCOUNT
R2 CROMOGENIC AGAR (BASE + Supl. en frasco)

(A.P.H.A. IMPROVED) (Pharmacopea medio S, mejorado)
Recuento total en aguas potables, con máxima recuperación , al continuar las
células en un medio tan oligotrófico como la muestra de agua. Recomendado
para recuento en aguas cloradas y farmacéuticas. La adición de un cromógeno
termoestable permite el contraste de las colonias, rojas, con el color del medio
con el de la membrana.
COMPOSICIÓN
Extracto de carne 0,50 g
Hidrolizado de caseina 0,50 g
Dextrosa-Glucosa 0,50 g
Almidón soluble 0,50 g
Di-K Hidrógeno Fosfato 0,30 g
Sulfato de Magnesio 0,024 g
Piruvato de Sodio 0,30 g
Agar-Agar 15,00 g
pH final: 7,2 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 19 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Agitar, calentando
hasta ebullición, hasta la total homogeneización.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y añadir
asépticamente 2 ml pinchados del suplemento estéril anexo (MIXCROM). No
refundir.
MANTENER EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y

PARA USO EN LABORATORIO.
1
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige.
PREPARADO: Estéril, Blanquecino.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 72 h a 37°C
aproximadamente (o bien 5 días a Tª ambiente 21-28°C aproximadamente):
E. coli WDCM00013, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc, crecen >50%. Con
respecto a TSA , recuento 132-161%.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc,
crecen >50%. Con respecto a TSA , recuento 166-177%.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc,
Burkholderia cepacia MKTA25416**, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc,
crecen >50%. Con respecto a TSA , recuento medio 79%.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc,
Aeromonas hydrophila MKTA49141**, Excelente, colonias rojas, tras inocular <100 ufc,
crecen >50%. Con respecto a TSA , recuento medio 100%.
Bacillus subtilis WDCM00003, Correcto, colonias rojas, tras inocular <100 ufc, crecen
>50%. Con respecto a TSA , recuento medio 103%.
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la
nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS,

PLAQUITAS HERMETICAS MF.
Inocular 1 ml en profundidad o mejor 0,1 ml en superficie, o aún mejor una
membrana en superficie por la que se hayan filtrado 1-250 ml de muestra.
Duplicar la muestra. Incubar una placa 5-7 días a 22 ºC aprox. para mesófilos y
la otra 3 días a 30-37 ºC aprox. para termófilos. Contar todas las colonias, que
serán rojas y muchas más que en medios normales como PCA, TSA, Nutrient
Agar, LPT Neutralizing Agar... (Sanchís, 9/99, Interlaboratorio sobre la
recuperación de medios nutritivos para recuento total en aguas, XVII Congreso
S.E.M.). La flora termófila se asocia a procedencia humana. La mesófila al
proceso de depuración. Este medio no es adecuado para recuento en alimentos,
superficies o aire, sólo es mucho más sensible en aguas puras.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
CETRIMIDE RAPID CROMOGENIC AGAR (BASE + Supl en frasco)

BASADO EN PHARMACOPEA MEDIO N
Aislamiento selectivo para Pseudomonas aeruginosa en medicamentos (USP)
y cosméticos (ISO 22717) con detección más rápida
Pseudomonas
aeruginosa, crece
con colonias rojas
rodeadas de halo
amarillo
fluorescente. En
18-24 h ya aparece
como colonias
incipientes (puntos
rojos), sin
fluorescencia, por
lo que este medio
sirve de alerta
precoz sin tener
que esperar las 48- P.aeruginosa, roja, crea un viraje
120 h típicas del del medio a crema en sólo 18 h
Agar Cetrimida
clásico.
COMPOSICIÓN
Peptona pancreática de gelatina 20,0 g
Cetrimida 0,3 g
Cloruro magnésico 1,4 g
Sulfato Di-potásico 10,0 g
Agar-agar 13,6 g
(Fórmula por litro) Fluorescencia en 18h de P.aeruginosa (izda) y
pH final: 7,2 ± 0,2 no de B.cepacia (derecha) con luz UVA de
366 nm (linterna VMT050)
PREPARACIÓN
Disolver 44,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Añadir 10 ml de glicerol.
Calentar hasta ebullición, agitando para su disolución. Autoclavar a 121 ºC
durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y añadir asépticamente 2 ml pinchados
del suplemento estéril anexo (MIXCROM). No refundir. El medio final es
blanquecino, aunque puede adquirir tonalidades rosadas tras suplementarlo,
que desaparecen tras oxigenarlo al plaquearlo.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
1
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Blanco PREPARADO: Estéril, Blanco,
rosado cuando caliente o antes de plaquearlo-oxigenarlo.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24-48 h a 37°C
aproximadamente, o bien a temperatura ambiente (aprox.21-28°C):
Pseudomonas aeruginosa WDCM00025, Excelente, tras inocular <100 ufc, crecen >50%.
Pigmenta, Colonias rojas con halo verde-amarillento y fluorescente. Con respecto a TSA ,
recuento 10-90% (Incertidumbre debida a la cepa y a las diferentes proporciones de flora
acompañante), pero selectivo respecto a otras cepas inoculadas. Se deduce que su uso sin
previo enriquecimiento es muy poco sensible.
Burkholderia cepacia MKTA25416, Correcto, colonias rojas sin halo fluorescente. Con
respecto a TSA , recuento medio 72%, pero selectivo respecto a otras cepas inoculadas.
E.coli WDCM00013, Inhibido.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Inhibido.
NOTA: Medio selectivo para Pseudomonas (USP XXI). El cetil trimetil

amonio bromuro o cetrimida (base de amonio cuaternario) inhibe a la mayoría
de flora acompañante. El medio estimula la producción de fluoresceína y
piocianina. La adición de un cromógeno termoestabilizado facilita la detección
precoz en las primeras 24 h (si la cepa no está letárgica) por la aparición de
pequeñas colonias rojas, que a las 48 ya se evidencian de un buen tamaño y con
fluorescencia.
SIEMBRA E INTERPRETACION
Verter 20 ml en cada placa de Petri estéril. Dejar enfriar (el medio así
oxigenado, revierte del rosado a su color blanquecino). Sembrar en superficie.
En el caso de las placas de contacto, tocar la superficie un instante, sin mover o
introducirlas en un aparato para control del aire. Incubar a 37 ºC
aproximadamente, durante 18-48 horas.
Pseudomonas aeruginosa crece con colonias rojas rodeadas de fluorescencia
verde-amarillenta o azul
(más bajo luz de 366 nm,
linterna MICROKIT), o bien
marrones. Confirmar con
tiras de citocromo-oxidasa
KOT050 (no usar asa de
nicrom, sino exclusivamente
de Platino (VCS147)) y
galerías de identificación
(MICROKIT 245000).
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
E. SAKAZAKII CROMOKIT CSA-DFI AGAR

Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter
sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según
Norma CSA y DFI.
COMPOSICIÓN
Triptona 15,0 g
Cloruro Sódico 5,0 g
Desoxicolato Sódico 0,60 g
Thiosulfato sódico 1,0 g
Mix cromogénico 0,11 g
Agar-Agar cromogénico 15,0 g
3 colonias azuladas:
pH final: 7,3 ± 0,2 E.sakazakii.
Colonias de otros colores:
Flora acompañante
PREPARACIÓN
Disolver 42 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta
ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El
color del medio es crema-rosado, a veces floculado por el tipo de agar-agar.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT314.

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado
PREPARADO: Estéril, Crema-rosado, puede contener flóculos de agar-agar
cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.
1
Enterobacter sakazakii WDCM00214, Excelente, colonias azules.
Escherichia coli MWDCM00013, Excelente, colonias amarillas.
Enterobacter aerogenes WDCM00175, Excelente, colonias verdes.
Klebsiella pneumoniae WDCM00097 Excelente, colonias amarillas, grandes.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido.
Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313)
según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y
vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y
parcialmente E.coli).
Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.
Observar la aparición de colonias azules, que son presuntivas para E.sakazakii y deben
confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias
amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT
245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).
El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por
identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter
sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas
que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también
crea enfermedades en personas de todas las edades. Ello exige la ausencia de este patógeno
en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos,
aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede
contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su
ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación,
sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias
(mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA)
de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO)
proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y
recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.
La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato
cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de
colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la
Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal
violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación
inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo
cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a
flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.
Medio diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 2008, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en 3-2020
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E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter
sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según
Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.
COMPOSICIÓN
Triptona 7,0 g
Desoxicolato Sódico 0,60 g
Thiosulfato sódico 1,0 g
Mix cromogénico 0,15 g
Cristal Violeta 0,002 g
Agar-Agar cromogénico 15,0 g
pH final: 7,0 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 31,75 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta
ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El
color del medio es púrpura, a veces floculado por el tipo de agar-agar.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT315.

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado
1
PREPARADO: Estéril, Púrpura, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos
precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.
Enterobacter sakazakii WDCM00214, Excelente, colonias verde-azuladas. PR >50%
Escherichia coli WDCM00013, Excelente, colonias incoloras.
Enterobacter aerogenes WDCM00175, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido.
Staphylococcus aureus WDCM 00034, Inhibido.
Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth
(DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con
cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido
Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).
Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.
Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para
E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este
microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos
(ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos
ref.MICROKIT 49578619).
El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por
identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter
sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas
que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también
crea enfermedades en personas de todas las edades. Ello exige la ausencia de este patógeno
en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos,
aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede
contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su
ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación,
sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias
(mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA)
de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO)
proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y
recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.
La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato
cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de
colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la
Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal
violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación
inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo
cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a
flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT VIBRIO AGAR

Medio sólido para aislamiento y diferenciación cromogénica de las especies de
Vibrio en alimentos marinos y en aguas.
COMPOSICIÓN
Digerido enzimático animal 10,0 g
Tiosulfato Sódico 5,0 g
Citrato Sódico 6,0 g
Colato Sódico 1,0 g Arriba: V.cholerae, púrpura
Abajo: V.parahaemolyticus, azul-verdoso
Agar-agar 15,00 g

PREPARACIÓN
Disolver 67,5 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta
ebullición para su disolución. NO Autoclavar. Enfriar rápidamente hasta 45ºC
y mezclar bien antes de verter en placas Petri estériles.

BIEN CERRADO EN LUGAR SECO FRESCO Y OSCURO. AGITE EL
BOTE ANTES DE USAR.
CODIGO: DMT510
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (500 g y 100 g).
1
DESHIDRATADO: Polvo amarillento PREPARADO: Estéril, Crema
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 18-24 h a 35-37ºC:
Vibrio parahaemolyticus WDCM00037, Excelente, Colonias verde-azuladas.
Inoculando 100 ufc, crecen más de 50 colonias.
Vibrio cholerae MKTA15748**, Excelente, Colonias púrpura o crema.
Inoculando 100 ufc, crecen más de 50 colonias.
Escherichia coli WDCM00013, Totalmente Inhibido.
Enterococcus faecalis WDCM00087 Totalmente Inhibido.
**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos
SIEMBRA
Sembrar en superficie en estría por agotamiento para aislar colonias tras el
enriquecimiento en los medios Alkaline Enrichment Broth DMT151 (para
V.cholerae) o bien Alkaline-Saline Enrichment Broth DMT159 o Vibrio
Hipersaline Microkit Broth DMT137 (para V.parahaemolyticus). Incubar 18-
24 h a 35-37ºC.
INTERPRETACIÓN
V.parahaemolyticus crece con
colonias verde-azuladas, mientras la
mayoría de cepas de V.cholerae lo
hacen con colonias púrpura. La flora
acompañante crece con colonias de
otros colores.
La concentración de sal es la adecuada
para que puedan crecer ambas
especies de Vibrio, que quedan
perfectamente diferenciadas por el
color que desarrolla enzimáticamente
la mezcla cromogénica en las mismas. De este modo queda eliminado el
problema de falsos positivos del clásico TCBS Agar (causado por la flora
acompañante que fermenta la sacarosa).
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
CROMOKIT X-STAPH AGAR Mejorado

Recuento diferencial de Staphylococcus aureus en muestras de alimentos,
cosméticos y agua. Muy mejorado respecto a la anterior fórmula.
COMPOSICIÓN
Digerido enzimático de caseína 23,0
Extracto de levadura 15,0
Extracto de carne 10,0
Piruvato Sódico 4,0
Cloruro Sódico 40,0
Cloruro de Litio 5,0
Mezcla cromogénica 0,24
Agar-agar 12,5
(Fórmula en gramos/litro)
pH final: ajustar a 7,2 ± 0,2 S.aureus, colonias azul oscuro o magenta (según cepa)
PREPARACIÓN
Disolver 110 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta
ebullición para su disolución. NO Autoclavar. Enfriar rápidamente a 45ºC,
mezclar bien. Si lo desea o la muestra es de matrices que se prevén con mucha
flora acompañante, a fin de aumentar la selectividad, añada asépticamente al
litro de medio enfriado a 45ºC, 100.000 UI de polimixina B (10 ml del frasco
Ref. SMS009), mezclar bien.
PARA USO EXCLUSIVO EN
LABORATORIO. MANTENGA EL
BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR
SECO FRESCO Y OSCURO. AGITE
EL BOTE ANTES DE USAR.
CODIGO: DMT515
PRESENTACIÓN: S.epidermidis, colonias azul turquesa

MEDIO DESHIDRATADO (botes de
500 g y de 100 g), placas preparadas larga caducidad (25 ml y fabricadas bajo
pedido para entregar siempre con 3 meses de vida útil), tubos preparados 18 ml
para fundir y sembrar en placa en masa.
1
fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...)
DESHIDRATADO: Polvo crema PREPARADO: Estéril, crema.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 18-48 h a 35-37°C aprox:
Staphylococcus aureus WDCM 00034, excelente, Colonias azul oscuro o magenta.
Inoculando 100 ufc, crecen al menos 70 colonias típicas.
Staphylococcus epidermidis WDCM 00132, parcialmente inhibido, colonias azul turquesa.
Bacillus subtilis WDCM 00003, colonias crema o rosadas incluso añadiendo polimixina.
Escherichia coli WDCM00013, Parcialmente Inhibido, colonias púrpura.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Parcialmente Inhibido, colonias pequeñas, de color
verde-light.
Bacillus cereus WDCM00001, completamente inhibido.
Bacillus thuringiensis MKTM-R002**, completamente inhibido.
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra,
SIEMBRA
Sembrar en masa 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, ya que esta
siembra es ideal para máximo recuento de microorganismos fermentadores como
S.aureus, sin el crecimiento típico de la siembra en superficie por parte de aerobios
estrictos acompañantes, como S.epidermidis. Para recuento en muestras líquidas de
gran volumen por filtración de membrana, sembrar sobre la placa la membrana de la
muestra filtrada, evitando que se formen burbujas entre ambas. Para aislamiento
desde enriquecimientos, estriar sobre la placa.
Incubar a 35-37 ºC aproximadamente, durante 18-48 horas.
INTERPRETACIÓN
Contar todas las colonias azul oscuro como S.aureus, ya que la mezcla cromogénica
provoca esta coloración típica sólo en las colonias que crecen en este medio y son de
este microorganismo. La composición del medio y el método de siembra lo hacen
muy selectivo contra los típicos falsos positivos de otros medios como el Baird
Parker, el RPF o el Mannitol Salt Agar. Su riqueza de ingredientes evita también los
falsos negativos propios de dichos medios. Si lo que busca son S.aureus coagulasa
positivos, confirme las colonias azul oscuro con latex M-Ident-Staph (Ref:
KWD094), que a pesar de la composición salina del medio, funciona correctamente.
En la validación interna realizada en 80 muestras de flora mixta, la sensibilidad
obtenida ha sido del 100% (ningún falso -) y la especificidad también del 100%
(ningún falso +). Límite de detección demostrado desde 4 ufc/inóculo (para inóculos
menores, la incertidumbre y distribución de Poisson no aseguran su presencia).
Respecto a anteriores lotes, desde Enero de 2014 este medio ha mejorado en cuanto a
la naturaleza de sus cromógenos y de su agar-agar: ya no flocula y distingue
perfectamente S.aureus (azul oscuro) de S.epidermidis (azul turquesa).
Medio diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 2012, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
MICROKIT® CHROMOSALM AGAR
Agar cromogénico para Salmonella (Investigación de la Beta-Galactosidasa )
(UNE 34-554:1983, UNE 34-818:1985, EN-12824:1997, UNE-EN ISO 6579:2003)
INTRODUCCIÓN
Presentamos el esperado medio

cromogénico de MICROKIT para aislar
colonias del género Salmonella de forma
diferencial y específica. Totalmente
diferente a los medios cromogénicos de
Salmonella de otras marcas, que tienen
cromógenos color rojizo mucho menos
específicos.
Salmonella puede diferenciarse de
otras Enterobacterias gracias a su
mecanismo para producir alfa-
galactosidasa en ausencia de beta-
galactosidasa. MICROKIT®
CHROMOSALM incorpora dos
sustratos cromogénicos, CHE-Gal y X-
alfa-gal, que permiten visualizar esta
actividad en la misma placa. Colonias verdes: Salmonella. Colonias
Efectivamente, CHE-Gal es negras: otras Enterobacterias, incluida
metabolizado por la beta-galactosidasa, Citrobacter. Colonias incoloras: Proteus
produciendo colonias negras en

presencia de hierro, como ocurre en la
mayoría de Enterobacterias. X-alfa-gal es
hidrolizado por Salmonella produciendo
colonias verde-azuladas, claramente
distinguibles de las de otras Enterobacterias, negras y de las de otros microorganismos,
incoloras. Las reacciones cromogénicas están muy concentradas en las colonias, dejando al
medio de su color natural, crema. El resto del medio está basado en la fórmula DCA de
Hynes, utilizando desoxicolato sódico y citrato sódico como inhibidores de la flora
acompañante. Gracias a todo ello, MICROKIT® CHROMOSALM detecta las cepas
enterotoxigénicas de Salmonella (S.enteritidis, S.typhimurium, S.paratyphi...) y también
detecta S.typhi, en todo tipo de muestras alimentarias, clínicas, agua...
Muchos medios para aislamiento de Salmonella (incluidos muchos otros

modernos medios cromogénicos con Magenta-Gal) son poco selectivos y/o diferenciales,
provocando un inmenso gasto en confirmaciones de colonias sospechosas que resultan ser
negativas (Proteus, Citrobacter...). Con una asombrosa especificidad (99,7%),
MICROKIT® CHROMOSALM reduce drásticamente la necesidad de confirmar falsos
1
positivos, ahorrando trabajo y grandes costes en medios adicionales, galerías
bioquímicas y pruebas inmunológicas: ¡Requiere un 95% menos confirmaciones de
colonias que los medios tradicionales!. De este modo, su aparente elevado coste de “medio
cromogénico” es sólo un espejismo.
Pero además, con frecuencia, en los medios habituales para Salmonella, los
crecimientos abundantes de flora acompañante enmascaran a Salmonella cuando está
presente en bajas proporciones. La incidencia de falsos negativos en MICROKIT®
CHROMOSALM es también ínfima, ya que la sensibilidad es del 90,5%, obteniéndose un
14% más positivos reales que en los demás medios.
En Enero de 2003, publicación en XIX Congreso SEM Santiago, hemos

validado este medio en un estudio intercolaborativo para 250 muestras naturales de todo
tipo de alimentos, aguas y manipuladores, con 6 laboratorios participantes, resultando la
mayor sensibilidad (del 89,47%), especificidad (del 98,45 %) y eficiencia (del 96,40 %) de
todos los medios de aislamiento selectivo de Salmonella, con gran diferencia respecto a
todos ellos.
COMPOSICIÓN (BASE Desoxicolato Citrato Agar)
Extracto de buey 5,00 g/l

Peptonas 5,00 g/l
Citrato Sódico 8,50 g/l
Desoxicolato Sódico 5,00 g/l
Citrato Férrico Amónico0,50 g/l
IPTG 0,03 g/l
Mezcla Cromogénica 0,38 g/l
Agar-agar 12,00 g/l
pH final 7'2 ± 0'2
.
Salmonella abony
MODO DE EMPLEO
Disolver 36'5 gramos de medio MICROKIT® CHROMOSALM en 1 litro de agua

bidestilada a temperatura ambiente (ideal 21-25 ºC). Dejar embeber 10 minutos, calentar
hasta ebullición, agitando hasta la total homogeneización. Esterilizar manteniendo la
ebullición durante 1 minuto. No autoclavar. No sobrecalentar. Los frascos sólo se pueden
refundir una vez. Enfriar rápidamente a 47 ºC y dispensar en placas Petri. Una vez
preparadas, las placas pueden mantenerse una semana a 2-8 ºC, en la oscuridad, precintadas
para evitar su desecación. Sembrar las muestras clínicas procedentes de caldo Selenito, y las
muestras alimentarias procedentes de los medios de pre-enriquecimiento más
enriquecimiento habituales (ver ISO 6579 de Salmonella). Incubar 18-24 horas a 37 ºC
aproximadamente.
LECTURA DE RESULTADOS 24–48 h a aprox. 37°C
Salmonella abony WDCM00029 y Salmonella enteritidis WDCM 00030, Colonias verde-

azuladas (alguna cepa de Salmonella, si es galactosidasa positiva, puede crecer con
colonias negras). Tamaño 1-2 mm. PR > 0,5, en concreto >93-180% de colonias respecto al
número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad
2
depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Tras
enriquecimiento, buen crecimiento.
Shigella flexneri WDCM00126, Colonias incoloras 1-2 mm (alguna cepa, si es
galactosidasa positiva, puede crecer con colonias negras). Crece bien.
E. coli WDCM00013, Inhibición parcial o total, colonias negras.
Klebsiella oxytoca MKTA13182**, Colonias negras mucosas de 1-2.5 mm.
Proteus mirabilis MKTA14153**, Colonias incoloras con olor a pescado. Tamaño 0.5-2
mm.
Citrobacter freundii MKTA8090**, Colonias negras.
Enterococcus faecalis WDCM00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Colonias incoloras o verdes-fosforescentes.
Tamaño 0.5-1 mm.
BIBLIOGRAFÍA
Perry, J.D., Ford, M., Taylor, J., Jones, A., Freeman, R., Gould F.K. 1999. A New
Chromogenic Agar for selective Isolation of Salmonella spp. J.Clin.Micro. 37: 766-768.
* Las salmonelas son normalmente alfa-galactosidasa positivas (colonias verdes) pero beta-
galactosidasa negativas (no colonias negras). En la publicación original, se probaron 556
cepas de S.enteriditis y todas crecieron verdes, es decir, alfa-gal positivas. De las 1022
Salmonella analizadas después, solo 2 se informaron incoloras: una Braenderup y una
Saintpaul. Por lo tanto, es posible obtener una excepción, pero son muy raras.
Sanchis, J. y otros 11 autores, 1/2003, XIX Congreso SEM Santiago.: Validación del
medio CHROMOSALM mediante un estudio intercolaborativo en los más diversos tipos de
matrices.
Sanchis, J. 09-2014: XIX Congreso Nacional de Microbiología de los Alimentos. Doble
enriquecimiento simultáneo para detección de Salmonella. J. Sanchís. MICROKIT.
PRESENTACIÓN
MICROKIT® CHROMOSALM se comercializa en:

* Envases 100 g ( para unos 3 litros de medio final), ref: DMT500-. 500 g ref: DMT500
* Frascos hidratados y estériles, para fundir, de 100 ml, ref: RPL012.
* Tubos preparados 15 ml para elaborar una placa, ref: TPL402.
* Placas preparadas 25 ml (3 meses de caducidad), ref: PPLM55
ATENCIÓN, MÉTODO RÁPIDO PARA SALMONELLA: Uniendo este

avance a un enriquecimiento mixto acelerado (mezclando los medios del
preenriquecimiento revitalizador y neutralizante: 225 ml Buffered Peptone
Neutralizing Water de MICROKIT DMT011+ enriquecimiento selectivo 18
ml SS Broth concentrado [x5] de MICROKIT DMT067) e incubándolos juntos
en las 18 h previas; permite la detección fiable de Salmonella en sólo 36 h
desde la muestra inicial. Por todo ello, este método acortado es la herramienta
que estaban esperando todas las fábricas de productos alimenticios para poder
liberar lotes gracias a la detección precoz de este patógeno, que les retrasaba
hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiológico a 3-5 días.
Medio diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 2001, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Nov-2020
3
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
HRS RAPID CROMOGENIC AGAR (BASE + Supl)
La presencia de esporas altamente resistentes al calor de Bacillus
sporothermodurans en leche pasterizada por el método Ultra Hight Temperature (UHT)
se ha convertido en un problema importante en la industria láctea. Su presencia se
considera indeseable, ya que obstaculizan los requisitos de esterilidad comercial. En un
estudio (APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2005, p. 1480–1494), se han evaluado, mediante
el uso de un selectivo tratamiento térmico de 30 minutos a 100°C, la presencia,
fuentes, y naturaleza de las esporas potencialmente muy resistentes al calor en la
leche cruda. Se detectaron altos números de estas esporas en la tela del filtro del
equipo de ordeño y en muestras de cultivos y forrajes verdes. Se aislaron
aproximadamente 700 cepas después del calentamiento selectivo. La colección de
cepas mostró una notable diversidad, con representantes de siete géneros que forman
esporas aerobias. Las más frecuentes esporas aisladas de leche UHT han sido Bacillus
sporothermodurans (aerobio facultativamente anaerobio), Brevibacillus borstelensis,
Paenibacillus lactis, Bacillus sphaericus, Bacillus licheniformis, y Brevibacillus brevis. El
23% de las 603 cepas formadoras de esporas pertenecen a 18 nuevas especies. La
reducción de esta carga de esporas por buenas medidas higiénicas durante el ordeño
probablemente podría reducir aún más el nivel de contaminación de la leche cruda, y
de esta manera reducir al mínimo el recuento aeróbico de formadores de esporas de
bacterias que podrían conducir al deterioro de la leche y los productos lácteos.
Las HRS (Heat Resistant Spores) o más coloquialmente “termorresistentes”,

aparecen en muestras de leche UHT, sobre todo si el método de tratamiento térmico
es “indirecto” (intercambiador de calor). Los métodos “directos” con inyección de
vapor sobrecalentado son más eficaces, pero estas esporas también aparecen de vez
en cuando. No son un problema para la salud (son microorganismos de riesgo
biológico 1: sin riesgo para la salud) y aparentemente no alteran la leche, de modo que
nos hemos acostumbrado a beber leche contaminada por estos microorganismos. El
problema no es para el consumidor sino para la imagen de la industria.
MICROKIT ha desarrollado un nuevo medio de cultivo cromogénico, HRS RAPID

Cromogenic Agar derivado del HRS Cromogenic Agar, con un nuevo factor “doping”
adicional, que permite, de forma muy rápida (en sólo 36h en vez de las 72 h propias
del Agar HRS), la visión de estas esporas germinadas, en forma de colonias, que suelen
ser grandes, con forma de volcán y rojas, gracias a un cromógeno termoestable. Este
medio no es selectivo para B. sporothermodurans, de modo que también crecen en el
mismo Bacillus licheniformis, Bacillus sphaericus (otras esporas termorresistentes o
HRS) y los demás esporulados, así como otros alterativos de la leche UHT: Por eso debe
1
emplearse en leche UHT o en leche cruda o pasteurizada a la que sometamos
previamente a un calentamiento UHT o similar que elimine los acompañantes no
esporulados.
COMPOSICIÓN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g Obsérvese
Glucosa 1,0 g la forma
de volcán
Factores doping MICROKIT 35,5 g de las
Agar-agar 12,0 g colonias,
rojas, de
Cromógeno en frasco anexo c.s. Bacillus
(Fórmula por litro) sporother-
modurans
pH final: 6,8 ± 0,2
Obsérvese el aspecto vulcaniforme de B.sporothermodurans en este
medio rápido y cromogénico, en sólo 36-48 h a 35-37ºC
PREPARACIÓN
Disolver 56 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a
116°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y añadir asépticamente 2 ml pinchados
del suplemento estéril anexo (MIXCROM). No refundir. El color final del medio es
blanco-crema. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna
al crema cuando se plaquea, lo cual no afecta los resultados. Si lo desea, puede añadir
trazas de vitamina B12 cuando el medio se está enfriando a 47-50ºC, aunque ya están
incorporadas en el medio deshidratado, dentro del extracto de levadura. Si desea una
cierta selectividad en leche cruda, añada a 1 L de medio, cuando se está enfriando a
47-50ºC, 10 ml de un frasco pinchable de polimixina B (MICROKIT SMS009), para
eliminar la mayor parte de la flora acompañante Gram negativa. O mejor aún, someta
a la leche cruda a un calentamiento (ej: UHT), para eliminar toda la flora acompañante
no esporulada y que crezcan solo las esporas termoresistentes (HRS).


fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema
PREPARADO: Estéril, Crema
EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 36-48 h a 37-55 ºC o bien a 35-37ºC,
aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:
Bacillus sporothermodurans MKTD 10599, Excelente, colonias rojas o fucsia, redondas,
con forma de volcán (boina), PR >90% de colonias respecto al TSA.
Bacillus subtilis WDCM 00003, Excelente, colonias grandes, rojas o rosas, lobuladas, PR
>90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Bacillus cereus WDCM 00001, Excelente, colonias céreas, fucsia, enormes, lobuladas,
PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
2
Enterococcus faecalis WDCM 00009, Excelente, colonias pequeñas, rojas, redondas,
con márgenes incoloros, PR >90% de colonias respecto al TSA.
Staphylococcus aureus WDCM 00032, Excelente, colonias rojo burdeos, grandes,
redondas, mucosas, PR >90% de colonias respecto al TSA.
Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia, por lo que indicamos la
Universal WDCM según ISO 11133-2:2014 y la Colección de Cepas Nativas Tropicales.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (100 g, 500 g, 5 Kg).

Recuento total de bacterias esporuladas en leche UHT y otros alimentos UHT (lácteos,
gelatina, forraje…). Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja,
púrpura, burdeos.... sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y
ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los
distingue de los aerobios). El color de las colonias no afecta a las pruebas de
identificación posteriores que desee realizar.

Inocular 1 ml de muestra de leche UHT y su serie de diluciones decimales, en
masa, para detectar precozmente la posible contaminación del lote por esporas de
este microorganismo (o bien estriar en superficie muestras ya alteradas).
Si se desea analizar la leche antes de la UHT, añada a cada L de medio 10 ml de
Polimixina B (frascos pinchables MICROKIT SMS009), cuando está enfriándose a 47-
50ºC, para eliminar buena parte de la flora acompañante. La polimixina es un
antibiótico polipeptídico producido por una cepa de Bacillus polymyxa, activo frente a
la mayoría de Gram negativos, ya que rompe violentamente su membrana plasmática.
Atención: los iones Ca++ inhiben su acción. Pero el mejor agente selectivo es el calor
UHT, y de este modo buscar con este medio (sin suplementos de antibióticos), sólo los
supervivientes al calentamiento de la muestra. De modo que para analizar leche cruda,
es mejor someterla a un calentamiento similar a UHT antes de sembrarla en el medio
de cultivo, a fin de eliminar la flora acompañante no esporulada (tanto G- como G+).
Incubar una placa a 30 ºC aproximadamente durante 36-48 horas, e incubar
otra placa a 37 y/o 55 ºC aproximadamente, durante 36-48 horas. Buscar las colonias
rojas y vulcaniformes de B.sporothermodurans, aunque cualquier otro tipo de colonia
que aparezca, también demuestra una UHT deficiente. La recuperación supera un
528% en el rango bajo de recuento en placa, un 145% en el rango medio y un 116% en
el rango alto, aquella conseguida por el HRS Agar (DMT532), gracias a un tercer factor
doping descubierto y agregado por MICROKIT. Esta fórmula, con menos agar, aumenta
la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor
oxigenación del fondo de la placa. Este medio está diseñado para siembra en masa de
productos que han sufrido esterilización UHT, de modo que los resultados no son
concluyentes en productos no-UHT, con numerosos falsos positivos (sobre todo si no
se añade polimixina B). Si desea sembrar en superficie, utilice 70 g/l de este mismo
medio, en lugar de 56 g/l. Para minimizar la desecación en muestreos de aire y
superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (MICROKIT
SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental

vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
3
ANEXO FOTOGRÁFICO
B.sporothermodurans en Maxim Agar Cromogénico (MICROKIT BCD515) en 3 días a 35ºC
B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532). Obsérvese el mayor tamaño

de las colonias en 3 días a 35ºC, que con lupa ya muestran su forma de volcán
B.sporothermodurans en HRS cromogénico rápido (MICROKIT DMT534). Obsérvese el espectacular tamaño de

las colonias en sólo 36 (izda) y 72h (dcha) a 35ºC, que muestran a simple vista su forma de volcán
4
Pseudomonas aeruginosa en HRS Rapid crom Agar con polimixina Bacillus cereus en Rapid crom Agar con polimixina (MICROKIT
(MICROKIT DMT534+SMS009): Colonias rojas con reborde rosado DMT534+SMS009): Colonias céreas, enormes, fucsia, lobuladas
Bacillus subtilis en HRS Rapid crom Agar con polimixina (MICROKIT Bacillus subtilis en HRS Rapid crom Agar con polimixina (MICROKIT
DMT534+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas DMT534+SMS009) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth
(MICROKIT DMT022): Colonias enormes, fucsia, lobuladas
Enterococcus faecalis en HRS Rapid crom Agar con polimixina Listeria monocytogenes en HRS Rapid crom Agar con polimixina
(MICROKIT DMT534+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con (MICROKIT DMT534+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con
centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Listeria monocytogenes centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Enterococcus faecalis
Staphylococcus aureus en HRS Rapid crom Agar con polimixina Shigella flexneri en HRS Rapid crom Agar con polimixina (MICROKIT
(MICROKIT DMT534+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, DMT534+SMS009): única Enterobacteria testada que crece, con
mucosas, redondas colonias enormes, fucsia, lobuladas
5
Izda: HRS Rapid cromogenic Agar DMT534. Dcha: el
mismo inóculo en el clásico B.sporothermodurans HRS
Cromogenic Agar DMT532. Se observan colonias más
grandes y numerosas en el nuevo medio RAPID.
HRS Rapid cromogenic Agar DMT534. Colonias típicas

de B.sporothermodurans en forma de volcán rojo.
6
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) AGAR

ISO 11290-1 Amendment 1 (15-10-2004), ISO 11290-2:2000/A1:2004
Listeria spp. Listeria

(colonias verde- monocytogenes
azuladas sin halo) (colonias verde-
azuladas con halo)
Nítidez de los halos a

Flora acompañante contraluz (las colonias no
(incolora) parecen verdes a causa
del contraluz)
Ottaviani & Agosti Agar fue desarrollado por estos dos investigadores italianos antes de que una marca
francesa les comprase los derechos para prepararlo en placa; luego, al publicarse en la addenda 2004 de la
Norma ISO 11290, se liberó su fabricación para cualquier otro laboratorio. Sus extraordinarias sensibilidad,
especificidad, eficacia, precisión, exactitud y rapidez… respecto al Oxford o al Palcam, acabaron con los
graves problemas que éstos daban, sobre todo de falsos positivos con numerosos Enterococos y Micrococos.
MICROKIT fue una de las primeras marcas que fue capaz de desarrollarlo (con la marca Cromocytogenes) no
sólo en placa preparada, también en otros formatos preparados y ADEMAS, fuimos los primeros en
comercializarlo en medio deshidratado (Dic-2004), cuando todo el mundo usaba (porque sólo podían usar)
placas preparadas de escasa caducidad.
Actualmente los laboratorios acreditados ISO 17025 que lo emplean con marca Cromocytogenes de
MICROKIT, nos dicen que recupera muchas más ufcs que las demás marcas y que nuestra extraordinaria
caducidad de 3 meses a su recepción, les permite haber vuelto al uso de la placa preparada. Que una fórmula
sea idéntica en diferentes marcas no significa que los resultados sean idénticos, hay más puntos débiles en la
fabricación de medios de cultivo que pueden llevar a resultados tan dispares.
Agosti Listeria and Ottaviani Agar, preparado con los suplementos selectivos y diferenciales adecuados, es el
más moderno, rápido, selectivo y diferencial medio de cultivo para el aislamiento e identificación presuntiva y
diferencial de Listeria monocytogenes a partir de muestras alimentarias.
1
El sustrato cromogénico detecta la beta-glucosidasa, enzima común en todas las especies de Listeria y unas
pocas cepas de Enterococos y Bacilos, provocando la aparición de colonias verde-azuladas. Un sustrato
adecuado detecta la fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provocando un halo de lisis/precipitación
alrededor de sus colonias. La combinación de ambos sustratos permite diferenciar las colonias de Listeria spp,
(verde-azuladas sin halo opaco) de las de Listeria monocytogenes (verde-azuladas rodeadas de un halo opaco).
Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de provocar halo de fosfolipasa, se requiere confirmación de
las colonias presuntivas (verdes con halo), con la simple prueba: Rhamnosa + / Xylosa – para L.monocytogenes
(al revés para L.ivanovii): Kit completo KMT012, tambien disponible en tubos preparados, TPL014, TPL015,
y en medio deshidratado DMT167 + suplementos DMT169 y DMT171. Ahorre el coste de las galerías de
identificación y el agar sangre, que menciona la ISO 11290 porque esto se redactó antes de la addenda 2014 de
dicha ISO sobre este nuevo medio cromogénico.
Bacillus circulans es capaz de dar falso positivo de Listeria spp. (colonias verdes sin halo), pero es X/R +/+
CÓDIGO del medio CHROMOCYTOGENES base DMT700. Concentración: 70,5 g/l. Ajustar a pH 7,2. Autoclavar 15 minutos a
121°C. Enfriar a 48-50°C. Se añaden una pareja de viales SMT700 (uno de cada uno de los dos tipos) por cada 500 ml de medio BASE
esterilizado y enfriado a 45°C aprox. El suplemento selectivo, que es polvo, se hidrata con 5ml de agua estéril calentada a 50 ºC y filtrada
por pirindola y cuando está disuelto, se añade tanto este suplemento como el fosfolipídico líquido, también precalentado a 50ºC, al medio
chromocytogenes agar que ya está disuelto y esterilizado previamente y atemperado a 48-50 grados.
Agitar bien y verter en placas. Plaquitas herméticas con larga caducidad PPL970. Placas preparadas PPLM70 con 3 meses de caducidad a
la entrega. Tubos preparados BASE TPL700 + suplemento SMT700. Frascos preparados BASE RPL700 + suplemento SMT700.
MODO DE EMPLEO: El medio final es crema opaco. Sembrar, dada su alta selectividad, incluso un inóculo
concentrado en Fraser o LEB (nunca en Aguas peptonadas sin intermedio selectivo). Incubar 18-48 horas a 30-
37°C aproximadamente. Confirmar sólo las colonias regulares, redondeadas, de 1-2 mm, verde-azuladas, con
halo opaco. Según ISO 11290, algunas cepas estresadas (en particular por acidez) o fosfolipasa-débiles pueden
generar halos estrechos, que se sólo ven bien tras 4 días de incubación. Se han reportado raras cepas de
L.monocytogenes, especialmente procedentes de productos cárnicos, que crecen con colonias atípicas, de color
blanco. En nuestra validación de Microstick-Listeria, pudimos testificar que tras solo 18 h de enriquecimiento
en LEB de MICROKIT de 8 ufc de L.monocytogenes con 102-103 ufc de flora acompañante e interferente, la
siembra directa en Agar Cromocytogenes no produjo ni un solo falso negativo en 20 tipos diferentes de
alimentos, lo que nos permite proponer un protocolo de detección en solo 36h con 18 h LEB + 18 h
Cromocytogenes. También hemos comprobado reiteradamente que añadiendo 18 ml de nuestro caldo LEB [x5]
en 225 ml de nuestra Buffered Peptone Neutralizing Water, acortamos el enriquecimiento (revitalizador +
selectivo) a sólo 18 horas y esta combinación obtiene las estrías más densas y las colonias más intensas de
todas las permutaciones que hemos probado con Agua Peptonada Tamponada, Agua Peptonada Tamponada
Neutralizante, LEB y Semifraser/Fraser. El tercer mejor método que hemos detectado es pasar 1 ml de pre-
enriquecimiento de 18 h en 225 ml de Agua Peptonada Tamponada, a post-enriquecimiento en 9 ml de LEB
otras18 h. Las dos temperaturas de incubación (primero a 30 ºC y luego a 35ºC) mencionadas en la ISO 11290
no han mejorado nuestros resultados, incubando todo a 35ºC. En todos los casos LEB de MICROKIT funciona
mejor que semiFraser y Fraser.
COMPOSICIÓN: La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la Norma ISO 11290.
La referencia SMT700+ de suplemento cromocytogenes engloba una pareja de viales. Contiene las cantidades indicadas en
la ISO 11290-1:1996/Amd.1:2004 (E) de Ácido Nalidíxico, Ceftazidina, Polimixina B, Cicloheximida y L--
phosphatidylinositol, que suplementan el medio base Ottaviani & Agosti DMT700- (enzimatic digest of animal tissues 18g,
enzimatic digest of casein 6 g, yeast extract 10 g, sodium piruvate 2 g, glucose 2 g, magnesium glycerophosphate 1 g,
magnesium sulfate anhydrous 0,5 g, sodium chloride 5 g, lithium chloride 10 g, disodium hydrogen phosphate anhydrous
2,5 g, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl--D-glucopyranoside 0,05 g, Agar-agar 13,5 g en 930 ml de agua bidestilada).
CONTROL DE CALIDAD:
llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige PREPARADO: Estéril, Beige
EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 30-37 ºC, aplicando el método ISO 4831, o el
indicado en el Manual MICROKIT actualizado:
Listeria monocytogenes WDCM 00019 y WDCM 00021, Colonias verdes con halo. Con respecto a PCA estandarizado*,
recuento 277-424%, pero de forma más selectiva y diferencial. * El que cumple con recuperación superior al 92-125%
Listeria innocua WDCM00017, Correcto, Colonias verde-azuladas sin halo opaco.
Enterococcus faecalis WDCM00087, colonias incoloras.
Staph. aureus WDCM00033, colonias incoloras.
E. coli WDCM0013, inhibido completamente, tras añadir 103 ufc, no aparece ni una sola colonia.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de
desechar a la basura.
2
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
MCC-COLICULT ChromoFluorogenic Broth

Detección mediante Presencia/Ausencia de Coliformes y E.coli (incluida E.
coli O157) en aguas y mediante NMP ahorrando las campanas Durham.
COMPOSICIÓN
Triptosa 5,00 g
Hidrogenofosfato di-K 2,70 g
K dihidrogenofosfato 2,00 g
Sorbitol 1,00 g
Laurilsulfato sódico 0,10 g
Triptófano 1,00 g
MUG 0,05 g
1-isopropyl-beta-D-1-
thiogalactopyranoside 0,10 g
Cromógeno (X-Gal) 0,08 g El MCC-COLICULT es un Caldo Lauryl MUG con X-Gal

pH final: 6,8 ± 0,2
PREPARACIÓN
Añadir 1 g esterilizado por irradiación (VIALES FPA900) a 100 ml de agua de

muestra, que hará de diluyente; no esterilizar.
O bien, añadir 16 g/l final de medio no irradiado (DMT900-) y autoclavar 5
minutos a 116 ºC, inoculando después.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y

OSCURO.
1
DESHIDRATADO CODIGO: DMT900-

Agitar los frascos P/A (RPL303) antes de usar, para asegurar la

homogeneización de los eventuales gradientes de densidad de los
componentes: los cristalizados/precipitados se disuelven al añadir 100 ml de
muestra.
DESHIDRATADO: Polvo beige, estéril.
PREPARADO: Estéril, ligeramente paja.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 18-24 h de 35 a 44´5 °C

aproximadamente:
E. coli WDCM00013: 9 tubos de 9 turbios, viran a turquesa en 18 h,

fluorescencia intensa bajo 366 nm. Indol Kovacs + (rojo en superficie) a 37 ºC
y a 44 ºC.
Citrobacter freundii WDCM00006, 9 tubos de 9 turbios (turbidez 2), viran a
turquesa en 18 horas, no fluorescentes. Indol – (no rojo en superficie)
Enterobacter aerogenes WDCM00175: 9 tubos de 9 viran a azul-turquesa en
18 h, sin fluorescencia con 366 nm. Indol – (no rojo en superficie)
Pseudomonas aeruginosa WDCM00024: Crecimiento sin viraje ni
fluorescencia
Enterococcus faecalis WDCM00087: Inhibido incluso inoculando 106 ufc.
PRESENTACIÓN: FRASCOS P/A 18 ml (RPL303), TUBOS 10 ml (TPL637),

VIALES PREPESADOS E IRRADIADOS 1 g (FPA900), DESHIDRATADO
100 g (DMT900-).
2
Añadir 1 g de medio irradiado (FPA900) a 100 ml de agua de red o de

fabricación (o bien 2 g a 250 ml de agua envasada o de baño), para la detección
de la Presencia o la Ausencia de Coliformes y de E.coli. La única precaución es
que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar
contaminaciones artificiales. Es necesario tratar previamente el agua clorada,
mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se
recuperen. Si se usan frascos preparados P/A (RPL303), añadir 100 ml de agua
de muestra al frasco, que ya contiene los inactivadores de cloro. Si se usan
tubos preparados (TPL637), se añade sólo 1 ml de muestra. Si se usa medio
deshidratado no estéril (DMT900-), se añaden 16 g a 1 litro de agua
bidestilada, se dispensa en los recipientes adecuados y se autoclava 5 minutos a
116 ºC antes de inocular las muestras. Agitar para homogeneizar. Incubar 8-48
horas a 35-37 ºC aproximadamente (Coliformes totales y E.coli) ó a 44 ºC
aproximadamente (Coliformes fecales y E.coli). La muestra inoculada sirve
también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar
inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir horas
entre toma e incubación. Viraje a color azul (X-Gal): Presencia de Coliformes
(totales o fecales según la Tª de incubación). Fluorescencia azul (luz azul por
MUG) que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. 366 nm (linterna VMT050):
E.coli (confirmar con 0,5 ml de KOVACS (SDA056), anillo rojo de Indol es
+). E.coli O157 H7 se detecta por ser X-Gal + (vira a azul), MUG – (no
fluorescente) e indol + (anillo rojo).
Frascos P/A con MCC:

Izquierda positivo,
Derecha Negativo
El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de

acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de
3
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
MICROKIT® MUG PLUS CROMOGENIC AGAR

CCA (ISO 9308-1:2014) AGAR CROMOGÉNICO
COLIFORMES Y E.COLI S/BOE 31-MARZO-2009
Agar selectivo para la detección simultánea confirmativa
de coliformes totales/fecales y E.coli en cosméticos, aguas
y alimentos. Medio diseñado por MICROKIT desde 1995,
oficial por B.O.E. desde 2009 y por ISO desde 2014.
INTRODUCCION
Los substratos cromógenicos desarrollados desde los
años 90 por los laboratorios BIOSYNTH AG, en concreto
Salmon-Gal, X-Glucurónido e IPTG, permiten la
detección simultánea de coliformes (colonias rojas) y
E.coli (colonias azules) en el mismo medio de cultivo. MICROKIT® MUGPLUS:
Agar cromogénico para E.
La acción simultánea de las peptonas seleccionadas en el medio, coli (colonias azules -olas-) y
del piruvato y de los tampones fosfato, garantiza un rápido demás coliformes (colonias
crecimiento colonial, incluso para los coliformes en estado rosas -surf-). Campylobacter
subletal. El crecimiento de la flora acompañante Gram positiva, y Shigella crecen con colonias
queda inhibido gracias al tergitol y a la mezcla de antibióticos verdes (hierba) y otros Gram
negativos con colonias crema
Cefsulodina + Vancomicina.
(Pseudomonas -montañas-).
El enzima Beta-D-galactosidasa, característica de los
coliformes, actúa sobre el Salmon-GAL provocando la
pigmentación roja o rosada en las colonias de coliformes.
E.coli, coliforme Beta-D-glucuronidasa positivo, actúa sobre el Salmon-GAL y sobre
el X-Glucurónido (5-bromo-4-chloro-3-indoxyl Beta-D-glucurónido) de modo que sus
colonias crecen de color azul.
COMPOSICION (g/l)
Digerido Enzimático de Caseína ........1´0
Extracto de levadura ........................... 2,0
Cloruro Sódico ....................................5´0
Dihidrógeno Fosfato Sódico.2H2O .....2´2
Hidrógeno Fosfato Disódico ...............2´7
Piruvato Sódico...................................1´0
Sorbitol ...............................................1´0
Triptófano ...........................................1´0
Tergitol 7 ..........................................0´15
Salmon-beta-D-Galactósido .............. 0,2
X-beta-G-Glucurónido CHX sal ........0´1
IPTG ................................................... 0,1
Agar-Agar E libre de inhibidores .....10´0 Inconfundibles colonias añil, las más típicas de la
pH Final: 6´8 ± 0´2 mayoría de cepas de E.coli
1
MODO DE EMPLEO
Agitar el bote. Disolver 26,5 g en 1 litro de agua destilada, calentando hasta
ebullición. Mantener durante 1 minuto. Agitar hasta su completa disolución. Si se desea, por
contar con flora acompañante abundante, para convertir el CCA (ISO 9308-1:2014) en Agar
cromogénico para coliformes (BOE 31-3-2009) añadir asépticamente, cuando el medio se
haya enfriado a 55 ºC, 5 mg de Cefsulodina + 5 mg de Vancomicina (total 5 ml de solución
estéril MICROKIT SMS400) para aumentar la selectividad del medio y eliminar la flora
acompañante Gram positiva. No autoclavar. El medio final es blanquecino. No refundir más
de una vez.
En alimentos, la siembra en profundidad elimina los Gram negativos no
fermentadores, que en la técnica de Filtración de Membrana para análisis de aguas pueden
dar lugar a falsos positivos y además reducir en un 50% la recuperación de los
microorganismos diana; para evitarlo, se puede añadir sobre la membrana o sobre la
muestra, una segunda capa de medio agarizado, previamente enfriado a 50 ºC. Esto no es tan
necesario en aguas potables o poco contaminadas por flora acompañante, ni en cosméticos.
LECTURA DE RESULTADOS
E.coli crece en MugPlus Agar con

colonias azul oscuro-añil (algunas cepas
azul claro-turquesa, foto abajo) y los
demás coliformes con colonias rosa-
fucsia. No confundir E.coli con algunas
cepas de Campylobacter, Salmonella o
Shigella, que pueden crecer con colonias
esmeralda, aunque también son
indicadoras de problemas a menudo no
detectados con otros medios.
2
Tras 18-24 horas de incubación a 35-37 ºC aproximadamente (ó 44,5 ºC aproximadamente para
C. fecales), los resultados son: E.coli: Colonias de azul oscuro a violeta, a veces turquesa (Salmon-
GAL y X-GLU positivo), que resultan indol positivas (incluso a 44,5ºC). Coliformes: Colonias
rosas-rojas (Salmon-GAL positivo) + las azules (E.coli). Otras enterobacterias: Colonias incoloras,
excepto cepas como las Salmonella o Shigella Beta-D glucuronidasa positivas, que aparecen de
color azul claro a esmeralda. Muchas cepas de Shigella y de Campylobacter crecen con colonias
verdes, pero también es del máximo interés que sean detectados, al ser microorganismos patógenos.
Gram positivos alterativos: Unas pocas cepas de Enterococcus durans crecen con colonias rojas,
pero diminutas, y además también indican contaminación fecal del agua. Ciertas cepas de
Staphylococcus aureus, St.saprophyticus y de Bacillus spp crecen con colonias naranjas o rosas, pero
se descartan de inmediato porque son Neogram (Ref. MICROKIT KIN001) positivas. Otras cepas
crecen con colonias crema que nunca se han de tener en cuenta. Las colonias con colores intermedios
entre el rojo y el azul (violáceo-lila) pueden proceder de ufc mixtas: diluir y repetir el análisis, o
resembrar la colonia para aislar colonias puras, o mirar una placa sembrada con una dilución mayor.
Confirme E.coli cubriendo sus colonias con reactivo de Kovacs. Si éste vira de amarillo a rojo-
cereza antes de 1 minuto, la reacción es, definitivamente, confirmativa. De forma más definitiva,
repicar una colonia azul en Agua de Triptona con Triptófano (MICROKIT BCD129, tubos
preparados TPL034), incubar a 44,5ºC durante 6-18h y añadir el reactivo de Kovacs, para confirmar
como positivo en caso de viraje de la superficie del tubo a rojo.

CONTROL FISICO DESHIDRATADO: Gránulos blancos CONTROL FISICO PREPARADO: Estéril, Blanquecino (en lotes anteriores a
2009: crema)
RECUENTO TOTAL RESPECTO A PCA/g: 103 SALMONELLA: AUSENCIA E.COLI: AUSENCIA
pH FINAL ANTES ESTERILIZACION: 6,8 El pH (la conductividad máxima recomendada en el agua para elaborar medios de cultivo preparados
es de 5 S; la nuestra tiene: 0,7 S) certificado con tolerancia  0,2, corresponde al día de fabricación y antes de la esterilización. Una atmósfera rica en CO 2 y
el autoclavado suelen bajar el pH hasta 0,1-0,4, pero sin llegar a afectar la calidad del medio. Agitar los botes de medio en polvo antes de usar, para asegurar la
homogeneización de los eventuales gradientes de densidad de los componentes.
COMPOSICIÓN y cromógenos acordes a la Norma ISO 9308-1:2014 y RD140/2003
Control realizado en las instalaciones de MICROKIT. Para evitar amplificar problemas, es prudente repetirlo en su laboratorio tras el transporte, tras
almacenamientos prolongados, tras desinfecciones del laboratorio, tras fallos en la Tª u oscuridad de almacenamiento, tras adquirir aspectos extraños u otras
eventualidades, aunque no haya llegado la fecha de caducidad óptima. Los resultados de este informe son aplicables directamente a la muestra que se ha
analizado del producto que se certifica; y, estadísticamente, al resto del medio. LIBRE de materias primas sospechosas de portar el agente BSE.
CRECIMIENTO/INHIBICION DE CEPAS 24-48 h a 37 ºC:
(Aplicando el método ISO 9308-1:2014, o el del Manual MICROKIT actualizado, se añada o no suplemento Cefsulodina+Vancomicina
SMS400)
Escherichia coli WDCM00013, Excelente, colonias azul-añil-violáceas. Recupera en masa el 200% con respecto a lo que recupera por
siembra en superficie. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 58-125%. Indol + directo.
Pluralibacter gergoviae, Excelente, colonias rojo-rosa. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 97%
Citrobacter freundii WDCM 00006, Excelente, colonias rojo-rosa. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 106%
Klebsiella oxytoca MKTA13182**, Excelente, colonias lilas-granates. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 99%.
Enterobacter cloacae WDCM00083, Excelente, colonias rojo-rosa. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 58-104%.
Salmonella enteritidis WDCM00030 Excelente, colonias incoloras. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento en superficie 29-202%.
Shigella flexneri WDCM00126, Excelente, colonias incoloras en masa, a veces interferencia con crecimiento azul celeste si se siembra en
superficie.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 10602, Inhibido
Staphylococcus aureus MKTA 6571, Inhibido
*El que cumple con recuperación superior al 92-125 % con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres debidas a
las cepas y a las diferentes proporciones de flora acompañante.
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
Color de la colonia Salmon-GAL X-Glucurónido Indol Rto. Ante TSA

E.coli Azul oscuro-añil o turquesa + + + 58-125% *
Pluralibater gergoviae Rojo-rosa + - - >95%
Citrobacter freundii Rojo-rosa + - - 98-106%
Klebsiella oxytoca Lila-Granate + - - >99%
Enterobacter cloacae Rojo-rosa + - - 58-104%
Salmonella enteritidis Incoloro - - - 29-202%
Shigella flexneri Incoloro (azul en superficie) - - -
Salmonella MUG+ Azul claro - + -
E. coli O157 : H7 Rojo-rosa + - + 230%
* En superficie, ya que en masa recupera el 200% más que en superficie
Un estudio comparativo independiente (*) de validación cuantitativa entre este medio, otros
cromogénicos, Endo y MFC demuestra que MUG PLUS® es el mejor medio de recuento de E. coli
en aguas. La validación interna realizada por MICROKIT con centenares de muestras y la
3
revalidación mensual entre Seilagua ®, Seilalimentos y Seilaparfum, lo confirman de rutina para
agua y para todo tipo de matrices alimentarias y cosméticas, desde 1998.
PRESENTACION (PARA TODAS LAS NECESIDADES)
* Botes de 100 g de medio de cultivo deshidratado en polvo agarizado. Referencia DMT400-
* Suplemento voluntario en frasco de 100 ml, con 100 mg de solución estéril de Cefsulodina + Vancomicina,
para 20 litros de medio (5 ml/l). Referencia SMS400.
* Frascos de 100 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia RPL444.
* Frascos de 200 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia RPL244.
* Tubos de 20 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia TPL400.
* Viales 2 ml de caldo MUG PLUS® de MF con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia FPL400.
* Viales pinchables de 100 ml de caldo MUG PLUS® de MF con Cefsulodina+Vancomicina. Ref. RPL400.
* Plaquitas herméticas de Agar MUGLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia PPL902
* Placas preparadas de Agar MUGLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia PPLM40
* Placas Rodac Envirocount preparadas de Agar MUGLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina.
Referencia PPL511
* Placas preparadas de medio deshidratado DryPlates-EC con Agar MUGLUS®. Referencia DPP006
BIBLIOGRAFIA
 Framptom, e.w., Restaino, l., and Blaszco, n. 1988. evaluation of the b glucoronidase substrate 5 bromo 4 chloro 3
indolyl bd glucuronide (x-gluc) in 24 hour direct plating method for E.coli. j. food prot. 51: 402-404.
 Kilian, m. and Bulow, p. 1976, rapid diagnosis of enterobacteriaceae. i. detection of bacterial glycosidases. acta
pathot. microbiol. scand sect. b84: 245-251.
 Le Minor, L., and Ben hamida, f. 1962. Avantages de la recherche de la b-galactosidase sur celle de la fermentation du
lactose en milieu complexe dans le diagnostic bacteriologique des enterobacteriaceae. Ann. Inst. Pasteur (Paris) 102
 Manafi, M. and Kneifel, W. 1989. A combined chromogenic/fluorogenic medium for the simultaneus detection of
total coliforms and E.coli in water.zentralbl.hyg. 189: 225-224.
 Santos, C.J., Araujo, M., Gómez, M.J. and Garrido, M.J. evaluación de medios de cultivo para la detección de
Escherichia coli en aguas. Lab. microbiología, instituto de investigación y análisis alimentarios. Universidad de
Santiago de Compostela. 9-1999. “Cuando se evaluaron los parámetros de especificidad, selectividad, eficacia
relativa, precisión y exactitud del recuento, el Agar MugPlus resultó ser el más adecuado frente al Endo, m-FC,
Colitag y Coli-ID”
 Real decreto sobre aguas de consumo humano, addenda BOE 16 de 19/Enero/2011 y BOE 17 de 20/Nov/2011
 Validación MICROKIT del Agar MUGPLUS en aguas mediante SEILAGUA, 31-Marzo-2009
 Validación MICROKIT del Agar MUGPLUS en alimentos mediante SEILALIMENTOS, 16-07-2009
 Validación MICROKIT del Agar MUGPLUS en cosméticos mediante SEILAPARFUM, 31-Marzo-2009
 Validación MICROKIT del Agar MUGPLUS en placas deshidratadas (DryPlates-EC) en alimentos, aguas,
cosméticos, superficies y aire, 6 de Noviembre de 2013
 ISO 9308-1:2014 Calidad del agua. Detección y recuento de E. coli y de bacterias Coliformes.
Arriba: Coliforme (Serratia marcescens) con sus

típicas colonias rojizas en CCA. Dcha: E.coli
salvaje (turquesa), otros coliformes (malva) y
flora acompañante (crema)
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1995 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Nov-2020
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MUP Metil-Umbeliferil Phosfate
Reactivo para la confirmación de Clostridium perfringens (ISO/14189:2017)
Izda: Clostridium perfringens en TSC. Dcha: Idem en TSC con MUP bajo luz UVA de 366 nm
Ya que los reactivos indicados en la ISO 14189 son cancerígenos: El MUP (Metil-Umbeliferil Phosfate, Ref:
MICROKIT reacciona con las colonias de Cl.perfringens, fosfatasa ácida+, emitiendo fluorescencia azul o
amarilla bajo luz UVA de 366 nm (linterna MICROKIT VMT050).
PRESENTACIÓN: Puede adquirirse el reactivo en polvo (SMT009), para añadir a TSC Agar, o bien ya
preparado en PLAQUIS® herméticas de MICROKIT (Ref. PPL929) a las que debería añadirse una segunda
capa de TSC Agar fundido y atemperado a 45°C tras depositar la membrana.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO EN POLVO:
Disolver 45 g de TSC Agar en 1 l de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su total
homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos o mejor a 116 ºC, 15 minutos. El color final del
medio es crema. Enfriar a 50 ºC y añadir asépticamente 400 mg de D- Cicloserina estéril (4 viales de 100 mg
de SMS252). Añadir también, por cada 500 ml de medio enfriado a 50°C, 55-100 mg de suplemento MUP
(Metil-Umbeliferil Phosfate), que reaccionará con las colonias. A mayor concentración de MUP, más nitidez se
obtendrá en la fluorescencia. Verter de inmediato en placas y no recalentar. Utilizar de inmediato a su
preparación para evitar la letal oxigenación.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
Según UNE-EN 26461-2, calentar la muestra 15 minutos a 70-80 ºC. Filtrar 100 ml de agua a través de 0,22
µm (VAC022). Añadir en la placa Petri y verter 18 ml del medio enfriado a 50 ºC (y si se desea, preparado a
doble concentración), sin que se formen burbujas. Es preferible sembrar la membrana filtrada entre dos capas
de medio, añadiendo la segunda capa a 45-47°C justo antes de solidificar. Incubar 18-24 (-48) horas a 43-46 ºC
aproximadamente, en anaerobiosis. Clostridium perfringens WDCM 00007 y WDCM 00080 crecen con
colonias negras, pardas o grises, blancas si la anaerobiosis no es correcta, fluorescentes bajo luz UVA de 366
nm gracias al MUP. PR > 0,7 respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en otro lote validado de TSC
Agar sin MUP. Con respecto a Schaedler, recuento 75-252%, variabilidad que depende de la composición y
carga de la flora acompañante inoculada.
El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de
Fabricado en la UE para MICROKIT desde 2010 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
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PLATE COUNT AGAR (PCA)

CROMOGÉNICO
Recuento total en alimentos
(FIL,IDF,AOAC,APHA,ICMSF),
diferenciando las colonias, incluso las más Con este
diminutas, de las partículas y del medio práctico medio
de MICROKIT,
COMPOSICIÓN distinguirá a
Triptona 5,0 g simple vista las
Extracto de Levadura 2,5 g colonias, rojas,
Glucosa 1,0 g de las
Agar-agar 10,5 g partículas de
Cromógeno termoestable c.s. muestra y del
(Fórmula por litro) medio,
pH final: 7,0 ± 0,2 agilizando los
recuentos sin
PREPARACIÓN desgastar su
Disolver 19 g de medio en 1 litro de agua destilada. vista.
Repartir en tubos o frascos de máximo 100 mL. Autoclavar a 116°C durante 5 minutos. No
sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del
medio es blanco-rosado. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosa más intenso
que retorna al crema-rosado cuando se vuelve a enfriar el medio y no afecta los resultados.
Si se sobrecalienta demasiado el medio se vuelve rojo o con precipitados dorados y en ese
caso no es utilizable y hay que repetir con más cuidado.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN
CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE
USAR. DESHIDRATADO CODIGO: BCD510
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen
las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta
Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica
de la etiqueta,...). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Rosado
EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 37 ºC o mejor 72 h a 30
ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:
E. coli WDCM00013, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 76-157 % de colonias
respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad
depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 81-145 % de
colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la
productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
1
Bacillus subtilis WDCM00003, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 93-107 % de
colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la
productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
Micrococcus luteus MKTA9341**, Excelente, Colonias rojas en 48 h, crecen mucho más rápido y
mejor que en TSA, y mejor a temperatura ambiente.
Enterococcus faecalis WDCM00087, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 171 % *de
colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente, colonias rojas.
**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra,
Dos años de participación en ensayos intercomparativos de alimentos, con 10 matrices
alimentarias diferentes, demuestran que no existen diferencias en los recuentos en contra del
PCA cromogénico de MICROKIT respecto a los PCA standard, sino al revés; ejemplo: en
hamburguesas, recuento medio en PCA clásico 9,0 x 104, en PCA cromogénico 2,6 x 105 (ya
que el color permite ver muy bien las colonias más diminutas), otros medios (Nutrient Agar,
R2, LPT Agar, YEA... no indicados para matrices alimentarias) 8,5 x 103.
Comparando la recuperación de diferentes microorganismos en PCA cromogénico, fabricado con
diferentes agares, observamos que el Agar Europeo MICROKIT es el que mejores resultados
obtiene, con diferencias significativas de >1 log (36-39 veces más colonias), respecto a los demás
agares y respecto a TSA, y por ello es el que empleamos, para máximas recuperación y exactitud:
Cepa con concentración certificada PCA cromogénico PCA cromogénico PCA cromogénico
en TSA fabricado a partir de fabricado con agar fabricado con agar
PCA de otra marca de americano MICROKIT Europeo MICROKIT
reconocido prestigio
E. coli 1.79 x 103 6x103 (335 %) 1x104 (559 %) 1.8x104 (1000 %)
Klebsiella oxytoca 7.10 x 103 3
6x10 (84,51 %) 3
1x10 (14 %) 1.7x104 (239 %)
Shigella sonnei 1.37 x 103 3
7x10 (511 %) 3
7x10 (511 %) 1.6x104 (11.678 %)
Enterococcus faecalis 2.46 x 103 4
1x10 (406 %) 3
6x10 (244 %) 1.5x104 (6.098 %)
Candida albicans 3.19 x 103 5x103 (157 %) 8x103 (251 %) 1.8x104 (564 %)
TOTAL RECUENTO 1,59 x 104 298 % respecto a TSA 316 % respecto a TSA 3.916 % respecto a TSA
106 % respecto al 3.694 % respecto a los
anterior anteriores
PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Recuento total standard de bacterias aerobias en alimentos, productos farmacéuticos,
cosméticos y otros productos. Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: naranja,
púrpura.... sobre el tono rosado del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras,
que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los
aerobios). El color no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en masa. Incubar a 30 ºC
aproximadamente durante 48 horas. Con flora psicotrofa, incubar a 6 ºC aproximadamente
durante 10 días y con flora termófila, incubar a 55 ºC aproximadamente durante 48 horas.
Contar todas las colonias rojas. Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del
medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo. Este
medio está diseñado para siembra en masa. Si desea sembrar en superficie, añada 3-5 g/l de
Agar-Agar (BCB006), o utilice 25-27 g/l de este mismo medio. Para minimizar la
desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de
antiburbujas (SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de
autoclavar. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un
duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX
sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 2007 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en X-2020
2
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PLATE COUNT MILK AGAR CROMOGÉNICO

(BASE + Supl. en frasco)
Recuento total de bacterias en productos lácteos (DIS 6610, D.I.N. 10192,
UNE 34-819-:1985, UNE 34-810:1984, UNE 34-805:1983, UNE 34-812:1985)
diferenciando las colonias, incluso las más diminutas, de las partículas y del
medio
COMPOSICIÓN
Triptona 5,00 g
Dextrosa 1,00 g
Leche en polvo desnatada
(exenta de antibióticos) 1,00 g
Agar-agar 10,00 g
Cromógeno en frasco c.s.
pH final: 6,9 ± 0,2 Con este novedoso medio de MICROKIT,
distinguirá a simple vista las colonias, rojas, de
las partículas de muestra y del medio, agilizando
los recuentos sin desgastar su vista.
PARA USO EN LABORATORIO.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. CODIGO: BCD115Z.

Tambien en frascote preparado (RPL215) 200 ml con Reactivo cromogénico
termoestable, para fundir y elaborar placas en las que las colonias se
distinguirán muy bien del medio y de las partículas de muestra, por colorearse
de rosa-rojo-púrpura sobre fondo blanco.
PREPARACIÓN
Disolver 19,5 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta
1
ebullición, agitando hasta su completa disolución. Autoclavar a 121 ºC durante
15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC y
añadir asépticamente 2 ml pinchados del suplemento estéril anexo
(MIXCROM). No refundir. El color final del medio es blanco-crema. A veces,
por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando
se plaquea, y no afecta los resultados.

DESHIDRATADO: Polvo blanco. PREPARADO: Blanco traslúcido
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente (o bien 72
h a temperatura ambiente 21-28°C aproximadamente):
Escherichia coli WDCM00013, Excelente, colonias rojas, con respecto a PCA
estandarizado*, recuento medio 120 % (las colonias diminutas también se ven)
Enterococcus faecalis WDCM00087, Excelente, colonias rojas, con respecto a
PCA estandarizado*, recuento medio 112 % (las colonias diminutas también se
ven)
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, colonias rojas, con respecto a
PCA estandarizado*, recuento medio 170 % (colonias diminutas también se
ven)
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente, colonias rojas, con
respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 99 %.
*El que cumple con recuperación superior al 92-125 % con respecto a cepas
cuantitativas trazables a la cepa tipo.
Los recuentos medios son más altos que en el medio sin cromógeno,
porque el color rojo permite ver muy bien las colonias diminutas en un
ambiente semiopaco.
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales en masa. Incubar
72 horas a 30 ºC aproximadamente para los aerobios mesófilos, a 55 ºC
aproximadamente para los termófilos y a 7 ºC aproximadamente para los
psicrófilos. Contar todas las colonias y multiplicar por el factor de dilución
para expresar los resultados en UFC/ml. Este medio está diseñado para siembra
en masa. Si desea sembrar en superficie, añada 3 g/l de Agar-Agar (BCB006).
Algunas levaduras y bacterias acidolácticas pueden crecer, como en PCA-Milk
normal, sin coloración roja, por lo que este medio los distingue de los aerobios.

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 2007 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en X-2020
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CROMOKIT® Lactobacillus AGAR

Agar cromogénico diferencial para recuento selectivo de Lactobacilos
COMPOSICIÓN
Triptona 10,0
Extracto de levadura 5,0
Dihidrogenofosfato de Potasio 6,0
Citrato diamónico 2,0
Acetato de Sodio 15,0
Sulfato de Magnesio anhidro 0,281
Sulfato de Hierro 0,034
Sulfato de Manganeso anhidro 0,011
Glucosa 20,0
Polisorbato Tween 80 1,0
Agar-Agar 12,0
(Fórmula en g/L)
Puede añadir suplementos para ajustar la fórmula a sus requerimientos específicos
pH final: ajustar a 5,8 ± 0.2
PREPARACIÓN
Disolver 71,3 g de medio en 1 L de agua bidestilada. Remover para homogeneizar, calentando hasta ebullición sin
parar de remover. AUTOCLAVAR a 121ºC durante 15 minutos. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando
suavemente. No volver a fundir, dispensar en placas Petri estériles que contengan 1 mL de muestra y su serie de
diluciones decimales y dejar solidificar. El color del medio es crema.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE DE POLVO ANTES DE USAR PARA
HOMOGENEIZAR LOS GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS DIFERENTES COMPONENTES,
POSIBLEMENTE FORMADOS DURANTE SU ALMACENAMIENTO. MANTENGA EL BOTE BIEN
CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT506)
¡SIN LOS FALSOS POSITIVOS TAN FRECUENTES EN MRS AGAR, QUE A MENUDO SUPONEN MÁS
DEL 90% DEL RECUENTO FALSEADO!
1
llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...).
DESHIDRATADO: Polvo crema
PREPARADO: Estéril, crema
CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a 35°C aproximadamente, en anaerobiosis:
Lactobacillus acidophilus MKTA 314, Correcto, colonias verdes o verde-azuladas
Lactobacillus casei MKTA 3932, Correcto, colonias blancas
Lactobacillus bulgaricus MKTD 20081, Correcto, colonias blancas
Preparar la muestra y su serie de diluciones decimales en Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing
Water, MRS Broth u otro medio adecuado.
Sembrar en superficie sobre la placa preparada 0,1 mL de cada dilución, repartiendo con asa Digralsky. Tambien
puede sembrar 1 mL de cada dilución en masa, cuidando que el medio esté a 45-47ºC para no destruir las células
diana; pero las colonias se verán mejor en siembra en superficie.
Tras dejar que el medio absorba la muestra, invertir las placas e incubarlas a 35ºC en jarra o en bolsa de anaerobiosis
(KKT001) durante 72h. Realizar el recuento de las colonias verdes (L.acidophilus) y blancas (otros lactobacilos).
También pueden crecer enterococos, pediococos y especies de Leuconostoc.
e
NOTA
Aunque el medio es ideal para recuento de Lactobacillus acidophilus en yogurt, otros productos lácteos fermentados y
en probióticos, también resulta de mayor ayuda que el MRS Agar u otros agares clásicos para recuento selectivo de
Lactobacilos y acidolácticas en general, en cualquier tipo de muestra ácida.
El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar
antes de desechar en la basura.
Medio diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, desde Enero de 2022, actualizado en Junio de 2022
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RAPID YM AGAR-MEDIO ACELERADOR DE HONGOS

Agar innovador para la detección rápida de hongos (levaduras + mohos) en sólo 18-48 (72) horas,
por viraje de violeta a amarillo, incluso en productos con conservantes (cosméticos, alimentos…)
Aspergillus niger: Izda, en sólo 18h ya vira el medio de lila a amarillo en el inicio de la estría. Aspecto de la misma placa en sólo 36 h.
JUSTIFICACIÓN DE SU NECESIDAD:
Existen numerosos agares para aislamiento y recuento de hongos (levaduras y mohos). Algunos son los más
conocidos aunque su origen sea la microbiología clínica (Sabouraud), otros son mejores para optimizar los
recuentos (RB Caf y DRBC), otros para aumentar su biomasa (PDA, MEA, SMA), otros se han ido creando
para microbiología alimentaria (OGYE, YGC, DG18…). Pero todos tienen el mismo problema: la necesidad
de incubar 3-5 días para conocer los resultados, convirtiéndose así en el eslabón más débil de la cadena en el
laboratorio de control, porque retrasa la liberación del producto final nada menos que una semana. Consciente
de este problema, MICROKIT creó en 2019 el caldo acelerador Rapid-H para detección precoz de hongos en
cosméticos, alimentos, etc. Sólo faltaba pasarlo a medio agarizado para permitir el recuento (por siembra
Digralsky) o el aislamiento para identificación (por siembra en estría tras enriquecimiento) en dicho caldo (o
en Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing Water, LPT Neutralizing Broth, Eugon…). Aquí
están los resultados.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN:
1- Si usa medio deshidratado, pesar 36,54 g, añadir a 1 L de agua bidestilada, agitar, calentar hasta ebullición,
removiendo frecuentemente para evitar grumos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 50ºC,
ajustar pH a 7,3 (si es necesario en función del agua empleada: el medio debe quedar del mismo color lila de
las fotos de este folleto). Dispensar en placas o Rodac (para muestreo rápido de superficies, y aire con MBS
de impacto) y dejar que solidifiquen.
2-Si usa frascos preparados 100 mL, fundirlos en agua hirviendo durante unos minutos hasta que estén
completamente líquidos, enfriar a 50ºC y verter en 5 placas estériles 90 mm o en 6 placas Rodac (para análisis
precoz de superficies, y aire con MBS de impacto).
3-Si usa placas preparadas o se las ha preparado a partir de medio en polvo o de frascos preparados, puede
sembrar de dos formas: a) En estría si ha enriquecido la muestra, para simple detección e identificación de
hongos (levaduras y mohos). B) en siembra Digralsky (VCL155) un máximo de 0,33 ml de solución madre y
1
sus diluciones, para recuento de hongos (levaduras y mohos). Deberá usar 3 placas y sumar los 3 resultados
para obtener un recuento fiable en 1 mL (=0,1 g de muestra en la solución madre). No siembre en masa, los
mohos y muchas levaduras son muy aerófilos y crecen muy despacio en masa. Es preferible haber usado
caldo acelerador Rapid-Hongos como diluyente o como enriquecedor.
4-Incubar a 32,5 ± 2,5 ºC (no es una errata, en este medio las levaduras y mohos crecen mejor a esa
temperatura que a la tradicional de 22,5ºC, lo que le ahorra una estufa de cultivos), durante 18-48 horas.
5-Cualquier viraje del agar violeta a amarillo indica presencia de hongos, ya que el medio es selectivo contra
bacterias y contiene factores estimulantes del crecimiento de hongos incluso en estado sub-letal. La muestra
puede tener conservantes, ya que el agar está formulado para este tipo de productos. Si no hay viraje, dejar
por prudencia otras 24 h (total 72 h) por si se trata de hongos estresados o en estado sub-letal. Si el viraje se
produjo al sembrar, debe emplear caldos de dilución o enriquecimiento que no acidifiquen, al estar
tamponados (ideal Buffered Peptone Neutralizing Water o caldo acelerador Rapid-Hongos)
Candida albicans, levadura detectada en sólo 16h por colonias

con halos amarillos sobre fondo violáceo
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN

LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL
Alternaria alternata, moho lento detectado en sólo 36h por viraje BOTE ANTES DE USAR PARA ELIMINAR LOS
a amarillo del inicio de la estría, después crecen las colonias EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD
DE LOS COMPONENTES, SOBRE TODO TRAS
PROLONGADOS ALMACENAMIENTOS. PARA
USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
Rhodotorula mucilaginosa,levadura lenta detectado en sólo 36h

Penicillium digitatum, moho lento esporulado en sólo 72h con
por colonias naranjas y medio amarillo a su alrededor (igual que
colonias verde-gris tras viraje precoz a amarillo del medio.
Saccharomyces cerevisiae: colonias blancas y medio amarillo)
PRESENTACIÓN Y CADUCIDAD: DESHIDRATADO (DMT243), 5 años, PLACAS PREPARADAS

(PPLM24 en caja de 80 u y ECOP07 en caja de 200u), 3 meses, Frascos preparados 100 mL para
preparar 5 placas ó 6 Rodac (RPL070), 1 año. La temperatura de conservación no es muy importante,
aunque es preferible que sea de 15 a 21 ºC, al menos en las placas preparadas. Lo que sí es imprescindible es
MANTENER PROTEGIDO DE LA LUZ! No congelar.
El usuario es el único responsable de la destrucción de los microorganismos generados en el interior del kit durante su uso, de
acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Añada lejía o alcohol, o si puede autoclávelos, antes de desecharlos a la basura.
Mantener fuera del alcance de los niños. No ingerir.
Diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 3-2021, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado el 7-Abril-2021
2
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NEOGRAM ENVIROCOUNT
SABOURAUD DEXTROSE CAF (CLORANFENICOL) AGAR

CROMOGÉNICO
Recuento selectivo de Levaduras y Mohos con mayor contraste de las colonias,

que de este modo se detectan antes de aparecer, más rápidamente por su
actividad metabólica anterior al crecimiento de sus colonias (verdes sobre
medio crema), en base a UNE 34 821:1986 e ISOS cosméticas: NF T75-611
(Poder inhibitorio intrínseco), ISO 16212 (recuento de hongos), ISO 18416
(Candida albicans).
1
COMPOSICIÓN
Polipeptona micológica 10,00 g
Dextrosa 40,00 g
Cloranfenicol 0,50 g
Agar-agar 15,00 g
Mezcla cromogénica c.s. Irritante a causa
(Fórmula por litro) del cloranfenicol
pH final: 5,6 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 65,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición,
agitando para su completa disolución. NO Autoclavar. Si se autoclava, hacerlo
a sólo 116ºC durante 1 minuto, o las colonias perderán mucho color.
Dos levaduras, Izda: Candida albicans Dcha: Saccharomyces cerevisiae

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema
2
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 3-5 días a temperatura
ambiente (21-28°C aproximadamente):
Aspergillus niger-brasiliensis WDCM 00053, Correcto, Colonias verdes y esporuladas de
negro en 5 días. Con respecto a TSA, recuento 73-475 %, pero de forma selectiva.
Saccharomyces cerevisiae WDCM 00058, Correcto, colonias verde-oscuras. Con respecto a
TSA, recuento 95-170 %, pero de forma selectiva.
Candida albicans WDCM 00054, Excelente, colonias verde-claro. Con respecto a TSA,
recuento medio 122-144 %, pero de forma selectiva.
Staphylococcus aureus WDCM 00033, E.coli WDCM 00013, Pseudomonas aeruginosa
WDCM00026, Streptococcus pyogenes MKTA19615, y Bacillus subtilis WDCM00003,
Inhibidos
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO,
NOTA: Medio base (SDA Caf) de uso muy extendido para el aislamiento y
recuento de hongos (levaduras y mohos) en la industria alimentaria.
El cloranfenicol actúa como antibacteriano termoestable de amplio espectro, lo
que da al medio una excelente selectividad con respecto al Sabouraud Dextrose
Agar.
La mezcla cromogénica que hemos añadido al medio base, permite una visión
más rápida de las colonias incipientes de levaduras y mohos, al contrastar su
color verde sobre el medio crema. Si los colores que obtiene son más tenues
que los de las fotografías, es porque se ha sobrecalentado el medio, debe tener
más cuidado la próxima vez. Esto también le sirve de indicador de que ha
caramelizado los azúcares por sobrecalentamiento, lo cual en el medio base
sólo se aprecia por un color caramelo en vez de crema, y esto repercute
también en la fertilidad (% de recuperación de ufcs).
SIEMBRA
En placas se siembra en superficie, extendiendo con un asa de Digralsky. Se
puede sembrar en masa enfriando el medio a 45ºC, pero entonces los mohos y
algunas levaduras crecerán más lentamente por falta de oxígeno. El medio se
incuba a 20-25 ºC aproximadamente, durante 3-5 días.
INTERPRETACIÓN
Las levaduras aparecen como colonias verdes no filamentosas, a menudo
mucosas. Los mohos crecen con colonias filamentosas, verdes y de margen
difuso. Identificar al microscopio los mohos; para levaduras y mejores
identificaciones de mohos, enviar las placas de cultivos puros a nuestro
servicio de Identificación molecular.
El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que

se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 2017 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
3
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
T.B.X. Tryptone Bile X-Glucurónido Agar
Medio cromogénico con base TBA, siendo éste para la detección y recuento
confirmativo de Escherichia coli en aguas, por el método de Filtración de
Membrana, mediante ensayo rápido según Norma ISO 9308-1:2001, BOE 45
de 21/2/2003 de aguas de consumo humano y BOE 259 de 29/X/2003 de aguas
de bebida envasadas. Para alimentos como medio cromogénico TBX, según
Norma ISO 16649-2; y para piensos según Norma ISO/TC 34/SC9.
COMPOSICIÓN
Triptona 20,0 g
Sales Biliares 1,5 g
X-Glu 0,075 g
Agar-Agar 14,0 g

pH final: 7,2 ± 0,2
E.coli en Agar T.B.X.

PREPARACIÓN
Disolver 35,6 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta

ebullición. Repartir en envases de menos de 250 ml. Autoclavar a 121 ºC
durante 15 minutos.
Enfriar a unos 55°C aproximadamente y verter en placas formando una capa de
espesor no inferior a 5 mm.

BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL
BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL MEDIO PREPARADO A 15-
21°C, EN TOTAL OSCURIDAD. PRESENTACIÓN: MEDIO
DESHIDRATADO CODIGO: DMT147. Frascos preparados para fundir en
placas. Tubos preparados de agar inclinado. Plaquis semi-herméticas 50 mm.
1
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el
laboratorio, tras conservar a alta Tª por fallos de refrigeración, cuando adquiere
aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de su
etiqueta...)
DESHIDRATADO: Polvo crema.
PREPARADO: Agar crema, homogéneo, traslúcido.
E. coli WDCM00013, Excelente, tras inocular <100 ufc, crecen >50%.
Colonias verde-azuladas. PR > 0,5, en concreto >75-96%* de colonias respecto
al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Klebsiella oxytoca MKTA13182**, Crecimiento con colonias incoloras. Con
respecto a TSA, recuento >50% (50-121 %*).
Enterococcus faecalis WDCM00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Crece escaso o no crece.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Inhibición completa: Ni una sola colonia
Bacillus subtilis WDCM00003, Inhibido
*Esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la
flora acompañante inoculada.
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos

Las placas no deben estar recién hechas, ya que en este medio hay que dejarlas
enfriar más de una hora para que la superficie quede bien dura.
Sembrar la membrana filtrada (procedente de incubación de 4-5h a 34-38 °C,

en TSA) evitando la formación de burbujas entre el filtro y el medio. O bien
sembrar 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, para siembra en
masa, añadiendo después 15-20 ml de medio fundido a 100°C y atemperado a
47-50°C y mezclando. Dejar solidificar del todo más de 1 hora. Incubar 19-20
horas a 44 ± 0,5 °C. Para muestras con probables células subletales, preincubar
4 horas a 37°C aproximadamente. Todas las colonias verde-azuladas son
presuntos E.coli.
Colocar la membrana sobre un cartón saturado en reactivo de Indol Kovacs
(SBH056) e irradiar con luz ultravioleta entre 10 y 30 minutos. Se cuentan
todas las colonias que viran el reactivo a rojo, considerándolas como E.coli.

acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar o inundar en
lejía antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 2001 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Abril-2020
2
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
NEOGRAM ENVIROCOUNT
TSB-TRYPTIC SOY BROTH CROMOGÉNICO

IRRADIADO (POLVO ESTÉRIL)
Validación de productos y de procesos farmacéuticos (USP Media Fills)
mejorado con cromógeno que alerta de la contaminación por viraje a rojo en
menos tiempo.
COMPOSICIÓN
Triptona de caseína 17,0 g

Fosfato dipotásico 2,5 g
Glucosa 2,5 g
(Fórmula en g/l)
pH final 7,3 ± 0,2

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO CROMOGÉNICO EN

POLVO, botes de 500 g esterilizados por rayos GAMMA triple envuelto en 3
bolsas autosellables: CÓDIGO: DMT778
Si lo desea, podemos fabricárselo en otras presentaciones (botes estériles de

100 g, 10 g, 1 g, csp 1 litro -30 g-, frascos preparados hidratados y estériles
como por ejemplo los de la fotografía...): CONSÚLTENOS.
También disponible TSB clásico (sin cromógeno) en polvo estéril (DMT777).
1
PREPARACIÓN
Disolver en condiciones de esterilidad, en proporción de 30 gramos por litro de
agua bidestilada a 21-25 ºC, volteando varias veces hasta su total
homogeneización. NO autoclavar.

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige, esterilizado por rayos gamma
PREPARADO: Ambar ¡no autoclavar ni sobrecalentar o se volverá rojo!
CONTROL DE CRECIMIENTO 2-7 días a temperatura ambiente (21-28°C
aproximadamente) o bien 48 h a 37°C aproximadamente:
Streptococcus pyogenes MKTA19615**, Excelente con alta turbidez , rojo
Staphylococcus aureus WDCM00032, Excelente con alta turbidez, rojo
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente con alta turbidez , rojo
Escherichia coli WDCM00013, Excelente con alta turbidez, rojo
Bacillus subtilis WDCM00003, Excelente con alta turbidez, rojo
Aspergillus niger-brasiliensis WDCM00053, Excelente con alta
turbidez/flóculos
Candida albicans WDCM00054, Excelente con alta turbidez, rosa
**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos

La inoculación en los recipientes será totalmente aséptica. Para el test de
esterilidad, incubar 7-14 días a 20-25 ºC. La turbidez indica que en la muestra
o en el proceso hay un fallo de esterilidad. En tal caso, mucho tiempo antes, el
medio habrá virado a rojo. Una vez abierto el bote no se puede garantizar su
esterilidad. La etiqueta roja indica que se ha irradiado, pero no necesariamente
que siga estéril, de acuerdo con las especificaciones del proveedor de la
irradiación: Es prudente realizar antes un test de esterilidad del polvo.

acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de
Diseñado y fabricado en la UE por MICROKIT desde 2009 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en
Abril-2020

Medios Cromogenicos Laboratorios Microkit

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MICROKIT CROMOKIT®

Medios de cultivo cromogénicos

RAPIDTEST Broth MU GPL US Cfs.Agar MCC Broth

CHROMOSALM Agar T.B.X. Agar CHROMOCYTOGENES Agar

PCA-Cromogenic Agar YEA-Cromogenic Nutrient Agar

: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

Cromokit X-Staph, detección y recuento de

: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

RAPIDTEST se basa en reacciones metabólicas microbianas, que alteran las

: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

1. Añadir a un tubo 1 ml del producto o, en productos sólidos, 1 ml de la solución madre (disolución de

: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

CROMOKIT® PAU-14 AGAR (PathoChrom Alimentos Universal Agar)

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

AHORRE TIEMPO Y PLACAS....

Independencia, al no someterse a la espera de importaciones/programaciones de placas preparadas

En Agosti Listeria and Ottaviani Agar, la -glucosidasa de

Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de

CHROMOCYTOGENES Agar base DMT700.

COMPOSICIÓN: La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la ISO 11290

CONTROL DE CALIDAD: Listeria monocytogenes: Colonias verdes con halo; con

(+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

CROMOKIT X-STAPH AGAR

En la validación interna realizada en 80 muestras de ﬂora mixta, la sensibilidad obtenida con

Incubar a 35-37 ºC, durante 18-48 horas.

: (+34) 91 897 46 16 - Fax: (+ 34) 91 897 46 41 Apartado 44 - 28210 Madrid - España

BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR)

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

El usuario es el único responsable de la eliminación de los

B.sporothermodurans en Maxim Agar Cromogénico (MICROKIT BCD515) en 3 días a 35ºC

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532). Obsérvese el mayor tamaño

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532) al que hemos añadido 37 g/L

CROMOKIT BACILLUS CEREUS AGAR

Peptona péptica de carne 10,0 g

PREPARACIÓN B.cereus, colonias blancas, céreas, con centro azul-

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR (BASE + frasco MIXCROM)

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

CROMOKIT C.PERFRINGENS AGAR

Disolver 50,0 g de medio en 1 L de agua bidestilada.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. Y EL SUPLEMENTO

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

CROMOKIT CAMPY AGAR

Polipeptona bacteriológica 15.00 g

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. Y EL SUPLEMENTO

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

MEDIO DESHIDRATADO 100g (DMT560-) y suplemento anexo c.s.p.2 L de medio final.

CROMOKIT EE AGAR (BASE)

(Fórmula por litro)

Suplemento SBH424: Agentes selectivos: 9,0 mg

Disolver 19 g del medio en medio litro de agua destilada. Calentar agitando

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE Y

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (botes de 500 g y de 100 g)

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio

Sembrar en masa 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, ya que

Contar todas las colonias rosas y azules como Enterobacterias, ya que la

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la