ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y

RECURSOS NATURALES

TEMA: COLIFORMES TOTALES

Mag. Elena Elvira González

Mamani
Estudiantes:
 Hilares Juro Mónica Carolina
 Montalvo Guzmán Kevin
 ¿QUE SON LOS COLIFORMES TOTALES?

 Generalmente el término “coliformes” son microorganismos de forma bacilo gram negativos, que
fermentan la lactosa produciendo ácido y gas entre 24 a 48 horas, pueden encontrarse en el tracto
digestivo del hombre o animales, por lo cual son expulsados especialmente en las heces como la
escherichia coli.
 Los coliformes totales son un grupo más utilizado en la microbiología de alimentos como indicador de
prácticas higiénicas inadecuadas y también pueden vivir en otros ambientes, se distingue entre
coliformes totales y coliformes fecales.
 2.-¿QUE CONTIENE LOS COLIFORMES TOTALES?
El grupo de los coliformes incluye bacterias en forma de bacilo Gram negativos con las siguientes
propiedades bioquímicas: oxidasa negativo y capacidad de fermentar lactosa, con producción de
gas en 48 horas a una temperatura de 37 °C.
El grupo coliforme está formado por los siguientes géneros:

Klebsiella
Escherichia coli

Citrobacter
Enterobacter
 3.-¿QUE SIGNIFICA LA PRESENCIA DE COLIFORMES
TOTALES?

 La presencia de bacterias coliformes es un indicio

de que el agua puede estar contaminada con aguas
negras u otro tipo de desechos en descomposición.
Generalmente las bacterias coliformes se
encuentran en mayor abundancia en la capa
superficial del agua o en los sedimentos del fondo.
 La presencia los coliformes totales son aquellos
microorganismos patógenos que se encuentran
presentes en el agua y su comportamiento frente a
diferentes factores como ph, temperatura, presencia
de nutrientes y tiempo de retención hídrica.
 4.-¿QUE CAUSA LOS COLIFORMES TOTALES SI EXCEDEN
LOS VALORES

Los valores establecidos para los coliformes totales es entre 30 - 50 UFC/100ml. Si los coliformes
totales supera los límites máximos permisibles, lo cual hace que el agua no sea apta para el
consumo humano constituyendo un eminente riesgo toxicológico para la población, cuando
aumenta la presencia de coliformes en el agua, aumenta también la probabilidad de que esta
contenga algún microorganismo patógeno.
 5.-¿COMO SE MIDE Y A TRAVÉS DE QUE MÉTODO ESTANDARIZADO SE
DETERMINA LOS COLIFORMES TOTALES?
 NMP (número más probable): Es una técnica de diluciones en tubo, es el cálculo de la densidad probable de
bacterias coliformes en la combinación de resultado positivo y negativo obtenido en cada dilución, este se
basa contando el número de tubos con fermentación positiva y comparando con la tabla del número más
probable para coliformes totales, con un nivel de confianza estadística del 95% para cada valor determinado
y expresado como NMP de coliformes por 100 ml de muestra de agua
 UFC (unidades formadoras de colonias): Es una técnica de disoluciones en placas, utilizan para cuantificar
cuántas bacterias están presentes en una solución dependiendo de la concentración de la muestraes. Es una
unidad de medida que se emplea para la cuantificación de microorganismos, es decir, para contabilizar el
número de bacterias.
 MATERIAL Y EQUIPO

 Medio de agar bilis rojo violeta (ABRV)

 Incubadora
 Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada
 Registrador mecánico o electrónico
 Microscopio óptico
 Baño de agua con termómetro calibrado, que mantenga la temperatura a 45 ±°C.
 Utensilios estériles (cuchara, pinzas) para tomar la muestra.
 Propipeta
 Pipetas bacteriológicas de 10 ml y que estén esterilizadas.
 Pipetas bacteriológicas de 1 ml, estériles, con algodón en el extremo superior.(las
necesarias de acuerdo con el número de diluciones)
 4 a 8 placas Petri estériles, de 15 x 100 mm.
 Stomacher (homogeneizador peristáltico).
 Bolsas estériles para Stomacher.
 

Procedimiento
1. Pesar la muestra agar bilis rojo violeta (ABRV) y preparar las diluciones. Recordar que el rango de sensibilidad del método es de 15 a 150 colonias
por placa.
2. Distribuir las placas estériles en la mesa de trabajo de manera que la inoculación y la adición de medio de cultivo se puedan realizar cómoda y
libremente. Marcar las bases de las cajas con los datos pertinentes antes de colocar el inóculo.
3. Inocular por duplicado, 1mL de la dilución en cada placa, mediante una pipeta estéril y verter de 18 a 20mL del medio ABRV fundido y mantenido a
45°C. El tiempo transcurrido entre la preparación de la dilución primaria y el momento en que se vierte el medio de cultivo, no debe exceder de 20
minutos.
4. Mezclar cuidadosamente el inóculo con el medio, mediante movimientos rotatorios . Permitir que la mezcla solidifique dejando las placas Petri
sobre una superficie horizontal fría. No permitir que se mojen las tapas de las placas.
5. En cuanto el medio solidifique, agregar a cada placa, una sobrecapa de 4 ó 5 mL del mismo medio fundido y mantenido a 45 °C, no permitir que se
mojen las tapas de las placas. La sobrecapa de agar se coloca para favorecer el crecimiento de los coliformes, que son facultativos. Dejar que
solidifique.
6. Preparar una placa para el control con 18 a 20 mL de medio para verificar la esterilidad.
7. Solidificado el medio invertir las placas y colocarlas en la incubadora a 35°C, durante 24 horas.
8. Después de este periodo, contar las colonias con el contador de colonias. Seleccionar las placas que contengan entre 15 y 150 colonias. Las colonias
típicas son de color rojo oscuro, generalmente se encuentran rodeadas de un halo de precipitación debido a las sales biliares, el cual es de color rojo
claro o rosa, la morfología colonial es semejante a lentes biconvexos con un diámetro de 0.5 a 2.0 mm.
9. Hacer uso del microscopio para resolver los casos en los que no se pueden distinguir las colonias.
 CONCLUSIONES
 Si los coliformes totales exceden los valores permisibles presentan un alto grado
de contaminación, lo que implica un riesgo de la presencia de microorganismos
patógenos y con ello genera un riesgo para la salud.

 La presencia de bacterias coliformes nos indica que el agua puede estar

contaminada con aguas negras u otro tipo de desechos, generalmente se encuentran
en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo
y son aquellos que pueden alterar los diferentes factores como pH, temperatura.

 El valor establecido para los coliformes totales es entre 30 - 50 UFC/100ml. Si los

coliformes totales supera los límites máximos permisibles, el agua no es apta para
el consumo humano y constituye un gran peligro para la salid humana
 REFRENCIAS

PREGUNTAS:
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DEPA.FQUIM.UNAM.MX/AMYD/ARCHIVERO/TECNIC-BASICAS-COLIFORMES-EN-PLACA_6528.PDF
HTTPS://ES.WIKIPEDIA.ORG/WIKI/COLIFORME
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