BIOQUÍMICA GENERAL Práctica: Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de la reacción, efecto del pH sobre la velocidad de reacción. Alumnos: Gonzàlez Severiano Mauricio y Martìnez Capetillo Diana I. Grupo: 3FV1 Sección: 2 Equipo: 4
Introducción: De acuerdo a la literatura consultada, la
Una enzima es un catalizador biológico invertasa tiene un pH óptimo que va que acelera las velocidades de las desde 4.5 a 5 por lo que el valor reportado reacciones químicas. Esta actividad en la reacción coincide con el pH óptimo depende de ciertas condiciones, entre de la invertasa. ellas la concentración de la enzima y el (Bioquímica, texto y atlas) pH del medio. Sin embargo, después de haber Objetivos: alcanzado la velocidad máxima de la ● Determinar el pH óptimo de la reacción, de acuerdo a la literatura, se invertasa. esperaría que el valor de absorbancia ● Demostrar que la concentración de disminuyera poco a poco, lo cual no enzima es directamente proporcional a sucedió. la velocidad de reacción. Hemos inferido que esto fue ocasionado ● Analizar la importancia del pH del por la posible contaminación de los medio sobre la velocidad de reacción reactivos. enzimática y su efecto sobre el Efecto de la concentración de enzima. carácter iónico de la enzima y del Para este experimento la concentración sustrato. del sustrato debe ser constante. Teniendo Resultados: en cuenta lo anterior, se explica que al ir Anexos en la siguiente página aumentando la concentración de enzima Discusión: en nuestro medio, más moléculas están Efecto del pH sobre la velocidad de disponibles para unirse al sustrato, reacción aumentando su actividad. De acuerdo a la estructura primaria de las Como podemos apreciar en la Gráfica 2, enzimas, contienen diferentes al ir aumentando la concentración de aminoácidos con grupos ionizables. Es enzima, la velocidad de reacción de igual por esto, que dependerá del medio en el forma aumentará. que se lleve a cabo la reacción si es ácido Conclusión: o básico. En esta práctica determinamos el pH Cada enzima cuenta con un pH óptimo óptimo de la invertasa, el cual es entre 4.5 que es en donde se alcanza el punto de y 5, además se aprecia en la Gráfica 2 mayor velocidad de reacción. Por ende, al una línea recta con pendiente positiva, por variar el rango de pH la velocidad de la lo que la relación entre [enzima] y la reacción se ve afectada, y en valores velocidad de reacción, son directamente extremos de pH, se desnaturaliza la proporcionales. enzima. Referencias: En nuestra experiencia trabajamos con la -Boyer R., “Conceptos de Bioquímica” enzima invertasa y de acuerdo a la Editorial International Thomson Editores. Gráfica 1, podemos observar que la 1a Ed. en Español pp. 78- 81 (2000) velocidad de reacción alcanza el punto -Donald Voet, Judith G. Voet.(2006) más alto a un pH de 4.5. Bioquímica. ED. Panamericana. Capítulo 4. Aminoácidos. Pag. 76 -Técnicas de Bioquímica Aplicada. Plumer, D.T. 1981. Editorial Interamericana. -Introducción a la Bioquímica Práctica. Mc Graw Hill.Rendina, G. 1974.
Gráfica 1: Efecto de pH sobre la actividad invertasa.
Tabla 2. Efecto de la [Enzima] sobre la velocidad de reacción.
Tubo 1 2 3 4 5
Absorbencia .271 .688 .625 1.150 1.425
[A.R] 4.16 12.264 11.04 21.234 26.574
U.I .416 1.226 1.104 2.123 2.657
[Enzima] 0.5 1 1.5 2 2.5
Gráfica 2: Unidades de invertasa sobre concentración de enzima