UNIVERSIDAD NACIONAL

JOSÉ FAUSTINO SÁNCHEZ CARRIÓN

Transcripción de los genes en las células procariota

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA-CICLO I

ESTUDIANTE: Melgarejo Lopez, Nils Edson

DOCENTE: Contreras Contreras, Ana Melva
Estructura de la ARN polimerasa

Subunidad β’
Subunidad α
Ion Mg+2

Subunidad β Watson, J.D., et al. Molecular Biology of the Gene, 6th

Subunidad α ed., Benjamin Cummings and Cold Spring Harbor
Subunidad ω
Laboratory Press, 2008.
 Iniciación
Existen en E. coli múltiples factores σ que
reconocen los diversos tipos de promotores
contenidos en su ADN:

✓ σ70 (70kd) reconoce las regiones -35 y -10

✓ σ32 reconoce el promotor de los genes de
choque térmico
✓ σ54 reconoce el promotor de los genes
implicados en la asimilación de N

Subunidad σ

Watson, J.D., et al. Molecular Biology of the Gene, 6th ed., Benjamin Cummings and Cold Spring Harbor
Laboratory Press, 2008.
 Elongación
Luego de haberse formado un pequeño segmento de ARN(de menos o mas de 10 nucleótidos)

Híbrido ADN-ARN

Burbuja de transcripción

topoisomerasa
Terminación Terminación independiente de rho

Terminación dependiente de rho

El factor rho tiene una estructura
hexamérica y actividad ATPasa

Watson, J.D., et al. Molecular Biology of the Gene, 6th ed., Benjamin Cummings
and Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2008.
 Operón

Karp G. (2019). Biología Celular y Molecular Conceptos y

Experimentos. 8ª Edición. Mc Graw Hill Interamericana, Madrid

¿Todos los genes bacterianos se encuentran en

operones?

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/regulation-of-gene-expression-and-cell-
specialization/a/overview-gene-regulation-in-bacteria
 Componentes

Los genes estructurales: Codifican enzimas ellos mismo

El promotor: Sitio de fijación de la ARN polimerasa

El operador: Unión de proteínas reguladoras

El gen regulador: Codifica la proteína reguladora

(Represora)

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/regulation-of-gene-expression-and-cell-
specialization/a/overview-gene-regulation-in-bacteria
Operón inducible Operón Lac

Gen z β-galactosidasa

Gen y Galactosidasa permeasa

Gen α Tiogalactósido transacetilasa

Karp G. (2019). Biología Celular y Molecular Conceptos y

Experimentos. 8ª Edición. Mc Graw Hill Interamericana, Madrid
 Metabolismo de la en E.coli

Berg, Jeremy M., y John L. ; Stryer Tymoczko. Bioquímica. 7a. ed.(2012)

 Regulación

Berg, Jeremy M., y John L. ; Stryer Tymoczko. Bioquímica. 7a. ed.(2012)

Berg, Jeremy M., y John L. ; Stryer Tymoczko. Bioquímica. 7a. ed.(2012)
Operón reprimible Operón Trp

Karp G. (2019). Biología Celular y Molecular Conceptos y

Experimentos. 8ª Edición. Mc Graw Hill Interamericana, Madrid
 Regulación

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/regulation-of-gene-expression-and-cell-
specialization/a/overview-gene-regulation-in-bacteria
Atenuación transcripcional del operón trp

Berg, Jeremy M., y John L. ; Stryer Tymoczko. Bioquímica. 7a. ed.(2012)

 UNIVERSIDAD NACIONAL
JOSÉ FAUSTINO SÁNCHEZ CARRIÓN

Técnicas de Biología Molecular: Extracción y

purificación de ADN.
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA-CICLO I

ESTUDIANTE: Melgarejo Lopez, Nils Edson

DOCENTE: Contreras Contreras, Ana Melva
Extracción del ADN

Técnica fenol-cloroformo

• Paso 1:Lisis total de la célula

• Paso 2:Extracción de proteína y lípidos

• Paso 3:ADN puro listo para

su separación por precipitación
 PASO 1:LISIS TOTAL DE LA CÉLULA

Homogenización Lisis por medio de Proteína K Inactivación de las nucleasas

detergentes intracelulares

Homogenizador manual Tritón o SDS Libera el ADN de las

histonas
 PASO 2:EXTRACCIÓN DE PROTEÍNA Y LÍPIDOS

Técnica fenol-cloroformo Hidroxiquinolina

• Se usa una solución fenol-cloroformo y alcohol isoamílico • Antioxidante del fenol
(25:24:1) • Ayuda identificar la fase
orgánica
 PASO 3:PRECIPITACIÓN DEL ADN

Etanol: Para
precipitar se
necesita 2 veces el
volumen de la fase
acuosa

Isopropanol: Para
precipitar se
necesita 0.7 veces el
volumen de la fase
acuosa
 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

Desnaturaliza el ADN Cebadores TAQ

(85°-90°C) (50°-60°C) (72°c)
 Electroforesis en gel

Elementos

• Agarosa
• Acrilamida
Preparación de Agarosa Perfil electroforético

Electroforesis de ácidos nucleicos

Bromuro de etidio
Técnica Southern blot
Extracción del ARN

Técnica de isotiocianato
de guanidina/fenol-cloroformo
Técnica Northern blot
 Bibliografía

• Karp G. (2019). Biología Celular y Molecular Conceptos y

Experimentos. 8ª Edición. Mc Graw Hill Interamericana, Madrid
• Paniagua R., Nistal M., Sesma P., Álvarez-Uría M., Fraile B., Anadón R. y Sáez F.J. (2017). Biología Celular y Molecular,
4ª Edición. Mc Graw Hill Interamericana, Madrid.
• Salazar Montes, A. M., Sandoval Rodríguez, A. S., & Armendáriz Borunda, J. S. (2013). Biología molecular: Fundamentos y
aplicaciones en las ciencias de la salud (1a. ed.--.). México D.F.: McGraw Hill.