SEMANA 12

METABOLISMO CELULAR
 SEMANA 12
INGENIERIA GENETICA

CONTENIDO: Ingeniería genética

Técnicas
Importancia
Avances y perspectivas
 ¿QUÉ ES LA INGENIERÍA GENÉTICA? 3
se han modificado
bacterias, plantas y
animales desde
principios de la década
Involucra la de los 70
manipulación directa, es
decir altera el genotipo
de un organismo
utilizando tecnología de El método mas usado
es la adición de ADN
ADN recombinante, la extraño en forma de
genómica y la genética vectores de ADN

del siglo XXI

Los grandes avances
conseguidos actualmente
se deben a la capacidad
tecnológica de modificar el
ADN en los seres vivos
 ETAPAS SEGUIDAS EN LA PRODUCCIÓN DEL ADN
RECOMBINANTE
1. Extracción del ADN del
espécimen que contiene el gen
de interés. Se aísla el ADN y se
fragmenta con las enzimas de
restricción
FUENTE: Clark, Douglas, & Choi. (2018)
¿Qué es un
vector?
Puede ser un plásmido o un virus. Los mas
usados son los plásmidos.
Debe contener las secuencias de ataque de las
enzimas de restricción, identificadas.
2. Preparación del vector de Se debe replicar independientemente del ADN de
clonación. la célula anfitriona
Debe poseer un marcador, como por ejemplo la
resistencia a un antibiótico.
3. Formación del ADN
recombinante

4. Introducción del ADN

recombinante en la
bacteria o célula
anfitriona

5. Propagación del cultivo de

la bacteria o célula
anfitriona

6. Detección y selección de
las células transformadas
(clones recombinantes)
FUENTE: Solomon, Berg, & Martin. (2013).
TECNICAS USADAS EN LA INGENIERIA GENETICA
1. Extracción de ADN o ARN, sea para estudio o
manipulación. La extracción de ARN es mas compleja por la
inestabilidad de la molécula.

FUENTE: https://www.medicalexpo.es/prod/perkinelmer/product-69673-948653.html
FUENTE:
https://inah.gob.mx/en/boletines/7234-reconstruyen-el-simbolismo-de-tres-ofrendas-mexicas-a-partir-del-adn-de-infantes-sacrifi
cados
2. Uso de las enzimas de restricción. Enzimas que cortan el
7
ADN produciendo fragmentos de secuencias concretas (contienen
un gen) de tamaño definido (4 a 8 nucleótidos)

Hpa:
Haemophilus
parainfluenzae

Eco:
Escherichia coli

Hind:
Hemophilus influenzae

Pst:
Providencia stuartii
3. Electroforesis en gel. Técnica usada para separar las moléculas de
proteínas o fragmentos de ADN usando sus propiedades de migración en un
campo eléctrico.

FUENTE: Solomon, Berg, & Martin. (2013).

4. Amplificación de los fragmentos de ADN por la reacción en
cadena de la polimerasa (PCR)
Aumenta el número de copias del
fragmento de interés. Usa los ciclos de
temperatura para desnaturalizar y replicar
repetitivamente el ADN, se necesita de
una sonda o primer de secuencia
conocida.

LINK PARA PROFUNDIZAR:

https://www.youtube.com/watch?v=2KoLnIwoZKU
FUENTE; Audesirk, Audesirk, & Byers (2013)
 5. Secuenciación de ADN. Se hizo posible gracias a las técnicas de PCR y
electroforesis, Sanger en 1977 desarrollo el método automatizado de secuenciación, hoy
en día la técnica está muy desarrollada.

Fuente: Helmutkae (2003)

https://www.scq.ubc.ca/genome-projects-uncovering-the-blueprints-of-
biology/
Fuente: Estevezj Creative Commons Attribution-Share Alike 3.0 Unported license.

LINKS PARA PROFUNDIZAR : https://dnalc.cshl.edu/view/15922-Early-DNA-sequencing.html

https://dnalc.cshl.edu/view/15479-Sanger-method-of-DNA-sequencing-3D-animation-with-narration.html
 Secuenciación de nueva generación (Next generation
sequencing NGS)

Fuente:http://www.uco.es/users/bb1rofra/BiologiaSistemas/Tema6_Genomica/im
agenes/EsquemaGeneralSecuenciacion.png

Fuente: Pinedo-Donelli & Ball (2020)

LINKS PARA PROFUNDIZAR : https://www.youtube.com/watch?v=RcP85JHLmnI

6. Clonación molecular

Modificado de: Kelvinsong Creative commons license CC BY-SA 3.0

Proceso de clonación de un gen en bacterias
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1. Obtención de
plásmido recombinante

2. Transformación de
bacterias

3. Selección de bacterias
transformadas

4. Crecimiento de bacterias
transformadas

5. Aislamiento de los
plásmidos recombinantes
AVANCES DE LA INGENIERÍA GENÉTICA
(NANOTECNOLOGÍA)

https://www.researchgate.net/figure/Schematic-illustration-of-different-applications-associated-with-D
NA-nanotechnology_fig1_325588434
• Nanotermómetros en DNA
• Nanoelectrónica en ADN

• DNA Origami

Fuente: https://www.nanowerk.com/spotlight/spotid=3850.php
Nanorobots biológicos – nanorobots de ADN:
https://www.youtube.com/watch?v=K9fuSVaszyg Un motor de ADNzima iniciado por
microARN que opera en células vivas

Fuente: https://www.nature.com/articles/ncomms14378
Antenas captadoras de luz

FUENTE:
https://pubs.acs.org/na101/home/literatum/publisher/achs/journals/content/jacsat/2014/jacsat.2014.136.issue-47/ja509018g/2
0141120/images/medium/ja-2014-09018g_0008.gif
 Y el Novel de este año???????????
Las tijeras moleculares CRISPR /CAS 9
Sistema que se encuentra en el sistema
inmunológico bacteriano, descubierto por
Francisco Mojica y desarrollada por Jennifer
Doudna y Emmanuelle Charpentier, permite
editar el ADN a nivel de bases. Se ha
convertido en la herramienta del futuro,
siendo una técnica sencilla y barata, que ha
despertado muchas esperanzas y temores en
la comunidad científica mundial.

LINKS PARA PROFUNDIZAR :

https://www.youtube.com/watch?v=4YKFw2KZA5o&feature=emb_logo

FUENTE:
https://www.investigacionyciencia.es/revistas/especial/edicin-gentica-crispr-717/el-descubrimien
to-del-sistema-crispr-cas-15646
Controversias
• “Pese a su popularidad en la comunidad científica, la posibilidad de “cortar y pegar” ADN no ha dejado de ser
objeto de controversia desde su presentación. …, aunque fuera posible crear “humanos de diseño” y eliminar
enfermedades genéticas, o incluso erradicar especies enteras que suponen un “estorbo” para la sociedad
–como los mosquitos que transmiten el parásito de la malaria— ¿sería correcto?” (Extracto del artículo: CRISPR, la
herramienta para “cortar y pegar” ADN que está cambiando la investigación biológica pese a la controversia. Marieke (2017).recuperado en:
https://www.elsevier.com/es-es/connect/ciencia/crispr,-la-herramienta-para-cortar-y-pegar-adn-que-esta-cambiando-la-investigacion-biologica-pese-a-la-cont
roversia)

• Riesgos e inquietudes:
• Manipulación en seres humanos,
• Posibilidad de mutaciones inesperadas que hacen riesgosa la edición
• Descontrol en la aplicación de la técnica, efectos secundarios no esperados
• Posibilidad de heredar los efectos negativos
• Cambios genéticos en una población. Uso de la técnica para la eliminación de poblaciones
• Reaparición de corrientes eugenésicas
• Facilidad para ser usada por cualquiera con acceso a la técnica (biohackers)
 21

IMPORTANCIA DENTRO
DE LA BIOTECNOLOGÍA
INGENIERÍA GENÉTICA APLICADA A LA MEDICINA 22

Obtención de Medicina forense

productos
farmacéuticos Marcadores
genéticos
Insulina Huella genética
Interferón
H. De crecimiento
Factor VIII Terapia génica
Diagnóstico de Inserción de genes
enfermedades funcionales para corregir
Detección en personas o un defecto genético
fetos enfermedades
hereditarias por técnicas
de ADN recombinante
En células En células somáticas
germinales
Producción de insulina recombinante
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Terapia génica
 Vacunas recombinantes Producción de la vacuna recombinante contra la hepatitis B

FUENTE: https://www.porquebiotecnologia.com.ar/Cuadernos/El_Cuaderno_71.pdf

Vacuna ADN

FUENTE: https://www.genscript.com/recombinant-vaccine.html

FUENTE: https://www.genscript.com/recombinant-vaccine.html
Ingeniería genética aplicada a agricultura 26

PLANTAS TRANSGÉNICAS:
¿Cómo se obtienen?
Transformación con CRISPR-CAS

FUENTE:
https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-ciencia/la-red-de-la-memoria-712/la-tcnica-crispr-permite-obtener-cultivos-resistentes-a-la-contaminacin-r
adiactiva-15541
 28

Obtención de plantas
transgénicas con propiedades
farmacéuticas.
Animales transgénicos

FUENTE: Solomon, Berg, & Martin. (2013).

FUENTE: Solomon, Berg, & Martin. (2013).

Ingeniería genética aplicada al medio ambiente 30

BIORREMEDIACIÓN AMBIENTAL: EMPLEO DE BACTERIAS MODIFICADAS GENÉTICAMENTE. de organismos

genéticamente modificados para eliminar contaminantes
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA
• Audesirk, T., Audesirk, G., & Byers, B. (2013). Biología, la vida en la tierra (9 ed.). Mexico, Mexico: Pearson.
• Clark, M. A., Douglas, M., & Choi, J. (2018). Biology 2e. (R. University, Ed.) Houston, Texas, EEUU: OPENSTAX. Reperado de:
https://openstax.org/books/biology-2e/pages/1-introduction
• Pinedo-Donelli S y Ball,E. (2020). Secuenciación de nueva generación: utilidad en dermatología. Med Cutan Iber Lat Am;
48 (1): 47-62. Recuperado en https://www.medigraphic.com/pdfs/cutanea/mc-2020/mc201h.pdf
• Solomon, E., Berg, L., & Martin, D. (2013). Biología. México, México: Cencage Learning.
• Rubio, Santiago; Pacheco-Orozco, Rafael Adrián; Milena Gómez, Ana; Perdomo, Sandra & García-Robles, Reggie (2020).
Secuenciación de nueva generación (NGS) de ADN: presente y futuro en la práctica clínica. Universitas Medica, 61(2).

• Lectura recomendada:
• Mojica F y Almendros C. (2017). El descubrimiento del sistema CRISPR-Cas. Investigación y Ciencia. Octubre.
20-28 Recuperado en:
https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-ciencia/los-orgenes-de-crispr-716/el-descubrimi
ento-del-sistema-crispr-cas-15646
• Documental recomendado: Unnatural selection. Netflix
Las enzimas de restricción son enzimas muy específicas, que reconocen una secuencia corta de
ADN de doble cadena rompiendo las dos hebras en los "sitios de reconocimiento" o de restricción.
https://dnalc.cshl.edu/view/15488-Restriction-digest-3D-animation-with-no-audio.html