Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de
Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos
Diabéticos La diabetes mellitus (DM) es un como unsimbiosis entre levaduras y bacterias trastornometabólico heterogéneopor la en formde granos de kéfir7. es una cultura presencia de hiperglucemiaalteración de la mixtaque contiene, por ejemplo, los secreción de insulina, accióndeficiencia de génerosKluyveromyces, Candida, insulina o ambos1. LALa hiperglucemia Saccharomyces yvarias bacterias del ácido crónica de la diabetes esrelacionados con láctico del géneroLactobacillus, Lactococcus, complicacionesmicrovascularesrelativamente Leuconostoc,Bacillus y Acetobacter que se específico a largo plazoafectar los ojos, los combinan ycontenido en una matriz de riñones y los nervios, así como elmayor proteínas ypolisacárido llamado “Kefiran” riesgo de enfermedades cardiovasculares. quese forman durante el crecimiento celular TúLos criterios de diagnóstico para la bajocondiciones aeróbicas7,8Paullinia diabetes sonbasado en los umbrales de cupana var. sorbilis, conocidopopularmente glucosa en sangre y esespecialmente como Guaraná, tiene susemillas asociado con la retinopatía2. ampliamente utilizadas9. En Brasil, elEl guaraná es muy consumido ya que es El estrés oxidativo es la principal causa unbebida alta energia y de las complicaciones de la diabetes, se suplementosalimentos, principalmente por origina en ladiabetes mellitus como sucaracterística estimulante en el sistema resultado de la altaniveles de glucosa en nerviosocentral (SNC). Este efecto está sangre, donde la especieoxígeno reactivo asociado con laalto contenido en cafeína, (ROS) y la producción deLos radicales libres además de contener otrosmetilxantinas, (RL) superan la capacidad dedefensa del incluidas la teofilina y la teobromina,además organismo al alterar el equilibrio de de polifenoles como catequinas oxidación-reducción celular3 yepicatequinas10 Esta composición ha sidoasociado con las actividades biológicas Manejo eficiente de la diabetes mellitus del guaraná,que incluyen actividad requiere un control continuo del nivel de antimicrobiana,antioxidante y azúcar en elsangre para minimizar el riesgo quimioprofiláctico encarcinogénesis y decomplicaciones diabéticas2. Así, los efectos antigenotóxicos9,10La asociación de antioxidantesLas estrategias naturales y Kéfir y Guaraná(Paullinia Cupana) podría terapéuticas son una de las estrategiaspara resultar enpropiedades beneficiosas el tratamiento de la diabetes4. A pesar de combinadas. SiendoPor lo tanto, este trabajo que hayvarias categorías de medicamentos tiene como objetivo evaluar los efectosde antidiabéticos,estos medicamentos kéfir de agua y extracto hidroetanólico posiblemente tengan efectosefectos deguaraná (Paullinia cupana), secundarios significativos o son muy caros5. usadondividualmente o en asociación, para Enen comparación con la droga sintética, las mejorarparámetros bioquímicos e histología plantaslos naturales tienen menos toxicidad de ratasdiabéticos y sonsin efectos secundarios6. Resumen El kéfir es una bebida fermentada.conocida como una excelente fuente de probióticos La asociación de kéfir y guaraná, ambos con posibles beneficios para la salud. Es una reconocidos por sus convenientes efectos bebida tradicional de Oriente Medio sobre la salud, podría resultar en originaria demiles de años, presentándose propiedades beneficiosas para el tratamiento Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos de la diabetes mellitus (DM). El objetivo de proceso dese repite la fermentación hasta el este trabajo fue evaluar los efectos del kéfir final de laexperimento. Los granos que no de agua y el extracto hidroetanólico de estaban siendoutilizados se conservaron en guaraná (Paullinia Cupana), utilizados una solución deAzúcar morena. Los animales individualmente o asociados, en la mejora de recibieronmismo kéfir (0,2 ml/100 g) (28) los parámetros bioquímicos e histológicos de durante 48 horassiempre que el pH fuera de ratas diabéticas. Los animales se dividieron ±4.o Preparación del extracto hidroetanólico en 5 grupos experimentales. Grupo 1: ratas deGuaraná (Paullinia Cupana)Se utilizó sin DM, grupo 2: ratas con DM, grupo 3: guaraná deshidratadosuministrado por ratas con DM tratadas con kéfir de agua, Sylvestre Natural Ingredients,una industria grupo 4: ratas con DM tratadas con extracto brasileña ubicada en Tatuí-SP.Este fue hidroetanólico de guaraná, grupo 5: ratas sometido a una extracciónhidroalcohólico con DM tratadas con kéfir de agua y guaraná para obtener fraccionessoluble y también hidroetanólico extraer. Después del para una mayor concentración,basado en la tratamiento, se evaluaron los efectos de metodología descrita en la literatura13El estas formulaciones sobre la glucosa en extracto hidroetanólico se obtuvo ayunas, el colesterol, los triglicéridos, la pormaceración de guaraná en polvo en creatinina y las enzimas alanina etanol a 70º,en la proporción 100g/1L, por 7 aminotransferasa (ALT) y aspartato días. Posteriormente, esto fuefiltrado y aminotransferasa (AST). El kéfir, el guaraná y sometido a evaporación a 50°C hasta las dietas combinadas previnieron la lamáxima eliminación de disolventes. el hiperglucemia en ratas diabéticas (p extractoobtenida se mantuvo en refrigeración.os animales MATRIZ Y MÉTODO Este estudio fue aprobado previamentepor el la producción de kéfirLos granos de kéfir de comité de ética institucional sobre el uso agua fueronmultiplicado en el Laboratorio de danimales (Dictamen N° 18A/2018). Nutrición deUniversidad José do Rosario FueronSe utilizaron 50 ratas Wistar Vellano(UNIFENAS) – Campus Alfenas, macho.adultos, con un peso corporal inicial azúcarmuscovado, del mismo lote, adquirido que oscila entre180-300g, aportados por el enMercado local.Los granos de kéfir se vivero deUniversidad José do Rosario lavaron conagua destilada e inoculados en Vellano. Túos animales fueron alojados en una solución deazúcar moreno 30g/L, en la jaulas colectivasconteniendo cinco individuos concentración de50g/L (50g de granos de cada uno, a temperaturacontrolado (25±1ºC) Kéfir en 1L de soluciónde azúcar moreno) en en un ambiente con ciclo12h luz/oscuridad. un vaso Erlenmeyer comida recibidaesecie específica (alimento limpio. Se dejó reposar durante 24 comercial) eber agua ad libitum, siendo horasatemperatura ambiente para sometido aeríodo de adaptación de 10 días.o lafermentaciógranos El recipiente está Inducción de diabetes mellitusPara la tapado sólo contoalla de papel, debido a la inducción de la diabetes, se basóen Abdullah producción de gases11 et al., 2018 1los animales eranpreviamente en ayunas durante 12 horas,con agua Después de la incubación, la bebida proporcionada ad libitum. Posteriormente, efervescentese filtró separando los granos los animalesrecibió una dosis intraperitoneal que se lavan yutilizado en un nuevo lote12El Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos (140 mg/kgpeso) de solución de colesteroltotales, triglicéridos, creatinina, monohidrato de aloxanoSigma-Aldrich Inc, St TGO y TGP Louis, MO, EE. UU.). Despuésuna semana, se La determinación de glucosa en ayunas, recolectó sangre deola y verificó el nivel de colesteroltotal (TC), triglicéridos (TG), glucosa en sangreor el glucómetro G-TECH aspartatoaminotransferasa (AST), Lite (Accumed Prod.Medicina. Hospital alaninaaminotransferasa (ALT) y creatinina Limitado). Los animales que obtuvieron séricase determinaron en suero por el ySostuvo una glucosa en sangre superior a métodoenzima colorimétrica. Tus niveles 200 mg / dlueron considerados diabéticos. eranmedido a través de un analizador Los animalescuyos valores glucémicos fueron bioquímicoMindray (Addlife) de marca intermediosentre 120 y 200 mg/dl fueron automatizado conKits de prueba (Kovalent)a nuevamentesometido al protocolo de preparación histológicaDespués de la inducción. Una veque se desarrolló la eutanasia, las muestraobtenido de órganos diabetes, los animalesse dividieron (corazón, hígado, páncreas yriñones) se aleatoriamente en diferentes fijaron en formalina neutra al 10%durante 24 Grupos horas y luego, después de la fijación, elmuestras fueron preparadas en el Sorteo experimental Laboratorio dePatología, donde se realizó lo Los animales se mantuvieron con una siguientepasos: 1) Recolección, dietaestándar y agua ad libitum, distribuidas 2) identificación del material en 5grupos (n=10), como se describe en la tabla 1,y tratado con agua, kéfir, Evaluación macroscópica), extractoácido hidroetanólico de guaraná o 3) fijación/escisión, una combinación deKéfir + Extracto Hidroetanólico de Guaranádurante 30 días. 4) deshidratación (uso de alcohol etílico Peso y consumo de agua yración de los enconcentraciones progresivas: 70%, 80%, diferentes grupos experimentalesfueron 95%,100%, con un tiempo de permanencia evaluados a lo largo del tratamiento.o de 60minutos en cada fase. Se realizaron Obtención de muestras biológicasAl final de dosbaños en alcohol al 100% para los 30 días, después de un ayuno de 10 evitarmoléculas de aguas residuales; 5) horas,los animales fueron anestesiados con Diafanizacióncon xileno I, xileno II y xileno III, isoflurano2%, la sangre se recogió por 6) Impregnación(baños de parafina/horno), punción cardíaca. 7) inclusión(cajas de acrílico) Las muestras de sangre de los animales ,8) Microtomía, cortes semi-serie de 5µm de fuerorecogido en tubos siliconados (sin espesor en la direccióna lo largo de las aditivos)para obtener el suero. fueron piezas, centrifugados a1500g durante 10 minutos a temperatura ambientemedio ambiente, y el 9) conjunto de cuchillascon tinción tricrómica suero se separó paradeterminación de de Masson, barnize identificación de los glucosa en sangre en ayunas, funciónfunción portaobjetos (número anterior delmuestra). renal, función hepática y perfil lipídico.o Posteriormente, estas diapositivas Evaluación de glucosa en sangre en ayunas, fueronometido a evaluaciones microscópicas de luzbinocular (Nikon E200) por un Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos examinador,siendo que no sabía a qué cambiosde biomarcadores hepáticos en grupopertenecían los cortes histológicos animales. Anvestigar los niveles séricos de analizados.o Análisis estadísticTodos los AST (Figura 2),los grupos tratados con resultados se expresaroncomo media más o guaraná y loscombinación Kefir con guaraná menos el error estándar,sometids a análisis presentadadiferencias significativas cuando de varianza (ANOVA) ycomparada por la se compara con losgrupo control diabético, prueba de Scott-Knott (1974) con lanivel de acercándose máslos valores del control no significancia del 5%14. Los análisis diabético. EnEn relación a los valores de ALT fueronrealizado a través del programa (Figura 3), hubodiferencia significativa para estadístico deanálisis de varianza (SISV los grupos tratadoscon Kéfir, guaraná y la combinación de Kéfircon guaraná, y en los RESULTADOS dos últimosgrupos hubo valores más El tratamiento de animales con alloxan(140 similares a losgrupo control no diabético. mg/kg de peso) hiperglucemia inducida Tales tratamientos podrían serpromoviendo enanimales de los grupos 2, 3, 4 y 5, y los una mejora en los niveles de tratamientoscon Kéfir (0,2mL/100g), extracto estosbiomarcadores hepáticos.La hidroetanólicode guaraná (300mg/Kg) y Kéfir dislipidemia es una complicacióncomún en la (0,2mL/100g)combinado con extracto DM tipo 1 no controlada, y puedeestar hidroetanólico deguaraná (300mg/Kg) relacionado con los hábitos del paciente. mostró alteracionessobre el perfil glucémico Ende acuerdo con los resultados En cuanto a los pesos de los animales,Se presentados(Cuadro 3), se observa un puede observar en la (Tabla 2) que en la aumento del colesteroltotales y triglicéridos primeraquincena de tratamiento las ratas no en animales diabéticosen comparación con diabéticas,uvo, en promedio, mayor peso los animalesdiabéticos, pero los tratamientos que eldiabéticos y no hubo diferencia nopromovió una diferencia significativa en significativaentre los grupos de ratas elaumento de estos valores. diabéticas y losdiabéticos tratados. En la segunda quincena delos grupos de Al analizar la función renal(Figura 4) a través tratamiento no mostraronDiferencias de los niveles de creatinina, sese visualizó un significativas.de los animales de estudio aumento en el valor de los vanimales diabéticos en comparación con los que El consumo de alimento de los grupos no notienen.diabetes, los grupos tratados con fuenfluido en la primera quincena de DM Kefir y DMguaraná mostró una mejora tratamiento, en la segunda quincena los sisimilares a los valores del grupo gruposcon DM consumieron una mayor sindiabetes. En cuanto a la combinación en el cantidad departe. El consumo de agua en la grupo DKéfir + guaraná, el tratamiento no primeraquincena fue significativamente promovióuna mejora y el valor estaba cerca diferente entrelos grupos evaluados. En la dedel grupo diabético. segunda quincena lagrupos con DM tratados características histológicas del tejido tales con guaraná y DMtratado con la comohiperemia (todas las muestras) (Figura combinación Kefir + guaranámostraron 5), además dede una acumulación anormal similitud en el consumo deagua, siendo estos de colágeno (fibrosis)en las áreas viables del más pequeños que los gruposdiabéticos y miocardio (Figura 6).Usando como DM tratados con Kéfir.Se observaron Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos parámetros: el puntaje de fibrosisfue 0 por (entre 5 y 20% de la superficieárea) y 3 (por ausencia o menos del 1% del área, 1(entre 1 encima del 20% del área). y 5% de la superficie, 2 (entre 5 y 20% de la DISCUSIÓN superficieárea) y 3 (por encima del 20% del área) Este estudio reveló que las dietas conKéfir de agua y extracto hidroalcohólico deguaraná el hígado Tinción tricrómica de Masson (Paullinia cupana) utilizadoindividualmente o proporcionó un análisis claro y uniforme de en asociación impidió lahiperglucemia en la características morfológicas de las ratas diabéticas enen comparación con el muestras tales comohiperemia (todas las grupo de control de ratones,en consonancia muestras) y atrofia, además defibrosis con los objetivos propuestosen el trabajo. El periportal y perilobulillar (Figura 7).Usando tratamiento asociado impidió laaumento de como parámetros: el puntaje de fibrosisue 0 los niveles de aspartato en por ausencia o menos del 1% del área, sueroaminotransferasa, y tanto 1(entre 1 y 5% de la superficie, 2 (entre 5 y eltratamiento conKéfir, guaraná o una 20% de la superficieárea) y 3 (por encima del combinación de ellosevitó el aumento de 20% del área) alaninaaminotransferasa, teniendo mayor importancia en lalos dos últimos grupos, y los portaobjetos teñidos con Tricromo grupos tratados conKéfir y con guaraná deMasson, que permitió una clara mostraron una mejoríaen los niveles de yuniformidad de las características creatinina.La elección del extracto histológicastrastornos tisulares como hidroetanólico deguaraná (Paullinia cupana) hiperemia (todas las muestras) yfibrosis se basó epropiedades reportadas en la periductal (Figura 8) y perilobulillar.Usando literatura científica,un estudio mostró que como parámetros: el puntaje de fibrosisfue 0 catorce compuestosfenoles fueron por ausencia o menos del 1% del área, caracterizados en muestras depolvo de 1(entre 1 y 5% de la superficie, 2 (entre 5 y guaraná, incluida la catequina,epicatequina, 20% de la superficieárea) y 3 (por encima del además de derivados flavonoidesoligómeros 20% del área) conocidos como procianidinas,como los riñones dímerode procianidina tipo B, trímerode procianidina tipo A yprocianidina tipo A21. Para el análisis Además, ya estáevidenció que la histomorfológico,portaobjetos teñidos con coadministración de Paulliniacupana retraso Tricromo deMasson, que permitió una clara en el aumento de peso corporal,aumento de yuniformidad de las características la glucosa en sangre y disminución de los histológicastrastornos tisulares como niveles de azúcar en sangretriglicéridos22 En hiperemia (todas las muestras),inflamación una evaluación in vitro de laextracto crónica, con presencia de célulascélulas hidroetanólico de guaraná en laviabilidad mononucleares, atrofia leve y celular y proliferación de célulasCélulas fibrosisperitubular y periglomerular (Figura mononucleares de sangre 9).Usando como parámetros: el puntaje de periféricaexpuestas aaltos niveles de glucosa, fibrosisfue 0 por ausencia o menos del 1% los resultados indicaroque el extracto mostró del área, 1(entre 1 y 5% de la superficie, 2 actividad positivaestadísticamente significativo aumentando laproliferación Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos celular y la disminución de los niveles sanguíneos20además deconducir a la dedsDNA extracelular incluso cuando se disfunción mitocondrialhepatocitos que combinancon un alto nivel de glucosa, lo que causan disfunción hepática.La investigación indica quepdría utilizarse para mejorar ha encontrado que la hiperglucemiase launcionamiento del organismo relacionó con la apoptosis de los humanosanos, así como los pacientes con hepatocitosinducida por radicales hidroxilo diabetestipo 2 en ratasdiabéticos tipo 117nefropatía diabéticaafecta del 30% al 40% de las La literatura muestra que los personas con DMtipo 1 y 10% a 40% de polifenolestienen beneficios potenciales para aquellos con DM tipo 2,representando la la saluddebido a sus propiedades, incluyendo principal complicaciónenfermedad laantioxidantes y antiinflamatorios, lo que microvascular de la diabetes y la principal sugiere queestos pueden ser importantes en causa deinsuficiencia renal terminal en todo la dieta comoTerapia dietética para la el mundo. OControl de la presión arterial y prevención y el control dediabetes y sus glucosa en sangre.juega un papel clave en la complicaciones15. además, elLos polifenoles reducción del riesgo yprogresión de la de la dieta pueden inhibir la α-amilasa yα- nefropatía diabética2,3,21 existeuna relación glucosidasa, la absorción de glucosa en compleja y bidireccional entre lahígado y elintestino por el cotransportador de diabetes, ya que la diabetes esa menudo glucosajunto con los iones de sodio (SGLT), acompañado de enfermedadenfermedad del estimulan lasecreción de insulina y reducir la hígado graso no alcohólico (NAFLD, por sus producción deglucosa hepática, es decir, han siglas en inglés)16, yla evidencia científica sidoasociado con una disminución de la muestra que el dañoenfermedad hepática en digestión decarbohidratos a nivel intestinal y pacientes con DM tipo 1controlada es una la regulación yalteración del transporte de complicación común causadapor glucosa, queayuda a controlar el azúcar en la hiperglucemia16,17 sangre1 La incidencia de NAFLDy el hepatocarcinoma Recientemente, los polifenoles también han es considerablementmayor en diabéticos en sidointroducidos como agentes comparación conno diabéticos18El hígado es potencialesneuroprotectores en la diabetes un órgano.metabólica esencial para la además de actuar en elcombatir otras conservación dehomeostasis metabólica del enfermedades y suscomplicaciones15. Estos cuerpo, pero sumecanismo del trastorno datos están enconcordancia con los datos de metabólico inducidopor diabetes en el este estudio, ya queque el tratamiento de hígado aún no escompletamente animales diabéticos conprincipales conocido17En ese trabajo habíaevaluó los complicaciones asociadas conpatogenia de la biomarcadores hepáticos delanimales, y diabetes19 tratamiento con guaraná y kéfircon guaraná Estudios muestranque hay un aumento en el impidió el aumento de los nivelesAST en nivel de marcadores deestrés oxidativo en suero, y ambos tratamientos con diabéticos19 yesto puede conducir a Kefir,guaraná o su combinación impidió complicaciones tales como mal laAumento de ALT, con mayor significación funcionamientoanormalidades endoteliales, en elúltimos dos grupos, mostrando que las estructurales yinflamación en los vasos Efeitos da Combinação da Bebida Fermentada de Kefir com Extrato Hidroetanólico de Guaraná (Paullinia cupana) sobre os Parâmetros Bioquímicos e Histologia de Ratos Diabéticos pruebasdisminución del daño hepático en en este estudio, impidió el aumentode los ratasdiabéticos niveles séricos de AST y ALT y los grupostratado con kéfir asociado con El kéfir ha sido investigado portienen efectos guaranámostró una mejora en los niveles terapéuticos significativos paraalgunas decreatinina Y estos resultados se deben al patologías y entre ellas la diabetes. hechoque la ingesta de kéfir aumenta el nivel Unaestudio fue diseñado para determinar el deglutatión peroxidasa y disminuye el nivel efectokéfir protector contra el daño demalondialdehído que interviene en el oxidativo tambiéncomo cambios histológicos controldel estrés oxidativo. Por otro lado, el y bioquímicosque se producen en los tejidos kéfir puedese unen a los radicales renales de las ratasdiabéticos El kéfir superóxido y también inhibenla peroxidación disminuyó el daño renalcausada por la del ácido linoleico, y cómoComo resultado, el diabetes, y por lo tanto concluyóque la kéfir incluso ejerce unacontra el cáncer a suplementación con kéfir puede través de una propiedadantioxidante y contribuipara un mejor control del estrés reduce el daño del ADN17,25 oxidativo, yen consecuencia a la mejora de las funcionesriñones, sugiriendo su uso para Así, consideramos que tanto el extractoácido retrasar laprogresión de la nefropatía hidroetanólico de guaraná (Paullinia diabética26corroborando los datos del cupana)En cuanto a la bebida fermentada de presente estudio.Otros investigadores han kéfir, se utilizasola o, como novedad en la observado que en ratonesdiabéticos literaturacientífico, asociado, tiene suplementados con kéfir hubo unaaumento efectosterapias importantes para los de la actividad de las enzimas intestinales pacientesdiabéticos Debido a las yabsorción de D-galactosa por vesículas propiedades de esta dieta,estos compuestos demembrana con bordes de cepillo, y que deben seguir siendoinvestigado por los ellas ratas de este grupo tenan glucosa en efectos potencialesprotector contra las sangresignificativamente menor, lo que complicaciones secundarias de indica que lasuplemento podría beneficiar en MD la digestión deproteínas y reducir el índice glucémico27 CONCLUSIÓN Se observaron resultados similares enotros El guaraná, ya reconocido por suefectos experimentos con reducción significativade antioxidantes en la literatura, en este glucosa en sangre en ratas diabéticas estudiodemostró una reducción de la glucosa tratados con kéfir, además de observar en sangre. Los resultadosindicó que el otrosefectos protectores como la tratamiento con guaraná, eltratamiento con disminución del estrésoxidativo que ralentiza kéfir y su asociacióntienen un efecto la progresión decomplicaciones de la antihiperglucemiante y puedenayudar a diabetes1,8, y estos resultadosse puede controlar el nivel glucémico y por lo comprar con los hallazgos de estetrabajo, tantominimizar el riesgo de complicaciones mostrando estas características de en la DMEn cuanto a las enzimas hepáticas esteprobiótico cuando se usa solo oasociado. (AST y ALT),Los datos preliminares mostraron una mejoraen los niveles de biomarcadores Dietas con kéfir aislado y asociadoal guaraná hepáticos. previno la hiperglucemia en ratasdiabéticos
Soluciones para la Diabetes y la Hipoglucemia (Traducido): Cómo prevenirla y deshacerse de ella de forma natural, sin medicamentos pero adoptando un estilo de vida saludable