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CICLO ESCOLAR 2021-2022

CARÁTULA OFICIAL
Nombre del estudiante: Edgar Ithiel de León O., Briceida Evelyn Peralta Primero, Ivana Mendez
Abarran

Fecha de entrega: 15 de octubre de 2021

Tema: Práctica 7. Reconocimiento de Proteínas

Materia: Biología Celular

Semestre: 1er Semestre

Nombre del maestro: Ugalde Muñiz Perla Eugenia

INTRODUCCIÓN
Las proteínas son elementos vitales para los organismos, estas mismas se
encuentran en plantas y plantas en una proporción elevada. Hay una gran variedad
de proteínas y cada una desempeña una función biológica específica, puede ser de
reserva, transporte, estructura, sostén, etc. Además, cualquiera de los numerosos
compuestos orgánicos constituidos por aminoácidos que están unidos mediante
enlaces peptídicos que intervienen en las diversas funciones vitales esenciales,
como el metabolismo, la contracción muscular o la misma respuesta inmunológica.
Con lo antes mencionado y relacionado al ser humano, se estima que el ser humano
tiene 30,000 proteínas distintas, donde solo un 2% de ellas se han descrito con
totalidad, las proteínas sirven sobre todo para construir y mantener las células. Un
ejemplo dentro de nuestro organismo serían las enzimas, donde son proteínas, al
igual que la insulina y casi todas las demás hormonas, los anticuerpos y la
hemoglobina.
Existen distintas formas y reacciones para poder identificar proteínas en distintos
organismos y muestras, una de ellas es conocida como la reacción xantoproteica,
esta reacción es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de
proteínas solubles en una solución y se emplea ácido nítrico concentrado. Seguimos
con la reacción Biuret, donde esta reacción es la más destacada, esta reacción la
producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la
presencia del enlace peptídico C O-NH que se destruye al liberarse los
aminoácidos. Ahora, todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo
amino y uno carboxilo libre, reaccionan con la ninhidrina. Ya que la positividad se
manifiesta por la aparición de un color violaceo u amarillo y esto mismo es debido a
que las proteinas y aminoacidos poseen esta caracteristica, esta reacción sirve para
identificarlos. Finalmente, la prueba Millón nos permite detectar compuestos como el
aminoácido tirosina o sus derivados, así como proteínas que lo contengan, el
reactivo de Millon, es una mezcla de nitritos y nitratos mercurios las cuales
ocasionan la mercuración y nitración de los aminoácidos libres o presentes en
proteínas, generando un precipitado blanco que por la misma acción del calor, toma
un color rosado o rojo ladrillo.
IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
OBJETIVO
- Que el alumno sea capaz de identificar a través de pruebas bioquímicas las
proteínas existentes en soluciones a problemas.
METODOLOGÍA
● Utilizando el simulador: http://amrita.olabs.edu.in/?
sub=73&brch=8&sim=140&cnt=4
● Identificar cualitativamente la presencia de proteína, en las muestras de clara
de huevo y gelatina en solución
● Utilizando los 4 métodos:
○ Biuret Test
○ Xanthoproteic test
 ○ Ninhydrin Test
○ Millon’s Test
RESULTADOS

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1° Describe el fundamento de las 4 técnicas de identificación de proteínas
utilizadas.
R:
-Reacción xantoproteica: Es un método que se usa para identificar la presencia o
ausencia de aminoácidos que se pueden encontrar en una solución o una mezcla y
éstos a su vez se pueden encontrar en distintas formas, ya sea libres o por medio
de la formación de proteínas; para llevarlo a cabo se utiliza como principal
componente el ácido nítrico. Para saber los resultados de la prueba, se tiene que
analizar el color que se obtiene en las muestras, en este caso cuando adopta un
color amarillo es positiva ya que se da la formación de proteínas en las cuales hay
aminoácidos aromáticos por ejemplo fenilalanina, triptófano, tirosina e histidina.
-Prueba de Biuret: Es un método que se utiliza para detectar proteínas, o
compuestos que cuentan con dos o más enlaces peptídicos y la ninhidrina reacciona
con los aminoácidos que tienen al grupo de amino libres. Está compuesto
principalmente por hidróxido de potasio, sulfato cúprico y tartrato de sodio. Para
saber los resultados de la prueba, se analiza el color que se tiene en la muestra y en
este caso, si es de color violeta es positiva ya que se identifica la presencia de
proteínas ya que se identifican los enlaces peptídicos en los aminoácidos de la
solución, también se forma por la pérdida de protones en los grupos amidas y la
unión de electrones de nitrógeno y oxígeno libres.
-Prueba de ninhidrina: Es un método que se utiliza para análisis de aminoácidos,
proteínas, péptidos y compuestos químicos y biológicos, en este caso, reacciona
con aminoácidos que cuentan con un pH de alrededor de 4 a 8. Para saber los
resultados de la prueba, debemos observar el color que se adquiere en la muestra;
para este tipo de prueba podemos saber que es positiva cuando el color que
adquiere es violeta o azul intenso y nos señala que se encuentra una gran cantidad
de proteínas en los aminoácidos ya que presentan menos grupos aminos libres en
el aire. En este caso, la ninhidrina reacciona con la presencia de amoniaco, lo que
da como resultado la formación de un complejo con una coloración violeta o azul.
-Millon’s test: Es un método que se utiliza para la identificación de aminoácidos
(principalmente la tirosina), proteínas y péptidos, su reacción se debe a la presencia
que existe en sus componentes del grupo hidroxifenilico en las moléculas proteicas.
Para saber los resultados obtenidos de la prueba, es necesario revisar el color que
adquirió, si su color es rojo esto nos indica que si hay presencia de proteínas en la
mezcla. En este caso, para que la muestra nos pueda dar un resultado positivo es
necesario que el grupo fenol de la tirosina se encuentre con el ácido nítrico, de esta
manera, se forma un complejo mercurio, el cual les permite que se obtenga un color
rosa o rojo.
2° Especifique algunas de las funciones que cumple la albúmina en el
organismo.
R: La albúmina es una proteína que se sintetiza principalmente en el hígado y es
uno de los mayores componentes proteicos que se encuentran en el cuerpo, cumple
con diversas funciones en nuestro organismo, por ejemplo, nos ayuda a transportar
todo tipo de sustancias, hormonas, enzimas y ácidos grasos, nos permite que se
facilite el proceso de metabolismo, es capaz de controlar nuestro pH, funciona como
un transportador en la sangre y se encuentra en el plasma que la compone y
también puede controlar líquidos que se encuentran en la parte extracelular del
organismo, además de encargarse de transportar medicamentos y fármacos que
pueden controlar la presión en la parte intravascular del cuerpo.
3° ¿Por qué la gelatina dio negativa en la prueba de millon’s?
R: En el caso de la gelatina, la reacción es negativa por las propiedades con las que
cuenta la gelatina ya que no reaccionan con el compuesto que se encuentra en la
muestra. La muestra de millon presenta resultados positivos cuando en la muestra
se produce un color rojo por la presencia de tirosina y también detecta el grupo
hidroxifelinico en las moléculas de las proteínas, para el caso de la gelatina, se
observa que la reacción fue negativa porque no cuenta con tirosina que es el único
aminoácido que se presenta en un grupo fenólico, sin embargo, en la gelatina no se
presenta este aminoácido porque no está compuesta en su mayor parte de
aminoácidos esenciales como lo es la tirosina.
4° ¿Qué proteínas encontramos en la gelatina?
R: La mayor parte de la proteína que se encuentra en la gelatina es el colágeno,
esta es una proteína esencial para el ser humano, forma fibras que cumplen con
distintas funciones como flexibilidad, elasticidad y la resistencia a la presión. Esta
proteína se encuentra en todos los animales y son secretadas principalmente por el
tejido conjuntivo que se encuentra en la piel, los huesos, las articulaciones, el pelo,
las uñas, los ligamentos, cartílago, vasos sanguíneos, entre otros. Por otro lado, la
gelatina es de los alimentos con más proteínas ya que está compuesta de alrededor
de 99% de ellas por lo que se recomiendo consumirla, aunque no contiene gran
parte de aminoácidos esenciales como valina, tirosina y triptófano.
5° Investiga qué otras técnicas se pueden utilizar en el laboratorio para la
identificación de proteínas.
R:
-MétodoBCA: Este método se basa en la utilización del ácido bicinconínico para la
identificación de proteínas, en este caso, se da la reducción de Cu+2 a Cu+1 que
pasa de ser un ion cúprico a un ion cuproso que reaccionan en un medio alcalino.
Para este caso, el Cu2+está en función de la concentración de las proteínas y la
coloración que se presenta es una solución púrpura y la absorbancia es
proporcional a la cantidad de proteína que se encuentra en la solución.
-Absorción ultravioleta: Es un método el cual utiliza la luz ultravioleta y la
espectroscopía para determinar la concentración de proteínas que se encuentra en
el medio. En este caso, se utilizan ya sea métodos directos o indirectos; para el
método directo que es la aplicación de la proteína a 280 la cual se basa en
absorción de la muestra a 280 nm ya que ese es el pico de absorción con el que
cuentan las proteínas gracias a Tirosina y Triptofano principalmente y el coeficiente
de extinción de la proteína. En el caso del método indirecto, se utiliza un
colorímetro.
-Ensayo de Lowry: En este método lo que se percibe que los iones de Cu2+ se
unen a las proteínas para formar átomos de nitrógeno con enlaces peptídicos, la
coloración que se produce es azul claro, esto provoca el desdoblamiento de la
estructura de la proteína y de esta manera, es que los residuos son expuestos.
Posteriormente, se percibe que el reactivo Folin-Ciocalteau que cuenta con un color
amarillo el cual llega a reducirse por los grupos que reaccionan sobre él y esto
provoca que se obtenga un color azul.
-Método de Bradford: Este método se caracteriza por la unión de colorantes, en
este caso, los grupos ácidos o básicos interaccionan los grupos orgánicos de los
colorantes que dan lugar a un precipitado; se utiliza el colorante azul de Coomassie
G250 y se lleva a cabo la conversión leuco colorante a un color azul intenso cuando
se da la interacción entre los grupos de aniones del colorante con los grupos amino
de las proteínas. Este método se considera de los más utilizados por su eficacia,
rapidez y sensibilidad que trabaja en un rango de 1 a 25 microgramos por un
volumen de 1 ml.
CONCLUSIONES
En esta práctica lo que pudimos aprender fue la importancia de las proteínas en
nuestra dieta ya que, con lo investigado, pudimos ver que las proteínas son
esenciales para nosotros porque cumplen con distintas funciones vitales como ser
una defensa ante organismos extraños, brindan un soporte físico, son una reserva
de energía, son capaces de transformar las moléculas de los alimentos que
consumimos en energía, llevan a cabo la contracción muscular y el movimiento,
coordinan las funciones corporales, entre otras. Es por ello que debemos entender
el gran papel que cumplen en nuestro organismo ya que realizan diversas labores
de suma importancia.
Por otro lado, con esta práctica también pudimos aprender los distintos métodos que
son utilizados frecuentemente en los laboratorios para identificar las proteínas que
se encuentran en una muestra y de acuerdo a lo que hemos observado, cada uno
de estos métodos resultan ser muy efectivos gracias a las características con las
que cuentan y los elementos que utilizan, pues cada una tiene diferentes formas en
las cuales podemos identificar las proteínas con muchas más facilidad que en otros
casos, es por ello que es muy importante aprender a trabajar con cada método que
se nos proporciona para poder aplicarlo posteriormente en un laboratorio y conocer
todas las técnicas que pueden ser aplicadas.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1° MedlinePlus. (2021). Proteínas y su función. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/genetica/entender/comofuncionangenes/proteina/

2° Acess Medicina. (2021). Aminoácidos, péptidos y proteínas. Disponible en:

https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?
sectionid=249199503&bookid=2971&Resultclick=2

3° Rousselot. (2021). Propiedades de la gelatina. Disponible en:

https://www.rousselot.com/es/rousselot-functional-ingredients/gelatinas-rousselot

4° UNAM. (2021). Proteínas. Disponible en:

https://e1.portalacademico.cch.unam.mx/alumno/biologia1/unidad1/biomoleculas/
funcionesproteinas