Práctica 1

Crecimiento Microbiano
Objetivo:
Comprender los criterios y etapas del crecimiento
microbiano.

Cuestionario:
1. ¿Qué factores fisicoquímicos son necesarios controlar y cómo
afectan el crecimiento microbiano? R=
-Temperatura: La mayoría de los gérmenes capaces de causar
enfermedades al humano crecen mejor a 37°C ya que es la
temperatura normal del cuerpo humano
-Humedad: Favorece el crecimiento bacteriano. Hay un parámetro
clave que nos mide, en un medio con solutos, la actividad de agua
(aw), que es igual a la presión del vapor de agua en presencia de
un soluto con respecto de la presión del agua pura (PS/P0). Oscila
entre 0-1. Es un indicador de la cantidad de agua metabólicamente
disponible para la actividad de los microorganismos.

Aw = Ps / Po

Todos los bichos requieren una alta actividad de agua para llevar a
cabo su metabolismo. En bacterias la aw=0’9. Los hongos pueden
vivir en ambientes con aw=0’8. Si la aw baja mucho (0’6-0’5), los
microorganismos no pueden crecer
-Acidez: La mayoría de los gérmenes crecen mejor a un pH
cercano a la neutralidad.
- Tiempo: La más importante causa de proliferación. A mayor
tiempo, más posibilidad de reproducción
-Oxígeno: Algunos microorganismos necesitan oxígeno para vivir
denominados aerobios o anaerobios.
- Presión Osmótica: Los microorganismos tienden a desarrollarse
en ambientes osmóticamente estables, y son muy sensibles a
cambios en la concentración osmótica. Para compensarlo, los
eucariotas sintetizan solutos compatibles: moléculas pequeñas que
no aumentan la masa celular pero mantienen estables las
membranas. Estos solutos compatibles son, por ejemplo, el
potasio, la trealosa, las betainas, etc.
- Prescott, L. M., J. P. Harley. , y D. A. Klein. 2004.Microbiología.5a
Ed.McGraw Hill Interamericana de España, S. A. U.
-Microbiología .net. Factores ambientales para el crecimiento
microbiano [internet] disponible en:
https://microbiologia.net/microbiologia/factores-ambientales-para-cr
ecimiento-microbiano/#:~:text=los%20Microorganismos%2010ed.)-,
Presi%C3%B3n%20osm%C3%B3tica,pero%20mantienen%20esta
bles%20las%20membranas.
2. Explique qué ocurre fisiológicamente en cada etapa de la
curva de crecimiento (que sucede con el microorganismo y
con el medio de cultivo).
-Microorganismo
Fase de latencia: las células no se reproducen de inmediato en un
medio nuevo.La población microbiana atraviesa un período de
intensa actividad metabólica que comprende sobre todo la síntesis
de enzimas y diversas moléculas.
Fase exponencial: La reproducción celular alcanza una actividad
máxima durante este período. Las células presentan mayor
actividad metabólica.
Fase estacionaria: La tasa de crecimiento disminuye, el número de
muertes microbianas compensa el de células nuevas y la población
se estabiliza. La actividad metabólica de las células que sobreviven
también se torna más lenta en esta fase.
Fase de muerte: La población disminuye a una pequeña fracción
de células más resistentes o hasta que todas sus integrantes
mueren.
3. ¿Cómo varía el contenido de macromoléculas en cada fase
del crecimiento?
Latencia. Cantidad inicial en que fueron adicionadas, no hay
cambios en ella durantes esta fase
Exponencial. Los nutrientes disminuyen a medida que son
utilizados por los microorganismos para su crecimiento. Los
productos de degradación se comienzan hacer presentes
Estacionaria. Los nutrientes ya no son suficientes para promover el
crecimiento celular, los productos de degradación se encuentran
acumulados en el medio
Muerte. Los nutrientes son mínimos o nulos y los productos de
degradación se encuentran muy presentes en el medio.
4. ¿Por qué se presenta la fase de latencia y cómo se calcula
gráficamente?
La fase de latencia abarca el lapso de tiempo entre la inoculación y
el momento en el que se alcanza la tasa de división máxima.1
Es el periodo de ajuste durante el cual las células bacterianas se
modifican por sí mismas con el objetivo de sacar ventaja en el
nuevo ambiente e iniciar el crecimiento exponencial. Durante esta
fase las células se adaptan a su nuevo entorno inducción o
reprimiendo la síntesis y actividad de determinadas enzimas,
iniciando la réplica de su material genético.
Se calcula la duración de la fase de latencia siendo cuantificada
como el tiempo obtenido por la extrapolación de la tangente en la
parte exponencial de la curva de crecimiento, hasta el nivel del
inóculo. Todo esto dado que la típica curva de crecimiento es de
tipo sigmoidal.2
1. Schlegel H, Zaborosch C. MICROBIOLOGÍA GENERAL. 1 ed. Barcelona: OMEGA ; 1997.
2. Rodrigez MR. Variabilidad de la inactivación microbiana y de la fase de latencia de los microorganismos
supervivientes a un proceso de acidificación [Tesis]. Madrid: Universidad Complutense de Madrid; 2016
[Citado el 18 de agosto de 2022]. Disponible en: https://eprints.ucm.es/id/eprint/38768/1/T37612.pdf
5. Explique cómo se disminuye la fase de latencia.
Cuando una población bacteriana es inoculada en medio fresco, el
crecimiento usualmente no comienza de inmediato sino hasta
después de un tiempo llamado de latencia que puede ser corto o
largo dependiendo de las condiciones de cultivo.
Si un cultivo que está creciendo en fase exponencial es inoculado
al mismo medio de cultivo bajo las mismas condiciones de
crecimiento, no se observa fase de latencia y el crecimiento
exponencial sigue a la misma velocidad.
Schlegel H. Microbiología general. 7ma ed. Barcelona: Omega;
1997.

6. ¿Qué es el tiempo de duplicación y cómo se calcula?

El tiempo de duplicación (td). Es el tiempo (en minutos) necesario
para que las poblaciones de células se dupliquen. Este periodo es
constante durante la fase logarítmica. 1
Durante esta etapa cada bacteria es capaz de duplicar su masa y
dividirse a intervalos regulares, dando lugar al crecimiento
exponencial de la población, representa la etapa en la que la
velocidad de crecimiento es constante y máxima para esas
condiciones de cultivo. La velocidad de crecimiento puede ser
modificada cambiando la composición del medio de cultivo y/o las
condiciones de incubación.2
Tiempo de duplicación

Donde:

μ=Velocidad específica de crecimiento

ln x1=Número final de células

In x0=Número inicial de células

t=Tiempo final

t0= tiempo inicial

log e = 0.43429

Para obtener el tiempo de duplicación se sustituye μ en la siguiente ecuación:

1. Hernández Alicia., Microbiología industrial [Internet]. Costa Rica:

EUNED; 2003 [20 de Agosto 2022]. Páginas: 296. Disponible en:
https://books.google.com.ec/books?id=KFq4oEQQjdEC&sitesec=r
eviews&rview=1&rf=ns:0&hl=es-419&lr=&sa=N&start=20
2. Cerra H, Horak C, Lagomarsino M, Torno G, Zarankin E. MANUAL
DE MICROBIOLOGÍA APLICADA A LAS INDUSTRIAS
FARMACÉUTICA, COSMÉTICA Y DE PRODUCTOS MÉDICOS
[Internet]. Org.ar. [citado el 21 de agosto de 2022]. Disponible en:
https://www.aam.org.ar/descarga-archivos/manual-microbiologia-a
plicada.pdf

7. Explique qué es el cultivo continuo y en cuál fase de la

curva de crecimiento se establece.
El cultivo continuo se puede describir como un sistema abierto y, a
diferencia de cultivo por lotes, se adiciona constantemente medio
de cultivo fresco a los microorganismos, a una determinada
velocidad, y se extrae el caldo de fermentación (medio de cultivo
con microorganismos y metabolitos), a la misma velocidad. Así, se
logra mantener en el rector una población estable de
microorganismos en condiciones uniformes. En muchas
fermentaciones, el compuesto de interés se produce durante la
fase exponencial; al respecto, una de las ventajas del sistema
continuo es que se puede mantener estable la población en esta
pase por periodos prolongados de tiempo.
Para que el cultivo continuo sea efectivo, es necesario que el
proceso se encuentre en estado estacionario. El estado
estacionario se define como una condición de estabilidad, En la
que varios factores permanecen constantes a través del tiempo;
entre ellos, el volumen del cultivo, la concentración celular y de
metabolitos, y las condiciones fisicoquímicas necesarias para el
desarrollo del proceso. Cómo resultado de la estabilidad, los
procesos fermentativos se pueden mantener por largos periodos,
siempre y cuando el sistema se mantenga libre de contaminación.

8. Explique qué es un cultivo en lote.

El cultivo en lote (o por lotes) es un sistema cerrado, porque
después de iniciado el proceso (al mezclar los nutrimentos y el
microorganismo), solo se adiciona oxigeno, antiespumantes y
bases o ácidos para el control de pH. La fermentación se lleva a
cabo en un periodo definido de tiempo, durante el cual varía la
composición del medio de cultivo, la concentración de biomasa y la
de metabolitos. Después, se interrumpe el proceso y se recupera
el producto.
Para realizar exitosamente un fermentación en lote, es necesario
conocer la curva de crecimiento del microorganismo: Al saber el
comportamiento de su crecimiento, Se pueden manipular las
condiciones de manera que se obtenga el producto deseado, por
ejemplo, si el que se requiere es la producción de metabolitos
primarios, se debe alargar la fase logarítmica; si son metabolitos
secundarios, se entiende la fase estacionaria y, pata aumentar la
cantidad de biomasa, se buscan las condiciones de mayor
producción de células.
Hernández A. Microbiología industrial. Montes de Oca, Costa Rica:
Editorial Universidad Estatal a Distancia; 2002
9. Explique ¿cuáles son las características macroscópicas y
microscópicas de Candida utilis?
Características Macroscópicas Microscópicas
Color
Borde
Aspecto
Apariencia
Elevación
Forma
Dimensiones

Reproducción

R=Candida utilis se utiliza principalmente en la producción de

proteína unicelular, debido a su capacidad de utilizar una variedad
de fuentes de carbono, como la paja de arroz (Rajoka et al., 2006),
almidón de papa en aguas residuales (Gélinas y Barrette, 2007),
aceite de aguas residuales (Zheng et al., 2005) y melaza (Nigam y
Vogel, 1991).Ensayos con Candida utilis sobre extractos ácidos de
paja de arroz, produjeron 3.5 g/ L de biomasa en base seca
(Zamora, 1996). También se ha usado como soporte para producir
varios productos químicos, tales como el glutatión (Liang et al.,
2008), monelina (Kondo et al., 1997) y el acetato de etilo (Christen
et al., 1999).
La proteína unicelular es la biomasa recolectada de distintos
microorganismos como algas, hongos, bacterias y levaduras, las
cuales pueden ser utilizadas como alimento tanto para ganado
como para uso humano.
● Palmerín Carreño Dulce María,et al. Identificación de una
levadura para producción de proteína unicelular para
consumo humano y determinación de los parámetros
cinéticos a nivel de matraces agitados.Instituto Tecnológico de
Celaya [internet]. México,2011. Consultado el 17 agosto del
2022. Disponible en:
https://www.uaq.mx/investigacion/revista_ciencia@uaq/Archiv
osPDF/v4-n2/t5.pdf

10. Investigue los usos de Candida utilis.

Usó como inóculo en alimentos para consumo humano, partiendo
de melaza como sustrato, siendo enriquecida con nitrógeno y
vitaminas.
Utilizada para la alimentación animal y humana.
Debido a su capacidad de utilizar variedad de fuentes de carbono,
como la paja de arroz, almidón de papa en aguas residuales, aceite
de aguas residuales, uso en la producción de proteína unicelular.
Uso como regulador de animales micro ecológicas equilibrio
intestinal, para mejorar la digestibilidad de los piensos, mejorar la
inmunidad del animal, debido a Cándida utilis células son ricos en
vitamina B y la proteína, sino que también proporcionan una
porción deseada de la nutrición animal

11.Realice el esquema de un fermentador o biorreactor, sus

componentes y aditamentos principales.
Un biorreactor proporciona nutrientes frescos de forma constante, además;
controla y monitoriza las condiciones de presión, temperatura y oxígeno, y
mantiene el crecimiento celular a una velocidad máxima. En general, las
células están fijas en soportes o matrices, o bien existe una membrana
filtrante que impide su arrastre. En estas condiciones , el crecimiento
bacteriano no sigue la curva de crecimiento habitual.

Rubio Granero, Concepción · García García, Ángeles · Cardona

Serrate, Fernando. técnicas básicas de microbiología y bioquímica.
editorial síntesis; 2017. Disponible en:
https://www.sintesis.com/data/indices/9788490774779.pdf

Algas verdes creciendo en biorreactor de laboratorio

Los biorreactores agitados mecánicamente poseen las siguientes funciones:

Homogenización
Suspensión de sólidos
Dispersión de mezclas líquido – líquido
Gasificación/aireación de líquidos
Intercambio de calor

Un fermentador simple de tanque agitado se presenta en la siguiente figura:

Considerar cada uno de los aspectos que se encuentran en la cédula para
elaborar el cartel.

CÉDULA DE EVALUACIÓN DE CARTEL

No Equipo: ____ Práctica N°: ____
Nombre del cartel: (Es l nombre de la práctica)

Aspecto ¿Qué se evaluará? Puntos Puntos Observaciones

asignados obtenidos

Logo de la UNAM Lado superior derecho Requisito

Logo de la FES - Lado superior izquierdo Requisito

Zaragoza

Título ● Título del cartel. Requisito

● No. equipo e integrantes, por orden
alfabético iniciando por el apellido paterno,
materno y nombre (de menor tamaño que el
título y en negrita.

Introducción Debe contener los siguientes aspectos: 1.0

• Antecedentes del tema.

• Objetivos específicos propuestos por

cada equipo.

Marco teórico Hacer un resumen del 100% de los 4.0

aspectos teóricos que se le indiquen en
cada una de las prácticas. (corresponde
al cuestionario que se encuentra en el
manual de prácticas de laboratorio).

Ilustraciones Incluir al menos 4 ilustraciones (figuras 1.0

(figuras y/o y/o tablas) que den soporte al marco
* teórico.
tablas)

Metodología Realizar un diagrama del 1.0

procedimiento indicado en el manual
de prácticas de laboratorio.

Aplicación Investigar dos aplicaciones en la industria. 1.0

Conclusión Se deben redactar con base en los 1.0

objetivos generales o específicos.

¿Qué aprendí?

Referencias Mínimo 4 referencias 1.0

Utilizar criterios de Vancouver para

reportarlas

Total 10 puntos

*NOTA IMPORTANTE*: Cada tabla o ilustración (figura) que se

mencione en el cartel deberá estar numerada, en forma consecutiva,
siguiendo el orden de primera aparición en el texto, con pie de figura y
autoexplicativa. Asegurarse de que en el texto cada tabla o ilustraciones
(figuras) tenga su correspondiente cita.

Propuesta de distribución:

Nota: La distribución puede cambiar.

Guardar en formato PDF y subir a la plataforma

Classroom con la siguiente nomenclatura:
Cartel_No_Equipo_No

Ejemplo:
Cartel_4_Equipo_5

Fecha de entrega del cartel: Lunes 22 de agosto del 2022

Hora límite de entrega: 15:00 horas

El cartel lo subirá UNICAMENTE el representante del equipo

en formato PDF.