Facultad de Ciencias Químicas

Universidad Autónoma de Chihuahua

REPORTE DE PRÁCTICA DE DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

POR EL MÉTODO DE BRADFORD

Nombre del alumno

Karina Morales Olivas

Fecha del reporte

28/09/2022

Número de control

343510

1. Descripción de la muestra

Flan

1. Materiales

1. Espectrofotómetro o micro lector de placas, celdas de plástico o microplacas,

micropipetas, puntas, tubo de ensayo y estándares de suero de albúmina bovina (BSA)
o alguna otra proteína de concentración conocida.

2. Reactivos

Reactivo de Bradford
 Facultad de Ciencias Químicas
Universidad Autónoma de Chihuahua

3. Metodología

En primera instancia, se puso en el mortero la muestra para homogeneizar y

posteriormente pesar 1 gramo de ella. Luego se le añadieron 9 mL de agua destilada,
obteniendo así una disolución 1:10. Enseguida se construyó una curva de calibración a
partir de añadir el reactivo y luego los sueros de albúmina bovina (BSA) en la micro
placa.

Los sueros fueron añadidos desde el menos diluido hasta el más diluido.
Posteriormente se depositaron 250 μL del reactivo de Bradford en la microplaca de
fondo plano, y se adicionaron 5 μL de la muestra mezclando ambos con sucesivos
pipeteos con la micropipeta. Finalmente la placa fue leída en el espectrofotómetro.
Obtenidos los resultados de los estándares, estos se ajustaron a un modelo de
regresión lineal, y se muestran a continuación.

4. Resultados

Para obtener la curva de valoración y con ella obtener los resultados mostrados a
continuación, se utilizaron los estándares por duplicación y se registraron en la
siguiente tabla.
 Facultad de Ciencias Químicas
Universidad Autónoma de Chihuahua

TABLA 1.1

Posteriormente, se pasó a graficar dichos datos para la obtención de la curva de

valoración y su respectiva ecuación.

Enseguida se registraron las absorbancias obtenidas para el jugo diluido con agua
destilada en una relación 1:10, para luego con la ecuación de absorbancia arrojada por
la gráfica despejar la concentración de proteína en mg por ml de agua.
 Facultad de Ciencias Químicas
Universidad Autónoma de Chihuahua

Finalmente, dichas concentraciones se multiplicaron por el factor de conversión, en

este caso 10 y se sacó un promedio (5.5%) y desviaciones estándar de estas (1.32).
Los resultados se muestran a continuación en la siguiente tabla.

TABLA 1.2

Para este procedimiento, se realizó solo una disolución ya que el alimento era sólido.

5. Conclusiones

Para finalizar, podemos observar que los resultados reflejan un buen contenido de
proteína, ya que las fuentes reportan para el quesillo venezolano, o coloquialmente
conocido como flan, un 4.5% de proteína para este. La proteína presente en este tipo
de alimento proviene del huevo utilizado para su preparación por lo cual dependiendo
del huevo y la cantidad presente en el flan, el contenido proteico varía. De manera que,
podemos concluir que este método nos ayuda a observar el verdadero contenido
proteico de los alimentos y poder confirmarlo con su etiquetado. Finalmente podemos
dar la práctica como exitosa ya que pudimos obtener todos los respectivos datos para
poder cuantificar dicho contenido.

6. Bibliografía

GUTIERREZ MENDEZ, N. (s. f.). MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

ANÁLISIS DE ALIMENTOS [PDF].