INFORME LABORATORIO No.

4: Curvas de calibración y cuantificación de proteínas

25 de agosto del 2021

Laboratorio Bioquímica Básica-14281

María José López Guarín-Microbiología Industrial

mjoselopezg@javeriana.edu.co
María Camila Grisales Romero-Microbiología Industrial
mcamila_grisales@javeriana.edu.co
Daniela de la Hoz González-Microbiología Industrial
d.delahozg@javeriana.edu.co

Resumen
La práctica del presente laboratorio se realizó con el fin de identificar ciertas propiedades de
algunos compuestos desconocidos por medio de su absorción por medio de la
espectrofotometría, dichos procesos se emplean para encontrar la concentración y de esta
forma seguir un curso de estrategias para determinar la concentración de las proteínas. Se
prepararon siete soluciones bajo diferentes concentraciones de proteína y de H2O, todas las
soluciones contenían una misma cantidad del reactivo de Biuret el cual permite observar la
presencia de proteínas, péptidos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en
sustancias de composición desconocida, la intensidad del color demuestra la concentración de
proteínas dentro de la muestra.
La proteína empleada en la práctica fue la leche de bovino, de esta forma se encontraba tres
tipos de proteínas, caseína, lactoalbúminas y lactoglobulinas. Para la cuantificación de
proteínas, se mide principalmente el pH de la leche, dando 6.94, luego se le agrega NaCl
hasta encontrar que bajo una concentración de 10.5 ml empleados de dicho ácido, el pH
quedó en 4.64, la leche se ha coagulado, cambiando su composición. Consecutivamente se
filtró la sustancia con el propósito de pesar las proteínas precipitadas como la concentración
por ácido, el calor es un desnaturalizante el cual afectó las interacciones de la proteína con el
solvente, por lo que su estabilidad disminuye y de esta forma se separan las proteínas,
quedando las proteínas sobrenadantes del ácido, se aplicó por último una prueba de
absorbancia sobre el sobrenadante para ver su concentración, se compararon los resultados
finales con la curva de calibración inicial.

Palabras clave
Absorbancia, espectrofotómetro, pH, concentraciones, Ley Lambert-Beer, proteínas, curva de
calibración, desnaturalización.

Objetivos
● Utilizar técnicas espectrofotométricas en la cuantificación de proteínas.
● Aprende a utilizar curvas de calibración para determinar la concentración de muestras
problema.
Introducción

La curva de calibración es un método el cual permite representar la medida de una función

dependiente de la concentración de un analito. La calibración se presenta como un método
analítico para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración.

La cuantificación de proteínas con espectrofotometría es un método que usa la luz

ultravioleta y la espectroscopía visible para determinar de manera rápida la concentración de
proteínas, este realiza la medición de una proteína soluble.

Método de Biuret es un compuesto coloreado, la intensidad de coloración es directamente

proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante
específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy
baja por lo que actúa mayormente en la cuantificación de proteínas en preparados muy
concentrados.

La cuantificación de caseína total se realiza previa separación de las proteínas del suero por
precipitación ácida a pH 4.6, justificándose como la separación entre el suero y las proteínas
al tener presencia de algún ácido, como fue el NaCl, las proteínas de la leche se
desnaturalizan, quedando la cadena polipeptídica reducida a un polímero estadístico sin
ninguna estructura tridimensional fija (cadenas proteicas).

Desarrollo experimental
Materiales:

Materiales Reactivos Equipos

Embudo Buchner Balones aforados de 25 ml. Patrón de proteínas. Espectrofotómetro.

Erlenmeyer con desprendimiento lateral. Reactivo de Biuret. Bomba de vacío.
Micropipeta 100 a 1000 micro L. Muestras problema. Potenciómetro.
Vaso de precipitados de 100 ml. Agua destilada. Centrífuga.
Vasos de precipitados de 50 ml. Leche entera. Balanza.
Celdas para espectrofotómetro. HCl 0.1M.
Pipetas graduadas de 5 ml.
Pipetas graduadas de 1 ml.
Pipeta Pasteur de plástico.
Pipeteador de cremallera.
Agitador magnético.
Probeta de 25 ml.
Tubos de ensayo.
Vidrio de reloj.
Papel filtro.
Gradilla.

Elaboración de la curva de calibración

Pasos de la realización de la curva de calibración:
1. Se preparó 2,5 ml de cada uno de los siguientes patrones de proteína: 0,5; 1; 2; 4 y 5
mg/ml partir de una solución de 10 mg/ml. Se realizaron los cálculos para determinar
la cantidad de microlitros de proteína y la cantidad de mililitros de agua destilada que
se necesitan para la preparación de cada uno de los patrones.
2. Se preparó adicionalmente tres tubos MP1, MP2 y blanco, en el primer tubo se utilizó
1 ml de agua destilada + 1,5 ml de la muestra problema 1, en el segundo tubo se
utilizó 1 ml de agua destilada + 1,5 ml de la muestra problema 2 y en el tercer tubo se
utilizó 2,5 ml de agua destilada + 2,5 ml de reactivo de Biuret.
3. Se preparó cada uno de los tubos de ensayo con su respectiva cantidad de proteína y
agua destilada y posteriormente se adicionó a cada uno de los tubos de ensayo 2,5 ml
de reactivo de Biuret.
4. Se realizó una tabla con el fin de recoger todos los cálculos realizados desde el paso 1
al 3.
5. Se mezcló muy bien todos los tubos y se incubó a temperatura ambiente durante 10
minutos.
6. Se encendió el espectrofotómetro y se dejó estabilizar por al menos 10 minutos.
7. Se ajustó la longitud de onda a 540 nm. Se utilizó el blanco para calibrar el
espectrofotómetro a un valor de cero (0) de absorbancia y una longitud de onda de
540 nm.
8. Se leyó la absorbancia de cada uno de los patrones y muestras realizadas.
9. Se registró los resultados en la tabla elaborada por el profesor donde se registraron los
datos de la absorbancia y concentración.
10. Se elaboró una curva de calibración de concentración vs. Absorbancia. En el eje x se
ubicó las concentraciones obtenidas para las diferentes diluciones del patrón de
proteínas y en el eje y las absorbancias correspondientes.
11. Se trazó una línea pasando por el origen 0,0 y utilizando el programa Excel se
determinó la ecuación de la recta.
12. Se determinó la concentración de proteína presente en las muestras MP1 y MP2,
interpolando los datos en la gráfica y comprobando por medio de la ecuación.

Cuantificación de proteínas de la leche

a. Determinación de las proteínas totales en la leche
1. Se preparó un tubo de ensayo, para este procedimiento se tuvo en cuenta que la
absorbancia al ser mayor que al rango de valores de la curva de calibración elaborada
previamente, por lo tanto se tuvo que hacer diluciones de la leche en agua destilada
hasta obtener un valor de absorbancia en el rango de lectura de la curva de
calibración.
2. Se adicionó al tubo de ensayo 2ml de reactivo de Biuret.
3. Se incubó los dos tubos a temperatura ambiente durante 10 minutos.
4. Se ajustó la longitud de onda a 540 nm. Se utilizó el blanco para calibrar el
espectrofotómetro a un valor de cero (0) de absorbancia y una longitud de onda de
540 nm.
 5. Se leyó la absorbancia del tubo de ensayo.

b. Fraccionamiento de las proteínas de la leche por pH.

1. Se tomó 20 mL de leche en un vaso de precipitados y se midió el pH en el
potenciómetro.
2. Se agregaron lentamente pequeñas alícuotas de HCl 0,1M y se agitó con agitación
magnética, hasta obtener un pH alrededor de 4,6.
3. Se pesó un papel de filtro y luego se filtró la anterior solución al vacío usando un
embudo Büchner.
4. Se secó el filtrado con papel de filtro en el horno a 60°C y se determinó el peso de las
proteínas precipitadas.

c. Determinación de la concentración de proteínas del sobrenadante ácido

1. Se tomó 2,5 mL del sobrenadante que se obtuvo en el paso anterior y se agregó 2,5
mL del reactivo de Biuret
2. Se mezcló muy bien y se incubó a temperatura ambiente durante 10 minutos.
3. Se ajustó la longitud de onda a 540 nm. Se utilizó el blanco para calibrar el
espectrofotómetro a un valor de cero (0) de absorbancia y una longitud de onda de
540 nm.
4. Se leyó la absorbancia del sobrenadante.

Resultados
Curva de calibración
Blanco:2,5 ml de agua destilada + 2,5 ml de reactivo de Biuret=2,5 ml
MP1:1 ml de agua destilada + 1,5 ml de la muestra problema 1=2,5 ml
MP2:1 ml de agua destilada + 1,5 ml de la muestra problema 2=2,5 ml

Patrón de proteína 0,5 mg/ml:

𝑉𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 * 𝐶𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 = 𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 * 𝐶𝑓𝑛𝑎𝑙
𝑥 * 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙 = 2, 5𝑚𝑙 * 0, 5 𝑚𝑔/𝑚𝑙
2,5𝑚𝑙*0,5 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥= 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥 = 0, 125 𝑚𝑙 = 125µ𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 2, 375 𝑚𝑙 𝐻2𝑂

Patrón de proteína 1 mg/ml:

𝑉𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 * 𝐶𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 = 𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 * 𝐶𝑓𝑛𝑎𝑙
𝑥 * 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙 = 2, 5𝑚𝑙 * 1 𝑚𝑔/𝑚𝑙
2,5𝑚𝑙*1 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥= 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥 = 0, 25 𝑚𝑙 = 250µ𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 2, 250 𝑚𝑙 𝐻2𝑂

Patrón de proteína 2 mg/ml:

𝑉𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 * 𝐶𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 = 𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 * 𝐶𝑓𝑛𝑎𝑙
𝑥 * 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙 = 2, 5𝑚𝑙 * 2 𝑚𝑔/𝑚𝑙
 2,5𝑚𝑙*2 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥= 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥 = 0, 5 𝑚𝑙 = 500µ𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 2 𝑚𝑙 𝐻2𝑂

Patrón de proteína 4 mg/ml:

𝑉𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 * 𝐶𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 = 𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 * 𝐶𝑓𝑛𝑎𝑙
𝑥 * 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙 = 2, 5𝑚𝑙 * 4 𝑚𝑔/𝑚𝑙
2,5𝑚𝑙*4 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥= 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥 = 1 𝑚𝑙 = 1000µ𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 1, 5 𝑚𝑙 𝐻2𝑂

Patrón de proteína 5 mg/ml:

𝑉𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 * 𝐶𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 = 𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 * 𝐶𝑓𝑛𝑎𝑙
𝑥 * 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙 = 2, 5𝑚𝑙 * 5 𝑚𝑔/𝑚𝑙
2,5𝑚𝑙*5 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥= 10 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑥 = 1, 25 𝑚𝑙 = 1250µ𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 1, 25 𝑚𝑙 𝐻2𝑂

Tabla 1. Concentraciones y absorbancias obtenidas a partir del proceso de espectrofotómetro.

Tubo # 1 2 3 4 5 MP1 MP2

Absorbancia (A) 0,132 0,181 0,223 0,526 0,546 0,569 0,427

Concentración 0,5 1 2 4 5 4, 88 3, 56
en (mg/ml)

Concentración 7, 44 * 10
−6 −
1, 94 * 10
−5
2, 98 * 10
−
5, 96 * 10
−
7, 44 * 10 7, 28 * 10
−5 −5
5, 28 * 10
en (mol/L)

Cálculos para determinar la concentración en mol/L

Tubo 1
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
𝑀= 𝐿
(0,0005*2,5) −8
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 1, 86 * 10 𝑚𝑜𝑙
−8
1,86*10 𝑚𝑜𝑙 −6
𝑀= 0,0025
= 7, 44 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

Tubo 2
(0,001*2,5) −8
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 3, 73 * 10 𝑚𝑜𝑙
−8
3,73*10 𝑚𝑜𝑙 −5
𝑀= 0,0025
= 1, 94 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

Tubo 3
(0,002*2,5) −8
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 7, 46 * 10 𝑚𝑜𝑙
 −8
7,46*10 −5
𝑀= 0,0025
= 2, 98 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

Tubo 4
(0,004*2,5) −7
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
=1,49* 10 𝑚𝑜𝑙
−7
1,49*10 𝑚𝑜𝑙 −5
𝑀= 0,0025
= 5, 96 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

Tubo 5
(0,005*2,5) −7
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 1, 86 * 10 𝑚𝑜𝑙
−7
1,86*10 −5
𝑀= 0,0025
= 7, 44 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

MP1
(0,00488*2,5) −7
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 1, 82 * 10 𝑚𝑜𝑙
−7
1,82*10 −5
𝑀= 0,0025
= 7, 28 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿
MP2
(0,00356*2,5) −7
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 = 67 000 𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 1, 32 * 10 𝑚𝑜𝑙
−7
1,32*10 −5
𝑀= 0,0025
= 5, 28 * 10 𝑚𝑜𝑙/𝐿

Gráfica 1. Absorbancia en función de la concentración de las concentraciones obtenidas para

las diferentes diluciones del patrón de proteínas.

Cálculos para encontrar la concentración de las muestras problema (MP).

𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏
MP1
𝑦 = 0, 1077 𝑥 + 0, 0436
0, 569 − 0, 1077𝑥 = 0, 0436
− 0, 1077𝑥 = 0, 0436 − 0, 569
− 0, 1077 𝑥 =− 0, 5254
5254
𝑋= 1077
𝑋 = 4, 88 𝑚𝑔/𝑚𝑙

MP2
𝑦 = 0, 1077 𝑥 + 0, 0436
0, 427 − 0, 1077𝑥 = 0, 0436
− 0, 1077𝑥 = 0, 0436 − 0, 427
− 0, 1077 𝑥 =− 0, 3834
1278
𝑋= 359
𝑋 = 3, 56 𝑚𝑔/𝑚𝑙

Cálculos para determinar la concentración de las proteínas totales de la leche entera en mg/ml
y en % (p/v)
Absorbancia (A) leche:1,341
𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏
𝑦 = 0, 1077 𝑥 + 0, 0436
1, 341 − 0, 1077𝑥 = 0, 0436
− 0, 1077 𝑥 = 0, 0436 − 1, 341
− 0, 1077 𝑥 =− 1, 2974
12974
𝑋= 1077
𝑋 = 12, 05 𝑚𝑔/𝑚𝑙

𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
% (𝑝/𝑣) = 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
* 100
0,01205 𝑔
% (𝑝/𝑣) = 2 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
* 100 = 0, 60%

Descripción de la composición proteica de la leche

La fracción proteica de la leche está formada por una mezcla de diferentes proteínas, las
cuales son: Caseína, Beta-lactoglobulina, Alfa-lactoalbúmina, Lactoferrina, Lactoperoxidasa,
Inmunoglobulinas, Lisozima.
Caseína: Esta proteína se clasifica en varios tipos de moléculas: alfa-caseína, la beta-caseína,
la kappa-caseína y la gamma-caseína. Es la proteína más abundante en la leche de vaca,
componiendo el 80% del total de sus proteínas y en la leche humana constituyen el 40%. Al
encontrarse una proteína en un medio ácido o alcalino se produce su desnaturalización, es
decir que se da lugar a una reacción química que altera su estructura dejando de ser soluble
en agua, lo que provoca que precipite en forma de grumos.
Beta-lactoglobulina: Es una proteína presente en la proteína de suero, es la proteína de mayor
tamaño y corresponde al 50% de las proteínas del suero. Cuenta con las siguientes
propiedades: tiene actividad biológica (péptido bioactivo) como por ejemplo capacidad
antihipertensiva, antimicrobiana, antioxidante, anticarcenogénica, inmunomoduladora,
opioide, hipocolesterolémica y otras acciones de tipo metabólico.

Alfa-lactoalbúmina: Es una proteína que favorece la unión de la glucosa con la galactosa para
la síntesis de la lactosa. Se encuentra tanto en la leche de vaca como en la humana. Forma
parte de la capa de nata que aparece en la superficie de la leche hervida.

Lactoferrina: Es una glicoproteína que se encuentra en el calostro y en la leche. Tiene la

propiedad de unirse al hierro, es una molécula con acción antimicrobiana, antioxidante,
antiinflamatoria, anticancerígena y con propiedades sobre la regulación del sistema inmune.
Los derivados de su digestión también dan lugar a otros péptidos que intervienen en la
función inmune y en la neutralización de los radicales libres.

Lactoperoxidasa: Es una proteína casi inexistente en la leche humana, pero muy abundante en
la saliva. También es muy abundante en la leche de vaca. Es una enzima con función
defensiva que en presencia de agua oxigenada, procedente de los microorganismos o
producida por otras enzimas, cataliza la formación de una serie de sustancias con gran poder
antimicrobiano.

Inmunoglobulinas: Son proteínas que reconocen las estructuras extrañas al organismo, como
las membranas de los microorganismos, y se unen a ellas permitiendo que sean destruidas por
el sistema inmune. Son muy abundantes en el calostro y menos en la leche.

Lisozima: Es una proteína presente en la leche humana pero ausente de la leche de vaca. Su
función es disolver la pared de los microorganismos patógenos. Actúa además potenciando la
acción de los leucocitos. La lisozima y la lactoferrina se potencian mutuamente en su acción
contra los agentes infecciosos.

Cálculos para determinar la concentración de las proteínas en el sobrenadante ácido de la

leche en (mg/ml)
Absorbancia del sobrenadante: 0,637
𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏
𝑦 = 0, 1077 𝑥 + 0, 0436
0, 637 − 0, 1077𝑥 = 0, 0436
− 0, 1077 𝑥 = 0, 0436 − 0, 637
− 0, 1077 𝑥 =− 0, 5934
1978
𝑋= 359
𝑋 = 5, 51 𝑚𝑔/𝑚𝑙
¿Qué clase de proteínas se precipitaron al cambiar el pH de la leche? Cálculos para
determinar su concentración en mg/ml y en la leche entera (% p/v).
pH leche:6,94
Adición de 6 ml: 5,38
Adición de 7 ml: 4,98
Adición de 8 ml: 5
Adición de 9 ml: 4,8
Adición de 10 ml:4,7
Adición de 10,5 ml:4,64
Papel filtro=2,3957 g - 0,8573 g=1,54 g
𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
% (𝑝/𝑣) = 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
* 100
1,54 𝑔
% (𝑝/𝑣) = 20 𝑚𝑙
* 100 = 7, 7 % 𝑝/𝑣

1540 𝑚𝑔
20 𝑚𝑙
= 77 𝑚𝑔/𝑚𝑙

Cuando un pH se encuentra igual a su punto isoeléctrico coincide con el pH de menor

solubilidad con lo cual se induce su precipitación. Por lo tanto, a un pH de 4,8 se precipitaron
la proteína lactoalbúminas que tienen el punto isoeléctrico oscila en 4,8, y la proteína
lactoglobulinas las cual es una proteína ácida con un punto isoeléctrico de alrededor de un pH
5,2. y a un pH de 4,6 se precipitaron las proteína de caseína con un pH de 4.6 se coagula
separándose del suero, se lavan y secan para obtener lo que se denomina caseína ácida.

Descripción de la razón por la cual algunas proteínas de la leche no precipitan a pH 4.7. De

ejemplos de esas proteínas
Cuando un pH se encuentra igual a su punto isoeléctrico coincide con el pH de menor
solubilidad con lo cual se induce su precipitación. La razón por la cual las proteínas
contenidas en la leche no se precipitan a un pH de 4,7 es porque el punto isoeléctrico de las
tres clases de proteínas no es 4,7. Por ejemplo el punto isoeléctrico de las caseínas es de 4,6,
las lactoalbúminas tienen un punto isoeléctrico de alrededor de 4,8 y las lactoglobulinas
tienen un punto isoeléctrico de 5,2.

Descripción clara del proceso de desnaturalización de una proteína.

La desnaturalización de las proteínas se basa en la pérdida de la estructura tridimensional por
diversos factores, por ejemplo, la temperatura, pH o ciertos agentes químicos. La pérdida de
la estructura da como resultado la pérdida de la función biológica asociada a esa proteína, ya
sea enzimática, estructural, transportadora, entre otras. La estructura de la proteína es
altamente sensible a los cambios. La desestabilización de un solo puente de hidrógeno
esencial puede desnaturalizar la proteína.
Factores que provocan la desnaturalización
1.- pH
2.- Temperatura
3.- Sustancias químicas
4.- Agentes reductores

¿Cuál es el uso de las caseínas y la lactoalbúmina en la industria de alimentos?

La caseína aislada es una materia prima con mucho valor en distintos sectores industriales, se
utiliza en una amplia variedad de alimentos y bebidas debido que tienen muy buenas
propiedades funcionales para la elaboración de alimentos, son emulsionantes, gelificantes,
retienen agua, mejoran la textura y contribuyen al rendimiento.Puede ser empleados para la
elaboración de quesos, en la producción de vinos se usa como clarificante, además se usa en
la elaboración de helados, cárnicos, suplementos proteicos, batidos, etc. La lactoalbúmina es
una de las proteínas que se pueden encontrar en el suero de la leche, tanto del ser humano
como en los animales. Uno de los aspectos más interesantes de la lactoalbúmina es que
contiene gran cantidad de aminoácidos esenciales para nuestro organismo, lo que le confiere
un gran valor biológico. Se encuentra el lactosuero y su uso como producto, El lactosuero de
queso es un residuo abundante obtenido durante el procesamiento de quesos y su disposición
en el ambiente produce varios inconvenientes. Contiene principalmente lactosa, proteínas
como sustancias de importante valor nutritivo, minerales, vitaminas y grasa. Su composición
y tipo de lactosuero varía dependiendo del tipo de leche, tipo de queso elaborado y el proceso
de tecnología empleado.
Entre los productos de exitosa aceptación debido a sus bajos costos de producción, grado de
calidad alimenticia y aceptable sabor, se encuentran las bebidas refrescantes, bebidas
fermentadas, y alcohólicas, proteína unicelular, biopelículas, producción de ácidos orgánicos,
concentrados de proteínas, derivados de lactosa entre otros (Londoño, 2008).

Análisis y discusión

Conclusiones

Se describió en su totalidad la función de técnicas espectrofotométricas en la cuantificación

de proteínas. Las técnicas espectrofotométricas fueron importantes durante la práctica del
laboratorio ya que fue lo que nos permitió hallar la concentración de proteínas dentro de las
muestras realizadas.

Gracias a la curva de calibración, podemos concluir que la absorbancia aumenta conforme

aumenta la concentración de la solución. Por eso para medir la absorbancia de la leche se
tuvo que hacer diluciones seriadas, hasta llegar a una solicion de 1/32, debido a que la leche
tiene una absorbancia, que si se mide en el espectrometro va a arrojar un valos mayor a 2.

Bibliografía

Abril, N. Bárcena, A. Fernández, E. Galván, A. Espectrofometría: Espectros de absorción y

cuantificación colorimétrica de biomoléculas
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf
Roca Ruiz, A. M. (s. f.). Aprende sobre las proteínas que contiene la leche. La leche - Puleva.
Recuperado 1 de septiembre de 2021, de
https://www.lechepuleva.es/la-leche/proteinas-de-la-leche

de Nutricion, E. (2018, 23 octubre). ¿Qué es la Beta-Lactoglobulina? Beneficios y

propiedades|NutriTienda.https://www.nutritienda.com/.
https://blog.nutritienda.com/beta-lactoglobulina/

de Nutricion, E. (2018b, octubre 23). ¿Qué es la Lactoferrina? Beneficios y propiedades |

NutriTienda. Nutritienda. https://blog.nutritienda.com/lactoferrina/

editor pochteca. (2021, 25 marzo). Caseinatos | Grupo Pochteca. Grupo Pochteca | Venta de
materias primas para la Industria. https://mexico.pochteca.net/caseinatos/

Calvo, M. (s. f.). PROTEINAS DEL LACTOSUERO. BIOQUIMICA DE LOS

ALIMENTOS. Recuperado 1 de septiembre de 2021, de
http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/proteins/lactosuero.html

Dosal, A. Villanueva, M. (2008, Marzo). CURVAS DE CALIBRACIÓN EN LOS

MÉTODOS ANALÍTICOS.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/CURVASDECALIBRACION_23498.pdf