Instituto Tecnolgico de Los Mochis

Ingeniera en Industrias Alimentarias

Biotecnologa
6to Semestre
Cintica Enzimtica y Microbiana
Alumno:
Bez Garca Enrique
Prof.
Dra. Rosa Mara Estrada
11P

Los Mochis Sin., a 21 de Abril 2015

EJEMPLO DE CINTICA ENZIMTICA

La hidrolisis de N-glutaril-L-fenilalanina-p-nitroanilida (GPNA) para dar p-nitroanilina y
N-glutaril-L-fenilalanina, esta catalizada por la enzima -quimiotrpsina. En unas
determinadas condiciones de pH y temperatura, los datos cinticos han sido los siguientes:
[GPNA] / 10-4 M
V / nmol L-1 min-1

2.50
2.11

5.00
3.73

10.0
5.90

15.0
7.10

a) Asumiendo una cinetica enzimtica de tipo Michaelis-Menten, calclense grficamente

los valores de Vmax y Km.
b) Determine el valor de n de recambio (k2) sabiendo que la concentracin de enzima
empleada fue de 4.00 x 10-6 M.
Solucin:
La ecuacin de Michaelis-Menten es:

Tomando inversos en ambos miembros se obtiene la linealizacin de Lineweaver-Burk

Que tiene la forma de una lnea recta:

y = 0.0. + pendiente . x
de manera que representando 1/v frente a 1/[S] podremos obtener Vmax y Km
a) Para ello hacemos la siguiente tabla auxiliar:
(1 / [S])/ 103 M-1
(1/v)/(mmol-1 L min)

4.00
0.455

2.00
0.263.

A continuacin graficamos los valores obtenidos

1.00
0.169

0.667
0.141

Como:
0.0. = 0.0800 mmol-1L min

1 / Vmax = 0.0800 mmol-1 L min

Vmax = 12.5 mmo l /L / min

Como:

b) Reordenando la definicin de K2 y sustituyendo, nos quedara:

CINETICA MICORBIANA DE Saccharomyces cerevisae

Llamada la levaduras de la cerveza es un hongo ambiental comn, componente
transitorio de las microbiotas digestivas y cutneas humanas, del reino fung, familia:
Saccharomycetaceae, especie Cerevisiae.
Son de forma esfrica u ovalada, miden entre 5 y 10 micras, se consideran organismos
facultativos, producen la fermentacin del pan y bebidas alcohlicas por fermentacin.
Su metabolismo se lleva a cabo usando azucares como su principal fuente de carbono y
energia, la temperatura afecta la capacidad de desdoblar azucares, la reproduccin y
crecimiento celular (0.3 0.5 C y 34 37 C)
Los cambios en el pH son causantes de la desnaturalizacin de enzimas y de problemas en
el intercambio de iones en la membrana celular. En la fermentacin de levaduras los valores
de pH entre 3 y 6 general-mente favorecen el crecimiento y la actividad fermentativa.
La Aireacin y Agitacin: La actividad celular, la secrecin de enzimas y la velocidad de
fermentacin al inicio del proceso, dependen estrechamente de las condiciones de aireacin
y agitacin.
Medio de cultivo: La produccin de levadura, requiere adems de unas condiciones
ambientales optimas, de una variedad de nutrientes esenciales y vitaminas.

N (sales de amonio, sulfato de amonio y urea)

F (fosfato diamonico y acido fosfrico)

Mg (sales de magnesio

K, Ca, S, carbohidratos y trazas de Zn, Cu, Mn y Mo.

Vitaminas biotina, inositol, ac. pantotenoico y tiamina.

CINTICA DEL CRECIMIENTO DE BIOMASA

La fisin binaria y otros procesos de divisin celular causa un aumento en el

nmero de clulas de una poblacin

En el transcurso de toda la fermentacin, solo se adiciona oxigeno (en forma de aire

y un para el control del pH, con el fin de garantizar las condiciones optimas de
operacin que permitan obtener una alta concentracin celular.

La composicin del medio de cultivo, la concentracin de biomasa y la

concentracin del metabolito cambia constantemente como resultado del
metabolismo celular.

Metodologa: Esterilizacin de material, se separ la solucin reguladora de fosfatos, agar

papa dextrosa (PDA), solucin extracto de malta (NOM-111-SSA1-1994)
UFC: 20 mL de extracto de malta + levadura S. cerevisiae. Inmediatamente el tubo con la
muestra se agito para homogeneizar. 1.5 mL de muestra en 7 diferentes matraces con 150
mL de malta.

Resultados:
1.- Cintica de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae

Grafica 2.- Determinacin de pH

Grafica 3.- Concentracin de azcares

Grfica 4.- UFC / ml

Conclusin: El crecimiento de la levadura Saccharomyces cerevisiae se vera influenciado

por el medio en el que se le coloca y las condiciones de pH, y temperatura a los cuales se le
expone, en esta primera practica se obtuvieron buenos resultados ya que al proveer a la

levadura de todas las condiciones optimas de crecimiento se pudieron medir los parmetros
de inters (UFC, pH, azucares, acidez).