UNIVERSIDAD NACIONAL “JORGE BASADRE

GROHMANN - TACNA”
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL
INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

RECUENTO DE LEVADURAS EN CÁMARA

NEUBAUER
INFORME DE LABORATORIO N°4

CURSO : Biotecnología de alimentos

DOCENTE : Mgr.Dennys Sihuayro Larico

ALUMNOS : Judith Maricarmen Pari Pari 2014-111030

Renzo Wilmar Yujra Mamani 2014-111007

HORARIO : miercoles 4:00 - 6:00pm

TACNA – PERÚ
2021
 RECUENTO DE LEVADURAS EN CÁMARA NEUBAUER

I. OBJETIVO
 Determinar el conteo de levaduras en cámara neubauer
 Conocer el funcionamiento de la cámara neubauer

II. FUNDAMENTO

Para realizar un proceso fermentativo es indispensable establecer un iniciador

de fermentación o cultivo iniciador, es una preparación que se emplea para
poner en marcha el proceso de fermentación aplicada en la industria
alimentaria

Figura 1 :Cámara neubauer

1. Cuadro grande central (centro de la cruz, 400 cuadros pequeños): 1mm /400
cuadros.

2. Cuadro mediano (formado por 5x5=25 cuadros pequeños): 0.25 mm x 0.25

mm

3. Cuadro pequeño: 0.05 mm x 0.05 mm = 0.0025 mm

4. Líneas separadoras de cuadros medianos (en rojo): 0.025 mm del extremo

del cuadro pequeño.
 Figura 2: Campo para conteo en cámara Neubauer

La cámara de recuento, Neubauer, es un dispositivo de precisión hecho de

vidrio óptico especial. Se utiliza para contar células u otras partículas en
suspensiones bajo el microscopio. Las cámaras de recuento se utilizan
principalmente para el análisis de sangre (recuento de leucocitos, eritrocitos,
trombocitos). Además, las cámaras de recuento sirven para contar bacterias,
espermatozoides y esporas de hongo. La cámara de Neubauer o, también
llamada, Hematocimetro es un grueso portaobjetos de cristal, dividido en tres
secciones, la sección media a su vez cuenta con un rayado fino formando una
cuadrícula de 3 mm x 3 mm identificable fácilmente al microscopio .
III. MATERIALES

Cámara neubauer
Levadura seca
Microscopio
Vaso precipitado
Agua destilada
Balanza analítica

IV. PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
 Lavar la cámara y el cubre con agua destilada y alcohol 96%.
 Secar bien con papel lente.
 Poner el cubreobjetos encima de la cámara.
 Homogeneizar removiendo bien el cultivo en donde residen las levaduras,
agregar dos gotas de colorante azul de metileno al 1%.
 Tomar con pipeta una muestra.
 Poner la punta de la pipeta en una de las dos ranuras de la cámara y, por
capilaridad, las levaduras se distribuirán en la cámara.
 Si se crea una cámara de aire repetir la operación desde el principio.
 Fijar la cámara de recuento en la platina del microscopio para realizar la
observación microscópica.
  Esperar unos minutos antes de contar para que las levaduras se depositen
en la cámara

Preparación del microscopio

 El enfoque del microscopio se empieza con el objetivo de menor aumento

que posteriormente pasaremos a uno de más.
 Se centra el objetivo del microscopio a ojo en el centro teórico de la cruz de
la cámara, luego se coloca el objetivo lo más cerca posible del
cubreobjetos, pero sin tocarlo y posteriormente se irá alejando hasta que la
imagen sea lo más clara y nítida posible.
 Se aconseja trabajar a 400 aumentos.

Contabilizar levaduras totales (recuento)

 Se aconseja siempre hacer la media de levaduras contenidas en varios

grupos de cuadros. Sea cual fuere el modelo de cámara empleado, el
procedimiento es el mismo.
 Por ejemplo, según la fig. 4, se presenta contabilizar las levaduras
contenidas en los grupos de 25 y 16 cuadros respectivamente según la
cámara usada.

V. RESULTADOS

Ejemplo de conteo de levaduras en cámara neubauer:

 3
X levaduras ¿ cuadros cámara 1000 m m
x x = X millones de levaduras l ml
Y cuadros Volumen cámara 1 c m3 ( o 1 ml )

Hallar el cálculo estimado de la cantidad de levaduras presentes en un mosto donde

se obtuvo los siguientes resultados:

1.- si se encuentran 14 levaduras en 25 cuadros en la cámara neubauer

#cuadros de la cámara :400 cuadros útiles

Volumen de la cámara: 0.2mm x0.2mmx0.1mm x25 = 0.1mm3

14 levaduras en 25 cuadros a X levaduras en 16 cuadros aplicando una regla de tres:

14-------25 cuadrados
x-------16cuadrados
X = (16 * 14) / 25 = 224 / 25 = 8,96

3
8.96 levaduras 400 cuadros cámara 1000 mm
x x =2.24 millones de levaduras l ml
16 cuadros 0.1 m m
3 3
1 c m ( o 1ml )

2.- si tenemos 3 grupos de 4 cuadros pequeños con 7 levaduras de media.

Se aplica la siguiente regla de tres:

14 25
X 4
X = (4 x 14) / 25 = 56/25 = 2,24

Aplicando la fórmula rápida:

2,24 x 1.000.000 = 2.240.000 levaduras / mL ó = 2,24 millones de levaduras / mL

VI. CONCLUSION

Una cámara de Neubauer  o  hemocitómetro  es un instrumento utilizado

en medicina y biología para realizar el recuento de esporas y células en un medio líquido,
que puede ser; un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial,
etc.

La cámara sirve para obtener el estimado recuento celular a travez de microscopio, este es
un método sencillo y poco costoso, el cual permite un seguimiento del cultivo mediante su
inspección visual.

VII. CUESTIONARIO

a. Describa el procedimiento de conteo de células de neubauer.

Para el contaje de los glóbulos blancos o leucocitos se debe contar toda la

superficie de los cuatro cuadrados medianos de las esquinas y el cuadrado
central de cada retículo.

El contaje se inicia en el cuadrado de la esquina izquierda superior. Se

comienza desde el primer cuadrado de la primera fila, es decir, de izquierda a
derecha hasta llegar al extremo contrario.
 Allí se baja y se devuelve la mirada de derecha a izquierda hasta llegar al otro
extremo y así sucesivamente se van contando las células que hay dentro de
cada cuadrícula en forma de zigzag. Se cuentan las 16 cuadrículas de cada
cuadrado mediano.

Para evitar contar una célula dos veces existen reglas sobre las células que se
ubican sobre las líneas limítrofes de cada cuadrícula. Las células que se
ubiquen en las líneas izquierdas y superiores se cuentan y las que se ubiquen
sobre las líneas derechas e inferiores se ignoran.

b. ¿Cuál es la utilidad del conteo de células en cámara neubauer?

La cámara de conteo es un aparato de vidrio especial de precisión. se utiliza,

para contar células u otras particulas en suspensiones bajo el microscopio. las
cámaras de conteo se utilizan principalmente para el análisis de sangre (conteo
de leucocitos, eritrocitos, trombocitos). Pero las cámaras de conteo sirven
también para el conteo de bacterias, esporas del moho y para cualquier tipo de
recuento citológico.
c. Grafique y describa las partes y caracteristicas de la cámara neubauer

Caracteristicas

La cámara completa es del tamaño de un portaobjeto normal para que pueda ser
colocada en la platina del microscopio.

La cámara consta de tres superficies rectangulares centrales (a, b, c). En la zona

“b” está ubicada la zona R o zona
de recuento, también llamado
retículo. Una a cada lado de la
cámara, separados por la
zona “d”.
Cada retículo es una zona pulida que contiene grabada la zona de contaje. Consta de
un cuadrado con una superficie de 9 mm2 y está dividido internamente en 9 cuadros
con 1 mm2 de superficie cada uno. Los cuatro cuadros de las esquinas están divididos
en 16 cuadrículas más pequeñas (0.0625 mm2 de superficie).

Estas cuadrículas se forman por una serie de líneas milimetradas que se entrecruzan
entre sí, constituyendo cuadrículas perfectamente graficadas y delimitadas a las
medidas que se han especificado. Estas líneas han sido grabadas con punta de
diamante.

Los cuatro laterales corresponden a la zona de recuento. En estos laterales o esquinas

es donde se realiza el contaje de la mayoría de las células (hematíes y leucocitos),
mientras que las plaquetas se cuentan en la zona central.

La zona central
tiene más
divisiones, consta
de un cuadrado de 1 mm2 dividido en 25 cuadros que tienen una superficie de 0,04
mm2 cada uno. Estos a su vez se dividen en 16 cuadrículas con una superficie de
0,0025 mm2.

La zona “a” y “c” sirven de soporte para colocar un cubre objeto especial que recibe el
nombre de laminilla hematimétrica o cubre hematímetro.

La altura entre la laminilla y la superficie de recuento es de 0,1 mm. Las medidas de la

superficie de los cuadros de conteo, así como la altura de la cámara y la dilución de la
muestra, son datos necesarios para realizar los cálculos finales.
BIBLIOGRAFIA

Cardona-Maya W, Berdugo J, Cadavid A. Comparación de la concentración

espermática usando la cámara de Makler y la cámara de Neubauer. Actas Urol
Esp 2008;32 (4): 443-445. Disponible en: scielo.

Cámara de Neubauer. (2018, 27 de marzo). Wikipedia, La enciclopedia libre.

Fecha de consulta: 04:10, junio 23, 2019 desde es.wikipedia.org

Meneses A, Rojas L, Sifontes S. Aplicación de un método alternativo de conteo

en Cámara de Neubauer para determinar la concentración de Trichomonas
vaginalis. Rev. Cub Med Trop 2001; 53 (3): 180-8. Disponible en:
researchgate.net