ÍNDICE

INTRODUCCIÓN

CAPÍTULO I: Marco Teórico

1.1. Leucocitos
1.1.1. Propiedades

1.2. Prueba del recuento sanguíneo completo (RSC)

1.3. Recuento manual de leucocitos

1.3.1. Leucocitosis
1.3.2. Leucopenia

1.4. Cámara de Neubauer

1.4.1. Fórmula para Cálculo de Conteo Celular en Cámara de Neubauer

CAPÍTULO II: Metodología

2.1. Objetivos
2.1.1. Objetivos generales
2.1.2. Objetivos específicos

2.2. Método

2.3. Materiales, equipos y reactivos

2.4.Procedimiento
2.4.1. Pre-analítica
2.4.2. Analítica
2.4.3. Post-analítica

CAPÍTULO III: Resultados

3.1. Resultados
3.1.1. Conteo de leucocitos persona N° 1
3.1.2. Conteo de leucocitos persona N° 2

3.3. Interpretación de resultados

CONCLUSIÓN

REFERENCIAS
ANEXO
 INTRODUCCIÓN

En la actualidad es importante que el profesional de Tecnología Médica en

Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica conozca y maneje diversas técnicas para
el conteo de leucocitos y acelere el diagnóstico de enfermedades. El presente
informe, titulado “Recuento manual de leucocitos”, se centra principalmente en la
aplicación de la técnica de conteo de leucocitos mediante el uso de la cámara de
Neubauer.

El recuento de leucocitos es valioso, ya que permite mejorar el diagnóstico de

enfermedades que generan ya sea un incremento o descenso de los leucocitos. La
variabilidad del número de leucocitos presenta diversos factores y causas, por
ejemplo que la persona padezca alguna enfermedad o infección genera que el
cuerpo produzca mayor número de leucocitos para combatir las bacterias, los virus
u otras sustancias extrañas que han causado la afección. Esto aumenta la cantidad
de glóbulos blancos.

Asimismo, otras enfermedades pueden hacer que el cuerpo produzca menos

glóbulos blancos de los que se requiere naturalmente.. Las afecciones que reducen
este conteo incluye algunos tipos de cáncer, el VIH y sida, una enfermedad viral que
ataca directamente a los glóbulos blancos. Ciertos medicamentos, entre ellos la
quimioterapia, también pueden reducir la cantidad de glóbulos blancos.

Por tanto el procedimiento planteado en la experimentación nos ayudará en el

diagnóstico, prevención y control de las posibles enfermedades que el paciente
pueda llegar a tener mediante el conteo de leucocitos.

Por lo expuesto anteriormente, el presente informe ha sido dividido en 4 partes. En

el primer capítulo se describe el marco teórico, en el segundo capítulo se plantea la
metodología usada, ya sea objetivos generales o específicos, materiales y
procedimientos, utilizando los fundamentos teóricos; en el tercer capítulo se
describe los resultados obtenidos en la ejecución de la práctica y discutimos los
resultados obtenidos en la investigación. Finalmente, en la cuarta parte planteamos
nuestras conclusiones y recomendaciones basadas en nuestras observaciones
 CAPÍTULO I: Marco teórico

1.1. LEUCOCITOS:

Los leucocitos comúnmente conocidos como glóbulos blancos, son un tipo de

glóbulo sanguíneo (célula de la sangre) que se produce en la médula ósea y se
encuentra en la sangre y el tejido linfático. Se caracteriza porque carece de
hemoglobina, tiene núcleo y es capaz de moverse espontáneamente e
independientemente, su diámetro varía de 8 a 20 μm.

Los leucocitos son parte del sistema inmunitario del cuerpo y ayudan a combatir
infecciones y otras enfermedades mediante la destrucción de agentes infecciosos y
células cancerosas, produciendo anticuerpos o ingiriendo materiales extraños y
desechos celulares.

1.1.1. PROPIEDADES

A. DIAPÉDESIS:
Esta propiedad permite que los leucocitos atraviesen las paredes de los
capilares sanguíneos; migrando constantemente a otros tejidos.

B. MOVIMIENTO AMEBOIDE:
Los leucocitos realizan su desplazamiento con la emisión de pseudópodos.

C. QUIMIOTAXIS:
Este atributo permite que los leucocitos migran hacia el foco infeccioso
atraídos por las sustancias tóxicas de los patógenos.

D. FAGOCITOSIS:
Es la ingestión de sustancias extrañas para digerirlas mediante la acción
enzimática.

Figura 1:
1.2. PRUEBA DEL RECUENTO SANGUÍNEO COMPLETO (RSC)

El análisis de sangre que se realiza con más frecuencia es el hemograma completo.

El hemograma consiste en una valoración de todos los componentes celulares
(glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas) presentes en la sangre.

El recuento sanguíneo completo incluye el número de leucocitos. Este valor se usa

para detectar afecciones como infecciones, inflamaciones, alergias y leucemias.
También se llama GB y glóbulo blanco.

1.3. RECUENTO MANUAL DE LEUCOCITOS:

Consiste en realizar el recuento de los leucocitos presentes en una dilución de

sangre. Es un método poco usado debido al elevado error que presenta. Se realiza
el recuento de las células mediante la cámara de Neubauer utilizando el
microscopio.

El conteo de glóbulos blancos puede mostrar si el número es demasiado alto o bajo,

pero no permite confirmar el diagnóstico. Por eso, se suele hacer junto con otras
pruebas, como un hemograma o conteo sanguíneo completo, una fórmula
leucocitaria, un frotis de sangre o una prueba de médula ósea.

Tabla 1: Valores normales del recuento de leucocitos

RECUENTO DE LEUCOCITOS

Rango normal (células/mm3) 4 500 - 11 000 células/ mm3

1.3.1. LEUCOCITOSIS:

Un conteo alto de glóbulos blancos de más de 11 000 células por mm3, puede
indicar:

● Una infección bacteriana o viral

● Una enfermedad inflamatoria como la artritis reumatoide
● Alergia
● Leucemia o enfermedad de Hodgkin
● Daño en un tejido por una quemadura o una operación

1.3.2. LEUCOPENIA:

Un conteo bajo de glóbulos blancos menor a 4 500 células por mm3 puede indicar:
 ● Daño en la médula ósea: El daño puede ser causado por una infección, una
enfermedad o por tratamientos como la quimioterapia
● Un cáncer que afecta a la médula ósea
● Un trastorno autoinmunitario, como lupus (lupus eritematoso sistémico o LES)
● VIH y sida

1.4. CÁMARA DE NEUBAUER:

El hematímetro o hemocitómetro, es un instrumento de laboratorio que consiste en
una placa de vidrio especial grueso. Esta cámara sirve para realizar recuentos de
algunos tipos celulares como hematíes, glóbulos blancos y plaquetas, aunque
puede ser usada para recuento de esporas, espermatozoides, parásitos, etc.
El conteo se inicia en el cuadrado de la esquina superior izquierda. Se comienza
desde el primer cuadrado de la primera fila, es decir, de izquierda a derecha hasta
llegar al extremo contrario.
Allí se baja y se devuelve la mirada de derecha a izquierda hasta llegar al otro
extremo y así sucesivamente se van contando las células que hay dentro de cada
cuadrícula en forma de zigzag. Se cuentan las 16 cuadrículas de cada cuadrado
mediano.

Figura 7:

Figura 8: Vista microscópica con objetivo de 40X

1.4.1. Fórmula para Cálculo de Conteo Celular en Cámara de Neubauer
 CAPÍTULO II: Metodología

2.1. OBJETIVOS

2.1.1. Objetivos generales:

- Dominar el recuento manual de leucocitos mediante la utilización de la
cámara de Neubauer.

2.1.2. Objetivos específicos

- Aplicar la fórmula para Cálculo de conteo celular en Cámara de Neubauer

- Conocer los datos (marca, modelo y función) de los materiales usados
- Reconocer los datos (marca modelo y función) de la cámara de Neubauer

2.2. MÉTODO:

El recuento manual de leucocitos se realiza en una dilución de sangre. La técnica

consiste en diluir sangre anticoagulada con EDTA en líquido de Turck (reactivo), y
realizar el recuento de las células mediante hemocitómetro o cámara de Neubauer
utilizando un microscopio óptico. Para calcular el valor total de recuento tendremos
en cuenta la fórmula de conteo celular en cámara de Neubauer.

2.3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

A. Tubos de ensayo: Se usan principalmente para contener líquidos y sólidos,

así como también sirve para realizar mezclas, también se emplean para
calentar líquidos y sólidos a altas temperaturas.
B. Gradilla: Sirve de soporte para los tubos de ensayo y para posteriormente
guardarlos también.
C. Tubo EDTA(tapa lila): Son tubos que llevan como anticoagulante EDTA este
es empleado para realizar recuentos sanguíneos completos debido a que
conserva mejor la morfología sanguínea.

D. Pipeta automática (10 - 100 μl)Boeco: La micropipeta de 10-100μl es muy

empleada en distintas técnicas analíticas en los laboratorios debido a su fácil
manejo, exactitud y la seguridad que nos da.

E. Pipeta automática (100 - 1000μl)Boeco:La micropipeta de 100-1000μl es

muy empleada en distintas técnicas analíticas en los laboratorios debido a su
fácil manejo, exactitud y la seguridad que nos da.

F. Cámara de Neubauer:
● Profundidad de la celda: 0.100 mm
● Tamaño: 79x39x13 mm
● Peso neto: 45 g
● Marca: MARIENFELD

G. Microscopio óptico: Es una herramienta que permite observar elementos

que no pueden ser vistos a simple vista y esto es a través de lentes, visores y
rayos de luz que acercan y agrandan la imagen a tamaños convenientes para
su examinación y análisis, los objetivos que son más usados suelen ser de
4x,10x,20x,40x y 100x.
 H. Solución Turk: viene a ser una solución hipotónica, la composición del
líquido de Turk es la siguiente:
- 2 ml de ácido acético glacial
- 1 ml de solución acuosa de violeta de genciana al 1%
- 100 ml de agua destilada
El ácido acético rompe a los eritrocitos y la violeta de genciana tiñe a los
leucocitos

2.4. PROCEDIMIENTO:

2.4.1. Pre-analítica:
a. Toma de muestra de sangre en tubo de EDTA
- Ejecutar con las precauciones debidas (uso de guantes, alcohol,
etc)
- Desechar correctamente los materiales punzocortantes

2.4.2. Analítica

a. Realizar una dilución de 1/20 de la sangre (con EDTA) y el reactivo de Turck.

(volumen final de 400 μl)
b. Colocar el cubreobjeto a la cámara Neubauer
c. Homogeneizar la dilución y dejar reposar 5 minutos
d. Pipetear 20μl de la dilución y colocar en la cámara Neubauer
e. Llevar al microscopio y realizar el recuento de los leucocitos.

● Si existen células sobre los bordes exteriores de un cuadrado, se cuentan

solo aquellos situados sobre las líneas superior y derecha y no se cuentan los
que están situados en las líneas inferior e izquierda.

● El correcto conteo se realiza de la siguiente manera:

2.4.3. Post - analítica:

● Después de realizar el conteo de los leucocitos se debe de aplicar la
fórmula de conteo de leucocitos de la cámara de Neubauer, detallada
en el marco teórico.
 CAPÍTULO III: Resultados
3.1. RESULTADOS:

Ya habiendo realizado la dilución con el reactivo Turck después de transcurrir un

corto tiempo (5 min), colocamos la muestra en la cámara de Neubauer y es ahí
donde empezamos a utilizar el microscopio con un objetivo de 40x para contabilizar
los leucocitos (glóbulos blancos).

3.1.1. CONTEO DE LEUCOCITOS PERSONA N° 1:

Gráfico 1:

APLICACIÓN DE LA FÓRMULA DE CONTEO CELULAR EN CÁMARA DE

NEUBAUER:

A. 1° Paso
● Primer cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida.
- 1 + 8+6+6+1+4+3 = 29
● Segundo cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 9 + 6+7+4+7+6+4 = 43

● Tercer cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 3 +4+7+5+2+1+2 = 24

● Cuarto cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 4 +6+5+2+2+2+6 = 27
 B. 2° Paso:
● Sumatoria de los resultados de cada cuadrante:
- 29 + 43 + 24 + 27 = 123
C. 3° Paso:
● Aplicación de la fórmula Cálculo de Conteo Celular en Cámara de
Neubauer:
- Células/mm3 = (# células contadas) (Factor de dilución) (1/factor
volumen)
- Células/mm3 = (123) (20) (1/0.4)
- Células/mm3 = 6 150

3.1.2. CONTEO DE LEUCOCITOS PERSONA N° 2:

Gráfico 2:

APLICACIÓN DE LA FÓRMULA DE CONTEO CELULAR EN CÁMARA DE

NEUBAUER:

A. 1° Paso
● Primer cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida.
- 9 +8+3+7+9+10+4 = 50
● Segundo cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 11 +6+9+7+4+8+8 = 53

● Tercer cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 9 +4+9+8+8+9+4 = 51

● Cuarto cuadrante:
- Sumamos los resultados obtenidos en L invertida
- 5 +4+7+5+9+7+6 = 43
 B. 2° Paso:
● Sumatoria de los resultados de cada cuadrante:
- 50 + 53 + 51 + 43 = 197
C. 3° Paso:
● Aplicación de la fórmula Cálculo de Conteo Celular en Cámara de
Neubauer:
- Células/mm3 = (# células contadas) (Factor de dilución) (1/factor
volumen)
- Células/mm3 = (197) (20) (1/0.4)
- Células/mm3 = 9 850
-

3.2. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Como ya se logró ver en este proceso y conteo de leucocitos (glóbulos blancos)

podemos obtener resultados concretos siguiendo correctamente los pasos
requeridos y respetando el tiempo que se amerita cada proceso

Logramos apreciar que en cada una de las muestras que pusimos en la cámara de
neubauer tuvieron correctos resultados ,tuvimos pequeñas dudas de que la
hemoglobina influía en este proceso porque nuestras 2 muestras eran diferentes,
una muestra de sangre era más oscura y otra más clara, sin embargo, esto se debe
a que ambas personas llevan un estilo de vida diferente uno de otro y por ende sus
resultados son diferentes.

El experimento permitió que mejoremos nuestros conocimientos tanto en el uso de

materiales como las micropipetas, realización de diluciones y el manejo de equipos
como el microscopio óptico Además en la aplicación y desarrollo de la fórmula para
el conteo de leucocitos.
 CONCLUSIÓN

De acuerdo a los resultados obtenidos sobre el conteo de células blancas o

leucocitos en el experimento, se concluye que tanto la persona 1 como la persona 2
de las cuales se realizó el conteo de leucocitos, presentan valores dentro del rango
normal.

De acuerdo a la bibliografía consultada, se considera que el rango normal de

leucocitos por mm3 en una persona oscila entre 4 500 - 11 000.
El número de leucocitos por mm3 en la persona N° 1 es de 6 150, este valor se
obtuvo después de reemplazar en la fórmula de Conteo Celular en Cámara de
Neubauer. Al cotejar el resultado obtenido, se mostró que se encuentra dentro del
rango normal. En el caso de la persona N° 2 el número de leucocitos por mm3 fue
de 9 950, este valor también se encuentra en el rango de valores normales.

Asimismo, los resultados muestran una variación de 3 800 leucocitos por mm3 entre
ambas personas, esta variación se debe a diversos factores como el estilo de vida
de cada persona, edad y sexo.

A partir de lo mencionado anteriormente, se verificó que ambas personas, no

poseen alteraciones en el número de leucocitos por mm3, sin embargo no se puede
afirmar un diagnóstico sobre una enfermedad en ambos casos, ya que para ello se
necesita realizar un conjunto de pruebas a parte del conteo de leucocitos, por
ejemplo la fórmula leucocitaria, para mejorar la precisión de los resultados.
Por otro lado, se debe tener en cuenta que el método usado para el conteo de
leucocitos en el experimento, presenta mayor porcentaje de incertidumbre, lo cual
se reduciría si se usara un método automatizado.

Finalmente, las limitaciones identificadas durante el desarrollo del experimento se

basaron principalmente en la inexperiencia en la aplicación del método de conteo
manual de leucocitos, lo cual incrementó el tiempo de ejecución del experimento.
 REFERENCIAS

- https://www.formacionalcala.com/articulos/141/que-son-los-globulos-blancos-o-leuco
citos-definicion-tipos-y-funciones

- https://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_02.htm#:~:text=Estos%20vasos%20transpor
tan%20c%C3%A9lulas%20del,a%20la%20masa%20del%20cerebro.

- https://es.slideshare.net/magargalvez/recuento-manual-de-leucocitos-en-cmara

- https://www.berri.es/pdf/HEMOGRAMA.%20C%C3%B3mo%20Hacer%20e%20Inter
pretar%20(Libro%20+%20eBook)/9789806574939
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