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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECANA DE AMÉRICA

Informe de laboratorio -
Métodos para la
determinación de urea y
creatinina en suero.

Curso: Bioquímica

Profesor(a): Doris Virginia Huerta Canales

Aaron Joel Camargo Mendoza

22/08/2021
1. Introducción
El trabajo experimental realizado el día jueves 19 de agosto (8-11 am), consistió en la
interpretación de manuales pertenecientes a dos compañías proveedoras de kits de
diagnóstico, estas son Valtek y Wiener. Previamente se tuvo que realizar una revisión de
conceptos sobre la urea y la creatinina, especialmente a las enfermedades que pueden
ocasionar en caso se encuentre en cantidades excesivas. Al término de la sesión se dio
paso a las preguntas dirigidas a la docente por parte de los estudiantes y viceversa.

1.1. Objetivos y competencias


Los siguientes objetivos están planteados en el protocolo de la práctica con el fin de lograr
determinadas competencias, entre los objetivos de la sesión tenemos:
- Conocer los aspectos previos (bioquímicos) pertenecientes a la urea y la creatinina.
- Conocer los indicadores de problemas relacionados al hígado o a los riñones, entre otros
trastornos relacionados a las cantidades de urea y creatinina según los exámenes de
bioquímica.
- Relacionar los niveles de urea (nivel de proteínas) y creatinina con el área de salud
nutricional.

Con el desarrollo de esta sesión de aprendizaje de laboratorio, el estudiante podrá lograr las
siguientes competencias:
- Interpretar el significado clínico de la prueba de laboratorio.
- Explicar el fundamento de los métodos propuestos.
- Aplicar los procedimientos para su realización.
- Conocer los valores de referencia de la prueba.
- Calcular sus valores de concentración.

2. Trabajos dentro de la sesión


2.1. Conceptos previos

● Urea: sustancia que se forma por la descomposición de proteínas en el hígado. Los


riñones filtran la urea de la sangre hacia la orina.
● Creatinina: la creatinina es un producto de desecho generado por los músculos
como parte de la actividad diaria. Normalmente, los riñones filtran la creatinina de la
sangre y la expulsan del cuerpo por la orina.
● Nitrógeno ureico: es uno de los productos de desecho que los riñones eliminan de la
sangre. Cuando los niveles normales de NUS están elevados, esto puede ser un
signo de que los riñones no están funcionando de manera eficiente.
● Niveles bajos de urea: denominado hipoxemia, no es algo muy frecuente y se
relaciona con excesivo consumo de agua y una dieta baja en proteínas.
● Niveles altos de urea: llamado uremia, niveles de urea altos en sangre, nos puede
indicar problemas hepáticos o renales, bajo consumo de agua y una dieta con
exceso de proteínas.
● Niveles bajos de creatinina: puede hacer pensar en una enfermedad renal, ciertos
trastornos musculares y neuromusculares, o una obstrucción de las vías urinarias.
● Niveles altos de creatinina: indican una enfermedad renal o que afecta el
funcionamiento de los riñones, como: Enfermedades autoinmunitarias.
● Análisis bioquímico de urea: para evaluar la función renal o monitorizar la eficacia de
la diálisis y de otros tratamientos relacionados con enfermedad o lesión renal.
● Análisis bioquímico de creatinina: se usa para averiguar si los riñones están
funcionando bien.
● Ureasa: es la enzima responsable de la degradación de la urea en amoníaco y
bicarbonato, lo que aumenta el pH del lugar en que está presente y favorece su
proliferación.
● Picrato o ácido pícrico: reactivos de la creatinina, produce un compuesto coloreado.

2.2. Procedimiento
-Significancia de las pruebas de Valtek y Wiener
En cuanto a la urea, su análisis bioquímico resulta importante para alertar o diagnosticar
problemas relacionados al hígado, los riñones o nivel de proteínas en el organismo, por ello
es importante determinar si los niveles de urea son altos o deficientes. De igual manera, el
análisis bioquímico de la creatinina, contribuye como un indicador de trastornos renales, por
lo que resulta importante determinar si los niveles de creatinina son altos o deficientes.
Ambas pruebas son parte de la conformación del perfil metabólico del paciente.

-Fundamentos de Valtek y Wiener sobre la determinación de urea


Ambos fundamentos se basan en el desdoblamiento de la urea en amoniaco y dióxido de
carbono a partir de la acción de la enzima ureasa, posteriormente se reacción con salicilato
e hipoclorito en el caso de Valtek, mientras que por el lado de Wiener, se reacciona con
fenol e hipoclorito, ambas reacciones se dan en medio alcalino y producen compuestos
coloreados. En Valtek se forma un complejo de color verde, mientras que en Wiener sera de
color azul de indofenol, posteriormente, son medidos espectrofometricamente a 600 nm
(Valtek) y 540 nm (Wiener), esto es asi dado que las mediciones son proporcionales a la
concentracion de la urea en la muestra.

-Fundamentos de Valtek y Wiener sobre la determinación de creatinina


Ambos fundamentos se basan en la reacción del picrato o ácido pícrico en medio alcalino
para la formación de un compuesto coloreado. En Valtek se forma un complejo de color
anaranjado, mientras que en Wiener sera de color rojo, posteriormente, son medidos
espectrofometricamente a 510 nm, esto es asi dado que las mediciones son proporcionales
a la concentracion de creatinina en la muestra.

-Muestras de las pruebas de Valtek y Wiener: como muestras para las pruebas de urea,
tanto para Valtek como para Wiener, tenemos al suero libre de hemólisis, dado que esta
hemólisis funciona como interferente que aumenta los valores de manera falsa, también se
emplea plasma y orina diluida, se recomienda evitar al fluoruro dado que inhibe la acción de
la enzima ureasa. En el caso de las pruebas de creatinina, tanto para Valtek como para
Wiener, tenemos al suero libre de hemólisis (interferente que causa valores falsamente
aumentados), plasma heparinizado y orina.

-Técnicas de Valtek y Wiener: se realiza la mezcla e incubación de las respectivas muestras


y reactivos respetando los volúmenes y concentraciones indicados en los protocolos,
posteriormente llevar al espectrofotómetro para conseguir las lecturas de absorbancias,
para ello se debe haber calibrado el equipo previamente. En el caso de la urea las lecturas
se realizan a 600 nm (Valtek) y 540 nm (Wiener), cabe resaltar que en Wiener se hace
distinción entre la técnica para suero o plasma y la técnica para orina. En el caso de la
creatinina las lecturas de absorbancias se realizan a 510 nm en ambos protocolos.
-Cálculos de Valtek y Wiener: basado en el metodo analitico del factor de calibración
(concentraciones estándar/absorbancia estándar) para posteriormente determinar la
concentración de urea y creatinina (muestras problemas) al multiplicar el factor de
calibración con la absorbancia de la muestra problema. También es importante mencionar
que la unidad empleada para la determinación de urea y creatinina varía según el protocolo.

-Urea (Valtek)

● Para determinar el factor:


C. standard de urea: 66
Abs. calibrador: 1.15
Factor: 66 / 1.15 = 57.3

● Para determinar la concentración de la muestra:


Factor: 57.3
Abs. desconocido: 0.67
C. muestra (urea en mg%): 57.3 * 0.67 = 38.3 mg%

-Rangos de referencia
10 a 50 mg%

Al tener un resultado de 38.3 mg% de urea podemos decir que dichos niveles están dentro
del rango normal, lo que se traduce en que no hay ningún trastorno renal o hepático.

-Urea (Wiener)

● Para determinar el factor:


C. standard: 0,60 g/l
Abs. calibrador (S): 0,18
Factor: 0,60 / 0,18 = 3,3 g/l

● Para determinar urea en suero o plasma (g/l):


Factor: 3,3
Abs. desconocido (D): 4,6
BUN en g/l: 3,3 * 4,6 = 15,18 g/l

-Rangos de referencia
20 a 40 g/l
Al tener un resultado de 15,18 g/l de urea podemos decir que dichos niveles están por
debajo del rango normal, lo que se traduce en indicador de algún trastorno renal o hepático.

-Creatinina (Valtek)

● Para determinar creatinina en suero (mg%)


Abs. muestra: 0,53
Abs. standard: 0,45
Creatinina en suero: 0,53 / 0,45 = 1,17 mg %

● Para determinar creatinina en orina (mg%)


Abs. muestra: 0,67
Abs. standard: 0,58
Creatinina en orina: 0,67 / 0,58 = 1,15 mg %

● Para determinar creatinina en orina (mg/24 h)


Cr. orina: 1,15 mg %
Vol. 24 h: 1L
Creatinina en orina (mg/24h): 1,15 * 1 * 10 = 11,5 mg/24 h

● Rangos de referencia:

Tomando en cuenta los valores de referencia, suponiendo que el paciente es un hombre, el


valor de 1,17 mg % se encuentra dentro de los valores normales en suero, mientras que
0,0115 g/24 h se encuentra por debajo de los valores normales en orina.

-Creatinina (Wiener)
● Para determinar creatinina en suero
D1: 0,37
D2: 0,67
S1: 0,50
S2: 0,40
Factor: 20 / 0,50 - 0,40 = 200
Creatinina en suero (mg/l): 0,67 - 0,37 * 200 = 0,30 * 200 = 60 mg/l

● Para determinar creatinina en orina


Diferencia de D: 0,30
Diferencia de S: 0,10
V: 1L
Creatinina en orina: 3 * 10 = 30 g/24 hs

● Depuración de creatinina endógena (D.E.):


Cr. en orina: 30
Cr. en suero: 60
D.E = 0,5 * 694 ml / min = 347 ml /min

● Rangos de referencia

Tomando en cuenta los valores de referencia, todos los valores obtenidos sobrepasan
notablemente los valores normales, por lo que indica trastornos o problemas en cuanto a la
funcionalidad renal o hepática.

Conclusiones
● La significancia de los métodos de los laboratorios Valtek y Wiener son similares en
la determinación de urea, de igual modo, son similares en la determinación de
creatinina.
● En cuanto a la determinación de urea y creatinina, se da por medio de la medición
espectrofotométrica de los compuestos coloreados respectivos tanto para Valtek
como para Wiener.
● El realizar estas pruebas bioquímicas resultan importantes como indicadores de
problemas nutricionales (nivel de proteínas), hepáticas y renales, además permiten
realizar monitoreos sobre dichos trastornos.
● En cuanto a los valores de referencias, estos se dan con distincion de sexo y en el
caso de la creatinina se toma en cuenta la depuraicon de clearence.

4. Referencias
1. VALTEK UREA.pdf [Internet]. [citado 22 de agosto de 2021]. Disponible en:
https://unmsm.online/nutricion/pluginfile.php/34395/mod_resource/content/0/VALTEK
%20UREA.pdf
2. WIENER UREA.pdf [Internet]. [citado 22 de agosto de 2021]. Disponible en:
https://unmsm.online/nutricion/pluginfile.php/34396/mod_resource/content/0/WIENN
ER%20UREA.pdf
3. VALTEK CREATININA.pdf [Internet]. [citado 22 de agosto de 2021]. Disponible en:
https://unmsm.online/nutricion/pluginfile.php/34393/mod_resource/content/0/VALTEK
%20CREATININA.pdf
4. Creatinina directa. :3.
5. Fawcett JK, Scott JE. A Rapid and Precise Method for the Determination of Urea.
Journal of Clinical Pathology. 1 de marzo de 1960;13(2):156-9.

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