04528123190V4

A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
• Indica los sistemas cobas c adecuados para el reactivo
Información de pedido Sistemas Roche/Hitachi cobas c
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2 cobas c 311 cobas c 501
150 tests Ref. 04528123 190 ID 07 6850 2 • •
C.f.a.s. HbA1c (3 x 2 mL) Ref. 04528417 190 Código 674
HbA1c Control N (4 × 0,5 mL) Ref. 20764833 322 Código 357
HbA1c Control P (4 x 0,5 mL) Ref. 20764841 322 Código 358
Hemolyzing Reagent Gen.2 (2 x 22,5 mL) Ref. 04528182 190 ID 07 6873 1
HbA1c Hemolyzing Reagent for Tina-quant HbA1c Aplicación solamente para
Ref. 11488457 122
(1000 mL) hemolizados
Español diabéticas. Debido a su función como indicadora del nivel medio de
la glucemia, la HbA1c proporciona un pronóstico de la evolución de
Información del sistema
complicaciones diabéticas en los pacientes con diabetes.3,5
Aplicación para sangre completa - Estandarización según la IFCC En su empleo clínico de rutina, generalmente basta realizar la prueba
transferible a DCCT/NGSP cada 3 a 4 meses. En ciertas situaciones clínicas, como en la diabetes
HB-W2: ACN 870 Hemoglobina (Hb) gestacional o al modificar el tratamiento de forma relevante, puede ser
A1-W2: ACN 880 Hemoglobina A1c (HbA1c) conveniente medir la HbA1c en intervalos de 2 a 4 semanas.7
RWI2: ACN 890 Cociente %
Principio del test10,11,12
A1CD2: ACN 952 Hemolyzing Reagent
El presente método emplea TTAB* como detergente en el hemolizante para
eliminar interferencias por leucocitos, ya que el TTAB no los lisa. No se
Aplicación para hemolizado - Estandarización según la IFCC transferible requiere ningún pretratamiento de la muestra para eliminar la HbA1c lábil.
a DCCT/NGSP Con el presente ensayo se miden todas las variantes de la hemoglobina
HB-H2 ACN 840 Hemoglobina (Hb) glucosiladas en el término N de la cadena beta cuyas regiones reconocibles
A1–H2 ACN 850 Hemoglobina A1c (HbA1c) por anticuerpos sean idénticas a las de la HbA1c. De este modo, el test
RHI2 ACN 860 Cociente % puede emplearse para averiguar el estado metabólico de pacientes con
A1CD2 ACN 952 Hemolyzing Reagent uremia o hemoglobinopatía (HbAS, HbAC, HbAE).13,14
*TTAB = bromuro de tetradeciltrimetilamonio
Función Hemoglobina A1c
Test in vitro para la determinación cuantitativa del porcentaje de La determinación de la HbA1c se basa en el ensayo inmunoturbidimétrico
hemoglobina A1c [HbA1c (%)] en sangre completa o sangre hemolizada de inhibición (TINIA) para sangre completa hemolizada.
con los sistemas Roche/Hitachi cobas c. • Muestra y adición de R1 (tampón/anticuerpo):
Generalidades1,2,3,4,5,6,7,8,9 La glucohemoglobina (HbA1c) de la muestra forma con el anticuerpo
La hemoglobina (Hb) está formada por cuatro subunidades proteicas con anti-HbA1c un complejo antígeno-anticuerpo soluble. Ya que en la
cuatro porciones hemo y constituye la proteína de pigmento rojo de los molécula HbA1c existe solamente un sitio de fijación específico para el
eritrocitos. Su función principal es el transporte de oxígeno y de dióxido anticuerpo anti-HbA1c, no se forman estructuras complejas.
de carbono en la sangre. Cada molécula de Hb es capaz de fijar cuatro • Adición de R2 (tampón/polihapteno) e inicio de la reacción:
moléculas de oxígeno. La Hb consta de numerosos derivados y subfracciones. Los polihaptenos forman con los anticuerpos anti-HbA1c
Dentro de este grupo heterogéneo de hemoglobinas, la HbA1c es una de las excedentes un complejo anticuerpo-polihapteno insoluble
hemoglobinas glucosiladas y constituye una subfracción que se deriva de la que se mide turbidimétricamente.
unión de varios azúcares a la molécula de Hb. La HbA1c se forma en dos pasos Hemoglobina
por la reacción no enzimática de la glucosa con el grupo amino N-terminal de La hemoglobina liberada de la muestra hemolizada es transformada
la cadena β de la hemoglobina de adultos normales (HbA). El primer paso es a un derivado con un espectro de absorción característico y se
reversible y produce la hemoglobina HbA1c lábil que se reordena lentamente mide bicromáticamente durante la fase de preincubación (muestra
en el segundo paso de la reacción para generar la HbA1c estable. + R1) de la reacción inmunológica descrita. Por consiguiente no
En los eritrocitos, la cantidad relativa de HbA que se transforma en HbA1c se requiere un reactivo Hb por separado.
estable aumenta paralelamente a la concentración promedio de la glucemia. El resultado final se expresa como HbA1c porcentual y se calcula a
El proceso de formación de la HbA1c estable depende de la vida media de partir del cociente de HbA1c/Hb de la siguiente forma:
los eritrocitos, de aproximadamente 100 a 120 días. En consecuencia, la Protocolo 1 (según la IFCC):
concentración de HbA1c determinada refleja el nivel promedio de glucemia HbA1c (%) = (HbA1c/Hb) × 100
en los 2 a 3 meses previos a la medición. Por ello, la determinación de Protocolo 2 (según el DCCT/NGSP):
la HbA1c en pacientes con diabetes mellitus es un medio idóneo para el HbA1c (%) = (HbA1c/Hb) × 87,6 + 2,27
seguimiento de la glucemia a largo plazo. Las concentraciones de glucosa
más recientes influyen más fuertemente en el nivel de HbA1c.1 Reactivos – Soluciones de trabajo
La relación entre la concentración de HbA1c y el valor medio de glucemia R1 Reactivo de anticuerpo
durante los 2 a 3 meses previos ha sido objeto de numerosos estudios. En Tampón MES: 0,025 mol/L; tampón TRIS: 0,015 mol/L, pH 6,2; anticuerpo
un estudio reciente se ha obtenido la siguiente correlación: anti-HbA1c (suero ovino) ≥0,5 mg/mL; estabilizadores, conservantes
Estandarización según la IFCC, (recalculada de acuerdo con (líquido)
la referencia bibliográfica 8) R2 Reactivo de polihaptenos
• Glucosa media (plasma) [mmol/L] = 1,73 × HbA1c (%) + 0,20 o bien Tampón MES: 0,025 mol/L; tampón TRIS: 0,015 mol/L, pH 6,2; polihapteno
• Glucosa media (plasma) [mg/dL] = 31,2 × HbA1c (%) + 3,51 HbA1c: ≥ 8 µg/mL; estabilizadores, conservantes (líquido)
Estandardización según el DCCT/NGSP8
• Glucosa media (plasma) [mmol/L] = 1,98 × HbA1c (%) - 4,29 o bien
• Glucosa media (plasma) [mg/dL] = 35,6 × HbA1c (%) - 77,3
Si el metabolismo del diabético no se controla adecuadamente, aumenta
el riesgo que sufra complicaciones tales como la nefropatía y la retinopatía
2007-11, V 4 Español 1/7 Sistemas cobas c
A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
Medidas de precaución y advertencias Material suministrado
Destinado al uso diagnóstico in vitro. Consultar la sección "Reactivos – Contenido y concentraciones"
Observe las medidas de precaución usuales para la manipulación de reactivos. en cuanto a los reactivos suministrados.
Ficha de datos de seguridad a la disposición del usuario
profesional que la solicite. Material requerido (no suministrado)
Elimine los residuos según las normas locales vigentes. Consulte la sección “Información de pedido”.
Agua destilada
Preparación de los reactivos Equipo de laboratorio usual
Los reactivos están listos para usar.
Ejecución del test
Conservación y estabilidad Para garantizar el desempeño óptimo del test, observe las instrucciones de
uso del analizador utilizado. Consulte el manual del operador apropiado
A1C-2 para obtener las instrucciones de ensayo específicas del analizador.
Sin abrir, a 2-8°C: ver la fecha de caducidad indicada en la Roche no se responsabiliza del desempeño de las aplicaciones no validadas
etiqueta del cobas c pack. por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su definición.
Abierto y refrigerado en el analizador: 4 semanas Aplicación de sangre completa para Hb (HB-W2) y HbA1c (A1-W2)
Definición del test Hb (HB-W2) para el analizador cobas c 311
Hemolyzing Reagent Tipo de medición 1 Punto
Sin abrir, a 2-8°C: Ver la fecha de caducidad indicada en Tiempo de reacción/ 10/23
la etiqueta del estuche. Puntos de medición
A temperaturas inferiores a 3°C, el reactivo puede enturbiarse. La turbidez Longitud de onda (sub/princ) 660/376 nm
no repercute en el funcionamiento del reactivo y es reversible a temperaturas Dirección de la reacción Incremento
mayores. Sin embargo, se recomienda atemperar el reactivo a temperatura Unidad g/dL
ambiente durante aproximadamente 10 minutos mezclándolo bien antes de
usar. Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)
Abierto y refrigerado en el analizador: 4 semanas R1 120 µL -
R3 24 µL -
Obtención y preparación de las muestras
Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
recoger y preparar las muestras. Muestra Diluyente
Sólo se han analizado y encontrado aptas las muestras aquí mencionadas. (reactivo
hemolizante)
Sangre venosa o capilar con anticoagulante.
Los únicos anticoagulantes aceptables son la heparina de litio, el Normal 5 µL 2 µL 180 µL
EDTA bi y tripotásico con fluoruro de potasio/Na2. Disminuido 5 µL 2 µL 180 µL
Aumentado 5 µL 2 µL 180 µL
El tipo de muestras al que se hace referencia fue analizado en una selección de
los tubos de recolección de muestras que se comercializaban en el momento
de efectuar el análisis, sin emplear la totalidad de los tubos existentes ni los Definición del test HbA1c (A1-W2) para el analizador cobas c 311
productos de todos los fabricantes. Los sistemas de recolección de muestras Tipo de medición 2 puntos finales
de diversos fabricantes pueden contener materiales diferentes que, en ciertos Tiempo de reacción/ 10/23–57
casos, pueden afectar los resultados analíticos. Si las muestras se procesan Puntos de medición
en tubos primarios, aténgase a las instrucciones del fabricante. Longitud de onda (sub/princ) 660/340 nm
Estabilidad:15 3 días a 15-25°C Dirección de la reacción Incremento
7 días a 2-8°C Unidad g/dL
6 meses a (-15) - (-25)°C Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)
R1 120 µL -
Congelar una sola vez. Mezclar bien la muestra antes del uso. -
R3 24 µL
Preparación de hemolizado para la aplicación de hemolizado
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
1. Dejar reposar la muestra de sangre y el reactivo hemolizante Hemolyzing
Reagent for Tina-quant HbA1c a temperatura ambiente antes de su uso. Muestra Diluyente
(reactivo
2. Mezclar la muestra con cuidado inmediatamente antes del pipeteo
hemolizante)
para asegurar la distribución homogénea de los eritrocitos.
Evitar la formación de espuma. Normal 5 µL 2 µL 180 µL
3. Diluir la muestra con el Hemolyzing Reagent for Tina-quant HbA1c Disminuido 5 µL 2 µL 180 µL
(Ref. 11488457) en la relación de 1:101 (1+100) tomando como Aumentado 5 µL 2 µL 180 µl
base uno de los esquemas de pipeteo siguientes.
Pipetear a tubos:
HbA1c Hemolyzing Reagent 500 µL 1.000 µL 2.000 µL
para Tina-quant HbA1c
Muestra (de paciente o de control) 5 µL 10 µL 20 µL
4. Mezclar en un agitador vibratorio o mezclando ligeramente.
5. El hemolizado puede emplearse una vez que la solución haya cambiado
de color de rojo a verde amarronado (aprox. 1-2 min).
Estabilidad del hemolizado:15 4 horas a 15-25°C
24 horas a 2-8°C
6 meses a (-15) - (-25°C)
Sistemas cobas c 2/7 2007-11, V 4 Español
04528123190V4

A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
Definición del test Hb (HB-W2) para el analizador cobas c 501 Se recomienda indicar los valores de HbA1c con un decimal, lo que
Tipo de medición 1 Punto permite introducirlos en el campo “valores teóricos”.
Tiempo de reacción/ 10/34 Aplicación para hemolizado, Hb (HB-H2 y HbA1c (A1–H2)
Puntos de medición Definición del test Hb (HB-H2) para el analizador cobas c 311
Longitud de onda (sub/princ) 660/376 nm Tipo de medición 1 Punto
Dirección de la reacción Incremento Tiempo de reacción/ 10/23
Unidad g/dL Puntos de ensayo
Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O) Longitud de onda (sub/princ) 660/376 nm
R1 120 µL - Dirección de la reacción Incremento
R3 24 µL - Unidad g/dL

Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)

R1 120 µL -
Muestra Diluyente
(reactivo R3 24 µL -
hemolizante) Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
Normal 5 µL 2 µL 180 µL Muestra Diluyente
Disminuido 5 µL 2 µL 180 µL Normal 5 µL - -
Aumentado 5 µL 2 µL 180 µL Disminuido 5 µL - -
Aumentado 5 µL - -
Definición del test HbA1c (A1-W2) para el analizador cobas c 501
Tipo de medición 2 puntos finales Definición del test HbA1c (A1-H2) para el analizador cobas c 311
Tiempo de reacción/ 10/34-70 Tipo de medición 2 puntos finales
Puntos de medición Tiempo de reacción/ 10/23–57
Longitud de onda (sub/princ) 660/340 nm Puntos de ensayo
Dirección de la reacción Incremento Longitud de onda (sub/princ) 660/340 nm
Unidad g/dL Dirección de la reacción Incremento
Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O) Unidad g/dL
R1 120 µL - Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)
R3 24 µL - R1 120 µL -
R3 24 µL -
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
Muestra Diluyente Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
(reactivo Muestra Diluyente
hemolizante) Normal 5 µL - -
Normal 5 µL 2 µL 180 µL Disminuido 5 µL - -
Disminuido 5 µL 2 µL 180 µL Aumentado 5 µL - -
Aumentado 5 µL 2 µL 180 µL
Definición del test Hb (HB-H2) para el analizador cobas c 501
Importante: Para optimizar la curva de calibración no lineal de HbA1, a Tipo de medición 1 Punto
cada valor de calibrador se añadió un valor de compensación constante de
Tiempo de reacción/ 10/34
0,6 g/dL, independiente del lote. Este valor ya está incluido en los valores
Puntos de ensayo
teóricos del calibrador HbA1c para el analizador cobas c y debe restarse del
resultado final. Introducir el factor de instrumento del test HbA1c absoluto Longitud de onda (sub/princ) 660/376 nm
(A1-W2) en los analizadores Roche cobas c como sigue: Dirección de la reacción Incremento
Calibración => pantalla Estado => factor del instrumento => pantalla Factor del Unidad g/dL
instrumento => HbA1c (A1-W2) => a=1,0; b = – 0,6 => actualizar => OK
Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)
Definición del cociente para el cálculo de HbA1c (%) R1 120 µL -
Protocolo 1 (según la IFCC): R3 24 µL -
Nombre de cociente abreviado RWI2 (890) Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra
Ecuación (A1-W2/HB-W2) × 100 Muestra Diluyente
Unidad % Normal 5 µL - -
Disminuido 5 µL - -
Protocolo 2 (según el DCCT/NGSP):
Aumentado 5 µL - -

Nombre de cociente abreviado RWD2

Ecuación (A1-W2/HB-W2) × 87,6 + 2,27

Unidad %
El protocolo 1 ya se ha implementado en la aplicación ACN 890. El HbA1c
porcentual según el protocolo 2 (DCCT/NGSP) se calcula manualmente
a partir de la ecuación indicada a continuación. Es posible modificar la
fórmula (ACN 890) en el nivel Administración/Edición.
El cociente de la HbA1c (%) se calcula automáticamente una vez
obtenidos los resultados de ambos tests.
2007-11, V 4 Español 3/7 Sistemas cobas c
A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
Definición del test HbA1c (A1-H2) para el analizador cobas c 501 Nota relativa a las aplicaciones para sangre completa y hemolizado
Tipo de medición 2 puntos finales Introducir el valor asignado al calibrador específico del lote y de la aplicación.
Tiempo de reacción/ 10/34-70 Emplear únicamente el calibrador C.f.a.s. HbA1c.
Puntos de ensayo El analizador debe disponer del reactivo cobas c Hemolyzing Reagent Gen.2
pack, 2 x 22,5 mL, Ref. 04528182 para poder efectuar la calibración.
Longitud de onda (sub/princ) 660/340 nm
Dirección de la reacción Incremento Control de calidad para las aplicaciones para sangre completa y
Unidad g/dL hemolizado
Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O) Para el control de la calidad, emplear los controles indicados en
R1 120 µL - la sección “Información de pedido”.
- Asimismo puede emplearse otro material de control apropiado.
R3 24 µL
Los intervalos y límites de control deben adaptarse a los requerimientos
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra particulares de cada laboratorio. Los valores obtenidos deben situarse dentro
Muestra Diluent de los límites establecidos. Cada laboratorio debería establecer medidas
Normal 5 µL - - correctivas a seguir en caso de que los valores se sitúen fuera de los límites.
Disminuido 5 µL - - Cálculo de la aplicación para sangre completa y hemolizado
Aumentado 5 µL - - Hb, HbA1c
Los sistemas Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la
Importante: Para optimizar la curva de calibración no lineal de HbA1, a concentración de analito de cada muestra.
cada valor de calibrador se añadió un valor de compensación constante de HbA1c (%)
0,6 g/dL, independiente del lote. Este valor ya está incluido en los valores Para calcular el porcentaje de HbA1c, consultar las secciones
teóricos del calibrador HbA1c para el analizador cobas c y debe restarse del Principio del test y Definición del cociente para el cálculo de
resultado final. Introducir el factor de instrumento del test HbA1c absoluto HbA1c (%) de la presente metódica.
(A1-H2) en los analizadores cobas c de Roche como sigue:
Calibración => pantalla Estado => factor del instrumento => pantalla Factor del Limitaciones - interferencias de la aplicación para sangre completa y
instrumento => HbA1c (A1-H2) => a=1,0; b = – 0,6 => actualizar => OK hemolizado13,14,18,19,20,21,22,23,24,25
1. Para el diagnóstico, los valores de HbA1c (%) deben emplearse
Definición del cociente para el cálculo de HbA1c (%)
conjuntamente con la información obtenida por otros procedimientos
Protocolo 1 (según la IFCC): diagnósticos y por evaluaciones clínicas.
Nombre de cociente abreviado RHI2 (860) 2. El test está concebido exclusivamente para la medición exacta y precisa
Ecuación (A1-H2/HB-H2) × 100 de la HbA1c (%). Por ello, no deben darse a conocer los resultados
Unidad % individualmente obtenidos para Hb total y HbA1c.
3. El test no está destinado al diagnóstico de la diabetes mellitus
Protocolo 2 (según el DCCT/NGSP): ni al seguimiento diario de la glucosa ni tampoco sustituye el
Nombre de cociente abreviado RHD2 autoanálisis diario de glucemia o glucosuria.
Ecuación (A1-H2/HB-H2) × 87,6 + 2,27 4. Principalmente, los resultados de HbA1c de pacientes con variantes
Unidad % de Hb deben interpretarse con cautela. Las hemoglobinas anormales
pueden influir en la vida media de los eritrocitos o en la tasa de
El protocolo 1 ya se ha implementado en la aplicación ACN 860. El HbA1c
glucosilación in vivo. De este modo, incluso resultados analíticamente
porcentual según el protocolo 2 (DCCT/NGSP) se calcula manualmente
correctos no son tan fiables para el control de la glucemia como los
a partir de la ecuación indicada a continuación. Es posible modificar la
valores de pacientes con una hemoglobina normal.23
fórmula (ACN 860) en el nivel Administración/Edición.
El cociente de la HbA1c (%) se calcula automáticamente una vez 5. Toda disminución de la vida media de los eritrocitos reducirá la exposición
obtenidos los resultados de ambos tests. de éstos a la glucosa disminuyéndose el nivel de HbA1c (%) aún cuando
Se recomienda indicar los valores de HbA1c con un decimal, lo que el nivel promedio de glucemia sea elevado en función del tiempo. La
permite introducirlos en el campo “valores teóricos”. reducción de la vida media de los eritrocitos puede deberse, entre otros,
a la anemia hemolítica u otras enfermedades hemolíticas, a células
Calibración de las aplicaciones para sangre completa y hemolizado falciformes de carácter homocigoto, al embarazo o a hemorragias
Hb crónicas o recientes de gran magnitud. En estas circunstancias se
Calibradores S1-S2: C.f.a.s. HbA1c recomienda interpretar los resultados del test HbA1c con cautela.
6. Este test no detecta la HbF glucosilada, ya que no contiene la cadena beta
Modo de calibración Lineal
glucosilada característica de la HbA1c. Pero el test Total Hb determina las
HbA1c HbF por lo que las muestras con altas concentraciones de HbF (>10%)
Calibradores S1-S6: C.f.a.s. HbA1c pueden producir resultados de HbA1c inferiores a los previstos.14,25
Criterio: Recuperación dentro de ± 10% del valor inicial con un nivel
Modo de calibración RCM
Intervalo de calibración Hb y HbA1c: se recomienda una calibración de decisión de 4,2% de HbA1c (IFCC).
completa Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 (concentración
- después de 29 días dentro de la estabilidad de bilirrubina conjugada y no conjugada: aprox. 1.000 µmol/L ó 60 mg/dL).
- después del cambio de lote Lipemia (Intralipid): Sin interferencia significativa hasta una concentración de
- y si lo fuera necesario según los triglicéridos de 500 mg/dL (cobas c 501) o resp. de 400 mg/dL (cobas c 311).
procedimientos de control de calidad. Glucemia: Sin interferencias significativas hasta una concentración de glucosa
de 55,5 mmol/L (1.000 mg/dL). No se requieren muestras recogidas en ayunas.
Siempre calibrar los tests Hb y HbA1c al mismo
tiempo. Desactive la calibración automática en Factores reumatoideos: Sin interferencias significativas hasta un
caso de control de calidad no exitosa. nivel de factor reumatoideo de 750 UI/mL.
Fármacos: En una serie de fármacos comunes testados no
Trazabilidad: Este método ha sido estandarizado frente al método de se encontraron interferencias.26
referencia aprobado de la IFCC para la medición de la HbA1c en sangre Otros: Los anticuerpos anti-HbA1c empleados en el presente estuche no
humana16,17 y puede transferirse a resultados que pueden rastrearse producen reacciones cruzadas con HbA0, HbA1a, HbA1b, hemoglobina
hasta el método DCCT/NGSP mediante cálculo. acetilada, albúmina glucosilada ni con HbA1c lábil.
Sistemas cobas c 4/7 2007-11, V 4 Español
04528123190V4

A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
Con fines diagnósticos, los resultados obtenidos con el test siempre Total VM DE CV
deben evaluarse junto a la anamnesis del paciente, los exámenes HbA1c (%) HbA1c (%) %
clínicos y los resultados de otros análisis. Conc. de control 1 6,0 0,12 1,9
Pasos de lavado adicionales: Se requieren ciclos de lavado especiales Conc. de control 2 10,5 0,21 2,0
en caso de combinar ciertos tests en los sistemas cobas c. Para más Muestra humana 3 5,6 0,07 1,3
detalles sobre las combinaciones de test que requieren pasos de lavado Muestra humana 4 11,8 0,20 1,7
especiales, sírvase consultar la más reciente versión de la metódica
NaOHD/SMS/Multiclean así como el manual del operador. Comparación de método
Cálculo de la aplicación para sangre completa y hemolizado Se han comparado los valores de HbA1c (%) en muestras de sangre
Hemoglobina: 4-35 g/dL humana obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 501 (y) con los
HbA1c: 0,3-2,5 g/dL obtenidos con el mismo reactivo en un analizador COBAS INTEGRA 800 (x)
Debido al factor del instrumento para HbA1c (b = - 0,6; véase las definiciones y en un analizador Roche/Hitachi MODULAR P (x).
de test para el analizador cobas c 311 y el cobas c 501), el límite técnico x = analizador COBAS INTEGRA 800, y = analizador cobas c 501
definido para la programación del analizador es de 0,9-3,1 g/dL lo que Cant. de muestras (n) = 109
corresponde a un intervalo de medición del 2,3-18,9% de HbA1c con una Passing/Bablok28 Regresión lineal
concentración típica de hemoglobina de 13,2 g/dL (valores IFCC; valores y = 0,9901x + 0,1097 y = 1,0033x + 0,0231
correspondientes para DCCT/NGSP a 4,3-18,9% de HbA1c). τ = 0,9578 r = 0,9962
Límite inferior de detección Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,0 y 12,6% (valores
Hemoglobina: 0,5 g/dL DCCT/NGSP).
HbA1c: 0,1 g/dL
Se puede calcular un límite de detección para la HbA1c porcentual en base a x = analizador Roche/Hitachi MODULAR P, y = analizador cobas c 501
una concentración dada de Hb. Suponiendo una concentración típica de Hb de Cant. de muestras (n) = 93
13,2 g/dL, el límite de detección inferior para HbA1c (%) es del 0,8% (valores Passing/Bablok28 Regresión lineal
según la IFCC; el valor correspondiente según DCCT/NGSP es del 2,9%).
y = 0,9837x + 0,1355 y = 0,9785x + 0,1967
El límite inferior de detección representa la concentración mínima medible de τ = 0,9396 r = 0,9951
analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como la concentración
Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,1 y 13,1% (valores
situada a tres desviaciones estándar por encima del estándar más bajo
DCCT/NGSP).
(estándar 1 + 3 DE, precisión intraensayo, n = 21).
Valores teóricos de la aplicación para sangre completa y hemolizado Adicionalmente se realizó una comparación con un método HPLC
Protocolo 1 (según la IFCC): 2,9-4,2% de HbA1c27 comercial. La estandarización del método HPLC fue conforme al DCCT
Protocolo 2 (según el DCCT/NGSP): 4,8-5,9% de HbA1c27 (Diabetes Control and Complications Trial).3,4
Los niveles de HbA1c superiores al intervalo de referencia establecido Método HPLC
indican la existencia de una hiperglucemia durante un lapso mínimo de Cant. de muestras (n) = 40
los 2 a 3 meses precedentes. Si la diabetes no está sujeta a un control Passing/Bablok28 Regresión lineal
adecuado, los niveles de HbA1c pueden alcanzar e incluso superar y = 0,9349x + 0,4499 y = 0,9236x + 0,5666
el 20%. Se recomienda la intervención terapéutica a partir de niveles τ = 0,9505 r = 0,9929
del 8%. Los diabéticos con niveles de HbA1c inferiores al 7% cumplen los
objetivos fijados por la Asociación Americana de Diabetes.18 Los niveles Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,3 y 11,9 % (valores
de HbA1c inferiores al intervalo de referencia establecido pueden indicar DCCT/NGSP).
un episodio reciente de hipoglucemina, la presencia de variantes de Hb
Características del test de la aplicación para hemolizado
o bien la reducción de la vida media de los eritrocitos.
A continuación, se indican los datos reresentativos de desempeño
Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia
obtenidos en los analizadores. Los resultados de cada laboratorio
pueden aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario,
en particular pueden diferir de estos valores.
establecer sus propios valores.
Características de test de la aplicación para sangre completa Precisión
A continuación, se indican los datos representativos de desempeño La reproducibilidad ha sido determinada empleando muestras
obtenidos en los analizadores. Los resultados de cada laboratorio humanas y controles según un protocolo interno (intraensayo
en particular pueden diferir de estos valores. n = 21, total n = 63). Se obtuvieron los siguientes resultados (datos
basados en valores del DCCT/NGSP):
Precisión
La reproducibilidad ha sido determinada empleando muestras En la serie VM DE CV
humanas y controles según un protocolo interno (intraensayo HbA1c (%) HbA1c (%) %
n = 21, total n = 63). Se obtuvieron los siguientes resultados (datos Conc. de control 1 5,9 0,13 2,2
basados en valores del DCCT/NGSP): Conc. de control 2 10,4 0,11 1,0
En la serie VM DE CV Muestra humana 1 5,2 0,08 1,5
HbA1c (%) HbA1c (%) % Muestra humana 2 8,8 0,07 0,8
Conc. de control 1 5,9 0,09 1,5
Conc. de control 2 10,5 0,11 1,1
Muestra humana 1 5,2 0,04 0,8
Muestra humana 2 9,0 0,11 1,2

2007-11, V 4 Español 5/7 Sistemas cobas c

A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2
Total VM DE CV 5. UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) group. Intensive blood
HbA1c (%) HbA1c (%) % glucose control with sulfonylureas or insulin compared with conventional
Conc, de control 1 6,0 0,12 2,0 treatment and risk of complications in patients with type 2 diabetes
Conc. de control 2 10,1 0,17 1,6 (UKPDS 33). Lancet 1998;352:837-853.
Muestra humana 3 5,6 0,09 1,6 6. Flückiger R, Mortensen HB. Review: glycated haemoglobins.
Muestra humana 4 11,7 0,18 1,5 J Chromatogr 1988;429:279-292.
7. Goldstein DE, Little RR, Wiedmeyer HM, England JD, McKenzie
Comparación de método EM. Glycated hemoglobin: methodologies and clinical applications.
Se han comparado los valores de HbA1c (%) en muestras de sangre Clin Chem 1986;32:B64-B70.
humana obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 501 (y) con los 8. Rohlfing CL, Wiedmeyer HM, Little RR, England JD, Tennill A,
obtenidos con el mismo reactivo en un analizador COBAS INTEGRA 800 (x) Goldstein DE. Defining the relationship between plasma glucose
y en un analizador Roche/Hitachi MODULAR P (x). and HbA1c. Diabetes Care 2002,25:275-278.
9. Bunn HF, Gabbay KH, Gallop PM. The glycosylation of hemoglobin:
x = analizador COBAS INTEGRA 800, y = analizador cobas c 501
relevance to diabetes mellitus. Science 1978; 200:21-27.
Cant. de muestras (n) = 109
10. Zander R, Lang W, Wolf HU. Alkaline haematin D-575, a new tool for the
Passing/Bablok28 Regresión lineal determination of haemoglobin as an alternative to the cyanhaemiglobin
y = 1,0322 x - 0,1447 y = 1,0268 x - 0,1082 method. I. Description of the method. Clin Chim Acta 1984;136:83-93.
τ = 0,9619 r = 0,9979 11. Wolf HU, Lang W, Zander R. Alkaline haematin D-575, a new
Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,2 y 13,1 % (valores tool for the determination of haemoglobin as an alternative to the
DCCT/NGSP). cyanhaemiglobin method. II. Standardization of the method using
pure chlorohaemin. Clin Chim Acta 1984;136:95-104.
x = analizador Roche/Hitachi MODULAR P, y = analizador cobas c 501 12. Little RR, Wiedmeyer HM, England JD, Wilke AL, Rohlfing CL,
Cant. de muestras (n) = 94 Wians FH, et al. Interlaboratory standardization of measurements
of glycohemoglobins. Clin Chem 1992;38:2472-2478.
Passing/Bablok28 Regresión lineal 13. Frank EL, Moulton L, Little RR, Wiedmeyer HM, Rohlfing C, Roberts
y = 1,0000 x + 0,0740 y = 0,9996 x + 0,1047 WL. Effects of hemoglobin C and S traits on seven glycated hemoglobin
τ = 0,9504 r = 0,9968 methods. Clin Chem 2000;46(6):864-867.
Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,1 y 13,1 % (valores 14. Chang J, Hoke C, Ettinger B, Penerian G. Evaluation and interference
DCCT/NGSP). study of hemoglobin A1c measured by turbidimetric inhibition
immunoassay. Am J Clin Pathol 1998;109:274-278.
Adicionalmente se realizó una comparación con un método HPLC 15. Documentación de Roche Diagnostics.
comercial. La estandarización del método HPLC fue conforme al DCCT 16. Kobold U, Jeppsson JO, Duelffer T, Finke A, Hoelzel W, Miedema
(Diabetes Control and Complications Trial).3,4 K. Candidate reference methods for hemoglobin A1c based on
Método HPLC peptide mapping. Clin Chem 1997;43:1944-1951.
Cant. de muestras (n) = 40 17. Jeppsson JO, Kobold U, Finke A, Hoelzel W, Hoshino T, Miedema
Passing/Bablok28 Regresión lineal K, Mosca A, Mauri P, Paroni R, Thienpont L, Umemoto M, Weykamp
y = 0,9490x + 0,4066 y = 0,9641x + 0,3276 C. Approved IFCC reference method for the measurement of HbA1c
in human blood. Clin Chem Lab Med 2002;40:78-89.
τ = 0,9544 r = 0,9936
18. Martina WV, Martijn EG, van der Molen M, Schermer JG,
Las concentraciones de las muestras se situaron entre 5,3 y 11,9 % (valores Muskiet FAJ. β-N-terminal glycohemoglobins in subjects with
DCCT/NGSP). common hemoglobinopathies: relation with fructosamine and mean
erythrocyte age. Clin Chem 1993;39:2259-2265.
Especificidad analítica de la aplicación para sangre completa y 19. Weykamp CW, Penders TJ, Muskiet FAJ, van der Slik W. Influence
hemolizado of hemoglobin variants and derivatives on glycohemoglobin
determinations, as investigated by 102 laboratories using 16
Derivados de la Hb La HbA1c inestable (pre-HbA1c), la Hb acetilada y la
methods. Clin Chem 1993;39:1717-1723.
Hb carbamilada no afectan el resultado del ensayo.
20. American Diabetes Association. Standards of Medical Care for patients
with diabetes mellitus. Diabetes Care [Suppl] 18/1, 1995:8-15.
Variantes de la Hb Las muestras con altas concentraciones de HbF
21. Sacks BW, Bruns DE, Goldstein DE, Maclaren NK, McDonald JM, Parrott M.
(>10%) pueden producir resultados de HbA1c
Guidelines and recommendations for laboratory analysis in the diagnosis
inferiores a los previstos.
Atención and management of diabetes mellitus. Clin Chem 2002;48:436-472.
La IFCC y el NGSP han pedido a los fabricantes que no cambien su forma de 22. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences
indicar los valores de HbA1c hasta que el grupo de trabajo ADA/EASD/IDF in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-474.
sobre el ensayo HbA1c haya tomado una decisión.29 Por esta razón, en 23. Miedema K. Influence of hemoglobin variants on the determination
la mayoría de los paises deben indicarse los valores establecidos por el of glycated hemoglobin. Klin Lab 1993;39:1029-1032.
DCCT/NGSP. Si tiene alguna duda sobre las medidas a adoptar en su 24. Niederau CM et al. Interference of non glucose-adducts on the
laboratorio, sírvase contactar con las autoridades locales. determination of glycated hemoglobins. Klin Lab 1993;39:1015-1023.
25. Rohlfing C, Connolly S, England J, Little R. Effect of elevated fetal
Referencias bibliográficas hemoglobin on HbA1c measurements: four common assay methods
1. Goldstein DE, Little RR, Lorenz RA, Malone JI, Nathan D, Peterson CM. compared to the IFCC reference method. Clin Chem 2006;52 Suppl 6:A108.
Tests of glycemia in diabetes. Diabetes Care 1995;18:896-909. 26. Report on the Symposium “Drug effects in clinical chemistry methods”,
2. Goldstein DE, Little RR. More than you ever wanted to know (but need to Breuer J, Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
know) about glycohemoglobin testing. Diabetes Care 1994;17:938-939. 27. Junge,W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference
3. The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. levels in adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Presentación gráfica
The effect of intensive treatment of diabetes on the development en EUROMEDLAB, Barcelona, 2003.
and progression of long-term complications in insulin-dependent 28. Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method
diabetes mellitus. N Engl J Med 1993;329:977-986. Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.
4. Santiago JV. Lessons from the diabetes control and complications 29. Report of the ADA/EASD/IDF Working Group of the HbA1c Assay.
trial. Diabetes 1993;42:1549-1554. London, UK. January 20, 2004, EASD News Section 5/2004.

Sistemas cobas c 6/7 2007-11, V 4 Español

04528123190V4

A1C-2
Tina-quant Hemoglobin A1c Gen.2

La barra del margen indica cambios o suplementos significativos.

©2007 Roche Diagnostics.

Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim

2007-11, V 4 Español 7/7 Sistemas cobas c