UNIVERSIDAD AUTÓNOMA BENITO JUÁREZ DE OAXACA.

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

REPORTE DE PRÁCTICA 1.

DOSIFICACIÓN DE ALCOHOL ETÍLICO EN FLUIDOS BIOLÓGICOS.

INTEGRANTES:
CID SALGADO CESAR
DÍAZ MATADAMAS MAURICIO DEMIAN
GARCÍA SILVA KARLA XIMENA
GIJÓN GARCÍA MAGALI

GRADO: 6° GRUPO: “A”

INTRODUCCIÓN
El consumo excesivo o inapropiado de alcohol es un problema social común. Es un
factor que contribuye a una gran cantidad de accidentes, lesiones y condiciones
médicas. La concentración de alcohol en la sangre es variable dependiendo el
metabolismo del individuo. Los parámetros específicos del individuo, como el
tamaño físico, el peso, el nivel de actividad, los hábitos alimenticios y la tolerancia
al alcohol, todo esto afecta el nivel de acetilación. La determinación del alcohol
etílico en la orina, la sangre y la saliva se utiliza comúnmente para medir el consumo
legal, la intoxicación por alcohol. La prueba mostrada a continuación está basada
en la determinación de alcohol etílico en orina (Uso Profesional, s/f).
OBJETIVOS

• Determinar la concentración de alcohol etílico en una muestra de orina y una

solución estándar.
• Ampliar el conocimiento en cuanto al manejo del espectrofotómetro.
FUNDAMENTO
En esta práctica se realizara una determinación de alcohol etílico por la técnica de
micro fusión, la cual consiste en tener un sistema cerrado (Cámara de Conway), en
la cual el etanol es separado mediante la acción de calor y un agente liberador, para
ser absorbido, en otro compartimento de la cámara de Conway, donde el etanol
reacciona con una solución ácida de dicromato de potasio (reactivo de Anstie)
mediante un proceso de óxido-reducción, para dar una serie de colores que van del
amarillo , dependiendo de la cantidad del etanol que se encuentre en la muestra. La
absorbancia del compuesto formado puede ser utilizada para realizar una
determinación semicuantitativa en un espectrofotómetro de luz ultravioleta. La
reacción de óxido reducción del etanol con el dicromato de potasio (Naranja), dará
como producto final un compuesto color verde.
3 C2H5OH + 2 K2Cr2O7 + 8 H2SO4 -------- 3 CH3COOH + 2Cr (SO4)3 + 2 K2SO4 + 11 H2O

Las muestras que se pueden analizar con este método son: sangre entera, plasma,
suero, orina, homogeneizado de tejido. La interpretación de la determinación de
etanol por esta técnica, debe considerarse como una prueba presuntiva, debido a
su baja especificidad, la presencia de acetaldehído o alcohol isopropílico da lugar a
reacciones similares con formación de ácido acético y acetona respectivamente,
con la consiguiente reducción del dicromato de potasio.
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
1. En un recipiente “B” colocar 2.0 mL de la solución de dicromato de potasio ácido
medidos volumétricamente.

2. En un recipiente “A” colocar 1.0 mL de la muestra problema y 1.0 mL de la

solución saturada de carbonato de potasio, mezclar suavemente.

3. Repetir el procedimiento, utilizando como muestra el estándar de 150 mg en 100

mililitros de agua.

4. Se tapan las cámaras de con-way y deja a

temperatura ambiente por una hora.

Imagen 1. Caramas de Con-way con la

muestra y el estándar expuestas al sol.

5. Una vez transcurrido el tiempo indicado, se pasa el contenido del

recipiente “B” a un tubo de ensayo y agregar 4 mL de agua destilada
(mezclar). La parte de la celda “A” se desecha.
Imagen 2. Pipeteo
de agua destilada

6. Leer la densidad óptica a 450 nm, utilizando como blanco

una solución consistente de 1 mL de dicromato de potasio
ácido diluida con 4 mL de agua destilada

7. Se obtiene las absorbancias del blanco, del estándar y del

Imagen 3. Tubo de ensayo
problema (muestra). con la muestra a analizar.
DIAGRAMA
Práctica 1

Dosificación de alcohol Cámara de Con-Way

etílico en fluidos biológicos
Materiales:
-2 cámaras de Con-way
-2 cuadrados de vidrio
-Klennex En un recipiente “B” En un recipiente “A”
-2 pipetas graduadas de 5 colocar 2.0 mL de la colocar 1.0 mL de la
mL o Pasteur
solución de dicromato de muestra problema y 1.0
-2 tubos de ensaye
potasio ácido medidos mL de la solución saturada
volumétricamente de carbonato de potasio
Reactivos:
-Dicromato de potasio ácido Repetir el procedimiento, Mezclar
-Solución satura de utilizando como muestra el suavemente
carbonato de potasio estándar de 150 mg en 100
-Agua destilada
mililitros de agua.
-Muestra de orina

Material de apoyo: Se tapan las cámaras de con-way y

se deja a temperatura ambiente
-Espectrofotómetro por una hora.
-Celdas

Una vez transcurrido el tiempo

indicado, se pasa el contenido del
recipiente “B” a un tubo de ensayo y
agregar 4 mL de agua destilada. La
parte de la celda “A” se desecha.

Leer la densidad óptica a 450 nm, utilizando

como blanco una solución consistente de 2
Se calcula la
mL de dicromato de potasio ácido diluida
cantidad de
con 4 mL de agua destilada
alcohol etílico en
sangre u orina

Se obtiene las absorbancias del blanco, del

estándar y del problema (muestra).
CÁLCULOS Y REPORTE DE RESULTADOS
1. Cálculos para la preparación de la solución estándar de alcohol etílico de 150
mg en 100 mL a partir de la solución madre que tiene densidad de 0.8 g/L

Si en 1 L existen 0.8 g de alcohol, entonces:

0.8 𝑔𝑔 − 1 𝐿𝐿

0.15 𝑔𝑔 − 𝑋𝑋 𝐿𝐿

0.15 𝑔𝑔 𝑥𝑥 1 𝐿𝐿 1000 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑋𝑋 𝐿𝐿 = = 0.1875 𝐿𝐿 = 𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏. 𝟓𝟓 𝒎𝒎𝒎𝒎
0.8 𝑔𝑔 1𝐿𝐿

Son 187.5 mL de la solución madre para poder tener la solución estándar que
contenga 150 mg de alcohol etílico.

2. Resultados de las absorbancias de las muestras, el estándar y el control

negativo.

Muestra Absorbancia
Control Negativo 1.04
Estándar 0.664
Equipo 1 0.903
Equipo 2 (Nuestro 0.919
equipo)
Equipo 3 0.955
Equipo 4 0.918

• Cálculos de la concentración de alcohol en las muestras de la orina.

Equipo 2 (Nuestro equipo)
La muestra problema tiene una absorbancia de 0.919, el estándar de 0.0664 y el
control negativo de 1.04 entonces:
𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵 − 𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸á𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛 = 𝐴𝐴
𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵 − 𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 = 𝐶𝐶
Entonces:
1.04 − 0.664 = 𝟎𝟎. 𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑 (𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸á𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛)
1.04 − 0.919 = 𝟎𝟎. 𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏 (𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝)

Calculando tenemos:
0.376 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 150 𝑚𝑚𝑚𝑚/100 𝑚𝑚𝑚𝑚
0.121 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

Como resultado tenemos:

1.121 𝑥𝑥 150 𝑚𝑚𝑚𝑚
𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜 = = 𝟒𝟒𝟒𝟒. 𝟐𝟐𝟐𝟐 𝒎𝒎𝒎𝒎
0.376

Nuestra muestra problema contiene 48.27 mg de alcohol,

tiene una concentración menor de alcohol que la solución
estándar (100 mg), eso explica el por qué se observa de
una coloración amarilla más intensa que la solución
estándar, esto debido a que como tiene menos alcohol la
muestra no se oxidó demasiado como la solución
estándar la cual tiene una coloración menos intensa por
la oxidación de más alcohol con el dicromato de potasio.
Junto con las demás muestras de los equipos se
obtuvieron:

• Equipo 1

Su muestra tuvo una absorbancia de 0.903 entonces:

1.04 − 0.664 = 0.376

1.04 − 0.903 = 0.137

Entonces: 0.376 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

0.137 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

 150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑥𝑥 0.137
𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜 = = 𝟓𝟓𝟓𝟓. 𝟔𝟔𝟔𝟔 𝒎𝒎𝒎𝒎 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂
0.376

• Equipo 3

Su muestra tuvo una absorbancia de 0.955

1.04 − 0.664 = 0.376

1.04 − 0.955 = 0.085

Entonces:

0.376 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

0.085 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑥𝑥 0.085

𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜 = = 𝟑𝟑𝟑𝟑. 𝟗𝟗 𝒎𝒎𝒎𝒎 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂
0.376

• Equipo 4

Su muestra tuvo una absorbancia de 0.918

1.04 − 0.664 = 0.376

1.04 − 0.918 = 0.122

Entonces:

0.376 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

0.122 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 = 𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜

150 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑥𝑥 0.122

𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑎𝑎𝑙𝑙𝑙𝑙𝑙𝑙ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜 = = 𝟒𝟒𝟒𝟒. 𝟔𝟔𝟔𝟔 𝒎𝒎𝒎𝒎 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂
0.376
Es así que como resultado final de todos los equipos se puede resumir en:
Muestra Absorbancia Cantidad de alcohol en
la muestra
Equipo 1 0.903 54.65 mg
Equipo 2 0.919 48.27 mg
Equipo 3 0.955 33.9 mg
Equipo 4 0.918 48.67 mg

La muestra problema del equipo 1 (58.65 mg de alcohol) fue la que tuvo mayor
contenido de alcohol en orina que la de los demás equipos. A simple viste se puede
observar que fue la muestra que tuvo una menor absorbancia, entonces la muestra
es la de color amarillo menos intenso en comparación con las demás muestras,
debido a su mayor contenido en alcohol y por ende mayor oxidación.

CONCLUSION
En esta práctica cuantificamos la concentración de etanol en de una muestra de
orina y también la del estándar de alcohol etílico usando un método de
espectroscopia. Después de que la muestra y el estándar hicieran reacción
mediante el calor del sol se preparó 2 disoluciones con agua destilada el estándar
de concentración de 150mg y otra con la muestra de orina, a cada solución se le
tomo un espectro para obtener la absorbancia de las soluciones para poder obtener
la concentración de nuestra muestra, para poder comparar los resultados con los
demás equipos. En conclusión realizar esta práctica nos ayudó a tener un más
conocimientos en espectroscopia y a manejar un espectrofotómetro y desarrollando
el método de dosificación de alcohol en la orina.
BIBLIOGRAFÍAS

Uso Profesional, P. (s/f). Bio-Alcohol en orina. Grupomexlab.com. Recuperado el 6

de abril de 2022, de https://grupomexlab.com/wp-
content/uploads/2020/09/2001081-Alcohol-en-orina.pdf.

Leda Giannuzzi, L (2006) Manual de Técnicas Analíticas en el Laboratorio de

Toxicología y Química Forense, Buenos Aires, Editorial Praia, 2006.

Cedillo Ochoa, E (2010) ESTUDIO COMPARATIVO ENTRE MUESTRAS DE

SANGRE Y ORINA PARA DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE
ALCOHOL. Recuperado el 05 de Abril de 2022 de:
https://www.repositoriodigital.ipn.mx/bitstream/123456789/9021/1/tesis%20ERIKA.
pdf