Teoria Leishmania Sem 4 Parasitologia

LEISHMANIASIS
Mg. PERCY E. ASMAT MARRUFO

PARASITOLOGÍA MÉDICA
UPAO
LEISHMANIASIS
 ZOONOSIS que desencadena un ESPECTRO DE ENFERMEDADES y es causadas por un grupo

heterogéneo de protozoos del genero Leishmania
 Genera DIVERSAS Y VARIADAS MANIFESTACIONES CLÍNICAS, caracterizadas por lesiones
cutáneas, mucosas o viscerales según la especie y la respuesta inmune del huésped
 Son de EVOLUCIÓN crónicas, de patogenicidad baja y morbilidad relativa
 Transmitidas por la picadura de insectos hematófagos ( VECTORES)
PARASITOLOGÍA HUMANA. Werner Louis Apt Baruch. 2013. Mc Graw Hill Interamericana Editores. México D,
VECTORES
Especies de dipteros de la familia Phlebotomodiae distribuidos en 5 generos:
Phlebotomus y Sergentomyia en el VIEJO MUNDO
Lutzomya, Brumptomyia y Warileya en el NUEVO MUNDO.
De 88 especies, estos son los vectores potenciales: Colombia más de 133

especies, en Ecuador 60, en Perú 99 y en Brasil 192
o Son insectos dípteros
o Miden aprox. entre 2 mm y 5 mm de longitud
o Tienen el cuerpo cubierto por pelos
o En reposo las alas las mantienen en posición erecta
o Las patas y el aparato bucal son relativamente largos
VECTORES
• Requieren nichos ecológicos con un alto grado de humedad atmosférica y T° un
poco más fresca que el medio ambiente que los rodea; generalmente son lugares
en regiones por debajo de los 1.700 msnm
• -Se desplazan unos 200 ó 300 m

• -Vida 1/2 corta, entre 20 y 30 días,
tiempo suficiente para que el CICLO
parásito se reproduzca. 33-86
dias
• -A los 7 días de infectarse por
primera vez, ya es infectante
• -La hembra coloca 70 huevos/dia
Suelo rico en materia orgánica( hojarasca o

las basuras) con buena humedad
LEISHMANIA
-EPIDEMIOLOGÍA-
• Esta extendida en:
-En 88 países; 72 en vías de desarrollo.
-Zonas tropicales, subtropicales y templadas.
-90% de LV se encuentra en: Bangladesh, India, Negal,
Sudan y Brasil.
• Se estima que:
-Hay 12 millones de personas que sufren leishmaniasis.
-Se presentan cada año 500 000 casos nuevos de LV y 1-
1,5 millones de LC.
-Hay 2,4 millones de años de vida perdidos ajustados por
discapacidad, secundario a leishmaniasis.
Mandell, Douglas, and Bennett’s Principies and Practice of lnfectious Diseases. 2016 Elsevier Espana, S.L.U.
EPIDEMIOLOGIA
La distribución y la epidemiologia de la
enfermedad esta relacionadas con
diferentes características:
• Ecologicas
• Climatologicas
• Socioeconomicas
Las que condicionan diversos
comportamientos de vectores, asi
como de los hospederos mamiferos
y humanos Dermatología Peruana 2004; vol 14: No 86 2
VECTORES DE LEISHMANIA SPP
-EN PERÚ-
ESPECIES DE LEISHMANIA EN VECTORES DE LEISHMANIA EN PERÚ:

PERÚ :
• Lutzomyia peruensis • En los ANDES predomina L.
• L. (V.) peruviana
• Lutzomyia ayacuchensis (V.) peruviana
• L. (V.) lainsoni • En la AMAZONÍA la mayoría
• Lutzomyia verrucarum de los casos son causados por
• L. (L.) amazonensis L. (V.) braziliensis,
• Lutzomyia tejadai Hirotomo Kato, Abraham G. Cáceres, et al. (2010). Use of FTA Cards for
Direct Sampling of Patients Lesions in the Ecological study of Cutaneous
• L. (V.) guyanensis Leishmaniasis. Journal of Clinical Microbiology; 48(10):3661-3665
• Lutzomyia pescei
• L. (V.) braziliensis
Diagnostico y tratamiento de la Leishmaniosis en el Perú. Norma técnica MINSA. Perú 2005.

DISTRIBUCION
LEIHSMANIASIS CUTANEA AMERICANA
CICLO BIOLOGICO
• Canis familiaris
• Didelphys albiventis
(zarigüeya)
• Rattus rattus)
• Choloepus didactylus
(Oso Perezoso )
• Tamanduá tetradáctila (
Oso hormiguero)
• Marsupiales
• Homo sapiens
RESERVORIOS: mamíferos silvestres y/o domésticos y

en algunas ocasiones el humano
LEISHMANIA
-TRANSMISIÓN-
TAMBIÉN SE PUEDE TRANSMITIR
TRANSMITE LEISHMANIA: POR:
• Hembra de mosquito • Transfusiones sanguíneas.
flebótomo (mosca de arena). • Compartir agujas para consumo
• Lutzomyia en América y de sustancias intravenosas.
Phlebotomus en otras partes
del mundo. • Exposición laboral.
• Flebótomo se cría en: grietas de • Transmisión congénita .
paredes de viviendas, basura, • Transmisión sexual.
escombros, o madrigueras de
roedores.
• Reservorios principales son:
perros, roedores o personas.
LEISHMANIA spp-
GENERALIDADES-
• Parásito dimórfico. Protozoo • Especies de Viannia: crecen en
diploide. intestino posterior de flebotomo
• Reino: Protista. Subreino: Protozoa. antes de migrar a intestino medio y
Orden: Kinetoplastida. Familia: anterior (peripilaria). Centroamerica
Trypanosomatidae. y Sudamérica.
• Genero: Leishmania. Subgéneros : • Especies de Leishmania: crecen en
Viannia y Leishmania. intestino medio (suprapilaria). Todo
el mundo.
LEISHMANIA SPP
-MORFOLOGÍA-
1. AMASTIGOTE
• Mide 2-5um diámetro.
• Forma redondeada u ovoide.
• Núcleo redondo.
• Cinetoplasto: en forma de
bastón y sin flagelo libre.
Estructura mitocondrial
especializada, contiene cantidad
considerable de ADN
extranuclear
• Forma intracelular, obligada
dentro de macrófagos y otras
células de sistema
reticuloendotelial de huésped
vertebrado.
Parasitología médica. Nueva edición. Antonio Atias.
LEISHMANIA SPP
-MORFOLOGÍA-
2. PROMASTIGOTE
• Mide 14-20um largo y 2-4um ancho.
• Móvil, largo y flagelado.
• Se encuentra en: Tubo digestivo de
vector invertebrado y cultivos in vitro.
Parasitología médica. Nueva edición. Antonio Atias.

LEISHMANIA
-CICLO VITAL- 3 Dermis
FASE INFECCIOSA 2
A piel de
huésped por 4
picadura de
hembra.
Amastigotes intracelulares
Evoluciona a través de etapas intermedias flageladas para convertirse en

PROMASTIGOTES METACÍCLICOS INFECCIOSOS.
6
Amastigotes se
diseminan a través de
linfáticos regionales y
del sistema vascular.
FASE DIAGNOSTICA 5
Amastigotes dentro de fagolisosomas se multiplican por división
binaria simple hasta romperlas e invadir otras células
reticuloendoteliales. Amastigotes liberados pasan a otros fagocitos
mononucleares.
FACTORES DEL HUESPED
• Mecanismos RESPUESTA INMUNE INNATA
• La localización intracelular de los amastigotes determina que los
Acs. sean ineficaces para el control de la enfermedad
• Procesamiento de las partículas antigénicas son presentadas al SI del
hospedero y estimulan la respuesta inmune especifica.
• RESPUESTA INMUNE CELULAR adecuada, balanceada y modulada, se
refleja en una tendencia a la cura espontanea o en una buena respuesta al
tratamiento.
CURA ESPONTANEA, HASTA LAS FORMAS:

AUTOLIMITADAS O A LAS PROGRESIVAS
FACTORES DEL PARASITO
• La morfología de las diferentes especies es muy similar, pero genéticamente tienen un
alto nivel de polimorfismo( isoenzimas, comportamiento biológico en el intestino del
vector)
• Promueve su fagocitosis, secretando sustancias quimiotácticas, y favoreciendo la
instauración de un proceso inflamatorio.
• Activan el complemento favoreciendo la fagocitosis por macrofagos en cuyo interior se
multiplican
• CISTEÍN PROTEASAS con actividades proteoliticas
• METALOPROTEINASAS (leishmanolisina dependiente de zinc) , glucoproteina unida y
abunda en la membrana de promastigotes a traves de GPI. En menor cantidad, también se
encuentra una proteina similar que actua a pH acido en amastigotes. Degradar
componentes de la matriz extracellular
• Destoxifica los radicales oxidantes y degrada las proteasas lisosomicas de los macrófagos,
estimula preferentemente la produccion de IL-10
FACTORES DEL PARASITO
• METACICLOGENESIS : asociado a la expresión de lipofosfoglicano (LPG) y
una proteasa de superficie, la gp63.
• LPG:
Incremento del grosor del glicocálix del LPG, bloqueando la inserción del CAM C5b-9
sobre la membrana celular del promastigote,
Inhibe la proteína cinasa C la cual está relacionada con la respuesta oxidativa del
macrófago
Inhibe la fusión fagosoma-endosoma y elimina eficientemente metabolitos tóxicos (
anión superóxido y radicales OH)
• GLICOPROTEÍNA gp63:
Transforma la fracción C3b del complemento a la forma inactiva C3bi
Degradación inespecífica de enzimas lisosómicas
La activación de los macrófagos puede promover la liberación de factores inflamatorios
(IFN-Ɣ) Con lo que se favorece la extravasación de células y fluidos desde los vasos
sanguíneos hasta el sitio de infección y se propicia su acumulación en el tejido, lo que
ocasiona edema e induración local: M-P-N-ULCERA
https://iris.paho.org/bitstream/handle/10665.2/50524/9789275320631_spa.pdf?sequence=1&isAllowed=y
ESPECTRO CLINICO DE LA ENFERMEDAD
PAUCIparasitario
MULTIparasitario
INTERACCION
HOSPEDERO-PARASITO
huesped
inmunidad
Cuando el SI es incapaz de generar una respuesta eficaz, la infección no se controla y la enfermedad tiende a evolucionar
a los extremos del espectro, con manifestaciones de mayor gravedad
1.LEISHMANIOSIS VISCERAL
-ESPECTRO CLÍNICO:
-CAUSA MAS • INFECCIÓN
FRECUENTE: ASINTOMÁTICA: Silente o
• L. donovani. en fase de
autorresolución.
-En subcontinente
indio, en etapas • LV CLÁSICA: (Kala-azar)
finales: con pentada característica:
Fiebre prolongada
• Kala-azar
Perdida de peso
• Fiebre Dum Dum
Hepatoesplenomegalia
• Fiebre Assam
Pancitopenia
• Esplenomegalia
Hipergammaglobulinem
infantil (L.
infantum). ia
1.LEISHMANIOSIS VISCERAL
-MANIFESTACIONES CLÍNICAS-
KALA-AZAR
• Periodo de incubación: 2-8 meses.
•PRESENTACIÓN AGUDA:
• EVOLUCIÓN SUBAGUDA O CRÓNICA: -Inicio súbito con fiebre alta y escalofríos.
-Fiebre insidiosa -Pueden mostrar esplenomegalia masiva,
-Debilidad hepatomegalia y linfadenopatia (Sudan).
-Perdida de apetito • FASE AVANZADA:
-Disminución de peso corporal -Edema periférico
-Epistaxis
-Retraso del crecimiento
-Hemorragia gingival
-Aumento de perímetro abdominal a
-Petequias y equimosis en miembros
consecuencia de hepatoesplenomegalia.
-Caquexia.
-HALLAZGOS ANALÍTICOS: anemia, leucopenia,
trombocitopenia, hipergammaglobulinemia y VSG
elevada.
2.LEISHMANIOSIS CUTÁNEA
• LC DE VIEJO MUNDO:
-Ulcera oriental
-Por: L. major, L. tropica o L. aethiopica.
• LC DE NUEVO MUNDO:
-Por: L. braziliensis, L. mexicana, L.
panamensis/L. guyanensis.
- Endémica en Latinoamérica
• ESPECTRO DE ENFERMEDAD:
-Aparición de ulceras cutáneas únicas o
múltiples, localizadas o difusas.
Mandell, Douglas, and Bennett’s Principies and Practice of lnfectious

Diseases. 2016 Elsevier Espana, S.L.U.
-MANIFESTACIONES CLÍNICAS-
• PERIODO DE INCUBACIÓN: 2 semanas-varios -Lesión única o lesiones múltiples.

meses. - Enfermedad diseminada con cientos
• ESPECTRO: de lesiones acneiformes pequeñas.
-Lesiones papulosas o papulonodulares • Características varían según especie de
pequeñas. Leishmania y localización geográfica.
-Lesiones secas y costrosas. • Lesiones suelen localizarse en áreas
-Ulceras grandes, profundas y mutilantes. expuestas del cuerpo.
-Placas y lesiones satélite, psoriasiformes o
verrucosas.
-PERÚ-
• Aparece: luego de 2-4 • Al retirar costra: lesión
semanas de inoculación de redondeada,
parásito. generalmente no
• Inicia con: una mácula - dolorosa, con fondo
pápula eritematosa, granulomatoso grueso
levemente pruriginosa, de y con exudado seroso
tamaño menor a 5 mm de usualmente no
diámetro. purulento.
• Posteriormente: lesión se • Típicamente se
úlcera espontáneamente y describe como lesión
produce exudado seroso con forma de “cráter
que al secarse formará una
de volcán”, con bordes
costra que cubre toda la
herida; sin embargo, por elevados bien
debajo de costra, lesión se definidos,
extiende en tamaño y hiperpigmentados
profundidad. (violáceos) y poco
sangrantes.
Diagnostico y tratamiento de la Leishmaniosis en el Perú. Norma técnica MINSA. Perú 2005.

3.LEISHMANIOSIS MUCOSA
-DEL NUEVO MUNDO-
• Prevalencia: 2-5%.
• Por:
-L. Braziliensis
-L. panamensis
-L. guyanensis
-L. amazonensis
• Afectación de:
-Mucosas de nariz, cavidad oral,
faringe o laringe.
-Meses o años después que
lesiones cutáneas hayan curado.
• Periodo de tiempo entre lesiones
primarias y afectación mucosa: 1
mes - 20 años.
LEISHMANIOSIS
-DIAGNÓSTICO-
1.- TEST DE RESPUESTA
INMUNOLOGICA
• Reacción de Montenegro
• IFI
• ELISA (*)
2.-TEST DE DEMOSTRACION DEL
PARASITO
• Frotis
• Cultivo
• PCR
• Histopatologia (*) Respuesta de
Respuesta de
Acs.detectable
anticuerpos
mínima
Ausencia de
* No en norma tecnica Respuesta inmunitaria inmunidad celular
celular exagerada
Clasificación clínica y toma de muestras para el diagnóstico de las leishmaniasis
LEISHMANIOSIS VISCERAL
-DIAGNÓSTICO-
• DIAGNOSTICO:
-Demostración de amastigotes en
tejidos
-Aislamiento de promastigotes en
cultivo
-PCR positiva
• MÉTODO:
-Aspiración esplénica • OTRAS PRUEBAS:
-Biopsia hepática -Inmunoabsorcion ligada a enzimas
-Aspirado de ganglios linfáticos (ELISA)
-Aspirado de medula ósea -Tira reactiva para k39 recombinante de
• MONITORIZAR RESPUESTA A L. infantum/L. chagasi
TRATAMIENTO: -Prueba cutánea de leishmanina
-Cuantificación de carga parasitaria en (Montenegro): habitualmente negativa
aspirado esplénico en LV activa.
LEISHMANIOSIS CUTANEA
-DIAGNÓSTICO-
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO: se basa en:
• Características clínicas de la enfermedad: lesión ulcerativa, no dolorosa, con un fondo granulomatoso
grueso, con bordes indurados, violáceos y con una duración mayor a cuatro semanas.
• Antecedente epidemiológico.
DIAGNOSTICO DEFINITIVO: requiere demostración del parasito, puede ser por diferentes métodos:
• Demostración de amastigotes en frotis y/o biopsia.
• Cultivos in vitro.
• PCR (Reacción en cadena de la polimerasa).
• Biopsia.
PARASITOLOGÍA HUMANA. Werner Louis Apt Baruch. 2013. Mc Graw Hill Interamericana Editores. Mexico D,F.
-DIAGNÓSTICO-
DEMOSTRACIÓN DE AMASTIGOTES EN FROTIS Y/O BIOPSIA
-Muestras teñidas con Wright y Giemsa.
FROTIS: -Se ve citoplasma de Amastigote y su
• Método mas común. núcleo (grande, posición excéntrica).
• Hay diferentes procedimientos para tomar la muestra: -Visión del cinetoplasto: confirma
diagnostico de leishmaniasis.
-Raspado con hoja de bisturí o espátula.
- Cinetoplasto: estructura diferenciada
-Aspiración con guja hipodérmica o micropipeta. con forma de bastón.
• Mejor muestra: aquella rica en linfa y sin: sangre, gérmenes o mucus
que impiden buena observación.
• Método de coloración: Giemsa y debe observarse con objetivo de
inmersión por 30 minutos. Parásitos se encuentran libres o en interior
de macrófagos.
• En lesiones recientes y no tratadas, hallazgo de amastigotes es mas
frecuente, lo que no ocurre en lesiones contaminadas o crónicas.
• Se trata de un método barato, pero de baja sensibilidad porque es
afectado por tratamientos previos o sobreinfección bacteriana y
requiere de personal entrenado para su lectura.
-DIAGNÓSTICO-
CULTIVOS IN VITRO
• Material se obtiene por aspiración o biopsia, el cual debe triturarse antes de inoculación
al medio de cultivo.
• Obtención de muestra es mas complicada en lesiones nasales.
• El mas usado es el NNN suplementando con sangre desfibrinada de conejo (15%), otros
medios son el RPMI o M199.
• Cultivos deben mantenerse a 23°C y se tornan positivos entre 3-30 días, siendo lo usual de
7 a 15 días.
• Sensibilidad:60-70%, pero las desventajas son que se requiere tener sistemas de
incubación con temperatura controlada y microscopios invertidos, infraestructura limitada
en las áreas endémicas.
• Este material también se puede usar para determinación de la especie de Leishmania,
mediante la hibridación de K-DNA y el uso de los anticuerpos monoclonales.
PARASITOLOGÍA HUMANA. Werner Louis Apt Baruch. 2013. Mc Graw Hill Interamericana Editores. Mexico D,F
https://iris.paho.org/bitstream/handle/10665.2/50524/9789275320631_spa.pdf?sequence=1&isAllowed=y.
-DIAGNÓSTICO-
PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)
• Método mas sensible: (>90%).
• Sin embargo, su uso requiere de equipos sofisticados y personal
altamente entrenado, por lo que se restringe aun en laboratorios
especializados.
BIOPSIA
• Se utiliza en el diagnostico parasitológico.
• Permite el estudio histológico.
-DIAGNÓSTICO-
*PRUEBA INTRADÉRMICA DE MONTENEGRO (denominada también Prueba de Leishmanina)
• Consiste en la inoculación intraepidermica de un extracto proteico (concentración 30 mg/ml) de un lisado de promastigotes de Leishmania
procedentes de un cultivo en masa.
• La aparición de una macula-papula en el punto de inoculación a partir de las 48 horas se considera positiva (diametro igual o mayor a 5 mm).
• Es útil cuando no se puede hacer diagnostico parasitológico porque su correlación con la clínica es buena (la sensibilidad varia entre 85-95% y la
especificidad entre 88-93%, dependiendo de la forma clínica).
• Sin embargo, su limitación es la falta de estandarización.
• El periodo de ventana puede ir de 4 a 6 semanas posterior a la primera manifestación de la lesión cutánea.
• Existe reacción cruzada con la enfermedad de Chagas.
• Aunque es una prueba muy sensible y específica, no permite diferenciar entre infección previa o actual. En leishmaniasis cutánea difusa la
reacción es siempre negativa
-DIAGNÓSTICO-
*PRUEBAS SEROLÓGICAS
• La inmunofluorescencia indirecta (IFI)y ELISA son los métodos mas usados para la
detección de anticuerpos.
• Dan reacción cruzada, principalmente con enfermedad de Chagas y kala-azar.
• Teniendo en cuenta que las diferentes especies de Leishmania varían en forma
considerable en cuanto a su capacidad para inducir anticuerpos detectables, en
leishmaniasis tegumentaria estas pruebas son poco usadas por limitaciones en la
sensibilidad y especificidad.
• IFI: Para la leishmaniasis cutánea este método no es utilizado, por eso no está
disponible en la rutina de los servicios de salud. Es indicado para leishmaniasis
mucosa o mucocutánea.
• ELISA: Este método es poco utilizado, una vez que no se encuentra disponible en la
rutina de los servicios de salud pública.
S y E de cinco pruebas diagnósticas utilizadas para la evaluación pacientes con lesiones
sospechosas de leishmaniasis cutánea y estratificadas por duración de la lesión, Lima,
Perú *
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2911183/pdf/tropmed-83-345.pdf
Am. J. Trop. Med. Hyg., 83(2), 2010, pp. 345–350
Perú *
Perú *

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LEISHMANIASIS

Mg. PERCY E. ASMAT MARRUFO

 ZOONOSIS que desencadena un ESPECTRO DE ENFERMEDADES y es causadas por un grupo

De 88 especies, estos son los vectores potenciales: Colombia más de 133

• -Se desplazan unos 200 ó 300 m

Suelo rico en materia orgánica( hojarasca o

ESPECIES DE LEISHMANIA EN VECTORES DE LEISHMANIA EN PERÚ:

• L. (V.) guyanensis Leishmaniasis. Journal of Clinical Microbiology; 48(10):3661-3665

Diagnostico y tratamiento de la Leishmaniosis en el Perú. Norma técnica MINSA. Perú 2005.

RESERVORIOS: mamíferos silvestres y/o domésticos y

Parasitología médica. Nueva edición. Antonio Atias.

Evoluciona a través de etapas intermedias flageladas para convertirse en

CURA ESPONTANEA, HASTA LAS FORMAS:

Mandell, Douglas, and Bennett’s Principies and Practice of lnfectious

• PERIODO DE INCUBACIÓN: 2 semanas-varios -Lesión única o lesiones múltiples.

Diagnostico y tratamiento de la Leishmaniosis en el Perú. Norma técnica MINSA. Perú 2005.

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